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甜菜M14品系特异表达基因BvM14-MADSbox启动子的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 王玉婷 曹洪祥 +3 位作者 马春泉 王宇光 郭锡伟 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期375-379,共5页
甜菜M14品系是带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系,其染色体组成中除了包含18条栽培甜菜染色体外,还附加有白花甜菜第9号染色体,具有无融合生殖特性,无融合生殖能够固定杂种优势。在前期工作中,通过SSH、RACE等技术获得了甜菜M14... 甜菜M14品系是带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系,其染色体组成中除了包含18条栽培甜菜染色体外,还附加有白花甜菜第9号染色体,具有无融合生殖特性,无融合生殖能够固定杂种优势。在前期工作中,通过SSH、RACE等技术获得了甜菜M14品系特异表达基因BvM14-MADSbox的cDNA全长。通过6种限制性内切酶分别酶切M14品系基因组总DNA,再与相应接头连接,构建了6个DNA步移文库。根据基因BvM14-MADSboxcDNA序列设计引物,通过染色体步移技术克隆出该基因的上游DNA序列。经生物信息学分析,推测获得了BvM14-MADSbox基因上游1 718 bp的启动子序列,该序列含有启动子的基本元件TATA-box、CAAT-box,和ARE、ERE、HSE、ABRE、CGTCA-motif等重要的顺式调控元件及一些光反应相关元件。该结果为今后BvM14-MADSbox基因的时空特异性表达调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 Bvm14-MADSbox基因 启动子 序列分析
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甜菜M14品系BvM14-SAMS2基因的克隆及表达特异性分析 被引量:4
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作者 谷丹 朱哲浩 +3 位作者 马春泉 于冰 陈思学 李海英 《黑龙江大学工程学报》 2014年第2期62-67,共6页
甜菜M14品系富含丰富的优质基因资源,对盐、寒冷、干旱等非生物胁迫具有极强的耐受性,是研究逆境胁迫极为难得的材料。课题组前期以甜菜M14品系为试验材料,在500mmol/L NaCl胁迫下,从蛋白质水平筛选获得了76个差异蛋白质点,在转录水平... 甜菜M14品系富含丰富的优质基因资源,对盐、寒冷、干旱等非生物胁迫具有极强的耐受性,是研究逆境胁迫极为难得的材料。课题组前期以甜菜M14品系为试验材料,在500mmol/L NaCl胁迫下,从蛋白质水平筛选获得了76个差异蛋白质点,在转录水平筛选获得了58个Unigenes序列,二者匹配得到了蛋白质点——BvM14-SAMS2。试验采用RACE技术,克隆获得甜菜M14品系BvM14-SAMS2基因cDNA全长1 538bp,包含最大开放阅读框ORF 1 182bp,编码393个氨基酸。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术对甜菜M14品系BvM14-SAMS2基因的表达特异性进行分析,结果表明,在正常生长条件下,BvM14-SAMS2基因在甜菜M14品系根、茎、叶、花中的表达量大小依次为:根>叶>花>茎。受盐胁迫诱导,BvM14-SAMS2基因在甜菜M14品系叶片中的表达量随着盐浓度的增大而增大,根中的表达量随着盐浓度的增大无明显变化。研究结果表明,BvM14-SAMS2基因在甜菜M14品系叶片中受盐胁迫诱导表达,该基因在胁迫下的表达量增加可能有利于植物抵御盐胁迫损伤。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 Bvm14-SAMS2基因 盐、氧化胁迫
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甜菜无融合生殖单体附加系M14花粉发生与发育的超微结构研究 被引量:2
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作者 陆俊萍 申家恒 +2 位作者 郭德栋 李伟 王艳杰 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1127-1137,共11页
运用透射电子显微镜技术,对甜菜无融合生殖单体附加系M14的小孢子发生、雄配子体发育以及相应的花药壁发育过程进行超微结构的观察研究,以阐明甜菜无融合生殖单体附加系M14花粉发生与发育超微结构特点以及花粉败育的时期和败育的细胞学... 运用透射电子显微镜技术,对甜菜无融合生殖单体附加系M14的小孢子发生、雄配子体发育以及相应的花药壁发育过程进行超微结构的观察研究,以阐明甜菜无融合生殖单体附加系M14花粉发生与发育超微结构特点以及花粉败育的时期和败育的细胞学特征.结果显示:(1)小孢子母细胞减数分裂正常,分裂期间细胞质具有明显的细胞质改组"现象,主要表现在核糖体减少,质体、线粒体的结构发生规律性的变化,有利于孢子体向配子体的转变.M14减数分裂的胞质分裂为同时型,前期Ⅱ和中期Ⅱ形成细胞器带";正常发育的花粉,小孢子分裂形成营养细胞和生殖细胞;生殖细胞脱离花粉壁,生殖细胞游离于营养细胞的细胞质中,最初具细胞壁,而后消失,且生殖细胞壁成分与花粉内壁成分相似.(2)三细胞型的成熟花粉含有一个营养细胞和两个具有尾突的精子;每个精子通过两层质膜与营养细胞隔开,含有一个大的精核,长尾突内含少量的细胞质以及纤丝状结构.(3)生殖细胞和精子中缺乏质体.(4)花粉的败育起始于小孢子,大部分受阻于单核-二细胞花粉期,其败育特征为花粉内液泡吞噬作用导致细胞器解体,绒毡层细胞过早解体或肥大生长致使营养供应受阻,可能是导致单核-二细胞花粉败育的主要细胞学原因.研究表明,白花甜菜第九号染色体的附加可能是导致M14大量花粉败育的遗传学因素. 展开更多
关键词 甜菜无融合生殖单体附加系m14 小孢子发生 雄配子体发育 花粉败育 超微结构
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甜菜无融合生殖单体附加系M14雌配子体发育的超微结构观察 被引量:4
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作者 尚娅佳 申家恒 +3 位作者 郭德栋 李伟 丁常宏 陆俊萍 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期29-38,共10页
【目的】阐明甜菜无融合生殖单体附加系M14雌配子体发育的超微结构特征。【方法】以甜菜无融合生殖单体附加系M14(Beta vulgaris L.VV+1C、2n=18+1)为实验材料,利用电子显微镜技术对其雌配子体的发育过程进行研究。【结果】甜菜无融合... 【目的】阐明甜菜无融合生殖单体附加系M14雌配子体发育的超微结构特征。【方法】以甜菜无融合生殖单体附加系M14(Beta vulgaris L.VV+1C、2n=18+1)为实验材料,利用电子显微镜技术对其雌配子体的发育过程进行研究。【结果】甜菜无融合生殖单体附加系M14为兼性无融合生殖体,二倍体孢子生殖为蝶须型(Antennaria-type)和韭型(Allium odorum-type),有性生殖为蓼型(Polygonum-type)。蝶须型为主要发育方式,超微结构特征为:雌配子体发育速度较快,从功能大孢子直到细胞化雌配子体时期,细胞器的种类与数量呈现增长趋势:细胞核核仁较大,存在核仁泡,核孔明显;核糖体数量多;线粒体的数量一直较多,从二核雌配子体出现内嵴,膜的结构变得清晰,八核雌配子体的线粒体基质呈电子透明状,细胞化后期恢复到原来的状态;质体的数量变化不大,形状多样,有的含淀粉粒;内质网呈分枝的管状或交织成索状分布在细胞核、液泡或细胞壁附近;高尔基体的数量相对较少,但在未退化的助细胞中十分丰富,活跃地分泌小泡;脂滴一直都存在,常与液泡及线粒体相互靠近;细胞化后期,绝大多数雌配子体的助细胞先后退化,极少数雌配子体只有一个助细胞退化,另一个宿存。韭型与蓼型雌配子体发育速度较慢,与蝶须型相比,直到单核雌配子体时期未见细胞器种类与数量发生明显变化。蝶须型与韭型、蓼型雌配子体仅在功能大孢子与单核胚囊时期通过是否有胼胝质壁加厚以及珠孔端有无退化的细胞痕迹进行区分。【结论】蝶须型、韭型、蓼型雌配子体发育过程中的超微结构特征差异明显,蝶须型雌配子体从功能大孢子至细胞化时期,雌配子体体积增大,细胞器的种类与数量随之增加,呈现代谢旺盛状态。推测蝶须型雌配子体在其后的发育中占优势。单核雌配子体之前依据珠孔端是否有退化细胞痕迹以及有无胼胝质壁加厚可将蝶须型与韭型、蓼型从结构上予以区分。韭型、蓼型从功能大孢子至单核雌配子体时期,雌配子体的体积以及细胞质的成熟程度均呈缓慢增长趋势。推测在其后的发育过程中大量退化。 展开更多
关键词 甜菜单体附加系m14(Beta VULGARIS L.VV+1C 2n=18+1) 兼性无融合生殖 蝶须型(Antennaria-type) 韭型(Allium odorum-type) 蓼型(Polygonum-type) 雌配子体 超微结构
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甜菜无融合生殖单体附加系M14大孢子发生的超微结构 被引量:2
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作者 丁常宏 申家恒 +2 位作者 郭德栋 尚娅佳 陆俊萍 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1516-1524,共9页
应用透射电镜技术探求甜菜单体附加系M14(Beta vulgaris L.,VV+1C,2n=18+1)有性生殖大孢子与二倍体孢子生殖大孢子发生时的超微结构特征,了解有性生殖和无融合生殖起始细胞的超微结构差别。甜菜单体附加系M14为兼性无融合生殖体,大孢子... 应用透射电镜技术探求甜菜单体附加系M14(Beta vulgaris L.,VV+1C,2n=18+1)有性生殖大孢子与二倍体孢子生殖大孢子发生时的超微结构特征,了解有性生殖和无融合生殖起始细胞的超微结构差别。甜菜单体附加系M14为兼性无融合生殖体,大孢子发生有韭型、蝶须型和蓼型3种类型。韭型和蓼型大孢子发生时均起源于大孢子母细胞,二分体之前从形态结构上难以区分;减数分裂前期I,细胞核中出现核液泡,形成联会复合体,细胞质改组,细胞壁上沉积胼胝质。韭型大孢子发生时,只进行减数第一次分裂,不发生减数第二次分裂,形成二分体,珠孔端二分体细胞退化,合点端二分体细胞发育为二倍体功能大孢子。蓼型二分体的珠孔端细胞在减数第二次分裂前或分裂过程中退化,合点端细胞经减数第二次分裂形成两个细胞,构成三分体,最终合点端大孢子发育为单倍体功能大孢子。蝶须型大孢子发生是M14中唯一的二倍体孢子无融合生殖方式,其大孢子发生时大孢子母细胞不发生减数分裂,不出现核液泡,未形成联会复合体,无细胞质改组,细胞壁上缺乏胼胝质的沉积和缺乏胞间连丝,这些可作为二倍体孢子无融合生殖的鉴定指标。 展开更多
关键词 甜菜无融合生殖单体附加系m14 兼性无融合生殖 大孢子发生 韭型 蝶须型 蓼型 超微结构
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甜菜M14品系Cystatin基因植物蛋白纯化表达载体的构建及转化烟草 被引量:1
6
作者 王宇光 詹亚男 +4 位作者 宫世龙 于冰 杨乐 陈思学 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2012年第1期135-140,共6页
植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类具有提高植物对各种生物及非生物胁迫抗逆性的重要蛋白质。利用前期获得的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的编码区序列构建了带有His标签的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的植物蛋白纯化表... 植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂是一类具有提高植物对各种生物及非生物胁迫抗逆性的重要蛋白质。利用前期获得的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的编码区序列构建了带有His标签的甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的植物蛋白纯化表达载体,并将其转化烟草,获得T0代阳性转基因植株,为下一步利用融合蛋白的His标签从转基因烟草中大量纯化甜菜M14品系半胱氨酸蛋白酶抑制剂奠定了基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 转化
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甜菜单体附加系M14种子形成方式 被引量:1
7
作者 马兰 杜洪岩 李荣田 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期381-388,共8页
以具有显性标记性状的红叶柄栽培甜菜为父本与绿叶柄M14甜菜杂交,观察F1植株叶柄颜色;利用SSR标记分析甜菜M14世代间的遗传相关性。结果显示,甜菜单体附加系M14传递率维持在较高水平;在人工去雄授粉条件下,F1代植株叶柄颜色均为红色,甜... 以具有显性标记性状的红叶柄栽培甜菜为父本与绿叶柄M14甜菜杂交,观察F1植株叶柄颜色;利用SSR标记分析甜菜M14世代间的遗传相关性。结果显示,甜菜单体附加系M14传递率维持在较高水平;在人工去雄授粉条件下,F1代植株叶柄颜色均为红色,甜菜M14通过接受外来遗传物质及精卵结合的有性生殖方式繁殖种子;M14株系中不存在与其母本株SSR标记基因型精确相同的植株。表明甜菜M14通过精卵融合的有性生殖而非无融合生殖形成种子。Southern杂交结果显示,从甜菜M14反转得到的栽培甜菜染色体中普遍含有白花甜菜DNA,暗示甜菜M14形成雌配子体及卵子过程中存在减数分裂过程和较高频率的染色体畸变。推测甜菜单体附加系M14高频传递现象可能是由于附加的白花甜菜第9染色体具有杀配子功能。 展开更多
关键词 甜菜单体附加系m14 无融合生殖 有性生殖 有性杂交 遗传相关 SOUTHERN杂交
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利用SSH技术分析盐胁迫下甜菜M14品系的差异基因 被引量:1
8
作者 赵晨曦 王琳琳 +5 位作者 谷丹 朱哲浩 于冰 马春泉 陈思学 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2014年第2期238-243,共6页
甜菜M14品系是利用野生白花甜菜(Beta corolliflora Zoss.)与栽培甜菜(Beta vulgaris L.)进行种间杂交及回交获得的附加有野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有野生白花甜菜的一些优良性状。本研究利用抑制消减杂交技术,以未处理... 甜菜M14品系是利用野生白花甜菜(Beta corolliflora Zoss.)与栽培甜菜(Beta vulgaris L.)进行种间杂交及回交获得的附加有野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有野生白花甜菜的一些优良性状。本研究利用抑制消减杂交技术,以未处理的甜菜M14品系叶片作为Driver,以500 mmol·L-1NaCl处理的甜菜M14品系叶片作为Tester,构建了盐胁迫下甜菜M14品系抑制消减cDNA文库;以地高辛为标记物,进行反向Northern Blot杂交筛选并测序,共获得盐胁迫下甜菜M14品系特异ESTs序列449个,组装后共得到58条Unigenes,并将测序所得结果进行了GO分类。该研究为进一步鉴定和挖掘甜菜M14品系新的优质基因资源奠定了基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 抑制消减杂交 盐胁迫
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姜烯酚6衍生物M14通过调控Keap1/Nrf2信号通路诱导人结直肠癌HCT-8细胞凋亡 被引量:2
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作者 杨春 李恒 +2 位作者 董欣宇 谢小亮 张东 《宁夏医科大学学报》 2021年第2期109-112,128,共5页
目的探讨姜烯酚6衍生物M14(S6-M14)诱导人结直肠癌HCT-8细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法MTT法检测不同浓度的姜烯酚6衍生物M14对人结直肠癌HCT-8细胞增殖的影响;ATP显色法检测姜烯酚6衍生物M14促进人结直肠癌HCT-8细胞凋亡的剂量... 目的探讨姜烯酚6衍生物M14(S6-M14)诱导人结直肠癌HCT-8细胞凋亡的作用及可能的分子机制。方法MTT法检测不同浓度的姜烯酚6衍生物M14对人结直肠癌HCT-8细胞增殖的影响;ATP显色法检测姜烯酚6衍生物M14促进人结直肠癌HCT-8细胞凋亡的剂量依赖效应;Western blot检测胞质内Keap1和Nrf2蛋白及核内Nrf2蛋白的表达。结果0.25、0.5、1、2、4 mmol·L^(-1)S6-M14均可抑制人结直肠癌HCT-8细胞的增殖(P均<0.001);姜烯酚6衍生物M14剂量依赖性地诱导人结直肠癌HCT-8细胞凋亡;姜烯酚6衍生物M14下调人结直肠癌HCT-8细胞胞质内Keap1和Nrf2蛋白表达,促进Nrf2蛋白的核易位(P均<0.05)。结论姜烯酚6衍生物M14抑制人结直肠癌HCT-8细胞增殖、诱导细胞凋亡,调控Keap1/Nrf2信号通路,有潜在的预防结直肠癌发生的作用。 展开更多
关键词 姜烯酚6衍生物m14 人结直肠癌HCT-8细胞 细胞凋亡 Keap1/Nrf2信号通路
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甜菜M14品系硫氧还蛋白过氧化物酶(BvM14-Tpx)基因在原核及真核细胞中的抗氧化及抗盐能力分析 被引量:3
10
作者 赵晨曦 南景东 +3 位作者 马春泉 于冰 陈思学 李海英 《黑龙江大学工程学报》 2015年第3期62-67,83,共7页
甜菜M14品系是在栽培甜菜染色体基础上附加了野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有抗逆、无融合生殖等优异特性。在前期工作中,通过RACE技术获得了甜菜M14品系硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,Tpx)编码基因BvM14-Tpx... 甜菜M14品系是在栽培甜菜染色体基础上附加了野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有抗逆、无融合生殖等优异特性。在前期工作中,通过RACE技术获得了甜菜M14品系硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,Tpx)编码基因BvM14-Tpx的cDNA全长,此基因参与各种过氧化物的清除反应从而提高植物的抗逆性。构建了BvM14-Tpx基因的大肠杆菌表达体系,对转BvM14-Tpx基因的大肠杆菌BL21(DE3)菌体在H2O2胁迫下的生长曲线进行了测定,结果显示转基因菌株比对照菌株提前1h进入生长期,说明BvM14-Tpx基因能够缓解H2O2对大肠杆菌生长的抑制;同时构建了BvM14-Tpx基因的酿酒酵母表达体系,对H2O2及NaCl胁迫下的转基因酿酒酵母的研究表明,转基因酵母的生长好于对照,说明BvM14-Tpx基因可以提高转基因酵母的抗氧化及耐盐能力。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 硫氧还蛋白过氧化物酶 大肠杆菌 酿酒酵母
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盐胁迫下甜菜M14品系膜蛋白的提取和检验 被引量:2
11
作者 潘钰 李金娜 +1 位作者 陈思学 李海英 《黑龙江大学工程学报》 2013年第2期45-49,共5页
盐胁迫是限制植物生长、降低植物产量的主要非生物胁迫之一,膜蛋白是盐胁迫时细胞最先受到危害的部位,且丰度低、疏水性强水溶性不好,且大部分膜蛋白存在糖基化、磷酸化等翻译后修饰,造成膜蛋白的微观不均一性,研究盐胁迫下膜蛋白的变... 盐胁迫是限制植物生长、降低植物产量的主要非生物胁迫之一,膜蛋白是盐胁迫时细胞最先受到危害的部位,且丰度低、疏水性强水溶性不好,且大部分膜蛋白存在糖基化、磷酸化等翻译后修饰,造成膜蛋白的微观不均一性,研究盐胁迫下膜蛋白的变化将有利于研究植物耐盐机制。甜菜M14品系是研究植物耐盐性的很好的材料,提取盐胁迫下甜菜M14品系叶片及根的膜蛋白,定量后进行Western Blot鉴定,检验膜蛋白的质量,为后续利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术研究甜菜M14品系盐胁迫下差异表达膜蛋白质奠定基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 盐胁迫 膜蛋白 WESTERN BLOT
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丹皮酚对人黑素瘤A375和M14细胞系增殖与凋亡的影响 被引量:1
12
作者 陶玥 张孟丽 +3 位作者 马鹏程 孙建方 周武庆 包军 《中国麻风皮肤病杂志》 2014年第9期519-523,共5页
目的:确定丹皮酚对体外培养人黑素瘤A375和M14细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用CCK8检测黑素瘤A375和M14细胞的增殖抑制率;以流式细胞仪检测细胞周期变化、Annexin-V/PI法观察细胞凋亡的变化;用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态变... 目的:确定丹皮酚对体外培养人黑素瘤A375和M14细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用CCK8检测黑素瘤A375和M14细胞的增殖抑制率;以流式细胞仪检测细胞周期变化、Annexin-V/PI法观察细胞凋亡的变化;用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。结果:细胞周期显示丹皮酚处理过的A375和M14细胞G2/M期比例均高于对照组。以0 mmol/L、1.25 mmol/L、2.5 mmol/L、5 mmol/L丹皮酚作用24 h后,A375细胞的早期凋亡率分别为3.11%±0.53%,13.74%±1.73%,25.95%±0.57%和46.44%±0.81%;M14细胞的早期凋亡率分别为1.00%±0.08%,2.00%±0.01%,2.99%±0.29%和14.73%±0.94%,呈剂量依赖性诱导A375和M14细胞凋亡。经5 mmol/L丹皮酚作用后Hoechst33258染色示凋亡细胞形态改变。结论:丹皮酚对黑素瘤A375和M14细胞均具有抑制增殖和诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 丹皮酚 黑素瘤 A375 m14 凋亡
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甜菜单体附加系M14与栽培甜菜蛋白质的SDS-PAGE比较分析 被引量:2
13
作者 朱宏 《哈尔滨师范大学自然科学学报》 CAS 2008年第5期69-72,共4页
利用SDS-PAGE电泳比较分析了甜菜单体附加系M14与栽培甜菜在花蕾期蛋白水平上的差异.对甜菜单体附加系M14与栽培甜菜花蕾期蛋白的SDS-电泳图分析后,样品分别获得41与40条蛋白质条带,以栽培甜菜为对照甜菜单体附加系M14在花蕾期特异表达... 利用SDS-PAGE电泳比较分析了甜菜单体附加系M14与栽培甜菜在花蕾期蛋白水平上的差异.对甜菜单体附加系M14与栽培甜菜花蕾期蛋白的SDS-电泳图分析后,样品分别获得41与40条蛋白质条带,以栽培甜菜为对照甜菜单体附加系M14在花蕾期特异表达了3条蛋白质带,表达缺失了2个条带,初步推测其中可能有与M14进行无融合生殖相关蛋白质. 展开更多
关键词 无融合生殖 甜菜单体附加系m14 栽培甜菜 SDS-PAGE电泳
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甜菜M14品系褐斑病抗性的初步研究
14
作者 胡敏 赵晓菊 +1 位作者 殷亚杰 武燕 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第15期187-189,共3页
甜菜M14品系由于附加了一条野生白花甜菜第9号染色体,因此,研究其是否具有抗病性以及抗病程度的强弱具有十分重要的意义。通过用褐斑病原真菌感染甜菜M14品系与栽培甜菜,对比接种前后叶片中几种酶活性差异,同时对其氨基酸含量进行分析... 甜菜M14品系由于附加了一条野生白花甜菜第9号染色体,因此,研究其是否具有抗病性以及抗病程度的强弱具有十分重要的意义。通过用褐斑病原真菌感染甜菜M14品系与栽培甜菜,对比接种前后叶片中几种酶活性差异,同时对其氨基酸含量进行分析。结果表明:甜菜M14品系植株在感染褐斑病原真菌后所研究的几种酶活性都高于作为对照的栽培甜菜植株;并且甜菜M14品系植株感病后总氨基酸含量下降,而栽培甜菜感病后总氨基酸含量上升。因此,甜菜M14品系具有抗褐斑病的特征,更加具有研究价值。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 褐斑病抗性 酶活性 氨基酸含量
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甜菜M14品系特异表达基因ESTs的生物信息学分析 被引量:2
15
作者 梅其文 胡伟明 +1 位作者 吴烨东 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2007年第5期682-686,688,共6页
甜菜M14品系具有无融合生殖特性,为了获得M14品系特异表达的基因,本实验室前期利用抑制消减杂交(SSH)和mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术对M14品系和能够进行有性生殖的栽培甜菜A2Y品系进行了基因特异表达研究,获得了298条M14品系特异表达基... 甜菜M14品系具有无融合生殖特性,为了获得M14品系特异表达的基因,本实验室前期利用抑制消减杂交(SSH)和mRNA差异显示(DDRT-PCR)技术对M14品系和能够进行有性生殖的栽培甜菜A2Y品系进行了基因特异表达研究,获得了298条M14品系特异表达基因的ES-Ts。对这些ESTs进行生物信息学分析并进行了GO分类,筛选出5条可能与基因表达调控和细胞周期调控相关的ESTs,为进一步获得这些基因的全长序列并研究其功能奠定了基础,也为今后能在甜菜M14品系中寻找并克隆与无融合生殖相关的基因提供了可靠的保证。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 EST(Expressed sequence tags) 生物信息学分析 GO(Gene Ontology)
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甜菜M14品系BvM14-APX、BvM14-DHAR3、BvM14-MDAR基因响应NaCl胁迫的表达分析 被引量:4
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作者 蒋德生 李海英 +2 位作者 于冰 陈思学 马春泉 《黑龙江大学工程学报》 2016年第2期64-71,共8页
甜菜M14品系是在二倍体栽培甜菜染色体组上附加野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有耐盐性、无融合生殖等优良性状,是发掘优质基因资源的良好研究材料。实验室前期已利用i TRAQ串联LC-MS/MS技术获得0、200、400 m M Na Cl胁迫下... 甜菜M14品系是在二倍体栽培甜菜染色体组上附加野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有耐盐性、无融合生殖等优良性状,是发掘优质基因资源的良好研究材料。实验室前期已利用i TRAQ串联LC-MS/MS技术获得0、200、400 m M Na Cl胁迫下叶中差异表达蛋白质76个;与利用Hiseq 2000高通量测序技术构建的Na Cl(0、200、400 m M)胁迫下甜菜M14品系转录组数据库相匹配,得到了3条参与抗氧化酶系统的Bv M14-APX、Bv M14-DHAR3及Bv M14-MDAR的Unigenes序列。对3条Unigenes序列进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR技术对0、200、400 m M Na Cl胁迫下叶和根中的3条基因进行组织特异性分析,探究3条基因在叶和根中的表达趋势,并比较了叶中3条基因在转录水平和蛋白水平的表达量变化是否一致,借以评估3条基因对Na Cl胁迫的响应。实时荧光定量PCR结果表明,Bv M14-APX基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调21.56、3.56倍;400 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调51.27、11.47倍。Bv M14-DHAR3基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调14.52、1.83倍;400m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调22.78、5.1倍。Bv M14-MDAR基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调29.04、1.33倍;400 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调59.3、3.81倍。3条基因在响应Na Cl胁迫过程中,叶中的表达量变化均显著于根,同时叶中转录水平与蛋白表达水平的变化具有一致性,说明这3条基因在抗氧化酶系统中起到了重要的作用,这也为进一步探究Bv M14-APX、Bv M14-DHAR3及Bv M14-MDAR基因间互作关系奠定了基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 NACL胁迫 实时荧光定量PCR
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甜菜M14品系盐胁迫转录组数据库的转录因子分析 被引量:8
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作者 端木慧子 陶鑫 +3 位作者 王建慧 韦恒 李海英 马春泉 《黑龙江大学工程学报》 2017年第4期48-54,共7页
土壤盐渍化是影响我国农业生产的重要因素之一。甜菜M14品系具有耐盐、抗旱等优良特性,是挖掘抗逆基因的良好材料。对课题组前期构建的甜菜M14品系盐胁迫下转录组数据库进行系统的分析,基于文献、植物转录因子数据库等信息对其中的转录... 土壤盐渍化是影响我国农业生产的重要因素之一。甜菜M14品系具有耐盐、抗旱等优良特性,是挖掘抗逆基因的良好材料。对课题组前期构建的甜菜M14品系盐胁迫下转录组数据库进行系统的分析,基于文献、植物转录因子数据库等信息对其中的转录因子进行筛选与鉴定,从而获得非生物胁迫应答相关的转录因子。进一步对筛选出的转录因子WRKY家族进行进化分析并构建其蛋白互作网络,采用实时荧光定量PCR技术进行盐胁迫下WRKY家族基因表达量的测定,分析WRKY家族转录因子盐胁迫的表达模式。结果证实,甜菜M14品系WRKY家族转录因子参与盐胁迫应答。该研究将为甜菜盐胁迫响应研究提供理论基础,为甜菜中转录因子研究提供数据支持,并为WRKY家族转录因子功能的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 转录组数据库 转录因子 WRKY家族 实时荧光定量PCR
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利用生物信息学技术构建分析甜菜M14品系盐胁迫下参考转录组数据库 被引量:5
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作者 吕笑言 金英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2017年第2期208-212,共5页
生物信息学(Bioinformatics)是一门计算机科学技术与生命科学的交叉学科,它通过综合利用生物学、计算机科学和信息技术揭示大量生物数据所赋有的生物学意义。目前利用生物信息技术对植物逆境环境下的基因组学、转录组学及蛋白质组学的... 生物信息学(Bioinformatics)是一门计算机科学技术与生命科学的交叉学科,它通过综合利用生物学、计算机科学和信息技术揭示大量生物数据所赋有的生物学意义。目前利用生物信息技术对植物逆境环境下的基因组学、转录组学及蛋白质组学的数据挖掘,已成为功能基因组学的研究热点。甜菜M14品系具有野生白花甜菜(Beta corolliflora Zoss.)的耐盐性优良性状。为了对盐胁迫下的甜菜M14品系进行转录组分析及差异基因筛选,本研究构建了甜菜M14品系盐胁迫参考转录组文库,并对文库进行了测序以及数据的生物信息学分析,在参考转录组中鉴定得到54 843个Unigenes,并对这些Unigenes进行功能注释、GO及COG功能分类,为下一步研究甜菜M14品系耐盐基因资源挖掘奠定了重要基础。 展开更多
关键词 生物信息学 甜菜m14品系 盐胁迫 转录组数据库 转录因子
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甜菜BvM14-CMO、BvM14-BADH基因的克隆、盐胁迫表达及生物信息学分析 被引量:6
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作者 吕笑言 王宇光 金英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 2018年第1期79-84,共6页
以耐盐甜菜(Beta vulgaris)M14品系为试验材料,利用RT-PCR克隆获得甜菜M14品系甜菜碱合成相关基因胆碱单加氧酶基因BvM14-CMO和甜菜碱醛脱氢酶基因BvM14-BADH的cDNA全长。荧光定量PCR测试结果表明,200和400 mmol·L^(-1)NaCl盐胁迫... 以耐盐甜菜(Beta vulgaris)M14品系为试验材料,利用RT-PCR克隆获得甜菜M14品系甜菜碱合成相关基因胆碱单加氧酶基因BvM14-CMO和甜菜碱醛脱氢酶基因BvM14-BADH的cDNA全长。荧光定量PCR测试结果表明,200和400 mmol·L^(-1)NaCl盐胁迫下BvM14-CMO及BvM14-BADH在甜菜M14品系的叶和根中均显著上调表达。通过蛋白质互作数据库预测,得到了拟南芥CMO和BADH蛋白的互作蛋白。采用甜菜M14品系盐胁迫转录组数据库,对甜菜M14品系中CMO和BADH互作蛋白的同源基因进行盐胁迫表达聚类分析,发现甜菜M14品系中大部分预测获得的CMO和BADH互作蛋白基因与BvM14-CMO和BvM14-BADH基因在盐胁迫下的表达变化趋势一致,这些研究结果为进一步深入研究BvM14-CMO和BvM14-BADH基因的功能奠定了理论基础。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 盐胁迫 胆碱单加氧酶基因 甜菜碱醛脱氢酶基因
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盐胁迫下甜菜M14品系BvM14-ATPaseF、BvM14-ATPaseH、BvM14-PsaD基因的表达分析 被引量:1
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作者 张咏雪 戚诗诗 +4 位作者 潘钰 马春泉 于冰 陈思学 李海英 《黑龙江大学工程学报》 2015年第4期49-54,共6页
甜菜M14品系是由栽培甜菜和野生白花甜菜杂交后获得的带有野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有抗逆、无融合等优良特性。在前期工作中,对盐胁迫下叶片膜蛋白进行了定量蛋白质组学分析,与未处理对照相比,200、400mM盐胁迫下共获得5... 甜菜M14品系是由栽培甜菜和野生白花甜菜杂交后获得的带有野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有抗逆、无融合等优良特性。在前期工作中,对盐胁迫下叶片膜蛋白进行了定量蛋白质组学分析,与未处理对照相比,200、400mM盐胁迫下共获得50个差异蛋白质点,选择其中3个蛋白质点为研究对象,与实验室前期相同盐处理下获得的转录组数据库相匹配,获得基因cDNA全长,将此3个基因命名为BvM14-ATPaseF、BvM14-ATPaseH和BvM14-PsaD;进行在线功能预测;设计引物,对盐胁迫(0、200、400 mM)处理下此3个基因进行实时荧光定量分析,了解在盐胁迫下基因转录与蛋白水平上表达量的关系。结果表明,与未处理对照相比,200、400 mM盐浓度处理下BvM14-ATPaseF基因分别上调3.70与4.47倍,BvM14-ATPaseH基因在盐胁迫处理下分别上调0.85与1.36倍,而BvM14-PsaD基因随着盐浓度的增加却下调0.97与2.54倍,表明在盐胁迫下不同基因具有的功能不同,而导致转录水平与蛋白水平的表达量并不完全相同。 展开更多
关键词 甜菜m14品系 盐胁迫 膜蛋白基因 荧光定量PCR
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