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枸杞多糖通过MAP3K3通路降低PD-L1表达抗肺腺癌作用及机制
1
作者 陈思柔 陈文雅 +4 位作者 陈静芹 黄秋茵 李龙娟 张韧 何彦丽 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第9期1458-1470,共13页
目的探究枸杞多糖通过MAP3K3通路降低程序性死亡配体1(PD-L1)表达从而抗肺腺癌的作用及其机制。方法(1)体内实验:构建小鼠皮下肺腺癌移植瘤模型,观察枸杞多糖低、中、高(25、50、100 mg·kg^(-1))剂量用药对小鼠肿瘤生长及免疫器官... 目的探究枸杞多糖通过MAP3K3通路降低程序性死亡配体1(PD-L1)表达从而抗肺腺癌的作用及其机制。方法(1)体内实验:构建小鼠皮下肺腺癌移植瘤模型,观察枸杞多糖低、中、高(25、50、100 mg·kg^(-1))剂量用药对小鼠肿瘤生长及免疫器官的影响。(2)体外实验:枸杞多糖0.25、0.5、1 mg·mL^(-1)处理H1299、A549细胞48 h,CCK-8法及平板克隆形成法检测各组细胞增殖情况,Western Blot及RT-qPCR法检测各组PD-L1蛋白和mRNA表达水平;建立来自健康人外周血激活的T淋巴细胞(PBMC)与肺腺癌细胞共培养体系,观察枸杞多糖用药前后对PBMC免疫杀伤作用的影响;1 mg·mL^(-1)枸杞多糖干预H1299细胞后进行转录组学测序,筛选差异表达基因,并进行KEGG富集分析。以Western Blot和RT-qPCR法检测枸杞多糖用药后肺腺癌细胞MAP3K3蛋白和mRNA表达水平。(3)回复实验:构建MAP3K3过表达A549人肺腺癌细胞株(A549 MAP3K3OE),Western Blot法检测枸杞多糖用药后其PD-L1蛋白表达情况,并观察MAP3K3基因过表达前后以及枸杞多糖干预前后,PBMC对肺腺癌细胞免疫杀伤功能的影响。结果(1)与对照组比较,枸杞多糖用药组瘤质量明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001);肿瘤组织病理学观察发现细胞密度降低,间质淋巴细胞浸润增多;枸杞多糖用药组免疫器官脾脏系数上升(P<0.05)。(2)枸杞多糖处理人肺腺癌细胞48 h后细胞增殖活力无明显变化(P>0.05);枸杞多糖用药后细胞PD-L1蛋白和mRNA表达水平均下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001);枸杞多糖可增强激活的PBMC对肺腺癌细胞的免疫杀伤作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001);转录组学测序差异基因主要富集在MAPK通路;枸杞多糖用药组细胞MAP3K3蛋白和mRNA表达水平下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。(3)A549 MAP3K3 OE肺腺癌细胞中PD-L1高表达(P<0.01);共培养实验发现A549MAP3K3 OE细胞对激活的PBMC免疫杀伤作用具有一定的抵抗性(P<0.001),而枸杞多糖干预后,可一定程度恢复PBMC对A549 MAP3K3 OE细胞的杀伤敏感性(P<0.01,P<0.001)。结论枸杞多糖通过下调肺腺癌细胞MAP3K3基因及PD-L1表达,改善体外培养体系中激活PBMC的免疫杀伤功能,这可能是枸杞多糖抗肺腺癌的作用机制之一。 展开更多
关键词 枸杞多糖 map3k3通路 PD-L1 肺腺癌 免疫杀伤 小鼠 H1299细胞 A549细胞 HBE细胞 Lewis细胞
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人卵巢癌组织中MAP3K3 mRNA的表达及预后分析 被引量：8
2
作者 尹灿 张莹 +6 位作者 董玉玲 陶林 邹泓 梁伟华 赵瑾 李锋 贾薇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期248-252,共5页
目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异... 目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异表达与临床病理特征的关系,评价MAP3K3 mRNA表达在卵巢癌患者预后中的价值。结果 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中的表达显著高于输卵管组织(P<0.05),其高表达与卵巢癌FIGO分期及发病模式分型相关(P<0.05);KaplanMeier生存分析显示,MAP3K3 mRNA高表达患者的无瘤生存时间和总体生存时间均显著短于低表达患者(中位生存时间:34个月vs 52.2个月,P<0.05;38.6个月vs 52.5个月,P<0.05);单因素分析显示,MAP3K3 mRNA高表达与卵巢癌患者预后差相关(HR=4.198,95%CI:1.711~10.302,P<0.05)。结论 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中高表达,其高表达与卵巢癌FIGO分期、发病模式及预后差呈正相关,可能参与了卵巢癌的恶性转化。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 map3k3 MRNA 预后
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MAP3K3基因过表达通过多条信号通路激活CREB促进人肺腺癌细胞增殖及上皮-间质转化 被引量：3
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作者 郭振辉 茆文莉 +4 位作者 陈文雅 梁娇 侯聪艳 张韧 何彦丽 《广东医学》 CAS 2022年第8期939-944,共6页
目的通过体外干预有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MAP3K3)基因表达研究其对人肺腺癌细胞增殖、侵袭以及上皮-间质转化(EMT)的影响,探讨MAP3K3在肺腺癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法使用慢病毒转染构建稳定过表达MAP3K3的人肺... 目的通过体外干预有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(MAP3K3)基因表达研究其对人肺腺癌细胞增殖、侵袭以及上皮-间质转化(EMT)的影响,探讨MAP3K3在肺腺癌发生、发展中的作用及可能的机制。方法使用慢病毒转染构建稳定过表达MAP3K3的人肺腺癌细胞株H1299、A549,通过克隆形成实验、划痕实验及Transwell实验,检测细胞增殖、迁移及侵袭行为的变化;Western blot实验检测EMT相关蛋白波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白E(E-cadherin)和钙黏蛋白N(N-cadherin)表达水平,检测MAP3K3下游信号分子AKT、mTOR、ERK1/2、JNK1/2及其磷酸化蛋白表达水平,检测过表达和敲低MAP3K3的H1299细胞p-CREB蛋白表达水平变化。结果过表达MAP3K3基因后,H1299和A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显增强,细胞的上皮表型分子E-cadherin下调,间质表型分子Vimentin和N-cadherin上调,p-AKT、p-mTOR、p-ERK1/2、p-JNK1/2以及p-CREB蛋白表达上调;使用shRNA稳定敲低MAP3K3后p-CREB蛋白表达明显下调。结论人肺腺癌细胞株H1299和A549体外过表达MAP3K3基因后,可增强细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进细胞EMT,其机制可能与MAP3K3通过激活多个下游信号通路,磷酸化激活CREB(环磷腺苷效应元件结合蛋白)有关,此研究可为基于该信号通路的新型靶向药物开发提供一些实验依据。 展开更多
关键词 肺腺癌 map3k3 CREB 上皮-间质转化
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MAP3K3在子宫内膜癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系研究 被引量：5
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作者 卢丹 戴规 +1 位作者 郭慧 黄丽慧 《中国煤炭工业医学杂志》 2021年第4期337-342,共6页
目的检测子宫内膜癌组织中MAP3K3表达,探究其与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2012年1月—2015年6月在湖南省妇幼保健院行手术切除的200例子宫内膜癌患者癌组织及其对应正常子宫内膜组织标本进行研究。采用免疫组化Sp法及qRT-PC... 目的检测子宫内膜癌组织中MAP3K3表达,探究其与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2012年1月—2015年6月在湖南省妇幼保健院行手术切除的200例子宫内膜癌患者癌组织及其对应正常子宫内膜组织标本进行研究。采用免疫组化Sp法及qRT-PCR法分别检测子宫内膜癌组织及正常子宫内膜组织中MAP3K3蛋白及mRNA表达;分析MAP3K3表达与临床病理特征的相关性;K-M生存曲线及Cox比例风险回归模型分析MAP3K3表达对预后的影响。结果与正常子宫内膜组织比较,子宫内膜癌组织中MAP3K3蛋白及mRNA均显著高表达(P<0.05);MAP3K3高表达与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度及脉管癌栓显著相关(均P<0.05);MAP3K3高表达组患者术后5年总OS低于MAP3K3低表达组(Log-rankχ^(2)=11.315,P=0.001);中-低分化、FIGOⅢ~Ⅳ期、发生淋巴结转移、术后未行辅助治疗、雌孕激素受体阴性及MAP3K3高表达是影响子宫内膜癌患者预后不良的独立危险因素(均P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中MAP3K3显著高表达,与临床病理及预后关系密切,是子宫内膜癌患者预后不良的危险因素,可作为其早期诊断及评估预后的肿瘤标志物及治疗靶点。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 map3k3 免疫组化 QRT-PCR
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