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M2e-HA2串联表位的自组装纳米颗粒流感疫苗的构建及血清学检测
1
作者 范琪琪 李恒 +4 位作者 赵鑫 周健 郭磊 秦丽 刘龙丁 《昆明医科大学学报》 CAS 2021年第9期20-24,共5页
目的构建M2e-HA2串联表位的自组装纳米颗粒通用流感疫苗,并进行免疫血清学检测。方法将流感病毒M2e和HA2抗原表位与Ferritin蛋白串联表达,非变性条件下提取并经亲和层析纯化获得纳米自组装颗粒,经Western blot和电镜验证后免疫小鼠。2... 目的构建M2e-HA2串联表位的自组装纳米颗粒通用流感疫苗,并进行免疫血清学检测。方法将流感病毒M2e和HA2抗原表位与Ferritin蛋白串联表达,非变性条件下提取并经亲和层析纯化获得纳米自组装颗粒,经Western blot和电镜验证后免疫小鼠。2次免疫后采集小鼠血清,使用Western blot进行抗原性检测,使用ELISA进行抗体水平检测。结果成功制备M2e-HA2串联表位的自组装纳米颗粒,将其免疫小鼠后血清中产生高水平的M2e和HA2特异性抗体。结论M2e-HA2串联表位的自组装纳米颗粒可以刺激小鼠产生高水平的M2e和HA2特异性抗体,为通用流感疫苗研发奠定基础。 展开更多
关键词 m2e-ha2串联表位 自组装纳米颗粒 流感疫苗 血清学
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植物乳杆菌表达重组新冠病毒M抗原表位及免疫原性分析
2
作者 邓安琦 叶丹妮 +9 位作者 艾雪言 唐秀兰 陈文聪 陈嘉豪 郝嘉翼 邓玲聪 李昌 陈永福 金俊杰 王茂鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1719-1727,共9页
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是引起新冠肺炎的病原体,其变异快、传播强,导致疫情广泛流行,以疫苗接种为主要防控措施。尽管已有大量新冠肽表位疫苗和黏膜型疫苗的研究,但靶向黏膜的肽表位疫苗和其功能评价的研究鲜有报道。本研究以IEDB数... 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是引起新冠肺炎的病原体,其变异快、传播强,导致疫情广泛流行,以疫苗接种为主要防控措施。尽管已有大量新冠肽表位疫苗和黏膜型疫苗的研究,但靶向黏膜的肽表位疫苗和其功能评价的研究鲜有报道。本研究以IEDB数据库预测SARS-CoV-2结构蛋白M肽表位作为抗原靶点,设计含3050及1229信号肽和DCpep优化的MS-3S基因,插入MS2噬菌体衣壳蛋白中,通过PCR和无缝克隆技术构建表达质粒pSIP:MS-3S,转化到植物乳杆菌LP18中获得重组菌LP18:MS-3S。通过对诱导时间、诱导剂质量浓度、转速和初始pH值等表达条件进行优化及鼻内免疫实验,验证重组菌免疫效果。结果显示,获得出916 bp修饰和优化的目的基因MS-3S,并成功构建重组菌LP18:MS-3S,经Western blot、流式细胞术、免疫荧光等检测方法验证,获得重组蛋白表达的最佳条件:诱导时间为4 h,诱导肽质量浓度为100μg/L,培养基初始pH值为7.0,转速为100 r/min。通过ELISA试验验证,在小鼠的血清、肺泡灌洗液和粪便稀释液中,检测出抗肽表位的特异性抗体。本研究成功构建了1株表达新冠M蛋白肽表位抗原的重组菌,并且可诱导机体产生体液和黏膜免疫,为新冠黏膜免疫候选疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 m蛋白 肽表位 植物乳杆菌 鼻内免疫
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新型冠状病毒M蛋白结构和B细胞表位预测 被引量：2
3
作者 叶晓鲜 李明洋 +3 位作者 朱珊丽 崔怀瑞 王昱 张丽芳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期400-405,共6页
目的预测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)M蛋白的结构及可能的B细胞优势表位。方法从NCBI GenBank数据库中检索SARS-CoV-2 M蛋白的氨基酸序列,应用计算机辅助生物信息学软件进行分析,利用ExPASy服务器上的ProtParam、SOPMA、GOR、Swiss Model... 目的预测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)M蛋白的结构及可能的B细胞优势表位。方法从NCBI GenBank数据库中检索SARS-CoV-2 M蛋白的氨基酸序列,应用计算机辅助生物信息学软件进行分析,利用ExPASy服务器上的ProtParam、SOPMA、GOR、Swiss Model分别预测M蛋白的理化性质、二级结构、三级结构;利用TMHMM、Phobius线上软件预测M蛋白的跨膜区域,并结合DNASTAR软件进行亲水性、柔韧性、表面可能性、抗原性及极性等综合分析;利用Vector NTI软件分析冠状病毒属M蛋白的同源性。结果 SARS-COV-2 M蛋白由222个氨基酸组成,为稳定的跨膜蛋白,以α螺旋为主。多种参数进行综合分析推测,其可能的B细胞优势表位为第5-14位氨基酸(NGTITVEELK)。SARS-CoV-2 M蛋白与SARS-CoV M蛋白、Bat SARS-like CoV的M蛋白同源性匹配最高,达90%。结论 5-14肽段为SARS-CoV-2 M蛋白可能的B细胞优势表位。本研究为实验确定SARS-CoV-2 M蛋白的B细胞表位、免疫识别提供了参考,为进一步研发疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 m蛋白 生物信息学 B细胞表位预测 同源性分析
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