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乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株MDA435侵袭力的抑制作用 被引量：18
1
作者 张友磊 傅志仁 +2 位作者 张军 王元和 沈茜 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期204-207,共4页
目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)反义寡脱氧核苷酸对人乳腺癌细胞株MDA435侵袭力的抑制作用。方法　设计合成互补于HPSEmRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS ODN ,以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转... 目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)反义寡脱氧核苷酸对人乳腺癌细胞株MDA435侵袭力的抑制作用。方法　设计合成互补于HPSEmRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS ODN ,以阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染MDA435细胞 ,以逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测转染后HPSEmRNA表达的变化 ,以Western印迹检测HPSE蛋白表达的变化 ,以定量Matrigel侵袭实验检测MDA435细胞侵袭力的变化。结果　与正常对照组、脂质体对照组和NS ODN相应浓度组相比 ,AS ODN各浓度组对HPSEmRNA和蛋白的表达及细胞侵袭力均有明显抑制作用 (P <0 0 1) ,其抑制效应在不同浓度组间差别显著 (P <0 0 1)。AS ODN在终浓度为 0 1μmol/L、0 2 μmol/L和 0 4μmol/L时对MDA435细胞的侵袭力抑制率分别为 34 0 %、5 7 8%和 79 7%。结论　HPSE反义寡脱氧核苷酸通过下调HPSEmRNA和蛋白的表达可显著抑制人乳腺癌细胞株MDA435的侵袭力 ,并呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 乙酰肝素酶 反义寡核苷酸 乳腺癌 细胞株 mda435 侵袭力 抑制作用
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透明质酸结合蛋白诱发肿瘤细胞凋亡的实验研究
2
作者 高锋 曹曼林 +2 位作者 张春旭 刘一文 王伟祥 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期230-232,i002,共4页
目的　探讨人脑透明质酸结合蛋白(hbHABP)对人肿瘤细胞凋亡的影响。方法　将hbHABP全长cDNA转染到人乳腺癌细胞(MDA435)和前列腺癌细胞(TSU)中,采用Western blot 检测细胞caspase 3、CD95表达的变化,并采用酶联免疫吸附试验试剂盒测定... 目的　探讨人脑透明质酸结合蛋白(hbHABP)对人肿瘤细胞凋亡的影响。方法　将hbHABP全长cDNA转染到人乳腺癌细胞(MDA435)和前列腺癌细胞(TSU)中,采用Western blot 检测细胞caspase 3、CD95表达的变化,并采用酶联免疫吸附试验试剂盒测定细胞裂解液中Bcl 2、Cip/WAF1 的含量。再将转hb HABP基因的MDA435细胞种植到鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)上,使MDA435 肿瘤细胞在体内环境中生长成瘤,取肿瘤块作病理切片,采用caspase 3 抗体作免疫组织化学染色。结果　MDA435 和TSU细胞转染hbHABP基因后,caspase 3和CD95表达均增高;MDA435 hbHABP细胞裂解液中Bcl 2含量下降,TSU hbHABP的Bcl 2无明显变化。TSU hbHABP细胞Cip1/WAF1的含量升高,MDA435 hbHABP无变化。免疫组织化学结果显示,MDA435 hbHABP肿瘤组织内caspase 3表达均增高。结论　hbHABP可能诱导肿瘤细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长。 展开更多
关键词 透明质酸结合蛋白 肿瘤细胞凋亡 实验研究 酶联免疫吸附试验试剂盒 caspase-3表达 mda435 免疫组织化学染色 Bcl-2 Western 鸡胚绒毛尿囊膜 细胞裂解液 诱发 前列腺癌细胞 人乳腺癌细胞 CDNA转染 BLOT检测 抑制肿瘤生长
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葫芦素B体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用研究 被引量：6
3
作者 张美侠 杨姣 +3 位作者 王艳丽 周雪莹 李岭 邓意辉 《实用药物与临床》 CAS 2010年第1期7-9,共3页
目的观察葫芦素B(Cucurbitacin B)对非磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MCF-7和磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法用不同浓度的葫芦素B分别处理MCF-7和MDA-MB-435S细胞,48 h后用MTT法... 目的观察葫芦素B(Cucurbitacin B)对非磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MCF-7和磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法用不同浓度的葫芦素B分别处理MCF-7和MDA-MB-435S细胞,48 h后用MTT法检测细胞增殖;用荧光显微镜观察细胞凋亡。结果MTT结果显示,葫芦素B对MCF-7和MDA-MB-435S细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量依赖性,统计学分析提示,各实验组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜显示典型的细胞凋亡。结论葫芦素B对人乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用(与STAT3的活化状态无关),诱导乳腺癌细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 葫芦素B 乳腺癌 MCF-7 MDA—MB-435S 凋亡
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中药成分CDP对乳腺癌细胞P16,E-CADHERIN去甲基化作用的研究 被引量：6
4
作者 柴新娟 栾菊 +3 位作者 杨文理 张迎春 葛亚俊 覃扬 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期798-802,共5页
目的探讨中药成分CDP对乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435的抑癌基因P16和E-CADHERIN启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435,分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)处理细胞;用甲... 目的探讨中药成分CDP对乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435的抑癌基因P16和E-CADHERIN启动子区CpG岛的去甲基化作用。方法培养人乳腺癌细胞系T47D和MDA-MB-435,分别用不同剂量、同一剂量不同时间的CDP和5-azacytidine(5-aza-C)处理细胞;用甲基化特异性PCR(MSP)和半定量RT-PCR,检测细胞中P16和E-CADHERIN基因的甲基化改变和RNA表达恢复情况。结果①在25、50、75和100μmol/L剂量的CDP持续作用6d后,T47D细胞P16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带减弱,在100μmol/L剂量时消失,在4个剂量CDP作用下,非甲基化特异性条带均重新出现;在75和100μmol/L浓度作用下时,T47D细胞中出现P16基因重新表达;②在50μmol/LCDP作用144h后,T47DP16基因启动子区CpG岛甲基化特异性条带仍存在;非甲基化特异性条带24h出现并持续到144h;在药物作用144h时,P16出现表达。③在MDA-MB-435细胞中,用不同剂量CDP处理或同一剂量CDP处理不同时间后,均未观察到E-CADHERIN非甲基化条带的出现,RT-PCR也未检测到E-CADHERIN基因的表达。结论在T47D细胞中,中药成分CDP可以剂量、时间依赖的形式逆转高甲基化的P16基因,而对MDA-MB-435细胞中高甲基化的E-CADHERIN基因无效,提示CDP药物存在靶分子反应多样性。 展开更多
关键词 中药成分CDP P16 E-CADHERIN 去甲基化 T47D MDA—MB-435
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人乳腺癌OX40L转基因细胞株的构建及其对T细胞的共刺激作用 被引量：2
5
作者 施勤 王勤 +3 位作者 陈永井 孙建军 葛彦 张学光 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期148-152,共5页
背景与目的:共刺激分子OX40(CD134)和OX40配体(OX40L、CD134L)分属TNFR、TNF家族,OX40-OX40L信号能促进细胞因子的产生及提高抗原特异性记忆T细胞的数量,发挥重要的免疫调节作用。本实验旨在构建稳定表达OX40配体(OX40L)的人乳腺癌转基... 背景与目的:共刺激分子OX40(CD134)和OX40配体(OX40L、CD134L)分属TNFR、TNF家族,OX40-OX40L信号能促进细胞因子的产生及提高抗原特异性记忆T细胞的数量,发挥重要的免疫调节作用。本实验旨在构建稳定表达OX40配体(OX40L)的人乳腺癌转基因细胞株,进而研究OX40-OX40L信号对T细胞体外活化和功能的调节作用。方法:运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人成熟树突细胞(dendriticcell,DC)获得全长人OX40L基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-OX40L转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435;经过G418抗性筛选和亚克隆,获得稳定表达OX40L的转基因细胞,并经RT-PCR和免疫荧光标记确证靶分子的表达;采用MTT、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光标记等方法分析转基因细胞对T细胞的增殖、IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌和T细胞上Fas分子表达的影响。结果:成功地获得稳定表达人OX40L分子的人乳腺癌MDA-MB-435转基因细胞株,该细胞株可有效地促进T细胞增殖,促进T细胞分泌IL-2和IFN-γ,在第7天,T细胞、T细胞+M435、T细胞+M435-mock、T细胞+M435-OX40L各组IL-2的浓度依次为:315ng/ml、322ng/ml、586ng/ml、973.4ng/ml;IFN-γ浓度依次为:(2518±117.6)pg/ml、(2490±124.2)pg/ml、(2695±134.5)pg/ml、(3755±187.75)pg/ml,该基因转染细胞同时还能下调T细胞上Fas分子的表达[(68.3±5.6)%,P<0.05]。结论:稳定表达人OX40L的乳腺癌转基因细胞在体外能有效地活化T细胞,介导其增殖、分泌细胞因子及抑制T细胞活化诱导的细胞死亡。 展开更多
关键词 乳肿肿瘤 MDA—MB-435细胞株 OX40L转基因细胞 T细胞 免疫调节
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类胡萝卜素对乳腺癌细胞株MDA-MB-435S中DNA损伤作用的影响 被引量：4
6
作者 彭光华 李忠 +1 位作者 戚向阳 张声华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第9期124-127,共4页
目的:探讨类胡萝卜素对乳腺癌细胞中DNA的损伤作用的影响。方法:类胡萝卜素与乳腺癌细胞MDA-MB-435S共培养,单细胞电泳方法检测类胡萝卜素对MDA-MB-435S细胞中DNA的损伤程度。结果:β-胡萝卜素和虾青素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞... 目的:探讨类胡萝卜素对乳腺癌细胞中DNA的损伤作用的影响。方法:类胡萝卜素与乳腺癌细胞MDA-MB-435S共培养,单细胞电泳方法检测类胡萝卜素对MDA-MB-435S细胞中DNA的损伤程度。结果:β-胡萝卜素和虾青素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞中DNA分子均有较大程度的损伤,且与处理的浓度和时间存在一定的相关性;番茄红素对MDA-MB-435S细胞中DNA分子有一定的损伤作用;角黄素、玉米黄素和玉米黄素双棕榈酸酯对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S细胞中DNA分子均无损伤作用。 展开更多
关键词 类胡萝卜素 乳腺癌细胞 DNA损伤 MDA—MB—435S 抗乳腺癌 作用机制
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红景天对乳腺癌治疗的研究 被引量：4
7
作者 刘艳虹 蔡敬宙 +1 位作者 方建志 潘锦瑶 《中医临床研究》 2010年第4期1-3,共3页
目的：研究红景天提取物对乳腺癌MDA-MB-435细胞株增殖及血管新生相关因子的影响。方法：人乳腺癌MDA-MB-435细胞培养后，加入红景天提取物10mg／ml、20mg／ml，设置空白对照组。药物治疗24小时后，使用流式细胞仪进行分选、MTT法测定... 目的：研究红景天提取物对乳腺癌MDA-MB-435细胞株增殖及血管新生相关因子的影响。方法：人乳腺癌MDA-MB-435细胞培养后，加入红景天提取物10mg／ml、20mg／ml，设置空白对照组。药物治疗24小时后，使用流式细胞仪进行分选、MTT法测定细胞增殖能力，以及VEGF表达的影响。结果：红景天处理后，MDA-MB-435细胞株的形态学特征发生显著变化，且随着药物浓度增加而愈加明显；阻滞MDA-MB-435细胞增殖周期的作用，主要阻滞于S期，该作用随着药物浓度增加亦增强；显著抑制MDA-MB-435细胞的增殖活性：处理24小时，各剂量组肿瘤细胞表达VEGF mRNA无明显差异，44小时后，给药组明显地抑制MDA-MB-435细胞表达VEGF的作用。结论：红景天提取物在体外可阻滞乳腺癌MDA-MB-435细胞增殖周期、降低乳腺癌MDA-MB-435细胞的增殖活性、减少促血管新生因子VEGF表达。 展开更多
关键词 红景天 乳腺癌 MDA—MB-435 VEGF
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乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达与紫杉醇耐药的实验研究
8
作者 张志霞 何涛 +1 位作者 董衍东 王丽 《西南军医》 2013年第6期662-664,共3页
目的探讨转移能力不同的两种人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达差异,及其与紫杉醇药物敏感性差异的相关性。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测两种细胞中Twist基因的表达情况,MTT法检测两种细胞对紫杉醇的敏... 目的探讨转移能力不同的两种人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-435S中Twist基因表达差异,及其与紫杉醇药物敏感性差异的相关性。方法用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测两种细胞中Twist基因的表达情况,MTT法检测两种细胞对紫杉醇的敏感性。结果 (1)RT-PCR结果显示:两种细胞中均有Twist基因表达,在MDA-MB-435S细胞中的表达高于MCF-7(P<0.05);(2)紫杉醇对MDA-MB-435S细胞的抑制作用弱于对MCF-7细胞的抑制作用(P<0.05)。结论 Twist基因在转移能力强的MDA-MB-435S细胞中表达高于转移能力中等的MCF-7细胞,同时高转移的MDA-MB-435S细胞对紫杉醇的敏感性弱于中等转移性的MCF-7细胞,且更易出现耐药。 展开更多
关键词 TWIST基因 MCF-7 MDA—MB-435S 耐药性 紫杉醇
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天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对MDA-MB-435s乳腺癌细胞的作用研究 被引量：2
9
作者 孙彬斌 赵晓军 《四川动物》 CSCD 北大核心 2010年第1期41-44,共4页
目的研究天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对体外培养的人类乳腺癌细胞株MDA-MB-435s的活性作用。方法采用MTT法检测P18对体外培养的MDA-MB-435s细胞增殖的影响;使用Live/Dead Viability/Cytotoxicity试剂盒对细胞进行染色,并在荧光显微镜下观... 目的研究天蚕素A-爪蟾素2杂合肽P18对体外培养的人类乳腺癌细胞株MDA-MB-435s的活性作用。方法采用MTT法检测P18对体外培养的MDA-MB-435s细胞增殖的影响;使用Live/Dead Viability/Cytotoxicity试剂盒对细胞进行染色,并在荧光显微镜下观察细胞的存活状态;通过DiBAC4(3)染色,以荧光分光光度计检测给肽时细胞膜的膜电位变化;在透射电子显微镜下观察P18作用24h后细胞超微结构的变化。结果MTT试验表明P18对MDA-MB-435s细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用;荧光显微镜下可观察到P18可以使MDA-MB-435s细胞膜破损,细胞死亡;P18作用时,荧光分光光度计检测到MDA-MB-435s的细胞膜发生了去极化现象;透射电子显微镜下可见大量细胞崩解坏死。结论杂合肽P18能够引起MDA-MB-435s细胞膜的通透性改变而导致细胞坏死。 展开更多
关键词 P18 天蚕素A 爪蟾素2 乳腺癌细胞MDA—MB-435s 细胞膜通透性
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