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银杏叶提取物通过调控p38 MAPK/MLCK信号通路对高氧诱导的急性肺损伤小鼠肠黏膜屏障的保护作用
1
作者 何英 邢周雄 +3 位作者 程云 耿争光 付豹 傅小云 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第2期127-132,共6页
目的探讨银杏叶提取物(GBE)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路,对高氧诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、ALI组、低剂量GBE组、高剂量GBE组和高剂量GBE... 目的探讨银杏叶提取物(GBE)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路,对高氧诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、ALI组、低剂量GBE组、高剂量GBE组和高剂量GBE+茴香菌素(anisomycin)组,每组10只。测定小鼠氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))以及肺湿重与干重比值(W/D);组织学染色观察肺和小肠组织病理变化并评分;酶联免疫吸附试验检测血清炎性细胞因子、D-乳酸(D-LA)和小肠sIgA水平;Western blotting检测相关蛋白表达。结果与对照组相比,ALI组小鼠PaO_(2)及闭合蛋白(occludin)、密封蛋白(claudin)、闭合小带蛋白1(ZO-1)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PaCO_(2)、W/D、肺和小肠病理评分、炎性细胞因子、D-LA、DAO、sIgA水平以及p-p38 MAPK/p38 MAPK和MLCK蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与ALI组比,低剂量GBE组和高剂量GBE组上述指标呈相反变化,且高剂量GBE组改善更显著。而高剂量GBE+anisomycin组与高剂量GBE组比较,治疗作用显著减弱(P<0.05)。结论GBE可能通过调控p38 MAPK/MLCK信号通路,减轻炎症反应,并升高肠黏膜屏障相关蛋白的表达水平,对肠黏膜屏障发挥保护作用。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 高氧 急性肺损伤 肠黏膜屏障 p38 mapk/mlck 炎症
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基于p38 MAPK/MLCK信号通路探讨通腑泻肺灌肠液对急性肺损伤大鼠肠道屏障及肠道菌群的影响 被引量：12
2
作者 马鸣 汪坤 +6 位作者 杨艳华 岳孟茹 任权娜 陈雨晗 宋永真 徐子福 赵旭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期5919-5931,共13页
该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液(TFXF)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、脂多糖(LPS,7.5 mg&#... 该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液(TFXF)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、脂多糖(LPS,7.5 mg·kg^(-1))组、LPS+地塞米松(DEX,3.5 mg·kg^(-1))组、LPS+高剂量(HD,14.74 g·kg^(-1))-TFXF组、LPS+中剂量(MD,7.37 g·kg^(-1))-TFXF组、LPS+低剂量(LD,3.69 g·kg^(-1))-TFXF组。腹腔注射LPS建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型。测定大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度和乳酸脱氢酶(LDH)活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠肺组织和结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子水平;苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠肺组织和结肠组织的病理表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、TNF-α和IL-1βmRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠结肠组织中p38 MAPK/MLCK信号通路相关蛋白表达;16S rRNA测序检测大鼠肠道菌群组成及含量变化,相关性分析探讨肠道菌群改善ALI大鼠的调节作用。结果显示,与LPS组比较,各给药组大鼠肺及结肠组织病理学评分、BALF中LDH活性和总蛋白浓度均明显降低;除LPS+LD-TFXF组外,其余给药均能显著降低大鼠肺组织及结肠组织中TNF-α和IL-1β含量;各给药组大鼠结肠组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)/肌球蛋白轻链2(MLC2)和MLCK蛋白表达明显降低;LPS+HD-TFXF组肺组织p38 MAPK、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平显著降低。16S rRNA测序结果显示,LPS+HD-TFXF组肠道菌群丰度显著升高,肠道菌群Sobs、Shannon、Npshannon指数均显著升高,肠道微生物β多样性分布趋向于CON组,厚壁菌门显著升高、变形杆菌门显著降低,拟杆菌属丰度显著降低,瘤胃球菌属显著升高,物种差异主要为经黏液真杆菌属Blautia、罗氏菌499(Roseburia_sp_499)、丁酸球菌属Butyricicoccus等。大鼠肺组织TNF-α和IL-1β分别与Muri菌属、未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关,与拟杆菌属呈显著正相关;大鼠结肠组织TNF-α和IL-1β分别与未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关,与拟杆菌属呈显著正相关。预测菌群生物功能与次生代谢物的生物合成、氨基酸的生物合成、糖代谢和氧化磷酸化等相关。上述研究表明,TFXF可调节ALI大鼠肠道菌群物种的丰度和多样性,修复肺及结肠组织结构,调节炎性因子水平。其治疗ALI大鼠的作用机制可能与通过p38 MAPK/MLCK信号通路抑制炎症,改善肠黏膜通透性,维持肠道菌群稳态和屏障有关。 展开更多
关键词 通腑泻肺灌肠液 急性肺损伤 16S rRNA测序 肠道屏障 p38 mapk/mlck信号通路
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加味白头翁汤通过p38 MAPK-MLCK信号通路影响溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜紧密连接蛋白 被引量：46
3
作者 张培培 杨欣 +4 位作者 梁国强 朱惠萍 朱慧 王萌 孙宏文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期5719-5726,共8页
从肠黏膜紧密连接蛋白角度探讨加味白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的效果及作用机制。将60只SPF级SD雄性大鼠随机选取10只作为空白组,其余50只采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建UC大鼠模型,随机分为5组,每组10只,分别... 从肠黏膜紧密连接蛋白角度探讨加味白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的效果及作用机制。将60只SPF级SD雄性大鼠随机选取10只作为空白组,其余50只采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建UC大鼠模型,随机分为5组,每组10只,分别为模型组、美沙拉嗪组以及低、中、高剂量加味白头翁汤组(L-JWBTW、M-JWBTW、H-JWBTW组),连续给药14 d。观察大鼠体质量、大便等一般情况,计算疾病活动指数(disease activity index,DAI);镜下观察结肠组织病理形态学变化,进行损伤程度评分、病理组织学评分;鲎试剂法检测血清内毒素含量,Western blot法分析结肠组织ZO-1、occludin、claudin-1、p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平。结果显示,与空白组相比,模型组大鼠体质量明显降低,DAI评分、结肠黏膜损伤程度评分、病理组织学评分均显著升高,p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平以及血清内毒素含量明显升高,ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达水平显著下降。与模型组比较,美沙拉嗪组及各剂量加味白头翁汤组体质量明显增加,DAI评分、结肠黏膜损伤程度评分、病理组织学评分以及p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平和血清内毒素含量均显著下降,ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达水平显著升高,其中H-JWBTW组变化最为明显。上述结果表明,加味白头翁汤可以通过抑制p38 MAPK/MLCK通路的激活,恢复occludin、claudin-1、ZO-1蛋白的表达水平,降低血清中内毒素含量,促进肠黏膜机械屏障修复,维持紧密连接的完整性,降低肠黏膜的通透性,达到治疗UC的作用。 展开更多
关键词 加味白头翁汤 溃疡性结肠炎 p38 mapk mlck ZO-1 occludin CLAUDIN-1 内毒素
原文传递
ATRA通过ERK/MAPK通路调控AS兔心脏MLCK的表达 被引量：1
4
作者 王雪 余沛 +3 位作者 王怡 周青 汪渊 朱华庆 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第10期1494-1499,共6页
目的研究全反式维甲酸(ATRA)通过信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)通路调控动脉粥样硬化(AS)模型兔心脏中肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法普通新西兰大耳朵白兔随机分为正常组、模型组、ATRA组,正常组给予普通饲料喂养,... 目的研究全反式维甲酸(ATRA)通过信号调节激酶/丝裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK)通路调控动脉粥样硬化(AS)模型兔心脏中肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达。方法普通新西兰大耳朵白兔随机分为正常组、模型组、ATRA组,正常组给予普通饲料喂养,模型组和ATRA组给予高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+5%猪油)喂养,并且ATRA组同时给予ATRA灌胃5 mg/(kg·d)。12周后,取动脉和心脏组织,油红染色分析动脉壁斑块形成情况;HE染色和Masson染色观察心肌组织形态学变化,免疫组织化学染色观察心脏中MLCK的表达;Western blot法检测各组MLCK蛋白和ERK蛋白磷酸化水平。体外培养H9c2心肌细胞,分为正常组、模型组、ATRA组、ERK/MAPK选择性抑制剂(PD)组。Western blot法检测各组MLCK蛋白的表达水平。结果12周以后,AS兔模型建立成功。与正常组比较,模型组动脉壁形成大量粥样斑块;HE染色结果显示模型组心肌组织出现严重的紊乱情况;Masson染色结果显示模型组心肌组织发生明显胶原纤维堆积;免疫组化结果显示模型组心肌组织中MLCK表达量增多;而给予ATRA以后,心肌组织紊乱情况得到改善,胶原纤维堆积得到缓解,MLCK表达量和ERK磷酸化水平均有所降低。并且模型组细胞中MLCK蛋白表达升高,给予ATRA和PD98059后,MLCK表达降低。结论ATRA可能通过ERK/MAPK通路降低模型兔心肌细胞MLCK的表达。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 动脉粥样硬化 心肌组织 肌球蛋白轻链激酶 丝裂原活化蛋白激酶
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基于p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路探讨半夏泻心汤修复肠黏膜屏障的作用机制 被引量：3
5
作者 刘蕾蕾 梁书志 刘西建 《中医药信息》 2024年第9期1-6,17,共7页
目的:探寻半夏泻心汤(BXD)在体内抑制肠道炎症反应及修复肠黏膜屏障的作用机制。方法:36只雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(美沙拉嗪组)以及半夏泻心汤低剂量组(BXD-低剂量组)、中剂量组(BXD-中剂量组)、高剂量组(BXD-... 目的:探寻半夏泻心汤(BXD)在体内抑制肠道炎症反应及修复肠黏膜屏障的作用机制。方法:36只雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(美沙拉嗪组)以及半夏泻心汤低剂量组(BXD-低剂量组)、中剂量组(BXD-中剂量组)、高剂量组(BXD-高剂量组)。适应性喂养7 d后,除空白组外,其余各组大鼠自由饮用5%DSS 7 d构建溃疡性结肠炎大鼠模型,造模成功后,空白组与模型组灌胃生理盐水,西药组灌胃美沙拉嗪,0.054 g/d),半夏泻心汤低剂量组(2.205 g/kg)、中剂量组(4.41 g/kg)、高剂量组(8.82 g/kg)灌胃给予半夏泻心汤提取物,均给药15 d。采用疾病活动指数评估造模及药物治疗后大鼠的一般变化情况;苏木精-伊红(HE)染色法,确认结肠组织病变损伤程度;ELISA检测血清中炎性因子含量表达变化情况;qRT-PCR法、Western blot法检测p38 MAPK/NF-κB/MLCK/信号通路关键蛋白表达。结果:5%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠出现体质量减轻、腹泻、脓血便及结肠缩短,造模成功。BXD及美沙拉嗪给药后,大鼠的DAI评分出现不同程度的降低。HE结果显示美沙拉嗪及高剂量BXD给药后明显改善了DSS导致的大鼠结肠组织的病理情况。酶联免疫吸附实验结果提示,高剂量BXD及美沙拉嗪给药后可以显著抑制大鼠促炎因子的表达水平,从而达到抑制肠道炎症的治疗效果。Western blot和qPCR结果表明,BXD可通过调控MAPK、MLCK、NF-κB、Occludin的表达量修复肠黏膜屏障。结论:半夏泻心汤可降低肠黏膜通透性以及修复受损的肠黏膜,其机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路实现的。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 溃疡性结肠炎 p38 mapk/NF-κB/mlck通路 肠黏膜屏障
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褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制 被引量：1
6
作者 余沛 王雪 +3 位作者 王怡 周青 汪渊 朱华庆 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第12期1747-1751,共5页
目的观察褪黑素(MLT)对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制。方法普通级纯种新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+5%猪油);褪黑素组:饲喂高脂饲料的同时MLT灌胃10... 目的观察褪黑素(MLT)对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制。方法普通级纯种新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1%胆固醇+5%猪油);褪黑素组:饲喂高脂饲料的同时MLT灌胃10 mg/(kg·d)治疗。纯种大耳白兔适应性饲养一周后,采用高脂饮食诱导造模,同时给予褪黑素药物治疗。于12周后处死进行采血,检测血清中血脂等指标。取动脉进行油红染色,检测脂质斑块形成情况;取心脏组织,包埋后HE染色观察心肌组织的形态变化;Masson染色检测心肌组织中胶原纤维的变化;Western blot法检测p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、肌球蛋白轻链(MLC)、肌球蛋白轻链磷酸化(p-MLC)的表达水平。结果动脉油红染色结果显示模型组出现大量脂质斑块,证明造模成功。血脂结果显示模型组总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)浓度明显上升,而褪黑素组相对模型组下降。油红染色HE染色结果显示MLT能改善心肌组织形态的紊乱情况,Masson染色结果显示MLT能缓解心肌组织胶原纤维的堆积。Western blot结果显示MLT能下调p38的磷酸化水平以及MLCK蛋白的表达水平,以及下调MLC的磷酸化表达水平(P<0.05)。结论MLT可能通过降低MAPK通路中相关蛋白p38的磷酸化调控MLCK蛋白的表达,从而降低MLC的磷酸化水平对动脉粥样硬化兔心肌组织起到保护作用。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 心肌组织 褪黑素 丝裂原活化蛋白激酶 肌球蛋白轻链激酶
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