MAFbx和MuRF-1因子在癌性恶病质肌肉萎缩中的作用 被引量：3

1

作者 徐坤鹏 姜达 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第7期1449-1451,共3页

癌性恶病质最显著的特征是不能用厌食解释的肌肉萎缩,骨骼肌蛋白分解,使病人生存质量下降并导致病人抗癌治疗的耐受性下降,最终导致病人生存时间缩短。大量研究发现,癌性恶病质骨骼肌萎缩与ATP-泛素-蛋白酶体途径的激活密切相关,泛素蛋... 癌性恶病质最显著的特征是不能用厌食解释的肌肉萎缩,骨骼肌蛋白分解,使病人生存质量下降并导致病人抗癌治疗的耐受性下降,最终导致病人生存时间缩短。大量研究发现,癌性恶病质骨骼肌萎缩与ATP-泛素-蛋白酶体途径的激活密切相关,泛素蛋白连接酶E3是该途径的关键酶,尤其是在骨骼肌中特异表达的E3-MAFbx/Atrogin-1和MuRF-1两种因子在肌肉萎缩中起重要作用。作者主要综述MAFbx/Atrogin-1和MuRF-1因子及恶病质骨骼肌蛋白降解的相关研究及进展。 展开更多

关键词 癌性恶病质 骨骼肌萎缩 mafbx/atrogin-1 MuRF1

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胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1通路改善废用性肌肉萎缩研究

2

作者 张笑笑 王萍 +3 位作者 李奕冰 冯海龙 何伟涵 张英剑 《胃肠病学和肝病学杂志》 2026年第2期219-223,共5页

目的 探讨胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1信号通路在小鼠废用性肌萎缩中的作用,为胃饥饿素改善小鼠盆底骨骼肌功能障碍导致的运动型便秘的治疗提供新的视角与思路。方法 构建体外废用性肌萎缩细胞模型,进行药物干预,利用Western blott... 目的 探讨胃饥饿素通过调控PI3K-AKT-mTORC1信号通路在小鼠废用性肌萎缩中的作用,为胃饥饿素改善小鼠盆底骨骼肌功能障碍导致的运动型便秘的治疗提供新的视角与思路。方法 构建体外废用性肌萎缩细胞模型,进行药物干预,利用Western blotting法检测PI3K-AKT-mTORC1信号通路相关蛋白AKT、p-AKT的表达及肌萎缩相关蛋白FoxO3a、p-FoxO3a的表达;另外,建立废用性肌萎缩小鼠动物模型,药物干预28 d后处死,分离后肢肌肉测量湿重,HE染色观察后肢肌肉病理变化,Western blotting法检测肌萎缩相关蛋白MAFbx和MuRF1表达情况。结果 (1)体外废用性肌萎缩细胞实验结果提示:胃饥饿素干预后AKT蛋白表达有上升趋势,p-AKT蛋白表达上调(P<0.01),FoxO3a蛋白表达有下降趋势,p-FoxO3a蛋白表达下调(P<0.01);(2)废用性肌萎缩小鼠动物实验结果提示:胃饥饿素分泌增加可以使模型组小鼠体质量改善,使后肢肌肉湿重增加,HE染色显示小鼠后肢肌肉萎缩的改善,肌萎缩相关蛋白MAFbx和MuRF1蛋白表达上调。结论 胃饥饿素触发PI3K-AKT-mTORC1信号通路,下调肌萎缩相关蛋p-FoxO3a,进而改善小鼠废用性肌萎缩,为盆底骨骼肌运动功能障碍型便秘的治疗提供新的理论基础。 展开更多

关键词 废用性肌萎缩 胃饥饿素 atrogin-1 MuRF1 PI3K-AKT-mTORC1信号通路

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保元解毒汤对癌性恶病质小鼠骨骼肌蛋白质降解及MAFbx、MuRF-1基因表达的影响 被引量：13

3

作者 于华芸 王文苹 +4 位作者 吴智春 刘国伟 蒋海强 欧阳兵 季旭明 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期226-229,共4页

目的研究保元解毒汤对肺癌恶病质小鼠骨骼肌蛋白质降解及MAFbx、MuRF-1基因表达的影响,探讨其干预骨骼肌蛋白质代谢的可能机制。方法 C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞株复制肺癌恶病质小鼠模型。40只小鼠随机分为正常对照组、模型组... 目的研究保元解毒汤对肺癌恶病质小鼠骨骼肌蛋白质降解及MAFbx、MuRF-1基因表达的影响,探讨其干预骨骼肌蛋白质代谢的可能机制。方法 C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞株复制肺癌恶病质小鼠模型。40只小鼠随机分为正常对照组、模型组、保元解毒汤组和醋酸甲羟孕酮组。测定小鼠腓肠肌质量;高效液相色谱法检测腓肠肌3-甲基组氨酸(3-MH)含量;RT-PCR法测定腓肠肌MAFbx、MuRF-1mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型组小鼠腓肠肌质量显著降低(P<0.05),肌组织内3-MH含量明显升高(P<0.05),MAFbx、MuRF-1 mRNA表达显著升高(P<0.05);与模型组和醋酸甲羟孕酮组比较,保元解毒汤组小鼠腓肠肌质量显著增加(P<0.05),肌组织内3-MH含量明显降低(P<0.05),MAFbx、MuRF-1 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论保元解毒汤能够改善癌性恶病质小鼠骨骼肌萎缩,其机制可能与MAFbx、MuRF-1基因表达下调,骨骼肌收缩蛋白降解减少相关。 展开更多

关键词 癌性恶病质 保元解毒汤 骨骼肌萎缩 3-MH mafbx MuRF-1

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川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩大鼠FoXO3a、MAFbx以及MuRF1表达的影响 被引量：8

4

作者 王红兵 梁炳生 +1 位作者 彭春辉 王鹏飞 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期597-600,共4页

目的研究川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩中FoXO3a、MAFbx及MuRF1表达的影响。方法 8周龄雌性SD大鼠54只,体重(200±10)g。随机分为3组,即正常对照组(A组,n=6)、失神经对照组(B组,n=24)、干预组(C组,n=24)。B、C组实验动物制备右下肢失神... 目的研究川芎嗪对失神经骨骼肌萎缩中FoXO3a、MAFbx及MuRF1表达的影响。方法 8周龄雌性SD大鼠54只,体重(200±10)g。随机分为3组,即正常对照组(A组,n=6)、失神经对照组(B组,n=24)、干预组(C组,n=24)。B、C组实验动物制备右下肢失神经腓肠肌动物模型,C组于模型制备后每日腹腔注射川芎嗪注射液80 mg/(kg.d),B组每日腹腔注射等剂量生理盐水;A组实验动物不作任何处理。取A组实验动物以及造模后2、7、14、28 d B、C组实验动物各6只,处死取其双侧腓肠肌称湿重,计算腓肠肌肌湿重比;另取右侧肌组织采用RT-PCR及Western blot检测各时间点FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平。结果与A组比较,随着大鼠失神经时间延长,B、C组腓肠肌肌湿重比逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05);造模后7、14、28 d,C组腓肠肌肌湿重比高于B组,且差异有统计学意义(P<0.05)。B、C组造模后7、14、28 d,FoXO3a、MAFbx、MuRF1 mRNA和蛋白表达水平均较A组高,C组各时间点均较B组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论川芎嗪可能通过降低FoXO3a、MAFbx以及MuRF1 mRNA和蛋白表达水平进而延缓失神经骨骼肌萎缩。 展开更多

关键词 FOXO3A mafbx MuRF1 川芎嗪 失神经 肌萎缩 大鼠

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AKT/FOXOs/Atrogin-1/MuRF1信号通路在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌萎缩中的作用 被引量：7

5

作者 韩锋锋 徐卫国 +4 位作者 崔志磊 刘乾 杨天芸 张悦 罗勇 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2013年第3期217-222,共6页

目的探讨AKT/FOXOs/Atrogin-1/MuRF1信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot技术检测COPD大鼠伸趾长肌内E3连接酶的两... 目的探讨AKT/FOXOs/Atrogin-1/MuRF1信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制COPD大鼠动物模型。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot技术检测COPD大鼠伸趾长肌内E3连接酶的两个肌肉萎缩特异性指标Atrogin-1和MuRF1,以及其上游FOXOs转录因子的基因与蛋白表达的变化;对伸趾长肌中磷酸化AKT(p-AKT)的蛋白表达及其与总AKT(t-AKT)的蛋白表达比率进行测定。结果 RT-PCR分析结果显示,COPD大鼠伸趾长肌组织中的Atrogin-1的mRNA表达明显上调(P<0.01);MuRF1和FOXO-1的mRNA表达与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot分析结果显示,伸趾长肌组织中Atrogin-1的蛋白相对表达量COPD组较对照组明显增加(P<0.01);MuRF1的蛋白表达COPD组较对照组增加(P<0.05);FOXO-1的蛋白表达两组比较无明显差异(P>0.05)。COPD组大鼠伸趾长肌中p-AKT的蛋白表达较对照组增加(P<0.05),p-AKT/t-AKT COPD组明显高于对照组(P<0.01)。结论 AKT/FOXOs/Atrogin-1/MuRF1信号通路参与COPD骨骼肌萎缩机制并发挥重要作用。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 AKT/FOXOs/atrogin-1/MuRF1信号通路 大鼠 骨骼肌 萎缩

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CKD时高糖皮质激素通过激活Atrogin-1、MuRF-1引起骨骼肌萎缩 被引量：12

6

作者 王会玲 桂志红 +1 位作者 许烨 张金元 《中国中西医结合肾病杂志》 2010年第11期953-957,共5页

目的:瘦体质量丢失和肌肉消耗状态是慢性肾脏病(CKD)严重并发症,并与患者不良预后有关。本研究观察CKD模型小鼠骨骼肌合成和分解代谢,分析肌肉特异性E3连接酶肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)在肌萎缩中的作用,探讨CKD肌肉消耗的病理机制。... 目的:瘦体质量丢失和肌肉消耗状态是慢性肾脏病(CKD)严重并发症,并与患者不良预后有关。本研究观察CKD模型小鼠骨骼肌合成和分解代谢,分析肌肉特异性E3连接酶肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)在肌萎缩中的作用,探讨CKD肌肉消耗的病理机制。方法:采用5/6肾切除制作小鼠CKD模型,以假手术组为对照组。同位素14+C-苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成,酪氨酸释放率分析检测肌肉分解代谢,组织病理学检测胫骨前肌横截面积并计算肌纤维面积分布图,Northern blot检测Atrogin-1和肌环指蛋白-1(MurF-1)mRNA水平,Western blot检测其蛋白表达及Akt/FOXO1信号通路,Elisa方法检测血清糖皮质激素水平。结果:造模1月后,CKD小鼠体重和骨骼肌重量明显下降,形态学表现为胫骨前肌横截面积减少,肌纤维面积分布图明显左移;蛋白质代谢方面显示肌肉蛋白分解增加明显,蛋白质合成代谢亦轻度下降,肌肉组织的Atrogin-1和MuRF-1mRNA表达明显上调,血清糖皮质激素水平较对照组升高13倍,CKD的代谢状态可导致骨骼肌组织Akt/FOXO1信号途径异常。结论:CKD时骨骼肌分解代谢旺盛,肌萎缩关键基因表达升高,致Akt/FOXO1信号途径异常,结果引起的肌肉萎缩,而糖皮质激素水平升高可能是原因之一。 展开更多

关键词 慢性肾脏病 骨骼肌 蛋白合成/分解 糖皮质激素 atrogin-1 FORKHEAD TRANSCRIPTION factor class

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温肾活血方对心衰大鼠运动耐量及Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达的影响 被引量：7

7

作者 彭杰 彭爽 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期70-73,共4页

目的研究温肾活血方对心衰大鼠运动耐量的影响及其对心肌细胞Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达的影响。方法 wistar成年大鼠60只随机分为模型组、假手术组、米力农组及温肾活血方高、中、低剂量组。采用腹主动脉缩窄术构建心衰模型,以EF... 目的研究温肾活血方对心衰大鼠运动耐量的影响及其对心肌细胞Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达的影响。方法 wistar成年大鼠60只随机分为模型组、假手术组、米力农组及温肾活血方高、中、低剂量组。采用腹主动脉缩窄术构建心衰模型,以EF≤45%作为造模成功标准,温肾活血方高、中、低计量组分别给予高、中、低浓度的中药汤剂灌胃,模型组与假手术组给予同样体积生理盐水灌胃,米力农组给予腹腔注射米力农,喂养四周后进行心脏彩超检查,力竭游泳实验。取心肌及腓肠肌细胞,通过TUNEL检测计算细胞凋亡率,RT-PCR检测Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA的表达。结果温肾活血方高、中剂量组心脏彩超指标(LVDS、LVDD、LVSV、LVEF、LVFS、LVCO、LVPWS、LVPWD)较模型组明显改善(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05)。温肾活血方高、中剂量组力竭游泳时间较模型组明显延长(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05)。温肾活血方高、中剂量组细胞凋亡率较模型组明显降低(P<0.01),与米力农组无明显差异(P>0.05),Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA的表达较模型组、米力农组明显减少(P<0.01)。结论温肾活血方能改善心衰大鼠心功能及运动耐量,其机制可能是通过降低Airogln-1MAFbx和Murf-1 mRNA表达,减少心肌及骨骼肌细胞凋亡来实现的。 展开更多

关键词 温肾活血方 心力衰竭 Airogln-1mafbx Murf-1 泛素-蛋白酶体通路

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Atrogin-1和MuRF-1在肌肉萎缩中的作用机制及影响因素 被引量：10

8

作者 王慧 罗勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期1921-1922,共2页

骨骼肌萎缩发生于多种慢性疾病，其严重程度与患者的康复、生活能力和生活质量相关。泛素蛋白酶体途径中有多个调节点，受多种因素调控，其中两种泛素蛋白连接酶E3s——Atmgin-1和MuRF-1对肌肉萎缩具有重要意义，并可能成为治疗的新靶... 骨骼肌萎缩发生于多种慢性疾病，其严重程度与患者的康复、生活能力和生活质量相关。泛素蛋白酶体途径中有多个调节点，受多种因素调控，其中两种泛素蛋白连接酶E3s——Atmgin-1和MuRF-1对肌肉萎缩具有重要意义，并可能成为治疗的新靶点。本综述总结了近年来国内外关于肌肉萎缩研究的部分相关机制。 展开更多

关键词 atrogin-1 肌肉萎缩 影响因素 泛素蛋白连接酶 泛素蛋白酶体 骨骼肌萎缩 慢性疾病 生活质量

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人参总皂苷对体外培养肌管形态及Atrogin-1表达的影响 被引量：1

9

作者 许烨 丁婷婷 +1 位作者 王会玲 张金元 《中国中西医结合肾病杂志》 2012年第8期666-668,I0001,共4页

目的:慢性肾衰竭(CKD)尤其进入终末期透析的患者常并发以骨骼肌蛋白质-能量消耗为特征的营养不良,研究表明Atrogin-1激活是肌肉蛋白分解的关键步骤。本实验通过培养肌细胞,观察人参总皂苷的干预下,对糖皮质激素作用下肌细胞形态改变及At... 目的:慢性肾衰竭(CKD)尤其进入终末期透析的患者常并发以骨骼肌蛋白质-能量消耗为特征的营养不良,研究表明Atrogin-1激活是肌肉蛋白分解的关键步骤。本实验通过培养肌细胞,观察人参总皂苷的干预下,对糖皮质激素作用下肌细胞形态改变及Atrogin-1的表达的影响。方法:培养小鼠肌原细胞C2C12并使之融合成肌管,以不同浓度的地塞米松(0～10μm)和人参总皂苷(100μmol/L)刺激肌管后,镜下观察肌管形态改变,Westernblot检测Atrogin-1蛋白表达水平。结果:糖皮质激素地塞米松作用下,可剂量依赖性地使肌管变细,肌管Atrogin-1蛋白表达水平显著增高;在人参总皂苷干预后,肌管形态较地塞米松组增粗,同时肌管Atrogin-1蛋白降低(P<0.05)。结论:人参总皂苷能够改善地塞米松作用下肌肉消耗,并下调肌管Atrogin-1蛋白表达水平。 展开更多

关键词 骨骼肌 萎缩 人参皂苷 atrogin-1

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Atrogin-1基因在贲门腺癌组织中的表达及其异常甲基化

10

作者 马洪亮 韩立杰 +4 位作者 郭炜 张明慧 郭艳丽 邝钢 董稚明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期67-72,共6页

目的：探讨atrogin-1基因在贲门腺癌（gastric cardia adenocarcinoma，GCA）中的异常甲基化及表达，并分析其临床意义。方法： 选用河北医科大学第四医院2004—2008年间的贲门腺癌患者手术标本共139例，分别应用亚硫酸氢盐转换-甲基化... 目的：探讨atrogin-1基因在贲门腺癌（gastric cardia adenocarcinoma，GCA）中的异常甲基化及表达，并分析其临床意义。方法： 选用河北医科大学第四医院2004—2008年间的贲门腺癌患者手术标本共139例，分别应用亚硫酸氢盐转换-甲基化特异性PCR（bisulfite conversion-methylation specific polymerase chain reaction，BS-MSP）、RT-PCR和免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及相应癌旁（距癌灶边缘3～5 cm）组织中atrogin-1基因的甲基化、mRNA和蛋白表达情况，应用免疫组织化学法检测相应组织中Smad4蛋白的表达。结果： 贲门腺癌组织中atrogin-1基因启动子区的甲基化率[44.6%（62/139）] 显著高于癌旁组织[3.6%（5/139）]（χ^2=63.891，P=0.001），且atrogin-1基因的甲基化与TNM分期及肿瘤的组织学分化程度密切相关（χ^2=6.144, P〈0.05）。贲门腺癌组织中atrogin-1基因的mRNA和蛋白表达水平显著低于癌旁组织[（0.482 5±0.175 4） vs （0.896 9±0.290 1），t=10.62, P=0.01；34.5% vs 82.0%, χ^2=4.441，P=0.001]，且与其启动子区的甲基化状态之间有明显的相关性（r=-0.256，P=0.001）。贲门腺癌组织中Smad4蛋白表达的阳性率显著低于癌旁组织（46.0% vs 95.7%； χ^2=2.945，P=0.001），且与atrogin-1蛋白表达之间呈明显的正相关（r=0.604，P=0.001）。结论： Atrogin-1基因启动子区高甲基化导致的基因沉默可能是贲门癌组织中此基因表达降低的机制之一。 展开更多

关键词 贲门腺癌 atrogin-1 甲基化 表达

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肺癌组织中Atrogin-1 mRNA的表达及患者生存分析

11

作者 崔玲玲 张晓峰 +6 位作者 谢东 王旗 李文杰 赵松 赵高峰 秦建军 陈萍萍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期130-133,共4页

目的:检测人肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,了解对肺癌患者术后生存情况及其影响因素。方法:运用实时定量PCR技术测定60例肺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,采用Kaplan-Meier单因素与Cox多元回归进... 目的:检测人肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,了解对肺癌患者术后生存情况及其影响因素。方法:运用实时定量PCR技术测定60例肺癌患者的癌组织及配对的癌旁组织中Atrogin-1基因mRNA表达水平,采用Kaplan-Meier单因素与Cox多元回归进行生存分析。结果:肺癌组织中Atrogin-1 mRNA表达水平(-8.15±3.94)显著高于其配对的癌旁组织(-10.39±4.35)(t=3.873,P=0.000),其中71.67%(43/60)患者Atrogin-1 mR-NA高表达,28.33%(17/60)患者低表达。Kaplan-Meier法生存分析结果显示:Atrogin-1的表达水平、淋巴结转移、家族史、病理分级与患者的生存率显著相关。Cox回归分析结果显示:Atrogin-1 mRNA表达水平、淋巴结转移、病理分级和吸烟是影响肺癌患者生存率的独立危险因素。结论:肺癌组织中Atrogin-1的高表达可能影响肺癌患者术后的生存,其可作为肺癌患者预后的一个评价指标,并可能成为基因治疗的一个作用靶点。 展开更多

关键词 atrogin-1 肺肿瘤 实时定量PCR 生存分析

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肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其临床意义

12

作者 张晓峰 陈幕华 +3 位作者 陈萍萍 崔玲玲 王旗 谢东 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第10期18-20,共3页

目的研究肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其与临床病理参数的关系。方法用PCR技术和免疫组化技术检测60例肺癌患者癌组织和癌旁正常肺组织的Atrogin-1基因mRNA及其蛋白表达。结果肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及Atrogin-1蛋白表... 目的研究肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其与临床病理参数的关系。方法用PCR技术和免疫组化技术检测60例肺癌患者癌组织和癌旁正常肺组织的Atrogin-1基因mRNA及其蛋白表达。结果肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及Atrogin-1蛋白表达明显高于癌旁正常肺组织(P均<0.01)。临床病理参数分析显示,Atrogin-1基因mRNA表达与结核病史、淋巴结转移、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05);Atrogin-1蛋白表达与淋巴结转移、家族史、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05)。结论Atrogin-1基因在肺癌发生发展中起重要作用,其对监测患者病情进展、转移潜能及估计预后有临床价值。 展开更多

关键词 基因 atrogin-1 肺肿瘤 聚合酶链反应技术

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Atrogin-1基因过表达对肌肉细胞营养状况的影响

13

作者 袁磊 吴国豪 张波 《外科理论与实践》 2008年第2期145-148,共4页

目的:构建含Atrogin-1基因的慢病毒载体,并研究Atrogin-1过表达对骨骼肌细胞营养状况的影响。方法:PCR合成两端含酶切位点的Atrogin-1cDNA全长,酶切后多次重组使之克隆到慢病毒核心载体FG12中;经限制性酶切和测序鉴定重组载体后,用它感... 目的:构建含Atrogin-1基因的慢病毒载体,并研究Atrogin-1过表达对骨骼肌细胞营养状况的影响。方法:PCR合成两端含酶切位点的Atrogin-1cDNA全长,酶切后多次重组使之克隆到慢病毒核心载体FG12中;经限制性酶切和测序鉴定重组载体后,用它感染小鼠成肌细胞,构建稳定株,将细胞进行分化,以Western印迹法检测Atrogin-1蛋白表达,并观察细胞形态学的变化。结果:Atrogin-1慢病毒载体中含有大小、序列正确的片段,感染该病毒的小鼠成肌细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白的高表达,且显示细胞明显萎缩。结论:成功构建了含Atrogin-1基因的慢病毒载体。该载体可使小鼠成肌细胞过表达Atrogin-1蛋白,引起肌肉细胞萎缩。 展开更多

关键词 基因 atrogin-1 慢病毒载体 肌营养不良 小鼠

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小鼠Atrogin-1基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

14

作者 袁磊 吴国豪 张波 《中国临床医学》 2009年第5期662-664,共3页

目的:构建小鼠Atrogin-1基因真核表达载体,研究其功能,并探讨其在癌性恶液质骨骼肌萎缩中的作用机制。方法:提取小鼠C2C12细胞RNA,反转成cDNA,PCR合成含有酶切位点的Atrogin-1 cDNA全长,酶切后连接到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组真核... 目的:构建小鼠Atrogin-1基因真核表达载体,研究其功能,并探讨其在癌性恶液质骨骼肌萎缩中的作用机制。方法:提取小鼠C2C12细胞RNA,反转成cDNA,PCR合成含有酶切位点的Atrogin-1 cDNA全长,酶切后连接到真核表达载体pcDNA3.1,构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Atrogin-1,经鉴定及测序证实cDNA片段大小和序列正确,然后用其转染293T细胞,Western blot法检测Atrogin-1蛋白的表达。结果:pcDNA3.1-Atrogin-1含大小、序列正确的Atrogin-1cDNA片段,转染pcDNA3.1-Atrogin-1的293T细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白高表达。结论:成功构建了Atrogin-1基因真核表达载体pcDNA3.1-Atrogin-1,并在真核细胞中表达了目的蛋白,其是研究癌性恶液质的重要工具。 展开更多

关键词 atrogin-1 真核表达载体 癌性恶液质

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AMPK活性升高对MuRF1、MAFbx mRNA表达量变化的影响研究

15

作者 马延超 朱荣 +1 位作者 许寿生 王瑞元 《生理通讯》 2009年第6期133-139,共7页

目的：通过注射AMPK激动剂AICAR，提高AMPK的活性，观察AMPK活性变化对MuRF1、MAFbx mRNA表达量变化的影响，探讨AMPK活性变化对骨骼肌蛋白质降解的作用。方法：24只SD大鼠根据用药后的时间分：AICAR注射后1h组、2h组、7h纽，生理盐水... 目的：通过注射AMPK激动剂AICAR，提高AMPK的活性，观察AMPK活性变化对MuRF1、MAFbx mRNA表达量变化的影响，探讨AMPK活性变化对骨骼肌蛋白质降解的作用。方法：24只SD大鼠根据用药后的时间分：AICAR注射后1h组、2h组、7h纽，生理盐水对照组，共4纽。采用同位素技术测定腓肠肌中AMPK活性变化，采用荧光定量PCR技术，测定腓肠肌中MuRF1、MAFbx基因表达量的变化。结果：AICAR注射后1h、2h、7h，AMPK活性与对照组相比显著性升高（P〈0．05或P〈0．01），AICAR注射后7h，AMPK活性开始下降；AICAR注射后1h、2h，MAFbxmRNA、MuRF1mRNA表达量与对照组相比非常显著性升高（P〈0．01），分别升高2．45、2．23倍和2．67、2．30倍；AICAR注射后7h，MuRF1mRNA表达量显著性升高（P〈0．05），升高2．01倍，而MAFbx mRNA表达只有升高趋势，但没有显著性差异。结论：本研究认为大鼠一次性注射AICAR后，能显著提高AMPK的活性，AMPK活性的升高又能促进MAFbx和MuRF1mRNA的表达，促进骨骼肌蛋白质的降解。 展开更多

关键词 AMPK mafbx MuRF1mRNA 蛋白质降解 大鼠

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黄鳝atrogin-1蛋白表达及细胞定位研究

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作者 王雨 王兆广 +3 位作者 刘泽军 夏中曦 范玉顶 钟其旺 《河南农业科学》 北大核心 2020年第5期154-160,共7页

为提高黄鳝养殖效率以及肌肉的质量,进一步发掘黄鳝肌肉发育相关基因,以atrogin-1为研究对象,构建了3种原核表达载体:pCold-TF-atrogin-1、pET28a(+)-atrogin-1及pGEX6P-1-atrogin-1。将构建的重组表达载体转入Transetta(DE3)感受态细胞... 为提高黄鳝养殖效率以及肌肉的质量,进一步发掘黄鳝肌肉发育相关基因,以atrogin-1为研究对象,构建了3种原核表达载体:pCold-TF-atrogin-1、pET28a(+)-atrogin-1及pGEX6P-1-atrogin-1。将构建的重组表达载体转入Transetta(DE3)感受态细胞,重组菌株经诱导表达后,仅pCold-TF-atrogin-1/Transetta(DE3)菌株表达出可溶性较高的重组蛋白。IPTG诱导试验结果表明,诱导剂浓度对蛋白质表达可溶性及含量几乎没有影响,诱导时间在20 h最佳。可溶性部分经Ni-NTA柱亲和层析纯化以及SDS-PAGE(10%聚丙烯酰胺)电泳,证实获得了重组蛋白。构建真核表达载体pEGFP-N1-atrogin-1,转染293T细胞,结果表明,atrogin-1融合蛋白在细胞质及细胞核中均有表达,且在细胞核中表达量相对较高。 展开更多

关键词 黄鳝 atrogin-1 原核表达 纯化 细胞转染 细胞定位

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WIF-1在COPD合并骨骼肌萎缩大鼠中的表达及其与血清炎症因子、Atrogin-1/MuRF-1蛋白水平的关系 被引量：1

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作者 王晓薇 许艳岚 《临床和实验医学杂志》 2024年第1期1-5,共5页

目的探讨WIF-1在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并骨骼肌萎缩大鼠中的表达及其与血清炎症因子、Atrogin-1/MuRF-1蛋白水平的关系。方法将30只SD大鼠按照随机数字表法分为COPD组(仅建立COPD成功的大鼠,n=11)、COPD合并骨骼肌萎缩组(COPD合并... 目的探讨WIF-1在慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并骨骼肌萎缩大鼠中的表达及其与血清炎症因子、Atrogin-1/MuRF-1蛋白水平的关系。方法将30只SD大鼠按照随机数字表法分为COPD组(仅建立COPD成功的大鼠,n=11)、COPD合并骨骼肌萎缩组(COPD合并营养不良骨骼肌萎缩大鼠,n=9)和对照组(未建立动物模型的健康大鼠,n=10),分别给予相应的处理。采用酶联免疫吸附试验法检测3组大鼠的血清白细胞介素(IL)-6、IL-8及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;苏木精-伊红染色观察肺组织及骨骼肌腓肠肌组织形态;免疫组织化学检测骨骼肌组织中WIF-1细胞阳性表达率;采用蛋白质印迹法检测骨骼肌组织中Atrogin-1、MuRF-1蛋白表达;Pearson法分析WIF-1与Atrogin-1、MuRF-1相关性。结果与对照组相比,COPD组大鼠IL-6、IL-8及TNF-α水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠IL-6、IL-8及TNF-α水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠WIF-1细胞阳性表达率较高,但差异无统计学意义(P>0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠WIF-1细胞阳性表达率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,COPD组大鼠Atrogin-1、MuRF-1蛋白水平增加,但差异无统计学意义(P>0.05);与COPD组相比,COPD合并骨骼肌萎缩组大鼠Atrogin-1、MuRF-1蛋白水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。WIF-1与Atrogin-1呈正相关(r=0.760,P<0.001),WIF-1与MuRF-1无相关性(r=0.149,P=0.433)。结论WIF-1基因在COPD合并骨骼肌萎缩大鼠中阳性表达显著升高,具有促炎症因子反应的作用,同时可影响肌肉萎缩相关蛋白而促进疾病进展。 展开更多

关键词 大鼠 慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌萎缩 WIF-1 atrogin-1 MuRF-1 炎症因子

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八宝丹抑制TNF-α诱导C2C12成肌细胞Atrogin-1表达的研究 被引量：2

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作者 赵棋琴 陈进晓 +4 位作者 沃达 何嘉 彭军 朱伟东 任丹妮 《福建中医药》 2022年第7期21-25,共5页

目的研究八宝丹(BBD)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的C2C12成肌细胞中核因子κB(NF-κB)通路及下游通路UPS系统中萎缩相关基因1(Atrogin-1)的作用。方法①筛选BBD干预浓度实验:取对数生长期C2C12成肌细胞分别予0、0.125、0.25、0.5、0... 目的研究八宝丹(BBD)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的C2C12成肌细胞中核因子κB(NF-κB)通路及下游通路UPS系统中萎缩相关基因1(Atrogin-1)的作用。方法①筛选BBD干预浓度实验:取对数生长期C2C12成肌细胞分别予0、0.125、0.25、0.5、0.75、1 mg/mL不同浓度BBD干预48 h,采用MTT法检测细胞活力;②筛选TNF-α刺激细胞的浓度和时间实验:取对数生长期C2C12成肌细胞,分别予0、1、10、50 ng/mL TNF-α蛋白液刺激C2C12成肌细胞,Westernblot法检测p-P65、Atrogin-1蛋白表达以筛选出TNF-α刺激细胞的最佳浓度;再根据TNF-α刺激细胞的最佳浓度干预C2C12成肌细胞0 min、8 min、15 min、30 min、1 h、4 h,West⁃ernblot法检测p-P65、Atrogin-1蛋白筛选出TNF-α刺激细胞的最佳时间;③BBD干预实验:将C2C12成肌细胞随机分为空白对照组、药物对照组、模型组、八宝丹组,药物对照组和八宝丹组分别加入BBD预处理2 h,再根据筛选的TNF-α刺激细胞最佳浓度和时间,于模型组和八宝丹组中加入TNF-α刺激细胞,Westernblot法检测p-P65、Atrogin-1的蛋白表达水平。结果①筛选BBD干预浓度实验结果表明,不同浓度BBD对C2C12成肌细胞活力无影响(P>0.05),根据本课题组前期研究结果,最终选取0.75 mg/mL作为BBD干预细胞浓度;②筛选TNF-α刺激细胞的浓度和时间实验结果表明,10 ng/mL TNF-α刺激C2C12成肌细胞8 min后p-P65蛋白表达明显升高(P<0.05),10 ng/mLTNF-α刺激C2C12成肌细胞4 h后Atrogin-1蛋白表达水平明显升高(P<0.01);③BBD干预实验结果表明,与空白对照组比较,模型组p-P65、Atrogin-1蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,八宝丹组p-P65、Atrogin-1蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论BBD可抑制TNF-α诱导的NF-κB信号通路中NF-κB的磷酸化水平及下游通路Atrogin-1蛋白表达。 展开更多

关键词 八宝丹 C2C12成肌细胞 TNF-Α p-P65 atrogin-1

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人参皂苷对大鼠失神经腓肠肌MAFbx表达的影响 被引量：2

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作者 南海 武文臣 董旭光 《长治医学院学报》 2014年第3期169-172,共4页

目的:观察人参皂苷对失神经大鼠腓肠肌MAFbx表达的影响,并探讨其延缓失神经腓肠肌萎缩的作用机制。方法:选用雌性Wistar大鼠72只,随机分为3组:假失神经组(A)24只,失神经组(B)24只,人参皂苷治疗组(C)24只。于造模2、7、14、28d后,用Real ... 目的:观察人参皂苷对失神经大鼠腓肠肌MAFbx表达的影响,并探讨其延缓失神经腓肠肌萎缩的作用机制。方法:选用雌性Wistar大鼠72只,随机分为3组:假失神经组(A)24只,失神经组(B)24只,人参皂苷治疗组(C)24只。于造模2、7、14、28d后,用Real time RT-PCR和Western blot方法检测各组大鼠右侧腓肠肌MAFbx mRNA和蛋白的表达。结果:失神经组MAFbx表达在各时间点均明显高于假失神经组(P<0.01),且在失神经2d达到峰值,而缓慢下降,失神经28d基本降至正常水平;人参皂苷组与失神经组各时间点相比,MAFbx表达均明显降低(P<0.01)。结论:人参皂苷能通过减少MAFbx的表达而延缓失神经肌萎缩的发生。 展开更多

关键词 失神经 肌萎缩 人参皂苷 mafbxatrogin-1

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LPS通过AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1基因转录 被引量：2

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作者 刘妍 梁辉煌 +3 位作者 刘玉兰 唐中林 汪文俊 张晶 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期374-380,共7页

以C2C12肌管细胞为试验材料,探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对肌管蛋白降解相关基因及信号通路的影响。选取不同质量浓度(10、100、1 000ng·mL-1)的LPS分别刺激C2C12肌管细胞30min和3h,通过RTqPCR检测炎症因子TNF-α和IL-6的基因转... 以C2C12肌管细胞为试验材料,探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症反应对肌管蛋白降解相关基因及信号通路的影响。选取不同质量浓度(10、100、1 000ng·mL-1)的LPS分别刺激C2C12肌管细胞30min和3h,通过RTqPCR检测炎症因子TNF-α和IL-6的基因转录,确定LPS最佳刺激浓度以建立细胞炎症模型。用最佳浓度LPS分别刺激C2C12肌管细胞0min、30min、1h、3h、6h、12h、24h,RT-qPCR检测MAFbx基因和MuRF基因在不同时间点的转录量变化。此外,1 000ng·mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12h后,Western blot检测AKT/FOXO1、mTOR和P38信号通路相关蛋白质的表达情况。结果表明:LPS刺激C2C12肌管细胞的最佳浓度为1 000ng·mL-1,在作用30min和3h时均能显著上调TNF-α、IL-6的基因转录,而在刺激12和24h时MuRF1、IL-1β、IL-6和TLR4的基因转录显著上调。此外,1 000ng·mL-1 LPS刺激C2C12肌管细胞12h时,仅AKT和FOXO1蛋白磷酸化水平明显降低。基于以上结果,推测LPS通过调控AKT/FOXO1信号通路诱导C2C12肌管细胞MuRF1转录。 展开更多

关键词 脂多糖 C2C12肌管细胞 肌肉蛋白降解 MuRF1基因 mafbx基因

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