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Enzyme-catalyzed synthesis of mannose ester and its enhancement of tanshinone and glycyrrhetinic acid lipid nanoparticles
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作者 Yue Li Jiexuan Wang +1 位作者 Xiuli Wang Xue Guo 《Journal of Traditional Chinese Medical Sciences》 2025年第3期390-401,共12页
Objective:To improve the efficiency of drug delivery,a mannose vinyl stearate mannose ligand(Man ligand)with active liver-targeting properties was synthesized.Methods:Non-aqueous enzymatic synthesis was used to modify... Objective:To improve the efficiency of drug delivery,a mannose vinyl stearate mannose ligand(Man ligand)with active liver-targeting properties was synthesized.Methods:Non-aqueous enzymatic synthesis was used to modify the structure of mannose.Glycyrrhetinic acid-tanshinone lipid nanoparticles(GT-LN)and liver-targeted glycyrrhetinic acid-tanshinone mannose-modified lipid nanoparticles(GT-MLN)were prepared.The physicochemical properties and release profiles of both formulations were evaluated,and their pharmacokinetic behavior and tissue distribution were investigated.Results:The average particle sizes of GT-LN and GT-MLN were 190.20±1.35 and 204.83±3.86 nm,respectively,with corresponding surface Zeta potentials of-28.0±1.68 and-30.24±2.10 mV.The drug release profile of GT-LN conformed to the Higuchi equation,whereas that of GT-MLN followed both the first-order kinetic and RitgerePeppas equations.Both formulations significantly enhanced the gastrointestinal stability of the drug.In vivo studies in mice demonstrated that hepatic GA and TSN concentrations in both groups were significantly higher than those in the original drug suspension group(P=.01).Notably,the concentrations in the GT-MLN group were significantly higher compared to the GTLN group(P=.01).Conclusion:Man ligand was formed via the linkage of vinyl stearate with the hydroxyl group at C-6 in mannose.The Manligand endowed these lipid nanoparticles with obvious active liver-targeting properties.Our results provide an efficient and stable route of drug delivery to the liver with improved drug availability. 展开更多
关键词 Non-aqueous enzyme catalysis mannose receptor Active liver targeting Lipid nanoparticles man ligand
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ERAD信号通路中EDEM1和MAN1A1基因多态性与公猪精液品质性状的关联分析
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作者 李亚赛 冯越 +8 位作者 周佳伟 吴俊静 乔木 万绪玲 吴梦华 彭先文 梅书棋 杜志强 张宇 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第8期178-183,共6页
在前期基因组研究的基础上,本研究从ERAD信号通路中筛选出2个可能影响公猪精液品质性状的候选基因:内质网降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1(ER Degradation Enhancingα-mannosidase-like Protein 1,EDEM1)与α-1,2-甘露糖苷酶(Alpha-Manno... 在前期基因组研究的基础上,本研究从ERAD信号通路中筛选出2个可能影响公猪精液品质性状的候选基因:内质网降解增强α-甘露糖苷酶样蛋白1(ER Degradation Enhancingα-mannosidase-like Protein 1,EDEM1)与α-1,2-甘露糖苷酶(Alpha-Mannosidase,MAN1A1)。通过一代测序发现候选基因EDEM1上存在g.61729627A>T位点,候选基因MAN1A1上存在g.42772917 G>A位点。在大白猪群体中进行关联分析,发现2个多态位点均能显著影响公猪精液品质。其中,EDEM1基因的g.61729627 A>T位点在多个精液性状中表现出显著关联,包括精子密度、有效精子密度、直线运动能力、精子活力、畸形率以及有效精子数;而MAN1A1基因的g.42772917 G>A位点则与精液量、精子密度、有效精子密度、精子活力、畸形率和有效精子数等性状密切相关,且EDEM1基因g.61729627A>T位点和MAN1A1基因g.42772917 G>A位点间存在互作。本文从公猪精液品质角度筛选出一些相关的候选基因和分子标记,为公猪精液品质性状改良提供了分子标记。 展开更多
关键词 SNP 精液品质性状 EDEM1基因 man1A1基因 关联分析
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山羊星状病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与应用
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作者 于皓同 马勇杰 +3 位作者 王凯茸 张琪 张淑霞 许信刚 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期7-11,共5页
为建立快速检测山羊星状病毒(Caprine astrovirus)的方法,根据GenBank上收录的山羊星状病毒ORF1ab基因序列(OR652457)设计特异性探针和引物,构建重组质粒。以重组质粒为标准品进行反应条件优化及临床样品检测初步应用,旨在建立一种检测... 为建立快速检测山羊星状病毒(Caprine astrovirus)的方法,根据GenBank上收录的山羊星状病毒ORF1ab基因序列(OR652457)设计特异性探针和引物,构建重组质粒。以重组质粒为标准品进行反应条件优化及临床样品检测初步应用,旨在建立一种检测山羊星状病毒的Taq Man荧光定量PCR方法。结果显示,该方法建立的标准曲线具有良好的线性关系;对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒、牛轮状病毒、山羊贝氏柯克斯体、山羊支原体等均无交叉反应;对山羊星状病毒重组质粒标准品最低检测限为2.16×10^(1)copies/μL;批内和批间试验结果稳定,变异系数均小于2%;用建立的方法对收集的陕西省部分山羊场的115份腹泻粪便样品进行检测,结果显示山羊星状病毒阳性率为29.57%,与常规RT-PCR的检测结果符合率为94.78%。该方法为山羊星状病毒快速检测提供了技术支持。 展开更多
关键词 山羊星状病毒 Taq man荧光定量PCR 检测方法
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猪A群轮状病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立与运用
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作者 林青 康龙滨 +5 位作者 吴瑞森 赵文娟 陈秋勇 王隆柏 周伦江 俞道进 《福建农业学报》 北大核心 2025年第4期370-376,共7页
【目的】建立一种猪A群轮状病毒(porcine rotavirus group A, PoRV A)快速检测方法,用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒(PoRVA)VP6基因序列(登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1)设计特异性引物和探... 【目的】建立一种猪A群轮状病毒(porcine rotavirus group A, PoRV A)快速检测方法,用于PoRV检测和流行病学调查。【方法】参考GenBank中猪A群轮状病毒(PoRVA)VP6基因序列(登录号MT025937.1、OP978242.1、PP566178.1)设计特异性引物和探针,优化反应体系中引物和探针的浓度,建立Taq Man RT-qPCR检测方法,并通过特异性、灵敏性和重复性的结果以及临床应用对该方法进行评价。【结果】该方法可特异性扩增PoRV核酸,最低检出限度为27.0 copies·μL^(-1),灵敏度高于普通RT-PCR 100倍;与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemicdiarrheavirus,PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(porcinedeltacoronavirus,PDCoV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis of swine, TGEV)核酸均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于1.10%,重复性好。151份疑似PoRV的临床样品使用RT-qPCR进行检测,结果显示检出率为42.38%(64/151),优于常规RT-PCR的检出率(33.11%,50/151)。【结论】本研究基于猪A群轮状病毒VP6基因,建立了适用于PoRV A检测及其流行病学调查的Taq Man实时荧光定量PCR检测方法,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优势,为猪轮状病毒检测和流行病学调查提供了技术手段。 展开更多
关键词 猪A群轮状病毒 Taq man探针 荧光定量RT-PCR
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酰胺直接转化方法在(–)-Sedacryptine和(–)-Geissman-Waiss内酯合成中的应用
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作者 徐业鹏 阮义 +1 位作者 郑剑峰 黄培强 《有机化学》 北大核心 2025年第3期988-995,共8页
酰胺是一类价廉易得的合成原料, 也是全合成重要的合成中间体. 由于酰胺在温和条件下的化学选择性直接转化有较高的步骤经济性, 因此具有重要的合成意义. 黄培强课题组于2010年报道了酰胺直接还原(脱氧官能化)反应, 随后又发展了一系列... 酰胺是一类价廉易得的合成原料, 也是全合成重要的合成中间体. 由于酰胺在温和条件下的化学选择性直接转化有较高的步骤经济性, 因此具有重要的合成意义. 黄培强课题组于2010年报道了酰胺直接还原(脱氧官能化)反应, 随后又发展了一系列高化学选择性的酰胺还原与转化方法, 所发展的方法被国内外同行广泛地应用于多类生物碱和含氮药物的合成中. 此研究以该课题组发展的基于酰胺的脑文格(Knoevenagel-type)缩合反应及酰胺的化学选择性还原方法为关键步骤, 以简洁的合成路线(7步和4步)分别完成了生物碱(–)-Sedacryptine (1)的形式全合成和(–)-Geissman- Waiss内酯衍生物(3aS,6aS)-4-(4-甲氧基苄基)六氢-2H-呋喃[3,2-b]吡咯-2-酮(9)及其同系物(3aS,7aS)-4-(4-甲氧基苄基)六氢呋喃[3,2-b]吡啶-2(3H)-酮(10)的合成. 展开更多
关键词 酰胺 脑文格反应 铱-硼共催化还原 (–)-Sedacryptine (–)-Geissman-Waiss内酯
原文传递
基于TaqMan探针多重实时荧光PCR快速检测大豆检疫性病原菌
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作者 李辉 付海滨 +4 位作者 李雪梅 薛腾 张学梅 薛春生 李鑫 《植物保护》 北大核心 2025年第6期245-254,共10页
为实现进口大豆中检疫性病原菌的精准、快速检测,减少外来有害生物入侵风险,本研究以大豆南方茎溃疡病菌Diaporthe phaseolorum var.meridionalis、大豆北方茎溃疡病菌Diaporthe phaseolorum var.caulivora和大豆茎褐腐病菌Cadophora gr... 为实现进口大豆中检疫性病原菌的精准、快速检测,减少外来有害生物入侵风险,本研究以大豆南方茎溃疡病菌Diaporthe phaseolorum var.meridionalis、大豆北方茎溃疡病菌Diaporthe phaseolorum var.caulivora和大豆茎褐腐病菌Cadophora gregata 3种常见检疫性病原菌为研究对象,以翻译延长因子1α基因(TEF1α)和β-微管蛋白基因(TUB2)为靶标设计特异性引物与TaqMan探针,构建可快速检测3种病菌的TaqMan探针多重qPCR检测体系。研究结果表明,3种病原菌DNA样品等浓度混合时,TaqMan探针多重qPCR体系内各组引物探针对目标菌株均能特异性扩增,未出现交叉反应,最低检测浓度为10.0 pg/μL,在检测范围内R2均大于0.99,且重复性较好,3种病原菌的TaqMan探针多重与单重qPCR检测体系定量线性范围几乎一致。本研究构建的检测方法能够高效、精准地完成进口大豆中3种常见检疫性病原菌的检疫鉴定与疫情监测工作,可为口岸外来有害生物防控工作开展、我国生态安全保障提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 TAQman探针 多重实时荧光PCR 检测 大豆 检疫性病原菌
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1种牛轮状病毒Taq-Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
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作者 王秀明 陈君彦 +1 位作者 础鲁 刘艳霞 《现代畜牧兽医》 2025年第3期11-15,共5页
试验旨在建立一种可简便、快速地检测牛轮状病毒(BRV)的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法,试验通过分析比对NCBI下载的BRV VP7基因序列,在VP7基因的保守区设计两对特异性引物及Taq-Man探针,经反应条件优化,建立BRV的Taq-Man荧光定量RT-PCR方... 试验旨在建立一种可简便、快速地检测牛轮状病毒(BRV)的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法,试验通过分析比对NCBI下载的BRV VP7基因序列,在VP7基因的保守区设计两对特异性引物及Taq-Man探针,经反应条件优化,建立BRV的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法。利用建立的检测方法检测标准品,绘制标准曲线,检测方法的特异性、灵敏性和稳定性,并对临床样品及疫苗半成品进行检验。结果显示,建立的Taq-Man荧光定量RT-PCR方法的最低检测限为10 copies/μL,组内和组间重复变异系数(CV)均小于3.50%。检测临床样品和疫苗半成品,疫苗半成品均检测阳性,临床样品检测阳性率69%。研究表明,BRV Taq-Man荧光定量RTPCR检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,对BRV的诊断检测及疫苗生产具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 牛轮状病毒(BRV) Taq-man探针 荧光定量RT-PCR VP7基因
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A study of the landforms and megafaunal characteristics of the Caiwei Guyot area by manned submersible image datadriven technology
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作者 Zhongjun Ding Xingyu Wang +2 位作者 Chen Liu Guangyang Ma Chanjuan Cao 《Acta Oceanologica Sinica》 2025年第1期147-164,共18页
Scientific and precise evaluations of the megafaunal and landform characteristics of seamounts are important guides for their protection and study.A series of manned and unmanned submersibles have provided invaluable ... Scientific and precise evaluations of the megafaunal and landform characteristics of seamounts are important guides for their protection and study.A series of manned and unmanned submersibles have provided invaluable observational imaging data for the ecological study of seamounts.However,traditional methods of artificial observation of seamount imaging data cannot accurately and efficiently determine the characteristics of megafauna and landforms.This research harnesses data-driven technology to systematically investigate the distributional traits and morphological features of megafaunal organisms,as well as the topographical characteristics,in the Caiwei Guyot region of the western Pacific’s Magellan Seamounts.To construct the landform and megafauna dataset of the Caiwei Guyot region,we used a data preprocessing technology based on image enhancement to provide high-quality imaging data for data-driven technologies.A megafaunal identification and counting algorithm based on YOLOv5(You Only Look Once Version 5)was developed to efficiently assess the abundance,variety,and dominant species of megafauna.Simultaneously,a landform three-dimensional(3D)reconstruction algorithm based on PatchmatchNet was developed to reconstruct the 3D form of the terrain accurately.This study pioneers the application of data-driven technology to deep-sea imaging within the Caiwei Guyot region,offering an innovative approach to accurately and efficiently characterize the region’s unique megafauna and landforms. 展开更多
关键词 manned submersible imaging DATA-DRIVEN Caiwei Guyot LANDFORMS MEGAFAUNA
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MAN主机CPP控制板用PLC替代的实施方案
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作者 李志刚 李振江 +1 位作者 吕红宾 寇忠祥 《天津航海》 2025年第2期20-22,共3页
文章探讨了使用可编程逻辑控制器(PLC)替代MAN主机CPP控制板(ASP12)的可行性和实施方案,结合实际项目,详细地说明了PLC选型、编程设计、系统集成等内容,并研发了ASP12-PLC控制板,旨在为中油海工船舶设备实现升级换代,以提升系统可靠性... 文章探讨了使用可编程逻辑控制器(PLC)替代MAN主机CPP控制板(ASP12)的可行性和实施方案,结合实际项目,详细地说明了PLC选型、编程设计、系统集成等内容,并研发了ASP12-PLC控制板,旨在为中油海工船舶设备实现升级换代,以提升系统可靠性、灵活性、可维护性及经济性。 展开更多
关键词 man主机 CPP控制板 ASP12 PLC替代
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A Spider-Man themed park
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作者 陈萍萍 《疯狂英语(新读写)》 2025年第9期9-11,75,共4页
Shanghai Disney Resort broke ground on a new Spider⁃Man⁃themed land,a major expansion that represents a rising global investment interest in Chinas theme park sector.Located close to Zootopia,the new land includes the... Shanghai Disney Resort broke ground on a new Spider⁃Man⁃themed land,a major expansion that represents a rising global investment interest in Chinas theme park sector.Located close to Zootopia,the new land includes the parks first major Marvel⁃themed attraction-a high⁃energy thrill roller coaster featuring Spider⁃Man,one of the most popular Marvel superheroes,according to the company. 展开更多
关键词 global investment theme park shanghai disney resort marvel roller coaster spider man theme park sector
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The Literary Effects of Metaphors and Symbolism:A Case Study on Invisible Man by Ralph Ellison
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作者 XIONG Zi-yan WANG Peng-fei 《Journal of Literature and Art Studies》 2025年第5期391-397,共7页
Invisible Man is a novel written by Ralph Ellison,talking about how the protagonist struggled in society as an African-American,sought his own identity and sense of belonging,and finally accepted the reality of being... Invisible Man is a novel written by Ralph Ellison,talking about how the protagonist struggled in society as an African-American,sought his own identity and sense of belonging,and finally accepted the reality of being“invisible”to live underground.The metaphors and symbols as key writing techniques in Invisible Man were analyzed in the paper with certain typical examples to reveal their research values for explorations of race issues in the book.The paper particularly highlights the tension embedded in the metaphors and the sarcasm conveyed through the symbols. 展开更多
关键词 Invisible man metaphorical tension symbolic sarcasm
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Unveiling Modern Saudi Society and Culture in Aziz Mohammed’s The Critical Case of a Man Called K
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作者 Shahad Alfaqih 《Cultural and Religious Studies》 2025年第2期58-64,共7页
Since modern Saudi novel vividly captures the essence of cultural and social life in Saudi Arabia,this paper aims to unveil the manifestation of historical events that generated new issues and discourses shaping moder... Since modern Saudi novel vividly captures the essence of cultural and social life in Saudi Arabia,this paper aims to unveil the manifestation of historical events that generated new issues and discourses shaping modern Saudi culture and society as depicted in Aziz Mohammed’s The Critical Case of a Man Called K(2021).The examination of its cultural and social context,thus,serves as an evaluation of a historical record that depicts the episteme of modern Saudi society.However,as ample as previous works on Saudi literature may be,most of them disregard the use of New Historicism in examining modern Saudi novels.This paper,therefore,utilizes New Historicism to unveil the nature of modern Saudi episteme as depicted by the young author Aziz Mohammed in The Critical Case of a Man Called K(2021)and to gain insight into modern Saudi discourses and issues shaped by historical and economic events.The study finds that the novel depicts a dystopian reality due to the implications of both late capitalism and globalization in modern Saudi Arabia.Furthermore,the novel highlights how far the discourse of Saudi Vision 2030,with its various aims,penetrates both society and culture,shaping a great part of modern Saudi episteme.The paper concludes by affirming Mohammed’s novel assertion of New Historicism’s main assumption that the text cannot be divorced from its historical,cultural,and social context and that it serves as a record indicative of a specific and unique episteme. 展开更多
关键词 Aziz Mohammed GLOBALIZATION late capitalism modern Saudi literature New Historicism Saudi Vision 2030 The Critical Case of a man Called K
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MAN B&W ME-B电喷主机ME-V阀故障
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作者 沈万东 《中国船检》 2025年第4期87-90,共4页
某5万吨级油轮配备的MAN B&W 6S50ME-B 9.3T2主机在航行期间,因ME-V阀反馈失败导致多次自动降速。经排查,发现NO.1缸ME-V阀驱动活塞与本体磨损卡阻,加之低温环境加剧液压油粘度变化,最终触发故障。更换ME-V阀总成后,故障得以解决。... 某5万吨级油轮配备的MAN B&W 6S50ME-B 9.3T2主机在航行期间,因ME-V阀反馈失败导致多次自动降速。经排查,发现NO.1缸ME-V阀驱动活塞与本体磨损卡阻,加之低温环境加剧液压油粘度变化,最终触发故障。更换ME-V阀总成后,故障得以解决。案例以故障现象为切入点,详细呈现排查逻辑与解决路径,并提出的预防性策略,有效降低电喷主机因局部故障导致系统性风险的概率。 展开更多
关键词 man BW ME-B电喷主机
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基于JPEG图像解码的高速Huffman解码电路 被引量:1
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作者 穆荣 焦继业 《现代电子技术》 2007年第20期123-124,128,共3页
研究JPEG图像的Huffman解码器在集成电路上的实现问题,以范式Huffman编码为研究对象,在研究范式Huffman编码特点及快速算法的基础上设计出高速Huffman解码电路。此解码电路已经在Altera的FPGA上通过测试,系统能稳定运行在140 MHz,输出... 研究JPEG图像的Huffman解码器在集成电路上的实现问题,以范式Huffman编码为研究对象,在研究范式Huffman编码特点及快速算法的基础上设计出高速Huffman解码电路。此解码电路已经在Altera的FPGA上通过测试,系统能稳定运行在140 MHz,输出数据平均达到约1.2 Gb/s的带宽。 展开更多
关键词 高速Huffman解码器 范式Huffman编码 JPEG FPGA
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《Man and nature》
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作者 杨滟珺 《印染》 北大核心 2019年第23期I0044-I0044,共1页
关键词 man and nature man and nature》
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鸡贫血病毒Taq Man探针荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:17
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作者 宋修庆 高宏雷 +4 位作者 王晓艳 林欢 宇文延青 王永强 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期56-59,共4页
根据鸡贫血病毒(CAV)的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感... 根据鸡贫血病毒(CAV)的基因序列,选取一段高度保守的基因序列作为目的片段设计引物与探针,将该目的片段克隆到pMD18-T载体中,作为阳性标准品。通过优化荧光定量PCR反应条件,建立了CAV的荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到10个病毒拷贝/μL,与其他禽病病毒无交叉反应,批间与批内重复试验相关系数都小于5%。实验数据证明该检测方法敏感性高,特异性好,重复性佳。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 TAQ man探针 荧光定量PCR
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猪细小病毒4型Taq Man荧光定量PCR方法的建立与应用 被引量:12
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作者 黄律 龙进学 +3 位作者 翟少伦 刘长龙 张荣 袁世山 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第1期1-9,共9页
根据GenBank中发表的猪细小病毒4型(PPV4)全基因组序列,针对其结构蛋白VP2基因的保守序列,设计合成特异性引物及Taq Man探针,以VP2克隆质粒为标准品,通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整,建立了PPV4的T... 根据GenBank中发表的猪细小病毒4型(PPV4)全基因组序列,针对其结构蛋白VP2基因的保守序列,设计合成特异性引物及Taq Man探针,以VP2克隆质粒为标准品,通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整,建立了PPV4的Taq Man荧光定量PCR。反应条件优化后,该方法在6.73×109copies/μL^6.73×101copies/μL范围内线性关系良好,相关系数为0.998;对PPV4的最低检测限为6.73×101copies/μL。特异性试验结果显示,用该方法检测其他基因型猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒及猪圆环病毒2型等临床常见病毒,结果均为阴性。批内及批间变异系数均低于2%。用建立的荧光定量PCR方法和普通PCR方法对672份临床病料感染情况进行检测,阳性率为1.93%,而普通PCR检出率仅为1.63%。本研究首次报告在我国猪群中存在PPV4,同时建立的荧光定量方法为PPV4的检测、体外敏感细胞的筛选以及病毒器官嗜性的研究等提供了快速而敏感的分子检测技术。 展开更多
关键词 猪细小病毒4型 TAQ man荧光PCR 检测
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Taq Man实时荧光定量PCR检测猪伪狂犬病病毒方法的建立与初步应用 被引量:7
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作者 赵丽 崔保安 +2 位作者 陈红英 魏战勇 赵玉丛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期137-140,164,共5页
根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成引物和探针,优化反应条件,建立实时定量荧光PCR方法。实验结果表明,当50pmol/L的引物0.3μL和5pmol/L的探针0.5μL时,反应体系获得的CT值较小,而荧光强度增加值最大;制作的标准曲线显示各浓... 根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成引物和探针,优化反应条件,建立实时定量荧光PCR方法。实验结果表明,当50pmol/L的引物0.3μL和5pmol/L的探针0.5μL时,反应体系获得的CT值较小,而荧光强度增加值最大;制作的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系;可检测到相当于20拷贝/μL的病毒DNA;与猪细小病毒、圆环病毒和猪瘟病毒等不发生交叉反应;敏感性比常规PCR电泳检测高约100倍。该方法具有快速、特异、敏感、可定量,并可同时检测大量样品等优点。 展开更多
关键词 实时荧光定量 TAQ man PCR 检测 猪伪狂犬病病毒
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犬细小病毒Taq Man荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用 被引量:7
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作者 刘海防 胡传伟 +5 位作者 谢之景 姜世金 张兴晓 倪长鹏 贾赟 杨笃宝 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期593-596,共4页
根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建... 根据GenBank中CPV VP2蛋白基因序列,选择CPV VP2基因保守序列,分别设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了CPV Taq Man荧光定量PCR检测方法。对CPV Taq Man荧光定量PCR的反应体系和反应条件进行优化,并对其特异性和敏感性进行了测定,建立标准曲线。结果,CPV Taq Man荧光定量PCR对CPV检测阳性,并能对10拷贝/μL的CPV模板检测阳性,标准曲线的相关系数为0.9992,但对非CPV模板检测阴性。结果表明,所建立的CPV Taq Man荧光定量PCR具有很好的特异性和敏感性,标准曲线具有很强的实用性。同时对CPV Taq Man荧光定量PCR与CPV PCR进行了比较试验,结果前者比后者的敏感性高100倍。采用CPVHA、CPV PCR与CPV Taq Man荧光定量PCR对55份临床样品进行检测,CPV HA对30份样品检测阳性,CPVPCR对40份样品检测阳性,CPV Taq Man荧光定量PCR对47份样品检测阳性。这表明,CPV Taq Man荧光定量PCR对样品的检出率最高,具有特异、敏感、快速的特点,适用临床样品的检测。 展开更多
关键词 犬细小病毒 实时定量PCR TAQ man荧光探针
原文传递
RevMan、Stata和R软件在生存资料Meta分析的应用 被引量:11
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作者 陈新林 胡月 +4 位作者 郎建英 陈丽霞 徐谦 莫传伟 武哲丽 《中国循证医学杂志》 CSCD 2016年第6期736-740,共5页
生存资料的Meta分析越来越多。从原始文献计算出风险比(HR)及其95%可信区间,实际频数和理论频数的差值(O-E)及其标准差后,可以使用Review Manager(RevMan)、Stata和R等软件计算合并HR。RevMan软件简单易学,但存在一定的局限;Stata和R软... 生存资料的Meta分析越来越多。从原始文献计算出风险比(HR)及其95%可信区间,实际频数和理论频数的差值(O-E)及其标准差后,可以使用Review Manager(RevMan)、Stata和R等软件计算合并HR。RevMan软件简单易学,但存在一定的局限;Stata和R软件功能强大,灵活多样,能够绘制多种图形,但需要进行适当的编程。 展开更多
关键词 生存数据 META分析 REV man STATA R软件
原文传递
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