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牦牛MAP3K7基因克隆及其与皮下前体脂肪细胞分化关系分析
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作者 蓝湘一 何洋洋 +5 位作者 张明 黄慈 王海波 王会 柴志欣 钟金城 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期225-233,共9页
MAP3K7是MAP3K家族中的一员,在脂肪分化、炎症和肿瘤发生过程中发挥着重要作用,但其与牦牛脂肪分化的关系未见报道,并且其基因序列未知,制约了相关功能研究。为了获得牦牛MAP3K7基因编码区(CDS)保守区域序列,明确其表达特征,了解其在牦... MAP3K7是MAP3K家族中的一员,在脂肪分化、炎症和肿瘤发生过程中发挥着重要作用,但其与牦牛脂肪分化的关系未见报道,并且其基因序列未知,制约了相关功能研究。为了获得牦牛MAP3K7基因编码区(CDS)保守区域序列,明确其表达特征,了解其在牦牛不同组织中的表达水平及其与牦牛皮下前体脂肪细胞分化的相关性,利用RT-PCR技术,克隆牦牛MAP3K7基因并利用生物信息学方法分析生物学特性;利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测MAP3K7在牦牛心、肝、脾等10个组织中的表达情况,与不同分化阶段牦牛皮下脂肪细胞中MAP3K7基因和脂分化相关基因的表达情况,同时结合油红O染色,明确MAP3K7基因对牦牛皮下前体脂肪细胞分化的影响。结果表明:克隆所得牦牛MAP3K7基因CDS区长度为1740 bp,编码579个氨基酸,与野牦牛MAP3K7预测序列CDS区比对发现第967位A>G,导致第323位氨基酸Thr>Ala的突变。理化性质分析发现,该蛋白为整体带负电的亲水酸性蛋白,具有112个氨基酸磷酸化位点,其氨基酸组成中,占比最高的是丝氨酸;二级结构预测显示,其无规卷曲含量最高,可能与TAB3等蛋白质间存在相互作用关系。核苷酸同源性比对与进化树结果表明,牦牛MAP3K7在反刍动物间具有较高的保守性,与野牦牛同源性最高且进化关系最近。组织定量检测发现,MAP3K7在牦牛皮下脂肪和内脏脂肪中的表达量相对较低,在牦牛皮下前体脂肪细胞诱导分化过程中,MAP3K7表达量随着成熟脂肪细胞的增多先上调,至分化到一定程度后下调。综上,MAP3K7基因在牦牛皮下前体脂肪细胞分化前期高表达以促进分化,但当分化到一定程度时,表达下调抑制进一步分化。 展开更多
关键词 牦牛 map3K7 基因表达 皮下脂肪 脂肪分化
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枸杞多糖通过MAP3K3通路降低PD-L1表达抗肺腺癌作用及机制
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作者 陈思柔 陈文雅 +4 位作者 陈静芹 黄秋茵 李龙娟 张韧 何彦丽 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第9期1458-1470,共13页
目的探究枸杞多糖通过MAP3K3通路降低程序性死亡配体1(PD-L1)表达从而抗肺腺癌的作用及其机制。方法(1)体内实验:构建小鼠皮下肺腺癌移植瘤模型,观察枸杞多糖低、中、高(25、50、100 mg·kg^(-1))剂量用药对小鼠肿瘤生长及免疫器官... 目的探究枸杞多糖通过MAP3K3通路降低程序性死亡配体1(PD-L1)表达从而抗肺腺癌的作用及其机制。方法(1)体内实验:构建小鼠皮下肺腺癌移植瘤模型,观察枸杞多糖低、中、高(25、50、100 mg·kg^(-1))剂量用药对小鼠肿瘤生长及免疫器官的影响。(2)体外实验:枸杞多糖0.25、0.5、1 mg·mL^(-1)处理H1299、A549细胞48 h,CCK-8法及平板克隆形成法检测各组细胞增殖情况,Western Blot及RT-qPCR法检测各组PD-L1蛋白和mRNA表达水平;建立来自健康人外周血激活的T淋巴细胞(PBMC)与肺腺癌细胞共培养体系,观察枸杞多糖用药前后对PBMC免疫杀伤作用的影响;1 mg·mL^(-1)枸杞多糖干预H1299细胞后进行转录组学测序,筛选差异表达基因,并进行KEGG富集分析。以Western Blot和RT-qPCR法检测枸杞多糖用药后肺腺癌细胞MAP3K3蛋白和mRNA表达水平。(3)回复实验:构建MAP3K3过表达A549人肺腺癌细胞株(A549 MAP3K3OE),Western Blot法检测枸杞多糖用药后其PD-L1蛋白表达情况,并观察MAP3K3基因过表达前后以及枸杞多糖干预前后,PBMC对肺腺癌细胞免疫杀伤功能的影响。结果(1)与对照组比较,枸杞多糖用药组瘤质量明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001);肿瘤组织病理学观察发现细胞密度降低,间质淋巴细胞浸润增多;枸杞多糖用药组免疫器官脾脏系数上升(P<0.05)。(2)枸杞多糖处理人肺腺癌细胞48 h后细胞增殖活力无明显变化(P>0.05);枸杞多糖用药后细胞PD-L1蛋白和mRNA表达水平均下降(P<0.05,P<0.01,P<0.001);枸杞多糖可增强激活的PBMC对肺腺癌细胞的免疫杀伤作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001);转录组学测序差异基因主要富集在MAPK通路;枸杞多糖用药组细胞MAP3K3蛋白和mRNA表达水平下调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。(3)A549 MAP3K3 OE肺腺癌细胞中PD-L1高表达(P<0.01);共培养实验发现A549MAP3K3 OE细胞对激活的PBMC免疫杀伤作用具有一定的抵抗性(P<0.001),而枸杞多糖干预后,可一定程度恢复PBMC对A549 MAP3K3 OE细胞的杀伤敏感性(P<0.01,P<0.001)。结论枸杞多糖通过下调肺腺癌细胞MAP3K3基因及PD-L1表达,改善体外培养体系中激活PBMC的免疫杀伤功能,这可能是枸杞多糖抗肺腺癌的作用机制之一。 展开更多
关键词 枸杞多糖 map3K3通路 PD-L1 肺腺癌 免疫杀伤 小鼠 H1299细胞 A549细胞 HBE细胞 Lewis细胞
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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除品系
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作者 贾淳钰 沈延 +3 位作者 陈罡 郑可 秦岩 李雪梅 《基础医学与临床》 2025年第3期290-297,共8页
目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系,为进一步研究map3k15在肾脏疾病方面的作用提供动物模型。方法1)分析map3k15在斑马鱼中的表达模式;2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系;3)观察... 目的利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系,为进一步研究map3k15在肾脏疾病方面的作用提供动物模型。方法1)分析map3k15在斑马鱼中的表达模式;2)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼map3k15敲除纯合品系;3)观察map3k15缺失对斑马鱼表型的影响。结果1)map3k15在斑马鱼前肾中表达,且MAP3K15/Map3k15蛋白在多物种间具有高度保守性;2)成功构建了斑马鱼map3k15-/-突变体,并保留+2 bp及+1 bp 2种突变品系;3)map3k15突变斑马鱼在胚胎发育过程中出现卵黄囊、心包及头部的水肿,且随发育时间延长,症状逐渐加重。结论成功构建了map3k15敲除的纯合斑马鱼品系,为未来研究map3k15在肾脏发育及疾病中的作用提供了重要的模型。 展开更多
关键词 map3k15 CRISPR/Cas9基因编辑技术 斑马鱼 肾脏发育
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LINC00667调节miR-454-3p/MAP3K9轴对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 吴华 孙永明 +3 位作者 蔡佳伟 赖世佳 蔡雪花 郑建华 《中国细胞生物学学报》 2025年第4期793-802,共10页
该研究探讨LINC00667调节mi R-454-3p/MAP3K9轴对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响。该研究将鼻咽癌细胞HNE1分为control组、si-NC组、si-LINC00667组、mimic NC组、miR-454-3pmimic组、si-LINC00667+inhibitorNC组、si-LINC00667+miR-45... 该研究探讨LINC00667调节mi R-454-3p/MAP3K9轴对鼻咽癌细胞恶性生物学行为的影响。该研究将鼻咽癌细胞HNE1分为control组、si-NC组、si-LINC00667组、mimic NC组、miR-454-3pmimic组、si-LINC00667+inhibitorNC组、si-LINC00667+miR-454-3pinhibitor组。利用qRT-PCR检测LINC00667、miR-454-3p、MAP3K9 mRNA表达水平;MTT法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Transwell检测细胞侵袭情况;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot法检测MAP3K9蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测LINC00667与miR-454-3p以及miR-454-3p与MAP3K9的相互作用。结果得出,HNE1与人正常鼻咽上皮细胞相比,LINC00667、MAP3K9 mRNA表达水平升高, miR-454-3p表达水平降低(P<0.05)。与control组和si-NC组比较, siLINC00667组HNE1细胞中LINC00667表达水平、MAP3K9表达水平以及细胞增殖、迁移和侵袭能力降低, miR-454-3p表达水平和细胞凋亡率升高(P<0.05)。转染miR-454-3p mimic对HNE1细胞的影响与转染si-LINC00667类似。与si-LINC00667+inhibitor NC组相比, si-LINC00667+miR-454-3p inhibitor组HNE1细胞的增殖、迁移和侵袭能力升高, MAP3K9表达水平升高, miR-454-3p表达水平、细胞凋亡率降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示, LINC00667与miR-454-3p、miR-454-3p与MAP3K9存在靶向关系。总结可得,干扰LINC00667可能通过上调miR-454-3p表达,抑制MAP3K9表达,进而抑制鼻咽癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 LINC00667 miR-454-3p map3K9 鼻咽癌 恶性生物学行为
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番鸭VIPR1和miR-317以及MAP3K7和miR-244靶向关系的研究
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作者 李丽 辛清武 +4 位作者 章琳俐 缪中纬 朱志明 梁阿政 郑嫩珠 《中国家禽》 北大核心 2024年第6期15-19,共5页
试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和RNAhybrid三个软件的交集预测miR-317和miR-244靶基因,构建VIPR1-pmirGLO/MAP3K7-pmirGLO野生型和突变型双荧光素酶重组载体,将miR-317/VIPR1-Wt和miR-244/MAP3... 试验旨在验证番鸭就巢相关miRNA与靶基因靶向关系。试验利用miRanda、PITA和RNAhybrid三个软件的交集预测miR-317和miR-244靶基因,构建VIPR1-pmirGLO/MAP3K7-pmirGLO野生型和突变型双荧光素酶重组载体,将miR-317/VIPR1-Wt和miR-244/MAP3K7-Wt分别共转染至鸭胚成纤维细胞,检测双荧光素酶活性。结果显示:与miR-NC组相比,miR-317/VIPR1-Wt共转染组相对荧光值显著降低(P<0.05);VIPR1突变后,miR-NC组与miR-317组的相对荧光值不显著(P>0.05),说明突变后完全抑制miR-317对VIPR1的结合作用,VIPR1与miR-317之间存在相互结合作用。与miR-NC组相比,miR-244/MAP3K7-Wt共转染组相对荧光值无显著性差异(P>0.05);MAP3K7突变后,miR-NC组与miR-244组的相对荧光值差异不显著(P>0.05),表明MAP3K7与miR-244之间不存在相互结合作用。研究提示,miR-317与VIPR1存在确切靶向结合位点,即VIPR1是miRNA miR-317的靶基因,而miR-244与MAP3K7不存在靶向关系。 展开更多
关键词 番鸭 就巢 miR-317 miR-244 map3K7 VIPR1
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大黄素通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡 被引量:1
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作者 范敏慧 帅仁亚 李晴宇 《浙江中西医结合杂志》 2024年第5期407-414,共8页
目的 探讨大黄素(emodin,EMO)通过microRNA(miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法 培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231以及人乳腺细胞系Hs578Bst,使用不同浓度的EMO处理细胞,细胞根据培养条件分为对照组、... 目的 探讨大黄素(emodin,EMO)通过microRNA(miR)-582-3p/MAP3K1对乳腺癌细胞增殖、凋亡的作用及分子机制。方法 培养人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231以及人乳腺细胞系Hs578Bst,使用不同浓度的EMO处理细胞,细胞根据培养条件分为对照组、EMO(10μM)组、NC mimics组、NC mimics+EMO组、miR-582-3p mimics组和miR-582-3p mimics+EMO组,检测EMO及miR-582-3p异常表达对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。荧光定量(qRT-PCR)检测miR-582-3p及MAP3K1的表达。MTT和EdU实验检测乳腺癌细胞增殖,流式细胞术和TUNEL实验检测细胞凋亡及细胞周期。蛋白印迹(Western blot)检测增殖标志蛋白Ki-67及凋亡标志蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3在癌细胞中的表达水平。结果 EMO可以抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231及MCF-7的增殖能力[(17.65±0.96)%比(28.63±2.16)%,(15.02±1.71)%比(28.22±1.89)%,P<0.05]、调节细胞周期并促进细胞凋亡[(23.67±1.25)%比(5.73±0.84)%,(27.33±1.73)%比(5.17±0.85)%,P<0.05]。Western blot结果显示,EMO可抑制细胞中Ki-67及Bcl-2的表达并促进Caspase-3(cleaved)及Bax的表达(P<0.05)。EMO处理乳腺癌细胞后miR-582-3p的表达显著下调[(0.45±0.09)比(1.00±0.10),(0.37±0.05)比(1.00±0.11),P<0.01],而过表达miR-582-3p会逆转EMO对乳腺癌细胞生物学活性的影响(P<0.05)。EMO还会通过miR-583-3p调节癌细胞中MAP3K1的表达(P<0.05)。结论 EMO可能通过调节miR-582-3p影响MAP3K1活性抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 大黄素 乳腺癌细胞 miR-582-3p map3K1
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转录因子SP1调控MAP3K1表达影响糖尿病视网膜病变细胞凋亡和炎症反应 被引量:1
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作者 黄丹 邓芳祝 +1 位作者 谢功泽 李巧莲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期519-523,共5页
目的:探究转录因子SP1对糖尿病视网膜病变(DR)细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法:构建人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的DR模型,通过转染将细胞分为Control组、HG组、HG+si-NC组、HG+si-SP1组、HG+si-SP1+oe-NC组和HG+si-SP1+oe... 目的:探究转录因子SP1对糖尿病视网膜病变(DR)细胞凋亡和炎症反应的影响及分子机制。方法:构建人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)的DR模型,通过转染将细胞分为Control组、HG组、HG+si-NC组、HG+si-SP1组、HG+si-SP1+oe-NC组和HG+si-SP1+oe-MAP3K1组。RT-qPCR检测SP1和MAP3K1表达;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测细胞中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量。通过生物信息学寻找SP1与MAP3K1启动子间的结合位点,ChIP-qPCR验证SP1与MAP3K1启动子的结合情况。结果:与Control组相比,HG处理的hRMECs中SP1和MAP3K1表达均升高(P<0.05)。抑制SP1表达后细胞凋亡率明显降低(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量明显减少(P<0.05)。抑制SP1可降低MAP3K1表达。进一步过表达MAP3K1逆转了si-SP1对HG诱导的hRMECs凋亡和炎症反应的抑制作用。结论:转录因子SP1通过促进MAP3K1表达促进DR细胞凋亡及炎症反应。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 SP1 map3K1 凋亡 炎症反应
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MAP3K5抑制剂司隆色替的结构修饰及构效关系研究进展
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作者 兰萍萍 王辉 +2 位作者 刘华 王甜甜 王增涛 《中国医药工业杂志》 EI CAS CSCD 2024年第2期165-175,共11页
作为首个进入临床阶段的有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶5(MAP3K5)抑制剂,司隆色替临床试验的适用证包括非酒精性脂肪肝、肺动脉高压和糖尿病肾病等。由于司隆色替结构新颖、独特,已成为该类抑制剂结构设计、骨架修饰的主要先导化合物... 作为首个进入临床阶段的有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶5(MAP3K5)抑制剂,司隆色替临床试验的适用证包括非酒精性脂肪肝、肺动脉高压和糖尿病肾病等。由于司隆色替结构新颖、独特,已成为该类抑制剂结构设计、骨架修饰的主要先导化合物。近年来,围绕司隆色替的结构修饰,获得了大量“me-too”类候选物。文章从骨架片段修饰和成环结构修饰2方面介绍了司隆色替的修饰策略及构效关系的研究进展,旨在为该领域的研究提供参考。 展开更多
关键词 map3K5抑制剂 司隆色替 研究进展 结构修饰
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MAP3K9通过上调Notch-1促进胰腺癌细胞的增殖与迁移
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作者 陈宇佛 黄桦 曹通 《医学理论与实践》 2024年第20期3431-3436,共6页
目的:探讨MAP3K9通过调控Notch-1促进胰腺癌细胞增殖、迁移的机制。方法:在胰腺癌细胞中分别转染MAP3K9过表达质粒和siRNA,RT-qPCR检测MAP3K9 mRNA表达水平,MTT实验检测转染后细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡能力的变化,划... 目的:探讨MAP3K9通过调控Notch-1促进胰腺癌细胞增殖、迁移的机制。方法:在胰腺癌细胞中分别转染MAP3K9过表达质粒和siRNA,RT-qPCR检测MAP3K9 mRNA表达水平,MTT实验检测转染后细胞增殖能力的改变,流式细胞术检测细胞凋亡能力的变化,划痕试验检测细胞迁移能力的变化,Transwell实验检测细胞的迁移与侵袭能力,Western Blot检测MAP3K9、Notch-1及EMT相关蛋白的表达情况。结果:RT-qPCR和Western Blot显示,PaTu-8988和PANC-1细胞的MAP3K9表达水平低于BXPC-3细胞;RT-qPCR结果表明,转染MAP3K9过表达质粒可以显著提高PaTu-8988和PANC-1细胞MAP3K9 mRNA表达水平,而转染siRNA MAP3K9可明显下调BXPC-3细胞MAP3K9 mRNA表达水平;上调胰腺癌细胞MAP3K9表达,可提高胰腺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力,并抑制细胞凋亡;在胰腺癌细胞中过表达MAP3K9,可上调Notch-1、Vimentin、N-cadherin以及slug蛋白表达水平,并降低E-cadherin表达水平。结论:MAP3K9能够激活Notch-1,进而促进胰腺癌细胞的上皮—间充质转化(EMT)过程,增强胰腺癌细胞增殖及迁移能力。 展开更多
关键词 map3K9 NOTCH-1 上皮—间充质转化 胰腺癌
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鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22表达的关系及意义 被引量:6
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作者 江庆萍 刘少颜 +4 位作者 何秀芳 彭娟 熊汉真 熊中堂 杨嶽鑫 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1146-1149,共4页
目的研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性。方法收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标... 目的研究鼻咽癌中MAP3K5和Epstein-Barr病毒编码的miR-BART22的表达及其相关性。方法收集53例鼻咽癌石蜡档案标本和30例鼻咽黏膜慢性炎标本,分别行EBER和miR-BART22原位杂交及MAP3K5免疫组化检测;另分别选取10例鼻咽癌和鼻咽黏膜新鲜标本提取蛋白行MAP3K5的Western blot检测。结果 53例鼻咽癌EBER均阳性,49例miR-BART22阳性;30例鼻咽黏膜慢性炎EBER和miR-BART22均阴性。MAP3K5在53例鼻咽癌组织中50例为阴性,癌巢周围粘膜组织呈阳性表达,3例弱阳性(+)表达。30例鼻咽粘膜慢性炎中,25例强阳性表达(++~+++),3例弱阳性(+)表达,2例阴性;鼻咽癌和鼻咽黏膜慢性炎MAP3K5差异具有统计学意义(P<0.001);Westernblot检测结果黏膜慢性炎MAP3K5蛋白表达值高于鼻咽癌(P=0.029)。MAP3K5和miR-BART22表达呈负相关(P<0.001)。结论 MAP3K5在鼻咽癌组织中表达水平低于黏膜上皮组织。MiR-BART22与之相反,在鼻咽癌中高表达,而黏膜慢性炎中缺乏。MAP3K5和miR-BART22在鼻咽癌中表达呈负相关。根据以上实验和相关文献,我们推测MAP3K5可能是EB病毒miR-BART22靶标基因,EB病毒miR-BART22通过抑制MAP3K5的表达,使相应磷酸化MAP3K5蛋白减少,进而下调MAPK通路下游基因蛋白的磷酸化,并行使对NPC细胞抑制凋亡、阻止分化并促进免疫逃逸等作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 map3K5 EPSTEIN-BARR病毒 miR-BART22 MIRNA
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人卵巢癌组织中MAP3K3 mRNA的表达及预后分析 被引量:8
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作者 尹灿 张莹 +6 位作者 董玉玲 陶林 邹泓 梁伟华 赵瑾 李锋 贾薇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期248-252,共5页
目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异... 目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 3,MAP3K3)的mRNA表达与卵巢癌临床病理特征及预后的相关性。方法采用qRT-PCR法检测MAP3K3 mRNA在卵巢癌和输卵管组织中的表达,并分析其差异表达与临床病理特征的关系,评价MAP3K3 mRNA表达在卵巢癌患者预后中的价值。结果 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中的表达显著高于输卵管组织(P<0.05),其高表达与卵巢癌FIGO分期及发病模式分型相关(P<0.05);KaplanMeier生存分析显示,MAP3K3 mRNA高表达患者的无瘤生存时间和总体生存时间均显著短于低表达患者(中位生存时间:34个月vs 52.2个月,P<0.05;38.6个月vs 52.5个月,P<0.05);单因素分析显示,MAP3K3 mRNA高表达与卵巢癌患者预后差相关(HR=4.198,95%CI:1.711~10.302,P<0.05)。结论 MAP3K3 mRNA在卵巢癌组织中高表达,其高表达与卵巢癌FIGO分期、发病模式及预后差呈正相关,可能参与了卵巢癌的恶性转化。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 map3K3 MRNA 预后
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miRNA-199a-3p调控MAP3K4在胃癌中的表达 被引量:9
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作者 闵小春 伍婷婷 +4 位作者 曾吉 张晓雪 刘晓明 景小鹏 金策 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第17期2817-2820,共4页
目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调... 目的探讨胃癌中MIRNA-199A-3P调控候选基因MAP3K4的表达。方法收集35例胃癌及癌旁组织标本,采用茎环逆转录-聚合酶链式反应法检测胃癌组织及癌旁组织中MIR-199A-3P的表达水平,WESTERN BLOT法检测MAP3K4表达;细胞转染法检测MIR-199A-3P调控MAP3K4表达,双荧光素酶报告基因检测系统验证MIR-199A-3P结合MAP3K4的3’UTR的靶位点。结果与癌旁组织相比,胃癌组织MIR-199A-3P高表达,且其候选基因MAP3K4低表达;MIR-199A-3P MIMICS转染抑制MAP3K4表达;MAP3K4是MIR-199A-3P作用的靶基因。结论 MIR-199A-3P是胃癌的一个癌基因,MAP3K4是受其调控的靶基因。 展开更多
关键词 胃肿瘤 MIR-199A-3P map3K4
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六味地黄丸对三阴性乳腺癌MAP3K1、SOX2表达的影响 被引量:9
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作者 郑里翔 权威 +2 位作者 周露 黄萍 黎红 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第9期5-8,I0013,I0014,共6页
目的研究六味地黄丸(滋阴方)抑制三阴性乳腺癌生长的分子机制。方法SPF级雌性昆明种鼠200只,每3 d触诊乳腺部位,6个月仍未发瘤的小鼠为正常组,发瘤后的小鼠随机分成5组:模型组,紫杉醇组,六味地黄丸低、中、高剂量组(滋阴方各组),至濒死... 目的研究六味地黄丸(滋阴方)抑制三阴性乳腺癌生长的分子机制。方法SPF级雌性昆明种鼠200只,每3 d触诊乳腺部位,6个月仍未发瘤的小鼠为正常组,发瘤后的小鼠随机分成5组:模型组,紫杉醇组,六味地黄丸低、中、高剂量组(滋阴方各组),至濒死期剥离瘤组织;制备六味地黄丸含药血清低、中、高剂量组(滋阴方各含药血清组)干预MDA-MB-231细胞;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)、免疫荧光法(immunofluorescence,IF)检测丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶1(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1,MAP3K1)、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)的表达水平。结果动物实验表明,与模型组相比,滋阴方中、高剂量组及紫杉醇组MAP3K1蛋白表达升高,SOX2蛋白表达下降(P<0.05);体外实验表明:MAP3K1沉默后,阳性RNAi滋阴方含药血清高、中、低剂量组(阳性RNAi滋阴方各含药血清组)MAP3K1表达显著上升,SOX2表达显著下降(P<0.05)。结论滋阴方可通过上调MAP3K1的蛋白表达,下调SOX2的表达来调控MAPK信号通路从而发挥抑制乳腺癌生长的作用。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 六味地黄丸 map3K1 SOX2
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杜洛克猪MAP3K5基因多态位点与生长、饲料利用性状的关联分析 被引量:2
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作者 蒲蕾 岳静伟 +10 位作者 张金山 刘欣 王立刚 颜华 侯欣华 高红梅 张恬 张跃博 武群清 张龙超 王立贤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期2982-2988,共7页
试验旨在研究MAP3 K5基因多态性与杜洛克猪生长、饲料利用性状的关联性。利用Illumina SNP60芯片测序结果比较发现了MAP3 K5基因的4个SNPs位点(Ssc1:30769583 A>C;Ssc1:30781169 A>G;Ssc1:30940839A>G;Ssc1:30962276G>A)。... 试验旨在研究MAP3 K5基因多态性与杜洛克猪生长、饲料利用性状的关联性。利用Illumina SNP60芯片测序结果比较发现了MAP3 K5基因的4个SNPs位点(Ssc1:30769583 A>C;Ssc1:30781169 A>G;Ssc1:30940839A>G;Ssc1:30962276G>A)。统计获得MAP3 K5基因的4个SNPs位点的基因型频率及等位基因频率,发现4个SNPs为低度-中度的多态突变位点。对MAP3 K5基因多态性与生长、饲料利用性状的关联性进行分析,结果表明,杜洛克猪Ssc1:30769583A>C位点CC基因型个体与AA基因型个体相比剩余采食量(RFI)性状降低了133.08g/d(P<0.05);Ssc1:30781169A>G位点的GG基因型个体与AG基因型个体相比RFI性状降低了116.18g/d(P<0.05),ADFI性状降低了0.23kg/d(P<0.05);Ssc1:30940839A>G位点的GG基因型个体与AG基因型个体相比饲料转化率(FCR)性状降低了0.10%(P<0.05);Ssc1:30962276G>A位点的AA基因型个体与GG基因型个体相比ADG性状降低了0.04kg/d(P<0.05)。试验初步认为MAP3 K5基因4个SNPs位点的多态性对杜洛克猪的RFI、ADFI、FCR和ADG具有一定影响。 展开更多
关键词 map3 K5基因 杜洛克猪 SNP 剩余采食量 饲料利用效率
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角膜混浊小鼠突变候选基因Map3k1克隆与序列分析 被引量:4
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作者 吴刘成 刘春 +2 位作者 蒋荧梅 王生存 邵义祥 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期1-5,共5页
对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增... 对具有角膜混浊表型的B6-Co突变系小鼠突变候选基因Map3k1进行克隆及测序分析,寻找该突变系小鼠Map3k1基因的突变位点。以小鼠Map3k1基因的mRNA、全长及上游5 kb序列设计引物,分别以基因组DNA和mRNA为模板,采用PCR和RT-PCR技术分段扩增目的基因,将目的片段连接在T载体上,转化至感受态细胞,筛选阳性克隆,质粒DNA分子提取,电泳检测,EcoRⅠ酶切释放目的片段,送上海生工生物工程技术服务有限公司测序。成功扩增出Map3k1基因的20个外显子和上游调控序列,B6-Co小鼠测序结果与基因组数据库序列比对,该基因位于13号染色体第112 559 574的碱基由T突变为A,编码的蛋白质第314氨基酸由亮氨酸变为谷氨酸,但是该基因的表达调控及蛋白质剪切机制仍有待深入研究。 展开更多
关键词 B6-Co突变系小鼠 map3k1基因 PCR扩增 序列分析
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miRNA-520a-3p调控MAP3K2表达对肺癌干细胞凋亡的影响 被引量:11
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作者 鄢俊 钟志宏 施华球 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第13期2051-2056,共6页
背景:有研究证实,miRNA-520a-3p在肺癌干细胞中有一定调节作用,但具体功能和作用机制尚不明确。目的:探索miRNA-520a-3p对肺癌干细胞凋亡的影响,并对其作用机制进行初步研究。方法:采用免疫磁珠法从肺腺癌细胞株A549中分离出CD133^+肺... 背景:有研究证实,miRNA-520a-3p在肺癌干细胞中有一定调节作用,但具体功能和作用机制尚不明确。目的:探索miRNA-520a-3p对肺癌干细胞凋亡的影响,并对其作用机制进行初步研究。方法:采用免疫磁珠法从肺腺癌细胞株A549中分离出CD133^+肺癌干细胞。实时荧光定量PCR检测miRNA-520a-3p在CD133^+肺癌干细胞中的表达。采用脂质体转染法增加CD133^+肺癌干细胞中miRNA-520a-3p表达水平,流式细胞术检测过表达miRNA-520a-3p对CD133^+肺癌干细胞凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验检测miRNA-520a-3p对MAP3K2基因的调控作用。Western Blotting检测过表达miRNA-520a-3p对CD133^+肺癌干细胞中MAP3K2,Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响。结果与结论:(1)在CD133^+肺癌干细胞中,miRNA-520a-3p表达水平显著低于CD133-肺癌细胞(P<0.05);(2)过表达miRNA-520a-3p后,显著增加了CD133^+肺癌干细胞凋亡百分比(P<0.05);(3)抑制miRNA-520a-3p表达能够显著增强含有MAP3K2基因3’-非翻译区(3’-UTR)报告质粒的荧光素酶活性(P<0.05),增加miRNA-520a-3p表达能够显著降低含有MAP3K2基因3’-UTR报告质粒的荧光素酶活性(P<0.05);(4)过表达miRNA-520a-3p后,CD133^+肺癌干细胞中MAP3K2,Bcl-2蛋白表达降低(P均<0.05),而Caspase-3蛋白表达增加(P<0.05);(5)结果表明,在CD133^+肺癌干细胞中,miRNA-520a-3p呈低表达状态。miRNA-520a-3p可能通过调控MAP3K2基因表达,诱导CD133^+肺癌干细胞凋亡。 展开更多
关键词 miRNA-520a-3p 肺癌 肿瘤干细胞 CD133 map3K2 细胞凋亡 干细胞
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Map3k1调控小鼠眼睑闭合的研究进展 被引量:8
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作者 吴刘成 邵义祥 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期144-151,共8页
小鼠(Mus musculus)眼睑发育需要协调细胞增殖、细胞形态改变、迁移及凋亡。Map3k1是MAPK家族中重要的一员,Map3k1表达的蛋白质MEKK1是MAPK信号通路重要的节点。MEKK1-JNK信号通路活化c-jun,增强AP-1转录因子的转录活性,从而调控肌动蛋... 小鼠(Mus musculus)眼睑发育需要协调细胞增殖、细胞形态改变、迁移及凋亡。Map3k1是MAPK家族中重要的一员,Map3k1表达的蛋白质MEKK1是MAPK信号通路重要的节点。MEKK1-JNK信号通路活化c-jun,增强AP-1转录因子的转录活性,从而调控肌动蛋白纤维的形成和细胞的迁移。MEKK1还有可能通过c-jun与HB-EGF/EGFR-ERK信号通路相互作用。Map3k1基因敲除后,小鼠胚胎眼睑不能闭合,造成小鼠出生时眼睑开放,导致角膜病。因此,深入研究Map3k1基因功能将有可能为研究人类先天性眼睑缺陷及角膜病提供新的思路,为此类疾病的早期诊断、预防、治疗提供新的手段和途径。 展开更多
关键词 map3k1 基因调控 信号通路 眼睑闭合
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MAP3K9对奶牛乳腺上皮细胞增殖及乳蛋白合成的影响 被引量:3
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作者 穆莹 王淼 +1 位作者 冯一兵 郑冰 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期16-20,61,共6页
以奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)对细胞增殖和β-酪蛋白(CSN2)合成的影响。对细胞进行蛋氨酸刺激,检测细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达。过表达或抑制MAP3K9,检测细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-M... 以奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶9(MAP3K9)对细胞增殖和β-酪蛋白(CSN2)合成的影响。对细胞进行蛋氨酸刺激,检测细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达。过表达或抑制MAP3K9,检测细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-MAPK1,m TOR和p-m TOR的表达。过表达MAP3K9且抑制MAPK1,检测细胞增殖与细胞中m TOR、p-m TOR和CSN2的表达。结果表明:蛋氨酸刺激使细胞增殖及细胞中CSN2和MAP3K9的表达显著增加(p<0.01);MAP3K9过表达或抑制时,细胞增殖及细胞中CSN2,MAPK1,p-MAPK1,m TOR和p-m TOR的表达均显著增加或降低(p<0.01),但抑制MAPK1时,过表达MAP3K9不能使细胞增殖及细胞中m TOR,p-m TOR和CSN2的表达增加。结果表明,作为一个调节因子,MAP3K9能通过激活细胞中的MAPK1来激活m TOR通路,正向调控奶牛乳腺上皮细胞增殖与乳蛋白合成。 展开更多
关键词 map3K9 奶牛乳腺上皮细胞 Β-酪蛋白 细胞增殖 蛋氨酸 MAPK1 MTOR
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猪MAP3K5基因CDS序列克隆及生物信息学分析 被引量:2
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作者 蒲蕾 岳静伟 +10 位作者 张金山 刘欣 王立刚 颜华 侯欣华 高红梅 张恬 张跃博 武群清 张龙超 王立贤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期2509-2517,共9页
试验克隆了猪MAP3K5基因cDNA序列,分析了猪MAP3K5基因与MAP3K家族及其他物种MAP3K5基因的序列同源性,并研究了其保守结合域。通过RACE-PCR扩增获得猪MAP3K5基因5 452bp的序列,并分析其可能的开放阅读框及预测蛋白序列,获得了MAP3K5基因3... 试验克隆了猪MAP3K5基因cDNA序列,分析了猪MAP3K5基因与MAP3K家族及其他物种MAP3K5基因的序列同源性,并研究了其保守结合域。通过RACE-PCR扩增获得猪MAP3K5基因5 452bp的序列,并分析其可能的开放阅读框及预测蛋白序列,获得了MAP3K5基因31个外显子结构。通过比对发现,猪MAP3K5基因与MAP3K家族其他成员的mRNA及蛋白质序列的同源性较低,均在50%以下,其中猪MAP3K5与MAP3 K6基因序列的同源性相对较高;猪MAP3K5基因与其他物种的MAP3K5基因的mRNA及蛋白质序列的同源性较高,均在78%以上,其中猪MAP3K5基因与牛、绵羊、犬和人的MAP3K5基因序列的同源性较高。对与猪MAP3K5序列同源性更高的蛋白质进行保守结构域分析,发现MAP3K6与MAP3K5的保守域和结合位点类似,其他MAP3K家族成员与MAP3K5的结构域差别较大;而其他物种的MAP3K5与猪MAP3K5相比保守结构域和结合位点相似。结果初步表明了猪MAP3K5序列和结构域特点,可为后续MAP3K5基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 map3K5基因 序列比对 结构域
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靶向抑制MAP3K1对小鼠乳腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 王胜洁 刘春 +3 位作者 汪海峰 吴刘成 彭晓清 邵义祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期26-31,290,共7页
为了在细胞学水平研究靶向抑制MAP3K1(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1)基因对小鼠乳腺癌4T1细胞黏附、运动及侵袭能力等生物学行为的影响,试验用体外构建靶向"沉默"MAP3K1基因的amiRNA(artificial microR... 为了在细胞学水平研究靶向抑制MAP3K1(mitogen-activated protein kinase kinase kinase 1)基因对小鼠乳腺癌4T1细胞黏附、运动及侵袭能力等生物学行为的影响,试验用体外构建靶向"沉默"MAP3K1基因的amiRNA(artificial microRNA)干扰载体,以X-treme GENE HP转染4T1细胞(干扰组转染amiRNA干扰载体,对照组转染空载体,空白组未转染质粒)对MAP3K1基因mRNA及蛋白表达水平进行检测,以测定干扰效率;分别以黏附试验检测小鼠乳腺癌4T1细胞的黏附能力,用划痕-愈合试验与Transwell侵袭试验测定小鼠乳腺癌4T1细胞的运动与侵袭能力。结果表明:小鼠乳腺癌4T1细胞转染MAP3K1 amiRNA-3干扰载体与空载体后,干扰4T1细胞MAP3K1 mRNA水平及蛋白水平均被有效抑制,干扰效率高达70%(P<0.01)。试验组4T1细胞黏附能力极显著低于对照组(P<0.01);干扰组4T1细胞的运动与侵袭能力均显著低于对照组(P<0.05)。说明构建的amiRNA干扰载体能够有效抑制靶基因MAP3K1的表达,并能够显著抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的黏附、运动与侵袭能力;靶向抑制MAP3K1基因能够广泛地影响小鼠乳腺癌4T1细胞的生物学行为。 展开更多
关键词 RNA干扰 map3K1 乳腺癌 4T1细胞 黏附能力 运动与侵袭能力
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