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调经助孕方联合带脉灸法通过调控M2型巨噬细胞极化改善宫腔粘连大鼠子宫内膜纤维化
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作者 丑丹 冯丹 +5 位作者 刘雯雯 陈茜 徐如意 亓媛 胡书香 汪新妮 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期2334-2340,共7页
目的:探索调经助孕方联合带脉灸法通过调控M2型巨噬细胞极化对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用。方法:取SD大鼠,采用机械刮宫+脂多糖感染的双重损伤法建立IUA模型,随机分为模型组、调经助孕方组、带脉灸法组、调经助孕方+带... 目的:探索调经助孕方联合带脉灸法通过调控M2型巨噬细胞极化对宫腔粘连(IUA)大鼠子宫内膜纤维化的改善作用。方法:取SD大鼠,采用机械刮宫+脂多糖感染的双重损伤法建立IUA模型,随机分为模型组、调经助孕方组、带脉灸法组、调经助孕方+带脉灸法组、补佳乐组,每组10只,另取10只大鼠作为假手术(对照)组,分组治疗后检测各组大鼠合笼后胚胎着床数。采用HE染色检测各组大鼠子宫组织病理形态,并比较其子宫内膜厚度、腺体数;Masson染色检测各组大鼠子宫内膜纤维化,并比较其胶原容积分数(CVF);ELISA检测各组大鼠血清促纤维化因子TGF-β1、促炎因子IL-1β与IL-6、纤维化因子Ⅰ型前胶原蛋白羧基末端肽(PⅠNP)与Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)水平;免疫荧光染色检测各组大鼠子宫内膜M2型巨噬细胞标志物CD163及CD68表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠子宫组织发生明显病理损伤,子宫内膜厚度变薄,腺体数、胚胎着床数明显减少(P<0.05),子宫内膜CVF、血清PⅠNP、PⅢNP、TGF-β1、IL-1β与IL-6水平、子宫内膜CD163及CD68阳性细胞数升高(P<0.05);与模型组相比,调经助孕方组、带脉灸法组、调经助孕方+带脉灸法组、补佳乐组大鼠子宫组织病理损伤均减轻,子宫内膜厚度增厚,腺体数、胚胎着床数、子宫内膜CD163及CD68阳性细胞数均升高(P<0.05),子宫内膜CVF、血清PⅠNP、PⅢNP、TGF-β1、IL-1β与IL-6水平均降低(P<0.05);与调经助孕方组、带脉灸法组相比,调经助孕方+带脉灸法组、补佳乐组大鼠子宫组织病理损伤均减轻,子宫内膜厚度增厚,腺体数、胚胎着床数、子宫内膜CD163及CD68阳性细胞数均增加(P<0.05),子宫内膜CVF、血清PⅠNP、PⅢNP、TGF-β1、IL-1β与IL-6水平均降低(P<0.05);调经助孕方+带脉灸法组与补佳乐组相比,大鼠各指标无明显变化(P>0.05)。结论:调经助孕方联合带脉灸法可促进M2型巨噬细胞极化,进而抑制IUA大鼠炎症及其子宫内膜纤维化,改善其宫腔粘连症状。 展开更多
关键词 调经助孕方 带脉灸法 m2型巨噬细胞极化 宫腔粘连 纤维化
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血清IL-6、PKM2在宫颈癌患者中的表达及其与临床预后的相关性
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作者 潘亚晶 董玉倩 +1 位作者 陈素洁 关新垒 《河南医学研究》 2025年第18期3351-3353,共3页
目的探讨血清白细胞介素-6(IL-6)、丙酮酸激酶M2型(PKM2)在宫颈癌患者中的表达及其与临床预后的相关性。方法回顾性收集2019年6月至2021年5月新乡医学院第一附属医院接受同步放化疗的112例宫颈癌患者资料,根据随访3 a生存情况分为预后... 目的探讨血清白细胞介素-6(IL-6)、丙酮酸激酶M2型(PKM2)在宫颈癌患者中的表达及其与临床预后的相关性。方法回顾性收集2019年6月至2021年5月新乡医学院第一附属医院接受同步放化疗的112例宫颈癌患者资料,根据随访3 a生存情况分为预后不良组(31例)和预后良好组(81例)。比较两组治疗前血清IL-6、PKM2表达及其他资料,分析治疗前血清IL-6、PKM2表达与临床预后的相关性。结果预后不良组国际妇产科联盟(FIGO)分期为Ⅲ期占比及鳞状细胞癌抗原(SCCA)、IL-6、PKM2表达高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。经Cox回归模型分析,结果显示,FIGO分期为Ⅲ期及SCCA、IL-6、PKM2高表达为宫颈癌患者临床预后不良的危险因素(HR>1,P<0.05)。经限制性立方样条法分析,宫颈癌患者治疗前血清IL-6、PKM2表达与临床预后不良风险呈线性剂量反应关系(P<0.05)。结论宫颈癌患者治疗前血清IL-6、PKM2表达与临床预后有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 白细胞介素-6 丙酮酸激酶m2 同步放化疗 预后
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Faecal pyruvate kinase isoenzyme type M2 for colorectal cancer screening:A meta-analysis 被引量:19
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作者 Carolin Tonus Markus Sellinger +1 位作者 Konrad Koss Gero Neupert 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第30期4004-4011,共8页
AIM:To present a critical discussion of the efficacy of the faecal pyruvate kinase isoenzyme type M2(faecal M2-PK) test for colorectal cancer(CRC) screening based on the currently available studies.METHODS:A literatur... AIM:To present a critical discussion of the efficacy of the faecal pyruvate kinase isoenzyme type M2(faecal M2-PK) test for colorectal cancer(CRC) screening based on the currently available studies.METHODS:A literature search in PubMed and Embase was conducted using the following search terms:fecal Tumor M2-PK,faecal Tumour M2-PK,fecal M2-PK,faecal M2-PK,fecal pyruvate kinase,faecal pyruvate kinase,pyruvate kinase stool and M2-PK stool.RESULTS:Stool samples from 704 patients with CRC and from 11 412 healthy subjects have been investigated for faecal M2-PK concentrations in seventeen independent studies.The mean faecal M2-PK sensitivity was 80.3%;the specificity was 95.2%.Four studies compared faecal M2-PK head-to-head with guaiacbased faecal occult blood test(gFOBT).Faecal M2PK demonstrated a sensitivity of 81.1%,whereas the gFOBT detected only 36.9% of the CRCs.Eight independent studies investigated the sensitivity of faecal M2-PK for adenoma(n = 554),with the following sensitivities:adenoma < 1 cm in diameter:25%;adenoma > 1 cm:44%;adenoma of unspecified diameter:51%.In a direct comparison with gFOBT of adenoma > 1 cm in diameter,47% tested positive with the faecal M2-PK test,whereas the gFOBT detected only 27%.CONCLUSION:We recommend faecal M2-PK as a routine test for CRC screening.Faecal M2-PK closes a gap in clinical practice because it detects bleeding and nonbleeding tumors and adenoma with high sensitivity and specificity. 展开更多
关键词 Faecal pyruvate kinase isoenzyme type m2 Colorectal cancer screening Colorectal cancer Stool Faecal occult blood Adenoma Polyps
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归芪益元膏通过抑制JAK3/STAT6信号通路减少M2型巨噬细胞极化提高Lewis肺癌小鼠对顺铂的敏感性
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作者 邹晓雨 田萍 +2 位作者 李娟 李金田 梁建庆 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第21期6072-6080,共9页
探讨归芪益元膏能否通过减少M2型巨噬细胞极化提高Lewis肺癌小鼠对顺铂的敏感性及其可能的机制。将10只SPF级SD大鼠分为归芪益元膏组(1.2 g·kg^(-1)·d^(-1))与空白组(等体积生理盐水),连续7 d灌胃给药后制备含药血清,采用细... 探讨归芪益元膏能否通过减少M2型巨噬细胞极化提高Lewis肺癌小鼠对顺铂的敏感性及其可能的机制。将10只SPF级SD大鼠分为归芪益元膏组(1.2 g·kg^(-1)·d^(-1))与空白组(等体积生理盐水),连续7 d灌胃给药后制备含药血清,采用细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法筛选出10%空白血清和10%含药血清为最佳干预浓度,分为M0组、M2组[20 ng·mL^(-1)白细胞介素-4(IL-4)]、M2+空白血清组(20 ng·mL^(-1)IL-4+空白血清)、M2+含药血清组(20 ng·mL^(-1)IL-4+含药血清),培养48 h。流式细胞术检测各组CD206^(+)细胞的比例;q-PCR检测各组Janus激酶3(JAK3)、信号转导及转录激活因子6(STAT6)、精氨酸酶-1(Arg^(-1))mRNA表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-10(IL-10)分泌。换新鲜培养基继续培养48 h,收集离心后的上清液为条件培养基,用不同组的条件培养基和不同浓度的顺铂(0~160μmol·L^(-1))干预Lewis细胞24 h,CCK-8法检测细胞活性。将50只SPF级雄性C57BL/6小鼠构建为Lewis肺癌小鼠模型,分为模型组,顺铂组(0.005 g·kg^(-1)顺铂,每2 d给药1次),顺铂联合归芪益元膏低、中、高剂量组[0.005 g·kg^(-1)顺铂(每2 d给药1次)+1.6、3.3、6.6 g·kg^(-1)归芪益元膏(每日1次)],连续给药14 d后处死小鼠,剥离荷瘤组织,苏木精-伊红(HE)染色观察荷瘤组织病理形态;免疫荧光检测荷瘤组织CD206/CD68比值;蛋白免疫印迹法检测荷瘤组织JAK3、STAT6的磷酸化水平和B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达;ELISA检测荷瘤组织VEGF、IL-10水平。细胞实验结果显示,与M2组相比,M2+含药血清组CD206^(+)细胞比例减少,JAK3、STAT6、Arg-1 mRNA表达下降,VEGF、IL-10分泌水平下降,细胞活性下降。动物实验结果显示,与模型组和顺铂组比较,联合给药组细胞凋亡数目和坏死区域更多,CD206/CD68比值降低,JAK3、STAT6磷酸化水平和Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上升,VEGF、IL-10分泌水平下降。综上,归芪益元膏可能通过抑制JAK3/STAT6通路减少M2型巨噬细胞极化提高Lewis肺癌小鼠对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 归芪益元膏 m2型巨噬细胞 化疗增敏 肺癌 中医药治疗 肿瘤微环境 JAK3/STAT6信号通路
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不同氧浓度条件下M2型巨噬细胞来源的外泌体蛋白组学分析及其对骨修复的影响
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作者 吕梦姣 廖礼彬 +2 位作者 田晓寒 杨毅 白生宾 《广西医学》 2025年第10期1454-1461,共8页
目的探讨不同氧浓度条件下M2型巨噬细胞来源外泌体的蛋白组学变化及其对骨修复的影响。方法将鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7细胞系)培养诱导为M2型巨噬细胞,将M2型巨噬细胞分为常氧组(在37℃、5% O_(2)的环境培养)与低氧组(在37℃、1%O2的... 目的探讨不同氧浓度条件下M2型巨噬细胞来源外泌体的蛋白组学变化及其对骨修复的影响。方法将鼠源性巨噬细胞系(RAW264.7细胞系)培养诱导为M2型巨噬细胞,将M2型巨噬细胞分为常氧组(在37℃、5% O_(2)的环境培养)与低氧组(在37℃、1%O2的环境培养)并给予相应条件培养。通过差速离心法获取M2型巨噬细胞外泌体,分别采用透射电子显微镜和Western blot进行形态鉴定和表面标志物鉴定。制备外泌体蛋白测序样本后,采用液相色谱-质谱联用技术分析外泌体的蛋白质组分,筛选出两组的差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并绘制蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图。结果在透射电子显微镜下可观察到两组M2型巨噬细胞的外泌体均呈现典型的茶杯型,并可见清晰的双层膜性小囊泡结构;Western blot鉴定结果显示,两组均能检测到外泌体的表面标志物Alix蛋白和Tsg101蛋白。常氧组和低氧组之间的差异表达蛋白共有1199个,其中表达上调蛋白696个、表达下调蛋白503个。GO功能富集分析结果显示,差异表达蛋白主要涉及三磷酸核糖核苷的生物合成与代谢过程等生物过程,细胞质核糖体等细胞组分,受体配体活性等分子功能。KEGG通路富集分析结果显示,差异表达蛋白主要富集于磷酸戊糖途径、缺氧诱导因子1信号通路等信号通路。PPI网络分析结果显示,Rack1、Eeflg、Mrto4、Rps9、Rps15a等可能为关键靶点蛋白。结论不同氧浓度条件下M2型巨噬细胞外泌体蛋白表达谱存在明显差异,磷酸戊糖途径、缺氧诱导因子1信号通路等信号通路,以及Rack1、Eeflg、Mrto4、Rps9、Rps15a等蛋白可能在骨修复中发挥重要的调控作用。 展开更多
关键词 氧条件 m2型巨噬细胞 外泌体 蛋白质组学 骨修复
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益髓破血方调节脑出血小鼠肠道菌群调控TLR4/MAPK信号通路诱导M2小胶质细胞极化
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作者 徐三鹏 李萍 史周莹 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第11期188-193,I0009,I0010,共8页
目的探讨益髓破血方通过对脑出血(intra cerebral hemorrhage,ICH)小鼠肠道菌群的调节调控TLR4/MAPK信号通路诱导M2小胶质细胞的极化。方法采用自体血注入法复制小鼠模型,造模完成后,将小鼠分为模型组(MX)、假手术组(JSS)和中药组(ZY),M... 目的探讨益髓破血方通过对脑出血(intra cerebral hemorrhage,ICH)小鼠肠道菌群的调节调控TLR4/MAPK信号通路诱导M2小胶质细胞的极化。方法采用自体血注入法复制小鼠模型,造模完成后,将小鼠分为模型组(MX)、假手术组(JSS)和中药组(ZY),MX和JJS给予等剂量的0.9%氯化钠溶液,ZY给予益髓破血方;分别于1、3、7 d观察ICH脑组织病理的改变;ELISA试剂盒检测各组小鼠1、3、7 d小胶质细胞M2型的抗炎因子Arg-1和BDNF;免疫荧光法观察M2标志物CD206的ICH急性期的变化规律;Western blot检测脑出血小鼠3 d和7 d脑组织中Arg-1、CD206、TLR4、p-p38MAPK、p-ERK1/2、和p-JNK的蛋白表达;16S检测ICH小鼠肠道菌群。结果与MX比较,ZY可改善脑组织构轻度异常,少量神经变性;血清中小胶质细胞;与MX比较,ZY 7 d后CD206+/Iba1+的阳性细胞数量升高(P<0.05);与MX比较,ZY组Arg-1、CD206的蛋白表达量增加(P<0.05),TLR4、p-p38MAPK、p-ERK1/2和p-JNK的蛋白表达降低(P<0.05);与MX比较,ZY组菌群多样性降低,有益菌相对丰度增加;益髓破血方干预后增加有益菌的相对丰度,提升物种菌群多样性。结论益髓破血方影响ICH小鼠的肠道菌群调控TLR4/MAPK信号通路诱导小胶质细胞M2表型极化,减轻脑出血继发性损伤,发挥保护保护脑神经的作用。 展开更多
关键词 脑出血 益髓破血方 TLR4/MAPK通路 小胶质细胞m2 肠道菌群
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乳腺癌M2型丙酮酸激酶琥珀酰化突变体构建及功能研究
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作者 潘婷 王宝迪 +7 位作者 郭旭 朱文斌 王洁 刘立琨 郝经伟 岳丽玲 段文博 高秀丽 《当代医学》 2025年第13期8-14,共7页
目的通过蛋白质琥珀酰化组学检测明确M2型丙酮酸激酶(M2-type pyruvate kinase,PKM2)在乳腺癌中的琥珀酰化水平,并通过结构分析及修饰位点突变体的构建探讨其在三阴性乳腺癌中的功能。方法收集正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)及不同乳腺癌细... 目的通过蛋白质琥珀酰化组学检测明确M2型丙酮酸激酶(M2-type pyruvate kinase,PKM2)在乳腺癌中的琥珀酰化水平,并通过结构分析及修饰位点突变体的构建探讨其在三阴性乳腺癌中的功能。方法收集正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)及不同乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MDA-MB-436、MDA-MB-468、BT-549、T47D、ZR-75-1)各1×10^(7),每组3个重复样本。蛋白质修饰组学检测并对比正常乳腺上皮细胞及不同乳腺癌细胞中PKM2琥珀酰化水平;采用生物信息学分析发生琥珀酰化的修饰位点潜在的结构变化及功能;基因定点突变构建PKM2修饰位点正向及负向突变体;以蛋白质免疫印迹及蛋白质免疫共沉淀验证PKM2琥珀酰化水平;细胞增殖标志物及细胞活力检测明确PKM2琥珀酰化的潜在功能。结果蛋白修饰组学结果表明,PKM2-K89在多种三阴性乳腺癌细胞中的琥珀酰化水平明显高于正常乳腺上皮细胞及非三阴性乳腺癌细胞(P<0.05);生物信息学预测分析发现PKM2-K89修饰后可能影响PKM2与底物三磷酸腺苷或腺苷二磷酸的结合能力;通过基因定点突变成功构建了PKM2-K89琥珀酰化的正向及负向突变体,并成功转染至乳腺癌BT-549细胞;与野生型及正向突变体相比,PKM2-K89的负向突变体可明显抑制增殖标志物Ki-67抗原及增殖细胞核抗原的表达水平,并抑制细胞活力。结论三阴性乳腺癌PKM2-K89呈高琥珀酰化水平,并通过生物信息学分析及修饰位点突变体构建明确PKM2-K89对乳腺癌细胞增殖的促进作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 m2型丙酮酸激酶 琥珀酰化 定点突变 细胞增殖
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丹参酮ⅡA调控PKM2/EGFR通路抑制平滑肌细胞增殖和代谢重编程的研究
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作者 黄飞燕 吴书玲 钟智强 《新中医》 2025年第10期171-179,共9页
目的:探讨丹参酮ⅡA通过PKM2/EGFR信号通路抑制氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖和瓦博格效应的分子机制。方法:以人主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别设置阴性对照组、ox-LDL对照组和丹参酮ⅡA低、高剂量组(10、50μ... 目的:探讨丹参酮ⅡA通过PKM2/EGFR信号通路抑制氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞增殖和瓦博格效应的分子机制。方法:以人主动脉平滑肌细胞为研究对象,分别设置阴性对照组、ox-LDL对照组和丹参酮ⅡA低、高剂量组(10、50μg/mL);MTT法检测丹参酮ⅡA干预对ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期变化;蛋白质印迹法检测丙酮酸激酶同工酶M2(PKM2)、表皮生长因子受体(pEGFR)、活性β-catenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、葡萄糖转运蛋白1(Glut1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白表达变化,荧光定量PCR法检测PKM2mRNA水平变化;分光光度法检测培养基葡萄糖消耗量和乳酸生成量。结果:丹参酮ⅡA以剂量依赖性方式抑制ox-LDL诱导的细胞增殖,G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例降低;丹参酮ⅡA从蛋白和转录水平抑制PKM2表达,下调pEGFR、活性β-catenin、cyclin D1、Glut1和LDHA蛋白表达,同时细胞减少葡萄糖摄取和乳酸产生。结论:丹参酮ⅡA可通过调控PKM2介导的EGFR,抑制ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖和代谢重编程。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 血管平滑肌细胞 氧化低密度脂蛋白 丙酮酸激酶同工酶m2 表皮生长因子受体 代谢重编程
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EB病毒通过抑制TP73诱导M2型肿瘤相关巨噬细胞极化促进鼻咽癌发生发展
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作者 谭远芳 裴本睿 +1 位作者 王卫琴 张波 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2025年第10期630-635,共6页
目的探讨EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)通过抑制TP73诱导M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)极化在鼻咽癌发生发展中的作用。方法建立稳定EBV感染的CNE1细胞(EB+组),未感染EBV的CNE1细胞为阴性对照(EB-组)。使... 目的探讨EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)通过抑制TP73诱导M2型肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAM)极化在鼻咽癌发生发展中的作用。方法建立稳定EBV感染的CNE1细胞(EB+组),未感染EBV的CNE1细胞为阴性对照(EB-组)。使用慢病毒载体在EB+细胞中过表达TP73(EB+TP73组),并设置空载病毒对照组(EB+NC组)。将各组CNE1细胞与THP-1来源的M0型TAM共培养,采用电子显微镜、免疫荧光、Western-blot和qRT-PCR进行鉴定。构建小鼠皮下移植瘤模型,比较各组肿瘤生长情况,并通过组织病理学和流式细胞术进行分析。结果EBV感染成功建模,并显著下调TP73的表达。与EB-组相比,EBV感染显著促进M2型TAM极化。而过表达TP73则逆转此效应,降低M2型TAM比例(P<0.05)。动物实验中,EB+组和EB+NC组肿瘤体积分别为(456.19±51.04)mm^(3)和(407.40±39.50)mm^(3),显著大于EB-组和EB+TP73组的肿瘤体积[(177.89±17.14)mm^(3),(234.91±19.05)mm^(3)](P<0.05)。组织病理学结果显示EB+组及EB+NC组肿瘤恶性程度更高。流式细胞术检测证实,EB+TP73组肿瘤组织中M1型TAM比例上升(8.85%),M2型TAM比例下降(1.06%)。结论EBV通过抑制TP73促进M2型TAM极化,从而推动鼻咽癌进展,而过表达TP73可逆转这一过程。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肿瘤蛋白类 EB病毒 肿瘤蛋白TP7 m2型肿瘤巨噬细胞极化
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miR-199a-5p调控PKM2对瘢痕疙瘩成纤维细胞糖酵解及胶原合成的影响
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作者 刘玉兰 公利鑫 +1 位作者 余道江 陈仕高 《河北医学》 2025年第8期1297-1302,共6页
目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)调控M2型丙酮酸激酶(PKM2)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)糖酵解及胶原合成的影响。方法:双荧光素酶报告基因实验检验miR-199a-5p与PKM2之间的相互作用;将KFB分为Control组、NC-mimics组、miR-199a-5p... 目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)调控M2型丙酮酸激酶(PKM2)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)糖酵解及胶原合成的影响。方法:双荧光素酶报告基因实验检验miR-199a-5p与PKM2之间的相互作用;将KFB分为Control组、NC-mimics组、miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimic+OE-NC组、miR-199a-5p-mimics+OE-PKM2组。qRT-PCR法检测各组KFB中miR-199a-5p、PKM2 mRNA的表达;CCK8检测KFB增殖;试剂盒检测葡萄糖消耗和乳酸产生;流式细胞仪检测KFB的凋亡;Western blot检测KFB中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)、PKM2蛋白的表达。结果:miR-199a-5p可以靶向负调控PKM2(t=14.394,P<0.001)。miR-199a-5p-mimics组凋亡率、miR-199a-5p高于Control组、NC-mimics组,A450值、葡萄糖消耗、乳酸生成、PKM2 mRNA和蛋白、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ低于Control组、NC-mimics组(P<0.05);miR-199a-5p-mimics+OE-PKM2组A450值、葡萄糖消耗、乳酸生成、PKM2 mRNA和蛋白、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ高于miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimics+OE-NC组,凋亡率低于miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimics+OE-NC组(P<0.05)。结论:miR-199a-5p可能调控PKM2抑制KFB的糖酵解及胶原合成。 展开更多
关键词 胶原合成 微小RNA-199a-5p m2型丙酮酸激酶 瘢痕疙瘩成纤维细胞 糖酵解
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丙酮酸激酶M2型应用于肿瘤诊断与治疗的研究进展 被引量:11
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作者 詹成 时雨 王群 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第13期1043-1046,共4页
目的:总结丙酮酸激酶M2型(PKM2)在肿瘤诊断与治疗中的应用的研究进展。方法:应用PubMed检索系统,以"PKM2"为关键词,检索2001-01-2013-02相关文献。纳入标准:1)PKM2功能与调节;2)PKM2在肿瘤诊断中的应用;3)PKM2在肿瘤治疗中的... 目的:总结丙酮酸激酶M2型(PKM2)在肿瘤诊断与治疗中的应用的研究进展。方法:应用PubMed检索系统,以"PKM2"为关键词,检索2001-01-2013-02相关文献。纳入标准:1)PKM2功能与调节;2)PKM2在肿瘤诊断中的应用;3)PKM2在肿瘤治疗中的应用。根据纳入标准,符合分析的文献45篇。结果:PKM2在肿瘤中特异表达,并在肿瘤代谢中起着重要的作用。在多种类型的肿瘤患者血液和粪便中检测到PKM2含量升高,并与肿瘤分化、转移与分期相关,在肿瘤诊断与监测中有着重大的价值。促进或抑制PKM2都抑制肿瘤的生长。目前,已有多种针对PKM2的药物和小分子化合物的研究,并且改变PKM活性对多种化疗药物有着增敏的作用。结论:PKM2作为一种新型肿瘤标志有着良好的应用前景,而对PKM2干预为肿瘤的治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 肿瘤 PKm2 诊断 治疗 综述文献
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黄芪甲苷促M2型巨噬细胞极化的作用研究 被引量:7
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作者 戴良成 袁保红 +2 位作者 罗晓春 黄萍 尹辉 《广东药学院学报》 CAS 2016年第4期494-497,502,共5页
目的探讨黄芪甲苷对M2型巨噬细胞极化的影响。方法黄芪甲苷体外作用小鼠原代巨噬细胞,用流式细胞仪检测其表面分子(CD206、MHCII和CD80/86)表达,Real time-PCR检测M1/M2型巨噬细胞特征基因(i NOS、YM1和Arg1)的表达,ELISA测定炎症相关... 目的探讨黄芪甲苷对M2型巨噬细胞极化的影响。方法黄芪甲苷体外作用小鼠原代巨噬细胞,用流式细胞仪检测其表面分子(CD206、MHCII和CD80/86)表达,Real time-PCR检测M1/M2型巨噬细胞特征基因(i NOS、YM1和Arg1)的表达,ELISA测定炎症相关细胞因子(TNF-α、IL-6、TGF-β)的表达。结果黄芪甲苷单独处理未能诱导M2型巨噬细胞生成,但其与IL-13联合处理可明显上调M2型巨噬细胞标志CD206、YM1和Arg1的表达,下调抗原提呈相关分子MHCII和CD80/86的表达,促进抑炎细胞因子TGF-β的分泌。结论黄芪甲苷通过协同作用方式促进M2型巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 巨噬细胞 M1/m2型极化 TGF-Β
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中性粒细胞胞外诱捕网通过诱导巨噬细胞M2型极化促进非小细胞肺癌增殖和侵袭 被引量:7
13
作者 苏莹 马丽丽 +1 位作者 柳江 韩忠诚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期472-477,共6页
目的:探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)诱导巨噬细胞极化在非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和侵袭中的作用及其相关机制。方法:采集28例NSCLC患者肿瘤组织及其癌旁组织,通过免疫组化检测PAD4和Arg-1表达水平。采用PMA/LPS和PMA/IL-4极化THP-1细... 目的:探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)诱导巨噬细胞极化在非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和侵袭中的作用及其相关机制。方法:采集28例NSCLC患者肿瘤组织及其癌旁组织,通过免疫组化检测PAD4和Arg-1表达水平。采用PMA/LPS和PMA/IL-4极化THP-1细胞为M1和M2型巨噬细胞的过程中加入NETs共孵育,qRT-PCR检测巨噬细胞iNOS、IL-6、TNF-α、Arg-1、IL-10和TGF-β表达水平。将各组M2型巨噬细胞与A549细胞共孵育,CCK8检测A549细胞增殖变化,Transwell检测细胞侵袭能力变化,qRT-PCR和Western blot检测细胞VEGF表达水平变化。结果:与癌旁组织比较,NSCLC患者肿瘤组织PAD4和Arg-1表达水平升高。在向M1型巨噬细胞极化过程中,加入NETs后巨噬细胞iNOS、IL-6、TNF-α表达水平降低,Arg-1、IL-10、TGF-β表达水平升高。在向M2型巨噬细胞极化过程中,加入NETs后巨噬细胞Arg-1、IL-10、TGF-β表达水平升高。与Control组比较,M2组A549细胞增殖、侵袭能力和VEGF表达水平升高。与M2组比较,M2+NETs组A549细胞增殖、侵袭能力和VEGF表达水平升高。结论:NETs通过诱导巨噬细胞向M2型极化,促进NSCLC增殖和侵袭。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 中性粒细胞胞外诱捕网 巨噬细胞 m2型极化
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NRP1调控M2型巨噬细胞极化介导电离辐射肺纤维化的作用研究 被引量:4
14
作者 佘炜 魏江 +2 位作者 董丹丹 赵原 顾露 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期252-256,共5页
目的:研究神经菌毛蛋白1(NRP1)对电离辐射肺损伤导致纤维化进程的影响,并探讨其与M2型巨噬细胞间的关系。方法:电离辐射肺纤维化(RIPF)组小鼠以6 Gy X射线全胸辐射建立电离辐射肺纤维模型;对照组即正常小鼠;EG00229给药组(EG00229为NRP... 目的:研究神经菌毛蛋白1(NRP1)对电离辐射肺损伤导致纤维化进程的影响,并探讨其与M2型巨噬细胞间的关系。方法:电离辐射肺纤维化(RIPF)组小鼠以6 Gy X射线全胸辐射建立电离辐射肺纤维模型;对照组即正常小鼠;EG00229给药组(EG00229为NRP1拮抗剂)小鼠辐射前7 d小鼠EG00229给药处理。HE、天狼星红、马松染色观察三组小鼠肺组织损伤和纤维化胶原沉积;ELISA检测三组小鼠肺泡灌洗液中TNF-α、IL-4、TGF-β1炎症因子水平;IHC和RT-PCR检测三组小鼠肺组织中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和NRP1蛋白表达水平;免疫荧光检测三组小鼠肺组织中CD14和M2型巨噬细胞极化标志物精氨酸酶1(Arg1)、抵抗素样分子α(FIZZ1)、几丁质酶3样蛋白1(Ym1)蛋白表达水平。结果:HE染色显示RIPF组小鼠肺部呈现放射性肺纤维化病理形态表现,EG00229给药组小鼠肺组织纤维化损伤有明显改善;与对照组相比,RIPF组小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA和NRP1及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达水平显著升高,EG00229可显著抑制小鼠肺组织中Col-Ⅰ、α-SMA和NRP1以及TNF-α、IL-4、TGF-β1和CD14表达(P<0.05);与对照组相比,RIPF组小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1和Ym1表达水平显著升高,EG00229可明显抑制小鼠肺组织中Arg1、FIZZ1和Ym1表达。结论:NRP1可能通过调控M2型巨噬细胞极化促进电离辐射肺纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 神经纤维蛋白1 m2型巨噬细胞 电离辐射 肺纤维化
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Cu离子和Al离子注入M2钢表面改性研究 被引量:9
15
作者 王超 刘正民 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期295-299,共5页
报道了M 2型高速工具钢在Cu、Al离子注入后表面硬度及抗磨损性的变化。对注入样品进行了显微硬度及抗磨损性的测量和XRD与RBS分析 ,观察了表面强化与离子注入条件之间的关系。结果显示 ,注入样品与未注入样品相比 ,表面硬度及抗磨损性... 报道了M 2型高速工具钢在Cu、Al离子注入后表面硬度及抗磨损性的变化。对注入样品进行了显微硬度及抗磨损性的测量和XRD与RBS分析 ,观察了表面强化与离子注入条件之间的关系。结果显示 ,注入样品与未注入样品相比 ,表面硬度及抗磨损性均有显著提高。分析结果表明 ,Cu、Al离子注入后样品中产生了不同的相 。 展开更多
关键词 m2 离子注入 抗磨损性 显微硬度 表面改性 铜离子 铝离子
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miR-330-3p靶向丙酮酸激酶M2型对胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程调控机制研究 被引量:7
16
作者 刘磊 赵羲和 田忠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期1099-1105,共7页
目的探讨miR-330-3p靶向丙酮酸激酶M2型(PKM2)基因对胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程的影响及机制。方法采用反转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞SGC-7901、胃粘膜上皮细胞PKM2-NC、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-shRNA、miR-330-3p-mimc... 目的探讨miR-330-3p靶向丙酮酸激酶M2型(PKM2)基因对胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程的影响及机制。方法采用反转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞SGC-7901、胃粘膜上皮细胞PKM2-NC、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-shRNA、miR-330-3p-mimcs+LV-NC、miR-330-3p-mimcs+LV-PKM2转染至胃癌细胞中,采用CCK8法、Transwell实验、Annexin V/PI法分别检测细胞增殖、侵袭、凋亡情况,检测葡萄糖利用率、乳酸生成量、己糖激酶(HK)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性等糖酵解指标,采用Western Blot法检测PKM2、GLUT1、HK2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,采用双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-330-3p与PKM2的靶向关系。结果 (1)胃癌细胞系miR-330-3p表达量高于胃粘膜上皮细胞,PKM2表达量低于胃粘膜上皮细胞(P <0.05)。(2)生物信息学显示,miR-330-3p与PKM2存在结合位点;荧光素酶报告基因检测结果显示,与miR-NC组比较,miR-330-3p PKM2野生型荧光素酶活性降低(P <0.05)。(3)与miR-NC组比较,miR-330-3p-inhibitor组吸光度值、侵袭细胞数增多,凋亡细胞数减少,细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量、HK活性、LDH活性降低,PKM2、GLUT1、HK2表达升高,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达量降低(P <0.05),miR-330-3p-inhibitor+PKM2-shRNA组升高或降低幅度低于miR-330-3p-inhibitor组(P <0.05)。(4)与miR-NC组比较,miR-330-3p-mimcs组miR-330-3p表达量升高(P <0.05),吸光度值、侵袭细胞数减少,凋亡细胞增多,细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量、HK活性、LDH活性升高,PKM2、GLUT1、HK2表达降低,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达量升高(P <0.05);miR-330-3p-mimcs+LV-PKM2组升高或降低趋势低于miR-330-3pmimcs组(P <0.05)。结论 miR-330-3p表达与胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程相关,可能通过靶向PKM2实现。 展开更多
关键词 miR-330-3p 丙酮酸激酶m2 胃癌 糖酵解 增殖 凋亡
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过表达SIRT1通过增强自噬水平调控巨噬细胞M2型极化减轻脓毒症诱导的急性肺损伤 被引量:11
17
作者 臧宾宾 李华 +2 位作者 杨颖 谢航 徐晓婷 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期698-703,708,共7页
目的:探究过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)巨噬细胞表型转化的影响及调控机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,LPS+IFN-γ与IL-4定向诱导其M1与M2型极化,Western blot检测细胞SIRT1和M1型标志物iNO... 目的:探究过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)巨噬细胞表型转化的影响及调控机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,LPS+IFN-γ与IL-4定向诱导其M1与M2型极化,Western blot检测细胞SIRT1和M1型标志物iNOS、CD86与M2型标志物Arg1、Mcr1蛋白表达。转染过表达SIRT1的质粒,RT-PCR检测转染效率,LPS诱导脓毒症ALI体外细胞模型,并分为4组:LPS组、LPS+pcDNA3.1-SIRT1组、LPS+pcDNA3.1-NC组和Control组,Western blot检测各组细胞iNOS、CD86与Arg1、Mcr1和自噬标志物LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1与p62及SIRT1/FOXO1信号通路SIRT1、FOXO1蛋白表达。免疫荧光检测各组细胞LC3B荧光表达。采用盲肠结扎穿孔(CLP)术构建脓毒症ALI小鼠模型,通过慢病毒在小鼠体内过表达SIRT1,并分为4组:假手术(Sham)组、CLP组、CLP+LV-NC组、CLP+LV-SIRT1组,RT-PCR、HE染色、ELISA检测各组小鼠肺组织SIRT1 mRNA表达、病理损伤及支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子TNF-α、IL-6与IL-10分泌,记录并分析造模72 h后各组小鼠存活率。结果:体外成功诱导了RAW264.7细胞M1、M2型极化,且M1型巨噬细胞SIRT1蛋白表达明显降低(P<0.05),而M2型巨噬细胞SIRT1表达显著升高(P<0.05)。转染pcDNA3.1-SIRT1后细胞SIRT1 mRNA表达明显升高(P<0.05)。与LPS组或LPS+pcDNA3.1-NC组相比,LPS+pcDNA3.1-SIRT1组iNOS、CD86、p62蛋白表达显著降低(P<0.05),而Arg1、Mcr1、LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1、SIRT1、FOXO1表达明显升高(P<0.05),LC3B荧光斑点数显著增加(P<0.05)。小鼠体内实验显示,与CLP组或CLP+LV-NC组相比,CLP+LV-SIRIT1组SIRT1 mRNA表达、BALF中抗炎因子IL-10分泌和造模72 h后小鼠存活率均明显升高(P<0.05),而肺组织病理损伤、BALF中促炎因子TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05)。结论:过表达SIRT1可在体内外改善脓毒症ALI,而通过SIRT1/FOXO1通路提高自噬水平促进巨噬细胞M2型极化可能是其发挥保护作用的机制之一。 展开更多
关键词 沉默信息调节因子1 m2型巨噬细胞 自噬 脓毒症急性肺损伤
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M2型巨噬细胞在移植肾上皮-间质转化中的作用 被引量:6
18
作者 杨迷玲 徐宪伟 +2 位作者 张果 曲青山 杨金花 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第4期305-308,313,共5页
目的探讨M2型巨噬细胞在移植肾上皮-间质转化中的作用。方法选取诊断为慢性移植肾肾损伤的肾活检标本30例,同时选取正常肾组织10例作对照;用Masson染色法评估肾活检组织的间质纤维化程度;用免疫组织化学法和图像分析法检测肾活检组织中C... 目的探讨M2型巨噬细胞在移植肾上皮-间质转化中的作用。方法选取诊断为慢性移植肾肾损伤的肾活检标本30例,同时选取正常肾组织10例作对照;用Masson染色法评估肾活检组织的间质纤维化程度;用免疫组织化学法和图像分析法检测肾活检组织中CD163(标记M2型巨噬细胞)和上皮-间质转化标记物TGF-β1、E-cadherin、Vimentin及SMA蛋白的表达情况,分析它们与移植肾组织临床病理指标之间的关系。结果①移植肾组织中的CD163、TGF-β1、Vimentin和SMA的表达显著高于正常肾组织,而E-cadherin的表达则相反(P均<0.05);②随着移植肾间质纤维化程度的加重,肾组织中CD163、TGF-β1、Vimentin和SMA的表达逐渐增多,而E-cadherin的表达逐渐减少,患者血肌酐和尿素氮水平也逐渐升高(P均<0.05);③移植肾组织中CD163的表达与TGF-β1、Vimentin和SMA呈正相关,而与E-cadherin的表达呈负相关(P均<0.01);④移植肾组织中CD163的表达与患者血肌酐水平呈正相关(r=0.937,P<0.01)。结论 M2型巨噬细胞与移植肾上皮-间质转化有关,可以促进移植肾EMT的发生,引起移植肾间质纤维化和患者的肾功能不全。 展开更多
关键词 肾移植 上皮-间质转化 m2型巨噬细胞 CD163 TGF-Β1
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血小板反应蛋白4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞转移 被引量:5
19
作者 李雅睿 张旭 +2 位作者 郭丹 李承君 和水祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1504-1510,共7页
血小板反应蛋白4(thrombospondin 4,THBS4)属于THBS家族成员,是细胞外基质分泌的蛋白质,参与调控细胞增殖、黏附及血管生成等多种生理过程。近来研究表明,机体在炎症刺激下加速产生THBS4并诱导巨噬细胞粘附与积累。我们的前期研究证实,T... 血小板反应蛋白4(thrombospondin 4,THBS4)属于THBS家族成员,是细胞外基质分泌的蛋白质,参与调控细胞增殖、黏附及血管生成等多种生理过程。近来研究表明,机体在炎症刺激下加速产生THBS4并诱导巨噬细胞粘附与积累。我们的前期研究证实,THBS4在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中发挥促癌作用,但THBS4对肝癌免疫微环境的影响尚不明确。本文旨在分析THBS4通过诱导肿瘤相关巨噬细胞M2型极化,促进肝癌细胞转移的作用。通过肝癌条件培养基(HCC conditioned medium,HCM)模拟肿瘤微环境,发现在HCM作用下巨噬细胞中THBS4表达呈时间依赖性升高(P<0.05);下调THBS4促使M1型巨噬细胞标志物IL-1β、CD86的表达升高(P<0.01),而M2型标志物IL-10和CD206表达降低(P<0.01)。进一步通过Transwell共培养实验检测THBS4诱导的M2型巨噬细胞对肝癌转移的影响。将下调THBS4的M2型巨噬细胞(M2-TAMs)与HepG2肝癌细胞进行共培养。结果显示,下调THBS4的M2-TAMs明显抑制了HepG2细胞的侵袭和迁移能力(P均<0.01)。综上所述,肿瘤微环境促进巨噬细胞中THBS4表达,THBS4可能通过诱导巨噬细胞M2型极化促进肝癌细胞侵袭转移。本文为探究THBS4诱导肝癌免疫微环境的建立提供了一些新的实验依据。 展开更多
关键词 血小板反应蛋白4 肿瘤相关巨噬细胞 m2型巨噬细胞 肝癌细胞 侵袭迁移
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平喘颗粒调控M2型巨噬细胞极化改善哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的实验研究 被引量:5
20
作者 张萌 李竹英 田春燕 《中国中医急症》 2023年第7期1145-1149,共5页
目的 观察平喘颗粒对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑及M2型巨噬细胞极化相关因子的影响。方法 选择30只6~8周雌性BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、平喘颗粒组,采用卵清蛋白和氢氧化铝构建哮喘小鼠模型,给予平喘颗粒进行干预。采用HE和PA... 目的 观察平喘颗粒对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑及M2型巨噬细胞极化相关因子的影响。方法 选择30只6~8周雌性BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、平喘颗粒组,采用卵清蛋白和氢氧化铝构建哮喘小鼠模型,给予平喘颗粒进行干预。采用HE和PAS染色检测各组小鼠肺组织病理形态变化;吉姆萨染色计数各组小鼠肺泡灌洗液中总细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、巨噬细胞数;ELISA法检测各组小鼠血清IgE含量及肺泡灌洗液中巨噬细胞M2标记物Arg1、白细胞介素-10(IL-10)的含量;real-time PCR检测各组小鼠肺组织中巨噬细胞M2标记物YM1、MRC1的水平;免疫荧光检测肺组织F4/80与MRC1的表达与共定位。结果 与模型组相比,平喘颗粒组小鼠肺组织炎性细胞浸润情况明显减少,气道黏液及杯状细胞明显减轻。与模型组相比,平喘颗粒组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数量、中性粒细胞数量、巨噬细胞数量明显降低,差异有统计学意义(P <0.05)。平喘颗粒组小鼠血清中IgE水平明显低于模型组,但高于空白组,与模型组及空白组比较差异均有统计学意义(P <0.05)。与模型组相比,平喘颗粒组小鼠BALF中Arg1和IL-10水平明显降低(P <0.05),与空白组比较无明显差异(P> 0.05);平喘颗粒组小鼠肺组织中YM1、MRC1基因表达水平明显降低,比较差异有统计学意义(P <0.05),与空白组比较无明显差异(P> 0.05)。免疫荧光检测各组小鼠肺组织结果显示MRC1与F4/80的表达与共定位荧光强度明显降低。结论 平喘颗粒可以抑制哮喘小鼠气道炎症及气道重塑,其机制可能与本方能够抑制哮喘小鼠M2型巨噬细胞极化的相关因子有关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 平喘颗粒 m2型巨噬细胞极化 气道炎症 气道重塑 小鼠
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