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核蛋白MARVELD1与核质转运受体蛋白Importin β1相互作用的鉴定
1
作者 王山 肖晟 +2 位作者 赫杰 韩放 李钰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期735-739,共5页
核蛋白MARVELD1(MARVEL domain containing1)是一个在多种肿瘤中表达下调的肿瘤相关基因.为寻找其相互作用分子,构建pGEX-4T-2/MARVELD1重组体并在大肠杆菌中成功表达GST-MARVELD1融合蛋白.采用GSTpull-down结合LC-MS/MS(液相色谱-串联... 核蛋白MARVELD1(MARVEL domain containing1)是一个在多种肿瘤中表达下调的肿瘤相关基因.为寻找其相互作用分子,构建pGEX-4T-2/MARVELD1重组体并在大肠杆菌中成功表达GST-MARVELD1融合蛋白.采用GSTpull-down结合LC-MS/MS(液相色谱-串联质谱)的方法对MARVELD1蛋白的相互作用分子进行筛选,发现了16个与MARVELD1相互结合的蛋白.进一步的免疫共沉淀实验证实,MARVELD1与核质转运受体蛋白importin β1能够相互作用,说明MARVELD1可能参与了importin β1的部分生物学作用,或是它通过与importin β1结合而进入细胞核.研究结果为进一步分析MARVELD1和importin β1的生物学功能奠定了基础. 展开更多
关键词 marveld1 核质转运受体蛋白 GST pull-down 免疫共沉淀
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MARVELD1基因功能产物的亚细胞定位及功能分析
2
作者 王山 雷露 +1 位作者 赫杰 李钰 《生命科学仪器》 2008年第1期22-27,共6页
MARVELD1基因是在非小细胞肺癌细胞系中存在差异表达的一个新基因，本文中我们将对MARVELD1蛋白的亚细胞定位及其功能作用做进一步的研究。运用免疫胶体金技术和重组荧光蛋白定位对MARVELD1蛋白进行亚细胞定位，观察发现MARVELD1蛋白在... MARVELD1基因是在非小细胞肺癌细胞系中存在差异表达的一个新基因，本文中我们将对MARVELD1蛋白的亚细胞定位及其功能作用做进一步的研究。运用免疫胶体金技术和重组荧光蛋白定位对MARVELD1蛋白进行亚细胞定位，观察发现MARVELD1蛋白在细胞核的核质中具有明显的标记信号，在胞浆中主要是在线粒体中有金颗粒存在。根据转染后细胞表面超微结构的变化结果，用FITC-鬼笔环肽对F—actin染色，激光共聚焦扫描显微镜观察结果显示，NIH3T3-MARVELD1细胞的微丝结构出现了明显的改变：微丝减少，细胞间通讯连接消失或降低，细胞膜边缘卷翘、皱缩，微丝变得紊乱、松散。说明该基因的表达影响了微丝的组装情况。应用间接免疫荧光技术对微管的分析表明在形态学上没有明显改变。根据微丝变化的形态学特征，采用半定量RT—PCR、western—blot进一步分析转染MARVELD1前后NIH3T3细胞中的纽蛋白（vinculin）和连接蛋白43（connexin43，Cx43）的表达情况。结果表明，转染后细胞中vinculin与Cx43的表达显著降低。表明MARVELD1基因的表达影响了细胞的粘附与细胞间通讯连接。鉴于MARVELD1亚细胞定位结果，提示MARVELD1蛋白的功能作用是通过核内调控vinculin与Cx43的表达机制，影响了微丝的结构，细胞粘附和细胞间通讯。 展开更多
关键词 marveld1 亚细胞定位 微丝 微管
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MARVELD1调控内含子miR-186、miR-335表达的研究
3
作者 李玮 赫杰 +3 位作者 彭林辉 姚媛菲 史明 李钰 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第3期407-412,共6页
目的:前期研究发现,MARVELD1(具有囊泡运输和膜连接功能的MAL及相关蛋白1)在多种肿瘤细胞中表达下调,许多micro RNAs也随其发生变化。本研究探讨了MARVELD1调控mi R-186和mi R-335的表达方式。方法:本研究选取了多种肺癌细胞系,运用q RT... 目的:前期研究发现,MARVELD1(具有囊泡运输和膜连接功能的MAL及相关蛋白1)在多种肿瘤细胞中表达下调,许多micro RNAs也随其发生变化。本研究探讨了MARVELD1调控mi R-186和mi R-335的表达方式。方法:本研究选取了多种肺癌细胞系,运用q RT-PCR的方法检测了MARVELD1以及mi R-186和mi R-335的表达情况,通过MARVELD1过表达体系和si RNA干扰MARVELD1表达的体系分析mi R-186和mi R-335表达变化情况,运用生物信息学网站对mi R-186和mi R-335进行分析,确认其是否为内含子mi RNA,并进一步应用MARVELD1过表达和RNAi体系检测MARVELD1对mi R-186和mi R-335的宿主基因的影响。结果:在肺癌细胞中,MARVELD1与mi R-186、mi R-335的表达呈现明显的正相关。在过表达MARVELD1之后,mi R-186、mi R-335出现高表达;当下调MARVELD1表达时,mi R-186、mi R-335则表现低表达。生物信息学分析发现mi R-186和mi R-335均为内含子mi RNA。进一步分析MARVELD1与mi R-186和mi R-335宿主基因的表达关系显示,MARVELD1可以上调它们的宿主基因的表达。结论:上述结果表明,MARVELD1可通过影响内含子mi R-186和mi R-335的宿主基因进而调控二者的表达,为进一步研究MARVELD1影响肿瘤细胞的发生机制奠定了基础。 展开更多
关键词 marveld1 miR-186 miR-335
原文传递
MARVELD1在脑胶质瘤中表达的实验研究 被引量：1
4
作者 时毅敏 魏川江 +2 位作者 唐世洁 唐世平 戴黎萌 《中国医学创新》 CAS 2015年第9期37-39,共3页
目的：探讨人脑胶质瘤组织中MARVELD1的表达。方法：RT-PCR和Western blot技术检测33例脑胶质瘤组织蛋白和m RNA的表达,并以11例正常脑组织为对照。结果：相较于正常脑组织,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤组织中MARVELD1蛋白和m RNA的... 目的：探讨人脑胶质瘤组织中MARVELD1的表达。方法：RT-PCR和Western blot技术检测33例脑胶质瘤组织蛋白和m RNA的表达,并以11例正常脑组织为对照。结果：相较于正常脑组织,Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤组织中MARVELD1蛋白和m RNA的表达水平差异均有统计学意义（P〈0.05）,Ⅲ级、Ⅳ级脑胶质瘤组织中MARVELD1蛋白和m RNA的表达水平低于Ⅰ-Ⅱ级脑胶质瘤组织和正常脑组织（P〈0.05）。结论：MARVELD1对脑胶质瘤恶性程度判断有一定的指导意义,并为脑胶质瘤临床治疗提供了新的靶标。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 marveld1 实验研究
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