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三七颗粒调控miR-23b/ASK1/p38MAPK信号通路抑制NLRP3炎症小体合成改善肾纤维化的机制研究
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作者 黄雪霞 吴金玉 +5 位作者 莫超 王小连 陆良喜 彭泓杰 李永聪 肖国居 《中国中西医结合肾病杂志》 2025年第3期201-207,I0002,共8页
目的:研究三七颗粒调控miR-23b/ASK1/p38MAPK信号通路抑制NLRP3合成改善肾纤维化的机制。方法:按随机数字表法将36只SD大鼠随机分为6组,即:正常对照组(A组)、模型组(B组)、miR-23b阴性腺病毒组(C组)、miR-23b过表达腺病毒组(D组)、三七... 目的:研究三七颗粒调控miR-23b/ASK1/p38MAPK信号通路抑制NLRP3合成改善肾纤维化的机制。方法:按随机数字表法将36只SD大鼠随机分为6组,即:正常对照组(A组)、模型组(B组)、miR-23b阴性腺病毒组(C组)、miR-23b过表达腺病毒组(D组)、三七颗粒组(E组)、厄贝沙坦组(F组),每组各6只。A组不造模,其余5组均采用尾静脉注射顺铂(3 mg/kg)诱导肾纤维化大鼠模型,C组造模成功后尾静脉注射miR-23b阴性腺病毒,D组造模成功后尾静脉注射miR-23b过表达腺病毒,其余4组尾静脉注射等量生理盐水。E组给予三七颗粒500 mg/kg灌胃,F组给予厄贝沙坦分散片150 mg/kg灌胃,其余4组均予等量生理盐水灌胃,每日给药1次,连续给药12周。第12周末处死各组大鼠,采集血液和肾组织。HE染色观察肾组织病理变化,全自动生化分析仪测定肾功能(Scr、BUN)水平,ELISA法检测血清炎症因子IL-1β、IL-18水平,Western blot检测肾组织miR23/ASK1/p38 MAPK信号通路关键因子(ASK1、p-p38MAPK)、NLRP3炎症小体(NLRP3、ASC、Caspase-1)、肾纤维化相关蛋白(FN、CollagenⅣ)表达的水平的变化,RT-qPCR检测肾组织中miR-23b的表达量。结果:与A组比较,B组大鼠肾间质大量炎性细胞浸润及间质纤维化,Scr、BUN水平显著升高(P<0.01),miR-23的表达明显降低(P<0.05),FN、CollagenⅣ、p-p38MAPK、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达显著上升(P<0.01),IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.01)。与B组比较,E组大鼠肾间质炎性细胞和间质纤维化显著减少,肾功能(Scr、BUN)显著降低(P<0.01),miR-23b的表达明显升高(P<0.05),FN、CollagenⅣ、ASK1、p-p38MAPK、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达均显著下调(P<0.01),IL-1β、IL-18水平显著降低(P<0.01),E组的疗效较D组的效果佳,与F组的疗效相当。结论:中药三七颗粒可能通过增加miR-23b过表达,阻断ASK1/p38MAPK信号通路的激活,抑制NLRP3炎症小体释放炎症因子,最终改善肾间质纤维化。 展开更多
关键词 肾纤维化 三七颗粒 miR-23b/ASK1/p38mapk信号通路 NLRP3炎症小体
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基于ASS1介导的Src/STAT3、MAPK/ERK级联反应探究参七虫草方对IPF模型大鼠成纤维细胞的影响
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作者 纪文雯 何程 +3 位作者 朱恩惠 王三凤 黄丽娜 陈炜 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第9期192-196,I0014,I0015,共7页
目的探究参七虫草方对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)模型大鼠成纤维细胞的影响。方法除空白组外均采用气管内滴注BLM的方法体外分离培养模型成纤维细胞。CCK-8法检测肺成纤维细胞增... 目的探究参七虫草方对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)模型大鼠成纤维细胞的影响。方法除空白组外均采用气管内滴注BLM的方法体外分离培养模型成纤维细胞。CCK-8法检测肺成纤维细胞增殖情况,选取最佳浓度及时间进行后续实验。实验分为6组:正常成纤维细胞+正常含药血清组(A组)、模型成纤维细胞+正常含药血清组(B组)、参七虫草方最佳含药血清组(C组)、精氨酸琥珀酸盐合成酶-1(arginine succinate synthetase-1,ASS1)抑制剂组(D组)、酪氨酸激酶(tyrosine kinase,Src)/信号转导和转化激活因子3(signal transducer and transformation activator 3,STAT3)阻断剂组(E组)、MAPK/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulatory protein kinase,ERK)通路抑制剂组(F组)。采用CCK-8法、细胞划痕实验分别检测细胞活力和迁移速率;RT-qPCR检测ASS1、Src、STAT3、双特异性蛋白激酶1/2(bispecific protein kinase 1/2,MEK1/2)、ERK1/2基因表达水平;Western Blot(WB)检测各组p-ERK、激活蛋白-1(activator-1,AP-1)、P-MEK、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、核蛋白因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与A组比较,B组的细胞活力及细胞迁移速率增强和增快(P<0.05);与B组比较,其余干预组的细胞活力及细胞迁移速率减弱及降低(P<0.05)。RT-qPCR检测结果:B组与A组比较,ASS1、MEK1、MEK2、ERK1、ERK2、Src、STAT3基因表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,其余干预组有关基因表达水平降低(P<0.05)。WB检测结果显示:B组与A组比较,p-ERK、P-MEK、MMP-2、MMP-9、NF-κB p65、AP-1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与B组比较,其余干预组表达水平降低(P<0.05)。结论参七虫草方能够抑制ASS1介导的Src/STAT3、MAPK/ERK级联反应,下调MMP-2、MMP-9、AP-1、NF-κBp65蛋白表达,改善IPF病情进展。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 成纤维细胞 Src/STAT3 mapk/ERK MMP-2 MMP-9 AP-1 NF-κBp65
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miR-874-3p通过负调控MAPK1抑制胃癌细胞的增殖迁移和侵袭
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作者 余诗雨 强薇 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2025年第2期116-124,共9页
目的本研究旨在探究miR-874-3p对胃癌细胞的增殖和转移的影响及其靶标丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)的作用机制。方法选用胃癌细胞系MKN28细胞,应用生物信息学分析预测miR-874-3p靶向结合位点,应用miR-874-3p mimic或其inhibitor改变MKN2... 目的本研究旨在探究miR-874-3p对胃癌细胞的增殖和转移的影响及其靶标丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)的作用机制。方法选用胃癌细胞系MKN28细胞,应用生物信息学分析预测miR-874-3p靶向结合位点,应用miR-874-3p mimic或其inhibitor改变MKN28细胞内miR-874-3p的表达,应用MAPK1 siRNA或MAPK1过表达载体改变MKN28细胞内MAPK1表达;采用RT-qPCR、Western blot检测miR-874-3p、MAPK1及MAPK1下游相关蛋白KRT6A、KRT13和KRT81的表达水平,CCK-8实验、划痕试验、Transwell实验细胞增殖、迁移和侵袭。结果MKN28细胞中miR-874-3p表达显著降低,MAPK1表达显著升高。当抑制MKN28细胞miR-874-3p表达时,其MAPK1的表达显著上调。当上调MKN28细胞miR-874-3p表达时,其MAPK1及其下游相关蛋白KRT81、KRT6A和KRT13的表达水平均下降,同时胃癌细胞的增殖活性、划痕修复能力和穿膜细胞数也相应降低;而同时增加MAPK1表达时,KRT81、KRT6A和KRT13的表达水平则明显回升。当用miR-874-3p inhibitor降低miR-874-3p表达后,MAPK1及其下游相关蛋白的表达水平均上升,胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力也随之增强;而当同时敲低MAPK1的表达时,这些指标的增强趋势又受到抑制。结论miR-874-3p在胃癌细胞中低表达,可通过负调控MAPK1的表达来抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭;胃癌的发生可能与miR-874-3p的低表达减弱了其对MAPK1及其下游蛋白KRTs的负调控作用,进而在一定程度上影响对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制有关。 展开更多
关键词 miR-874-3p mapk1 胃癌 细胞增殖 细胞转移
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龙血素B通过P38MAPK信号通路调控MC3T3-E1成骨分化和骨形成的机制 被引量:1
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作者 李经堂 涂乐佳 +2 位作者 陈淼 魏鹏 周璟瑜 《医学理论与实践》 2024年第7期1081-1084,共4页
目的:探究龙血素B对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)成骨分化和骨形成的影响以及其通过P38MAPK信号通路调控成骨分化和骨形成的机制。方法:培养MC3T3-E1细胞,加入不同浓度(0、15、30、60、90、120μmol/L)龙血素B,采用CCK8法和... 目的:探究龙血素B对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)成骨分化和骨形成的影响以及其通过P38MAPK信号通路调控成骨分化和骨形成的机制。方法:培养MC3T3-E1细胞,加入不同浓度(0、15、30、60、90、120μmol/L)龙血素B,采用CCK8法和流式细胞术(FCM)检测不同时间(24h、48h、72h)MC3T3-E1细胞增殖能力和凋亡情况,确定龙血素B促MC3T3-E1细胞成骨最佳的药物浓度及作用时间。培养MC3T3-E1细胞并分为空白组(不作干预),龙血素B组(加入龙血素B共培养),龙血素B+阻断剂组(加入龙血素B和P38抑制剂SB203580共培养),进行干预实验;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒测定各组细胞ALP活性,qRT-PCR法检测各组细胞骨桥蛋白(OPN)基因、骨钙素(OCN)基因、骨唾液蛋白(BSP)基因表达水平,茜素红染色法观察各组细胞骨形成能力。结果:龙血素B可促进MC3T3-E1细胞增殖并抑制其凋亡,效果与浓度和干预时间相关,在90μmol/L浓度下干预48h促MC3T3-E1细胞生长作用最强;干预结束后第1、3、5天,龙血素B组细胞ALP活性较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞ALP活性较龙血素B组降低(P<0.05);龙血素B组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较龙血素B组降低(P<0.05);干预结束后第21天,龙血素B组细胞钙化结节区域面积较空白组增大,龙血素B+阻断剂组细胞钙化结节区域面积较龙血素B组减小(P<0.05)。结论:龙血素B可提高MC3T3-E1细胞增殖活性,并通过激活P38MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化和骨形成。 展开更多
关键词 龙血素B P38mapk信号通路 MC3T3-E1细胞 成骨分化 骨形成
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苍膝通痹胶囊调控p38 MAPK/NLRP3/Caspase-1通路介导膝关节骨性关节炎软骨细胞焦亡的机制 被引量:1
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作者 张志猛 袁道通 +6 位作者 靳希民 巩瑞 宋振龙 张永奎 王晓乐 毕荣修 谢文鹏 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第22期61-68,共8页
目的:探究苍膝通痹胶囊(CXTB)调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路抑制膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞焦亡的机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CXTB低、中... 目的:探究苍膝通痹胶囊(CXTB)调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路抑制膝关节骨性关节炎(KOA)软骨细胞焦亡的机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、CXTB低、中、高剂量组及阳性药组,每组10只。使用改良Hulth法构建膝关节骨性关节炎大鼠模型,根据分组给予苍膝通痹胶囊(0.25、0.5、1.0 g·kg^(-1))及塞来昔布(24 mg·kg^(-1))灌胃,假手术组与模型组给予等体积生理盐水,连续灌胃28 d,1次/d。微计算机断层扫描(Micro-CT)检测骨体积分数(BV/TV)、骨小梁分离度(Tb.Sp),苏木素-伊红(HE)染色、番红固绿(SO)染色及国际骨关节炎研究协会(OARSI)评分观察膝关节退变水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、NLRP3、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)炎性因子的含量。膝关节置换术后的软骨组织以Western blot检测p38 MAPK、p-p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达,Real-time PCR检测p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达。结果:Micro-CT显示,与假手术组比较,KOA大鼠关节间隙明显狭窄并见骨赘增生,BV/TV值减少、Tb.Sp值增加(P<0.01),血清中TNF-α、IL-1β、IL-18含量升高(P<0.01),软骨中p-p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达升高(P<0.01),p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达增强(P<0.01),与膝关节置换术后的正常软骨组织相比,病变软骨中的p-p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达升高(P<0.05),p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA表达增强(P<0.01)。HE染色及SO染色中可见KOA大鼠关节面粗糙,软骨厚度变薄,细胞排列无序杂乱,同时OARSI评分增加(P<0.01);与模型组比较,CXTB低、中、高浓度组大鼠膝关节的BV/TV值增加、Tb.Sp值减少(P<0.01),HE染色及SO染色可见关节面趋于平滑,OARSI评分减少(P<0.01),p-p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达降低(P<0.05),p38 MAPK、NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA的表达下降(P<0.01),血清中TNF-α、IL-1β、IL-18含量降低(P<0.01)。结论:苍膝通痹胶囊干预后可减缓KOA大鼠的膝关节退变并且抑制炎性因子的表达及软骨细胞焦亡从而保护软骨,而机制可能是通过p38 MAPK/NLRP3/Caspase-1信号通路来调控的。 展开更多
关键词 信号通路 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mapk) NOD样受体蛋白3(NLRP3) 胱天蛋白酶-1(Caspase-1) 软骨细胞 细胞焦亡
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miR-140-3p通过靶向MAPK1影响宫颈癌细胞增殖及顺铂敏感性的研究
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作者 粟艳林 魏馨 +4 位作者 王妍 刘鹏敏 殷玲 程利 章雪莲 《中国现代手术学杂志》 2024年第4期261-268,共8页
目的研究miR-140-3p在宫颈癌细胞增殖和对顺铂敏感性中的作用及其机制。方法采用原位杂交技术检测宫颈癌及其癌旁组织中miR-140-3p的表达水平,并分析与临床病理参数的关系。通过CCK8实验、细胞克隆形成和细胞划痕实验,比较各组宫颈癌细... 目的研究miR-140-3p在宫颈癌细胞增殖和对顺铂敏感性中的作用及其机制。方法采用原位杂交技术检测宫颈癌及其癌旁组织中miR-140-3p的表达水平,并分析与临床病理参数的关系。通过CCK8实验、细胞克隆形成和细胞划痕实验,比较各组宫颈癌细胞增殖和迁移的差异。在不同浓度顺铂处理下,检测各组细胞的增殖、克隆形成及死亡率变化。利用miRNA数据库预测目标基因,并通过荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot检测目标基因mRNA和蛋白水平,以及凋亡相关蛋白表达,以验证miR-140-3p的潜在靶点。结果宫颈癌组织中miR-140-3p表达显著低于癌旁组织(P<0.05)。上调miR-140-3p可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、克隆形成及迁移。CCK8、细胞克隆形成和划痕实验结果表明,不同浓度顺铂处理后,miR-140-3p过表达组MAPK1的表达下降,宫颈癌细胞增殖及克隆形成下降,而细胞凋亡增加(P<0.05)。结论miR-140-3p可能通过调控MAPK1基因抑制宫颈癌细胞增殖,并增强对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 miR-140-3p mapk1 顺铂 化疗敏感性
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恩沃利单抗通过下调SLC1A3/ERK/MAPK信号通路抑制AGS胃癌细胞生长
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作者 董转霞 李峰 王育生 《现代消化及介入诊疗》 2024年第5期560-564,共5页
目的探讨恩沃利单抗对AGS胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法体外培养AGS细胞,实验分为恩沃利单抗组(分别含有2.5、5、10、20、40 mg/mL恩沃利单抗的培养液)和对照组(同等体积的生理盐水)。细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细... 目的探讨恩沃利单抗对AGS胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法体外培养AGS细胞,实验分为恩沃利单抗组(分别含有2.5、5、10、20、40 mg/mL恩沃利单抗的培养液)和对照组(同等体积的生理盐水)。细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞的活性,Transwell检测细胞的侵袭和迁移,流式检测细胞的凋亡。蛋白质组学检测分析两组差异蛋白和相关信号通路,蛋白印迹对发现的差异蛋白和通路进行验证。结果与对照组相比,恩沃利单抗组显著降低AGS细胞的存活率(P=0.0060);也能够显著抑制AGS细胞的侵袭和迁移细胞数(P=0.0052),并且可以促进AGS细胞的凋亡(P=0.0030)。聚类分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集发现,相比于对照组,恩沃利单抗组中溶质载体家族1成员3(SLC1A3)蛋白的表达显著下调,并与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关。蛋白印迹实验显示,加入了恩沃利单抗的AGS细胞中SLC1A3蛋白的表达明显降低(P=0.0041),丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的水平也显著降低(P=0.0008)。结论恩沃利单抗可能通过下调SLC1A3的表达,抑制ERK/MAPK信号通路,发挥抑制AGS胃癌细胞生长的作用。恩沃利单抗可能存在多个抗肿瘤作用机制。 展开更多
关键词 恩沃利单抗 胃癌 SLC1A3 ERK mapk
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ERK1/2信号通路基因3'UTR多态性与非小细胞肺癌的相关性 被引量:1
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作者 洪超 向旭东 +6 位作者 李盈甫 曹杨 陈雪雅 李帅 邢安灏 林牧 马千里 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第3期7-17,共11页
目的探究4个ERK1/2信号通路的基因3'UTR区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(MAPK1基因中的rs9340,NRAS基因中的rs14804,KRAS基因中的rs712和rs7973450)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC... 目的探究4个ERK1/2信号通路的基因3'UTR区域的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点(MAPK1基因中的rs9340,NRAS基因中的rs14804,KRAS基因中的rs712和rs7973450)与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的相关性。方法纳入了478名NSCLC患者及480名健康对照者,利用TaqMan探针法对其进行基因分型检测,并分析上述4个SNP与NSCLC的相关性。结果rs9340位点的等位基因在对照组与非小细胞鳞状细胞癌组(squamous cell carcinoma,SCC)中分布频率的差异具有统计学意义(P=0.009),该结果表明rs9340位点的G等位基因可能是非小细胞肺鳞癌的保护性因素(OR=0.67,95%CI:0.50~0.91)。同时,在<50岁年龄组中,rs9340位点的等位基因在对照组和NSCLC组中的分布频率差异具有统计学意义(P=5.07×10^(-4)),该结果表明rs9340等位基因G可能是NSCLC的保护性因素(OR=0.46,95%CI:0.29~0.72)。结论MAPK1基因SNP位点rs9340可能与NSCLC的发生风险相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ERK1/2信号通路 单核苷酸多态性 3'UTR mapk1
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PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路对胰腺癌PANC-1细胞VEGF表达的影响 被引量:16
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作者 张涓娟 蒲宇 +2 位作者 李勇 沈成义 张小明 《川北医学院学报》 CAS 2014年第1期44-48,共5页
目的:探讨PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路对人胰腺癌PANC-1血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:抑制剂LY294002和PD98095分别处理人胰腺癌PANC-1细胞,Western blotting检测细胞VEGF蛋白表达。结果:分析表明LY294002和PD98095处理后... 目的:探讨PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2信号通路对人胰腺癌PANC-1血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:抑制剂LY294002和PD98095分别处理人胰腺癌PANC-1细胞,Western blotting检测细胞VEGF蛋白表达。结果:分析表明LY294002和PD98095处理后的PANC-1细胞的磷酸化AKT、磷酸化ERK1/2及VEGF蛋白表达水平均明显低于对照组VEGF(P<0.05)。结论:抑制PI3K/AKT和MAPK/ERK1/2细胞信号通路能够下调VEGF蛋白表达,进而抑制肿瘤新生血管的生成及浸润转移能力。 展开更多
关键词 胰腺癌 PI3K AKT mapk ERK1 2 VEGF
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硫化氢对糖尿病大鼠心肌纤维化及MAPK1/3和MMP-8表达的影响 被引量:13
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作者 李芳 曾欧 +4 位作者 罗健 吴志雄 肖婷 张晶晶 杨军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期549-552,共4页
目的探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对糖尿病大鼠心肌纤维化及MAPK1/3和MMP-8蛋白表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、硫化氢干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)和硫化氢干预正常大鼠组(H2S组)。用腹腔... 目的探讨气体信号分子硫化氢(H2S)对糖尿病大鼠心肌纤维化及MAPK1/3和MMP-8蛋白表达的影响。方法 40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、硫化氢干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)和硫化氢干预正常大鼠组(H2S组)。用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(40 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型;对照组每天腹腔注射生理盐水;STZ+H2S组与H2S组每天腹腔注射硫氢化钠(H2S供体)溶液(100μmol/kg),8周后处死大鼠,HE染色观察心肌纤维病理形态学变化,Western blot法检测Collagen I、MAPK1/3和MMP-8蛋白的表达。结果与对照组相比,糖尿病组大鼠心肌组织胶原含量明显升高,心肌间质纤维化,Collagen I、MAPK1/3和MMP-8蛋白表达水平显著升高(P<0.05);糖尿病大鼠经硫化氢干预后大部分心肌纤维呈平行排列,结构清晰,间质有少量疏松结缔组织,Collagen I、MAPK1/3和MMP-8蛋白表达水平明显下调(P<0.05),而非糖尿病硫化氢干预组心肌纤维化程度及心肌组织Collagen I、MAPK1/3和MMP-8蛋白表达水平较对照组均无明显差异(P>0.05)。结论 H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制MAPK1/3/MMP-8信号通路有关。 展开更多
关键词 硫化氢 糖尿病 心肌纤维化 mapk1/3 MMP-8
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尿毒清颗粒对糖尿病肾病大鼠肾脏抗炎抗氧化保护作用及对TGF-β_1/p38MAPK信号通路影响的研究 被引量:42
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作者 谭菲 盛瑶环 何勇 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期117-122,共6页
目的探讨尿毒清胶囊对糖尿病肾病大鼠的抗炎、抗氧化作用及对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机分为10只正常组,60只模型组。模型组大鼠腹腔注射45 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)造模,... 目的探讨尿毒清胶囊对糖尿病肾病大鼠的抗炎、抗氧化作用及对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的影响。方法 70只雄性SD大鼠,随机分为10只正常组,60只模型组。模型组大鼠腹腔注射45 mg·kg^(-1)链脲佐菌素(STZ)造模,取造模成功的60只大鼠随机分为12只模型组,12只厄贝沙坦阳性组,12只尿毒清颗粒低剂量组(0.04 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒中剂量组(0.08 mg·kg^(-1)),12只尿毒清颗粒高剂量(0.16 mg·kg^(-1)),灌胃给药12周,模型组和空白组给予生理盐水。每周称量体质量,每周检测24 h尿蛋白量。给药治疗12周后,取血检测血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;麻醉处死大鼠,各取8只对肾组织行HE染色,观察肾组织的病理形态;并取肾组织进行RT-PCR和免疫组化观察TGF-β_1/p38MAPK信号转导等转化因子的mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著增高(P<0.05),NO、SOD含量显著降低(P<0.01),肾组织胞浆中TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);通过治疗后,与模型组对比,尿毒清颗粒高剂量组和阳性组肾脏病理损害明显减轻,尿蛋白及血清BUN、SCr、TG、MDA含量显著降低(P<0.05),NO、SOD含量明显增高(P<0.05),肾组织内TGF-β_1、p38MAPK、Caspase-3 m RNA及蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论尿毒清颗粒能降低24 h尿蛋白量,降低TG和MDA含量及升高NO、SOD含量,通过调控TGF-β_1/p38MAPK从而治疗糖尿病肾病的肾组织受损部位,改善肾功能和减轻病理损伤,能有效地保护糖尿病肾病组织。 展开更多
关键词 尿毒清颗粒 糖尿病肾病 转化生长因子β1 P38mapk Caspase-3 信号通路 SD大鼠
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MAPK8基因在小鼠源性3T3-L1脂肪细胞诱导分化中表达水平的变化 被引量:10
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作者 金子林 郭锡熔 +5 位作者 周旭华 周炯英 倪毓辉 王玢 潘晓勤 陈荣华 《中国儿童保健杂志》 CAS 2004年第4期327-329,共3页
【目的】 观察小鼠源性 3T3 L1脂肪前体细胞诱导分化过程中MAPK8基因表达水平的变化 ,探讨MAPK8基因与肥胖发生之间的关系。 【方法】 体外培养 3T3 L1前体脂肪细胞 ,在诱导 3T3 L1脂肪细胞分化成熟的不同时段 ,采用RT PCR技术检... 【目的】 观察小鼠源性 3T3 L1脂肪前体细胞诱导分化过程中MAPK8基因表达水平的变化 ,探讨MAPK8基因与肥胖发生之间的关系。 【方法】 体外培养 3T3 L1前体脂肪细胞 ,在诱导 3T3 L1脂肪细胞分化成熟的不同时段 ,采用RT PCR技术检测脂肪细胞中MAPK 8基因的mRNA表达水平。 【结果】 MAPK8基因高表达于 3T3 L1脂肪前体细胞中 ,随细胞分化成熟该基因表达水平逐渐下调。MAPK8基因表达水平除在诱导分化前至第 4d、第 2~ 5d、第 6~ 10d时段内差异无显著性外 ,其余各时段间差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。 【结论】 MAPK8基因与肥胖发生有关 ,在 3T3 L1细胞分化过程中表达逐渐下调可能有利于脂肪细胞的分化成熟和脂质积聚。 展开更多
关键词 mapk8基因 3T3-L1前体脂肪细胞 细胞分化 基因表达 肥胖
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柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 胡昕 宋淑慧 +1 位作者 熊玉卿 蔡丽萍 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第5期519-523,共5页
目的:探讨中药柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平的影响。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10、20、40μmol/L组、塞来昔布80μmol/L组。Western Blot测定培养48h后各组细胞中P38MAPK及ERK1/... 目的:探讨中药柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平的影响。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷10、20、40μmol/L组、塞来昔布80μmol/L组。Western Blot测定培养48h后各组细胞中P38MAPK及ERK1/2蛋白表达水平。结果:Western Blot结果显示,与空白对照组相比,低浓度柚皮苷组(10、20μmol/L)对SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白的表达无明显影响,而40μmol/L柚皮苷及塞来昔布组可明显下调P38MAPK及ERK1/2蛋白表达,具有统计学差异(P<0.05)。结论:柚皮苷能抑制人卵巢癌SKOV3细胞P38MAPK及ERK1/2蛋白的作用,从而可能阻断卵巢癌的发生、发展。 展开更多
关键词 柚皮苷 P38mapk ERK1 2 卵巢癌 SKOV3细胞
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补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化GSK-3β、p38MAPK及ERK1/2蛋白的影响 被引量:5
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作者 王攀攀 朱晓峰 +1 位作者 杨丽 张荣华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1381-1383,共3页
目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β(GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生... 目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β(GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生鼠颅骨成骨细胞。实验分为空白血清组和含药血清组,分别采用MTT、ELISA、Western-blot等方法检测两组成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌及磷酸化GSK-3β、p38 MAPK和ERK1/2蛋白的变化。结果:与空白血清组相比,含药血清组可明显促进成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌,并促进胞内磷酸化p38 MAPK和ERK1/2蛋白的表达,对磷酸化GSK-3β蛋白的表达未见明显影响。结论:补肾活血复方含药血清可促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,提高p38 MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化水平。 展开更多
关键词 补肾活血复方 成骨细胞 GSK-3Β P38mapk ERK1/2
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SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响 被引量:6
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作者 高静 朱红霞 +2 位作者 王敏哲 苟静 张丽 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1205-1210,共6页
目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:... 目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0、25、50、100μg/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。结果:Western blot结果显示,25μg/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高。同0μg/L的SDF-1处理组相比,25、50、100μg/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P<0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P<0.01),且这种作用具有剂量依赖性。当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P<0.01)。结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 信号通路 糖尿病 人微血管内皮细胞 PI3K/AKT mapk/ERK
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沙眼衣原体pORF5质粒蛋白激活p38MAPK和NALP3信号通路调控THP-1细胞IL-1β分泌的研究 被引量:3
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作者 刘安元 李群 +4 位作者 聂倩 陶立坚 粟盛梅 周洲 李忠玉 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期146-151,共6页
目的研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制,为阐明Ct致病机制提供实验依据。方法将原核表达重组体pGEX-6p/pORF5转化大肠埃希菌,表达并纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶... 目的研究沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)pORF5质粒蛋白诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制,为阐明Ct致病机制提供实验依据。方法将原核表达重组体pGEX-6p/pORF5转化大肠埃希菌,表达并纯化GST-pORF5融合蛋白,融合蛋白经蛋白酶酶切后制备不含GST标签的pORF5蛋白;用不同浓度的pORF5蛋白体外刺激THP-1细胞,ELISA测定不同时间IL-1β水平;分别用NALP3siRNA、ASC siRNA、Caspase-1抑制剂和p38抑制剂预处理THP-1细胞,再用pORF5蛋白刺激THP-1细胞24h,ELISA测定IL-1β含量,Real-time PCR测定IL-1β和NALP3炎性体mRNA的表达,Western blot分析Caspase-1的表达及p38磷酸化水平。结果 pORF5蛋白以剂量和时间依赖的方式刺激THP-1细胞产生IL-1β,24μg/ml pORF5蛋白刺激24h时IL-1β的表达水平达到峰值(495.1±55.5pg/ml);pORF5蛋白能促进THP-1细胞中NALP3炎性体mRNA的表达;NALP3-siRNA、ASC-siRNA及Caspase-1抑制剂预处理THP-1细胞后,IL-1β分泌量分别降低37.7%、71.3%和40.1%;p38抑制剂能降低NALP3炎性体mRNA及IL-1β分泌量(P<0.01),但抑制NALP3炎性体后p38磷酸化水平未受影响(P>0.05)。结论 pORF5质粒蛋白通过激活p38MAPK和NALP3信号通路共同调控IL-1β的产生和分泌。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 pORF5质粒蛋白 NALP3炎性体 p38 mapk IL-1Β
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PVT1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞的化学敏感性 被引量:4
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作者 卢万里 金哲 +2 位作者 段东奎 王铮 裴书飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第24期2999-3004,共6页
目的:探讨长链非编码RNA PVT1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞化学敏感性的相关机制。方法:qRT-PCR检测永生化人食管上皮细胞系和食管癌细胞系中PVT1、miR-486-3p、MAPK14的相对表达水平;生物信息学预测PVT1、miR-486-3p的... 目的:探讨长链非编码RNA PVT1通过调节miR-486-3p/MAPK14轴降低食管癌细胞化学敏感性的相关机制。方法:qRT-PCR检测永生化人食管上皮细胞系和食管癌细胞系中PVT1、miR-486-3p、MAPK14的相对表达水平;生物信息学预测PVT1、miR-486-3p的靶向关系,并以荧光素酶报告实验验证靶向关系;构建PVT1、miR-486-3p、MAPK14过表达和PVT1敲除耐顺铂食管癌细胞系Eca-109/DDP,DDP处理后,比较各组Eca-109/DDP中的半抑制浓度(IC50)、细胞存活率、细胞凋亡率,并检测细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)、耐药蛋白(MRP1、P-gp)表达情况。结果:PVT1、MAPK14在食管癌细胞中高表达,miR-486-3p低表达(P<0.05);PVT1靶向抑制miR-486-3p表达,过表达PVT1后Eca-109/DDP细胞的IC50、细胞增殖率,MRP1、P-gp、Bcl-2表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax表达水平显著降低(P<0.05),过表达miR-486-3p能够恢复上述表型;敲除PVT1后Eca-109/DDP细胞的IC50、细胞增殖率、MAPK14表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),过表达MAPK14后能够恢复上述表型。结论:PVT1可能通过靶向抑制miR-486-3p表达,促进MAPK14表达诱导耐药蛋白上调表达,降低食管癌细胞的化学敏感性。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 PVT1 miR-486-3p mapk14 顺铂敏感性
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黄芪三萜皂苷通过抑制TGF-β1/Smad2、p38MAPK信号抑制CVB3诱导的心肌纤维化 被引量:12
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作者 张兰 刘晶 +4 位作者 刘天龙 张勇 刘小玲 肖云峰 刘小雷 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2018年第5期2631-2634,共4页
目的本文旨在研究黄芪三萜皂苷(astragalus saponins,AST)对CVB3诱导心肌纤维化的保护作用及机制。方法使用CVB3病毒和BALB/c小鼠制备病毒性心肌炎模型并使用AST进行干预。记录不同处理组小鼠的生存曲线、检测不同干预组小鼠外周血中CK... 目的本文旨在研究黄芪三萜皂苷(astragalus saponins,AST)对CVB3诱导心肌纤维化的保护作用及机制。方法使用CVB3病毒和BALB/c小鼠制备病毒性心肌炎模型并使用AST进行干预。记录不同处理组小鼠的生存曲线、检测不同干预组小鼠外周血中CK-MB水平、心肌组织HE染色和天狼星红染色检测心肌损伤和纤维化水平及通过western blot和qPCR检测心肌组织中TGF-β1、Smad2及p38MAPK水平以研究AST的作用机制。结果 AST能够显著提高小鼠的生存率,显著降低CVB3诱导的心肌损伤和外周血中CK-MB水平。与CVB3组小鼠比较,AST干预组小鼠心肌组织纤维化面积显著减少。无论是RNA水平还是蛋白水平,CVB3能够显著诱导TGF-β1、Smad2及p38MAPK在心肌组织中的表达,而AST对此具有显著地抑制作用。结论 AST对CVB3诱导的心肌组织纤维化具有显著地抑制作用,这种保护作用与抑制CVB3诱导的TGF-β1/Smad2、p38MAPK信号在心肌组织中的活化有关。 展开更多
关键词 黄芪三萜皂苷 CVB3 心肌纤维化 TGF—β1/Smad2 p38mapk信号
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PI3K和MAPK信号通路对A549细胞FOXO1蛋白表达及其亚细胞定位的调节 被引量:4
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作者 张洪开 具英花 +2 位作者 徐韬钧 孙秀华 于爱鸣 《解剖科学进展》 CAS 2012年第2期126-129,133,共5页
目的探讨非小细胞肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT和丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号通路对Forkhead转录因子(Fox蛋白家族)FOXO1活性的影响及分子机制。方法体外培养人非小细胞肺癌系A549,分别选用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294... 目的探讨非小细胞肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT和丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号通路对Forkhead转录因子(Fox蛋白家族)FOXO1活性的影响及分子机制。方法体外培养人非小细胞肺癌系A549,分别选用PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002和MAPK/ERK信号通路特异性抑制剂UO126及两种抑制剂联合处理细胞之后,MTT比色法检测其对细胞增殖的影响;Western blot检测蛋白FOXO1、p-FOXO1及信号下游蛋白Bim表达的变化;免疫荧光法检测FOXO1蛋白在A549细胞中亚细胞的定位的变化。结果与对照组相比,LY294002和UO126都能明显地抑制A549细胞的增殖,且具有时间依赖性。Western blot结果显示,FOXO1的蛋白水平未见显著性变化,而FOXO1的磷酸化水平明显下降,Bim的表达相应增加。免疫荧光结果显示,FOXO1在A549细胞中的核转位增多。LY294002和UO126联合处理A549细胞时,较药物单独作用效果明显增加。结论 PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路能调节FOXO1磷酸化水平,且具有协同作用,抑制其转录活性。FOXO1通过激活Bim蛋白,促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖。 展开更多
关键词 FOXO1 PI3K mapk 肺癌
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肉桂醛对UVA照射后体外成纤维细胞表达MMP-1,MMP-3和MAPK信号的影响 被引量:11
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作者 周凌 晏洪波 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期114-117,共4页
目的探讨肉桂醛对UVA照射后体外皮肤成纤维细胞表达基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinases,MAPK)的影响。方法皮肤成纤维细胞在体外培养后,在培养基中加... 目的探讨肉桂醛对UVA照射后体外皮肤成纤维细胞表达基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinases,MAPK)的影响。方法皮肤成纤维细胞在体外培养后,在培养基中加入不同浓度(0,5,10,20和40μM)肉桂醛,24h后MTT法检测细胞活性。皮肤成纤维细胞经肉桂醛预处理24h后再予UVA照射,Westernblot法检测MMP-1,MMP-3,ERK,JNK,p38磷酸化蛋白水平。结果0—40μM肉桂醛对成纤维细胞的活性无明显影响(P均〉0.05)。肉桂醛能抑制UVA照射后成纤维细胞MAPK信号蛋白ERK,JNK,p38的活化,其也能抑制成纤维细胞表达MMP-1和MMP-3,且各浓度间作用差异均有统计学意义(P均〈0.05)。结论肉桂醛可能通过抑制UVA照射后成纤维细胞MAPK信号蛋白的活化来抑制MMP-1和MMP-3的表达,减少胶原降解,延缓皮肤光老化。 展开更多
关键词 肉桂醛 成纤维细胞 基质金属蛋白酶-1 基质金属蛋白酶-3 丝裂原活化蛋白激酶
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