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Dual functional AgNPs-M13 phage composite serves as antibacterial film and sensing probe for monitoring the corrosion of chromium-containing dental alloys 被引量:3
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作者 Ting Yang Na Li +4 位作者 Xiaoyan Wang Jian Zhai Bo Hu Mingli Chen Jianhua Wang 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期145-149,共5页
The preparation of silver nanoparticles(AgNPs)with microbe or plant tissues as bio-template offers green approach,while it suffers from low harvest and purification is needed.Herein,we propose a facile protocol for on... The preparation of silver nanoparticles(AgNPs)with microbe or plant tissues as bio-template offers green approach,while it suffers from low harvest and purification is needed.Herein,we propose a facile protocol for one-pot preparation of AgNPs using M13 phage as bio-template by simply mixing AgN03 solution with alkali M13 phage.In the obtained AgNPs-M13 phage composite,Cr(Ⅲ)selectively coordinates with the amino residues on phage surface and leads to the aggregation of AgNPs through the bridging of M13 phages.This makes it feasible for colorimetric sensing of Cr(Ⅲ)by measuring the absorbance ratio of AgNPs at 600 and 405 nm,which provides a LOD of 14 nmol/L.The composite also showed favorable bactericidal activity for both Gram-positive and Gram-negative bacteria,making it a promising candidate as antibacterial film in chromium-containing dental alloys and meanwhile serve as a sensing probe for monitoring the corrosion of the dental alloys. 展开更多
关键词 AgNPs-m13 phage composite Green preparation Bactericidal activity Colorimetric sensing Cr(Ⅲ)
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Stability of M13 Phage in Organic Solvents 被引量:1
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作者 Pouya Moghimian Vesna Srot +2 位作者 Benoit P. Pichon Sandra J. Facey Peter A. van Aken 《Journal of Biomaterials and Nanobiotechnology》 2016年第2期72-77,共6页
The effect of different types of organic solvents on the structural integrity of M13 phages has been directly visualized by transmission and scanning electron microscopy. The exposure of M13 phages to apolar hexane ha... The effect of different types of organic solvents on the structural integrity of M13 phages has been directly visualized by transmission and scanning electron microscopy. The exposure of M13 phages to apolar hexane had no effect on the structure of the phages for up to 8 h. In contrast, phages showed ~10-fold contraction into rod-like I-forms and to flattened spheroids with ~12 nm diameter upon exposure to polar organic solvents. We show that this finding can be beneficial for the macromolecular self-assembly and in broader aspects, to enhance the spatial arrangement of desired inorganic nanoparticles in the rapidly developing field of virotronics. 展开更多
关键词 m13 phage Organic Solvent Structural Integrity SELF-ASSEMBLY Electron Microscopy
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Application of M13 Phage Coat Proteins
3
作者 Zhi DING Ling ZHAO Xuemei MA 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2013年第1期45-47,共3页
M13 phage'is a filamentous bacteriophage containing a circular single-stranded DNA molecular, which is surrounded by approximately 2 800 copies of protein PVIII. In addition, there are five copies of each of proteins... M13 phage'is a filamentous bacteriophage containing a circular single-stranded DNA molecular, which is surrounded by approximately 2 800 copies of protein PVIII. In addition, there are five copies of each of proteins PVII and PXI in one end, and five copies of each of proteins PVI and PUI on the other. These coat proteins have play an important role in the infection and assembly of M13 phage. With the development of phage display technology, these five coat proteins all can be used in phage display, which plays an increasingly important role in molecular detection and treatment. 展开更多
关键词 m13 phage coat protein phage display technology
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靶向不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6重组M13噬菌体疫苗的构建及其免疫效果评价
4
作者 王财 常月立 +4 位作者 胡楠 李唯峰 赵子红 安晶 张玉妥 《中国生物制品学杂志》 2025年第2期129-136,142,共9页
目的构建靶向不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6的重组M13噬菌体疫苗,并评价其免疫原性,以期为NTHi疫苗的进一步研发提供新思路。方法通过基因重组技术将NTHi外模蛋白P6基因整合至载体pMECS Pha... 目的构建靶向不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6的重组M13噬菌体疫苗,并评价其免疫原性,以期为NTHi疫苗的进一步研发提供新思路。方法通过基因重组技术将NTHi外模蛋白P6基因整合至载体pMECS Phagemid,获得重组P6-M13噬菌体单克隆,经包装及纯化后,制备为重组P6-M13噬菌体疫苗。Western blot法检测疫苗中P6-M13 PⅢ融合蛋白的表达情况,双层琼脂平板法测定疫苗滴度,透射电镜下观察重组P6-M13噬菌体形态。将90只5周龄BALB/c雌性小鼠随机分为PBS、M13噬菌体、重组P6-M13噬菌体疫苗组,每组30只,分别于0、14、28 d经腹腔注射PBS(500μL/只)、M13噬菌体[1×10^(12)pfu/(500μL·只)]、重组P6-M13噬菌体疫苗[1×10^(12)pfu/(500μL·只)]。末次免疫2周后,ELISA法检测小鼠血清中特异性IgG水平及脾淋巴细胞培养上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-5和IL-17A水平,CCK-8法分析脾淋巴细胞的增殖情况;末次免疫3周后,用1.5×108cfu/mL NTHi经小鼠鼻腔进行攻毒,攻毒1周后,HE染色法观察小鼠鼻黏膜和肺组织病理变化;末次免疫4周后,称量小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏质量,计算脏器系数,并制备组织病理切片,进行病理学观察。结果制备的重组P6-M13噬菌体疫苗可正确表达P6-M13 PⅢ融合蛋白,滴度为5.5×10^(14)pfu/mL,镜下观察可见形态规则的重组P6-M13噬菌体。与M13噬菌体及PBS组比较,重组P6-M13噬菌体疫苗组小鼠血清特异性抗体IgG水平显著升高(F=71.489,P<0.05);脾细胞分泌IFNγ、IL-2、IL-4、IL-5水平明显降低(F分别为8.315、16.986、39.204、6.291,P均<0.05),3组间IL-17水平差异无统计学意义(F=0.863,P>0.05);脾细胞刺激指数明显升高(F=22.952,P<0.05)。攻毒后,PBS和M13噬菌体组小鼠鼻黏膜及肺组织结构严重受损,炎性细胞增多;重组P6-M13噬菌体疫苗组小鼠鼻黏膜及肺组织结构正常,少见炎性细胞。各组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏脏器系数差异均无统计学意义(F分别为1.012、1.642、0.300、2.079、0.405,P均>0.05),主要脏器大体形态色泽及病理切片检查均未发现病理改变。结论构建的靶向NTHi外膜蛋白P6的重组P6-M13噬菌体疫苗在小鼠体内可引起有效的体液免疫和细胞免疫应答,具有一定的免疫保护能力及良好的安全性。 展开更多
关键词 不可分型流感嗜血杆菌 外膜蛋白P6 噬菌体展示技术 m13噬菌体疫苗 免疫原性
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用M13噬菌体PⅢ蛋白Ⅰ-Ⅱ结构域表达HIV-1 gp41抗原表位 被引量:1
5
作者 冯福民 李敬云 +3 位作者 鲍作义 刘思杨 李林 庄道民 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2006年第12期2313-2315,2319,共4页
目的:探讨M13噬菌体PⅢ蛋白Ⅰ-Ⅱ结构域表达融合蛋白的可行性。方法:以纯化的HIV-1感染者血清多克隆抗体为配体,在噬菌体展示随机十二肽库中进行生物淘洗,经ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序,确定优势表位。将优势表位及两个优势表位的串联体... 目的:探讨M13噬菌体PⅢ蛋白Ⅰ-Ⅱ结构域表达融合蛋白的可行性。方法:以纯化的HIV-1感染者血清多克隆抗体为配体,在噬菌体展示随机十二肽库中进行生物淘洗,经ELISA鉴定阳性克隆,DNA测序,确定优势表位。将优势表位及两个优势表位的串联体分别与M13噬菌体PⅢ蛋白Ⅰ-Ⅱ结构域连接,克隆入PQE30载体进行蛋白表达,再以表达蛋白为抗原检测HIV-1感染者血清中的抗体。结果:成功筛选到位于HIV-1 gp41蛋白上的3组优势抗原表位(HGPKDAETTAIW;AAFKDNQLLRIW;AAFKDNQLTRIW),3组优势表位及表位串联体(YGPKDAETTAIW-GGGS-SCSAKFTCTTQI)在PQE30载体中实现可溶性融合表达。重组蛋白具有良好的抗原性,能与不同的HIV-1抗体阳性血清呈特异反应。结论:用M13噬菌体PⅢ蛋白Ⅰ-Ⅱ结构域表达HIV-1 gp41抗原表位是可行的。 展开更多
关键词 m13噬菌体 PⅢ蛋白 HIV-1 GP41 表位 基因表达
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基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用 被引量:1
6
作者 赵鹏 陶定银 +2 位作者 梁振 张丽华 张玉奎 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期249-253,共5页
通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白... 通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器。由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理。将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2mol/LNaCl、50mmol/LGly-HCl(pH2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定。与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个。此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中。上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质。 展开更多
关键词 蛋白质均衡器 m13噬菌体展示单链抗体文库 串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱 蛋白质 肾病患者 尿
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用M13DNA探针检测小鼠DNA指纹 被引量:2
7
作者 罗鹏 罗林 梁松 《西南民族学院学报(自然科学版)》 CAS 1994年第3期289-292,共4页
用HinfI酶切,随机引物法标记的M13mp18DNA作探针,对无关小鼠个体及一个小鼠家系三代进行了DNA指纹分析,无关个体平均每个个体得到14条谱带(>4kb)。无关个体具有相同指纹图概率为9×10 ̄(-8),... 用HinfI酶切,随机引物法标记的M13mp18DNA作探针,对无关小鼠个体及一个小鼠家系三代进行了DNA指纹分析,无关个体平均每个个体得到14条谱带(>4kb)。无关个体具有相同指纹图概率为9×10 ̄(-8),显示高度个体材异性,对小鼠家系内后代与亲本图谱进行了比较,表明图谱特征按孟德尔方式遗传。对家系内个体间遗传相似度D进行了计算,亲缘关系近则D值高,据此对本技术在动物个体识别,亲缘关系分析等方面的应用进行了讨论。 展开更多
关键词 DNA指纹 m13噬菌体 小鼠 遗传分析
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M13噬菌体肽库扩增及兔抗血清制备 被引量:1
8
作者 任晓峰 马晓微 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期79-82,共4页
为制备M13噬菌体多克隆抗体,将噬菌体十二肽原始文库进行大量扩增,作为免疫原制备兔抗M13的多克隆抗体血清并进行间接ELISA鉴定。结果表明,该多抗效价达1 1 048 576,说明此多抗可与扩增噬菌体文库发生很好的抗原抗体反应。将制备的噬菌... 为制备M13噬菌体多克隆抗体,将噬菌体十二肽原始文库进行大量扩增,作为免疫原制备兔抗M13的多克隆抗体血清并进行间接ELISA鉴定。结果表明,该多抗效价达1 1 048 576,说明此多抗可与扩增噬菌体文库发生很好的抗原抗体反应。将制备的噬菌体M13多克隆抗体与商业化M13抗体水平比较,制备多抗与商业化M13抗体效果相当。本研究成功制备兔抗M13噬菌体多克隆抗体,为深入研究噬菌体展示技术提供了材料。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 兔抗m13噬菌体血清 间接ELISA
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M13噬菌体衣壳蛋白的研究应用 被引量:1
9
作者 丁芝 赵岭 马雪梅 《安徽农业科学》 CAS 2013年第2期521-523,共3页
M13噬菌体是一种丝状噬菌体,内有一个环状单链DNA分子,它由约2 800个PⅧ蛋白组成的圆柱形衣壳包围环状单链DNA分子,其中5个PⅦ和5个PⅪ蛋白在噬菌体的一端,另一端有5个PⅥ蛋白和5个PⅢ蛋白。这些衣壳蛋白参与着噬菌体的感染、组装等功... M13噬菌体是一种丝状噬菌体,内有一个环状单链DNA分子,它由约2 800个PⅧ蛋白组成的圆柱形衣壳包围环状单链DNA分子,其中5个PⅦ和5个PⅪ蛋白在噬菌体的一端,另一端有5个PⅥ蛋白和5个PⅢ蛋白。这些衣壳蛋白参与着噬菌体的感染、组装等功能。文中对这5种衣壳蛋白在噬菌体展示技术的研究应用进行了综述。 展开更多
关键词 m13噬菌体 衣壳蛋白 噬菌体展示技术
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功能化M13噬菌体在食品安全检测中的应用研究进展 被引量:1
10
作者 马小勇 余丽萍 +2 位作者 姜颖 熊颖 任佳丽 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第19期165-172,共8页
食品中各类风险因子是威胁其安全性的主要因素,构筑生物传感方法快速检测各类风险因子对保障食品安全至关重要。M13噬菌体是一种特异性识别、浸染大肠杆菌的病毒,与抗体、功能核酸、分子印记聚合物等识别元件相比,噬菌体更易获得、性质... 食品中各类风险因子是威胁其安全性的主要因素,构筑生物传感方法快速检测各类风险因子对保障食品安全至关重要。M13噬菌体是一种特异性识别、浸染大肠杆菌的病毒,与抗体、功能核酸、分子印记聚合物等识别元件相比,噬菌体更易获得、性质稳定、耐受性强。通过基因或化学修饰对M13噬菌体进行功能化修饰,赋予其生物识别和信号传输双重功能,用以构筑各种生物传感器平台,具有操作简单、检测时间短、特异性好以及灵敏度高等优点,在食品安全检测中具有重要的应用价值。因此,本文综述了M13噬菌体的功能化方法,介绍了功能化的M13噬菌体检测食品样品中各类风险因子(食源性致病微生物、真菌孢子、过敏原、真菌毒素、农药残留等)的最新研究进展(2019年—至今),并展望了以M13噬菌体为代表的功能化噬菌体应用在食品安全领域的发展趋势,将为拓展M13噬菌体在食品安全领域的应用提供理论参考价值。 展开更多
关键词 食品安全检测 m13噬菌体 基因修饰 化学修饰
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Bioprocess-inspired preparation of silica with varied morphologies and potential in lithium storage 被引量:2
11
作者 Fuqiang Wan Wenxuan Wang +3 位作者 Zhaoyong Zou Hao Xie Hang Ping Zhengyi Fu 《Journal of Materials Science & Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2021年第13期61-68,共8页
As one of the most delicate bioprocesses in nature,biosilicification is closely related to biosilica with various morphologies,and has provided abundant inspiration to materials synthesis.In the present study,to explo... As one of the most delicate bioprocesses in nature,biosilicification is closely related to biosilica with various morphologies,and has provided abundant inspiration to materials synthesis.In the present study,to explore the biosilica formation process and fabricate silica with an exquisite microstructure for lithiumion battery(LIB)electrodes,a bacterial phage(M13)is used as a biotemplate to synthesize silica with diverse morphologies:cylinders,hexagonal prisms,assemblies of smaller cylinders and nanowires.A facile ethanol bath method is conducted to coat the nanowires with nitrogen-containing carbon and carbon-coated SiO_(2) nanowires with mesochannels(C@msSiO_(2) NWs)are first used as anode materials for LIBs.Attributed to the uniform carbon coating and parallel mesochannel structure,the electronic conductivity and capacity to accommodate volume variations were significantly improved.In the electrochemical perfo rmance test,the composites calcined at 750℃(C@msSiO_(2) NWs-750)show an impressive capacity of 653 mA h g^(-1) at a current density of 500 mA g^(-1) and stability(1000 cycles).In view of the electrochemical test outcomes,the prepa ration of a sophisticated structure with an outstanding potential is easily achieved via a biomimetic strategy. 展开更多
关键词 Biomimetic preparation Biosilicification m13 phage Silica nanowires Mesochannel
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噬菌体cDNA展示文库技术及其在寄生虫学中的应用 被引量:1
12
作者 张素华 钱程 吴海玮 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2007年第2期103-107,共5页
该文介绍了噬菌体cDNA展示文库技术的原理和发展,以及由多种载体构建的cDNA展示文库的特点,重点阐述最早应用于噬菌体展示技术的丝状噬菌体M13以及目前广泛应用的入噬菌体。作为噬菌体展示文库技术的分支,噬菌体cDNA展示文库技术广... 该文介绍了噬菌体cDNA展示文库技术的原理和发展,以及由多种载体构建的cDNA展示文库的特点,重点阐述最早应用于噬菌体展示技术的丝状噬菌体M13以及目前广泛应用的入噬菌体。作为噬菌体展示文库技术的分支,噬菌体cDNA展示文库技术广泛应用于各种天然配体一受体相互作用的研究,是研究各种寄生虫的结构与功能的基础,在寄生虫病诊断与致病机制研究及疫苗开发与药物研制等方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 噬菌体展示 CDNA文库 寄生虫学 m13噬菌体 入噬菌体
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代谢型谷氨酸受体5的纯化及纳米抗体的筛选
13
作者 王辉 马梦洁 许剑锋 《工业微生物》 CAS 2023年第5期156-162,共7页
文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行... 文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行表达纯化,然后对野生单峰驼进行7次免疫,对抽取骆驼的外淋巴细胞总RNA进行提取,经过反转录的方式转为c DNA,将用巢式PCR对VHH片段进行扩增并与p MECS噬菌粒载体进行连接,并电转化至TG1大肠杆菌中构建纳米抗体噬菌体展示文库;其三通过M13噬菌体展示技术对文库进行淘选,淘选出多个互补决定区3序列不同的纳米抗体;最后纯化出纯度较高的m GluR5蛋白,构建出库容量为5.47×10^(8)CFU/mL的噬菌体文库菌,经过两轮液相淘选,获得了12个互补决定区3序列不同的纳米抗体。研究成功筛选出12个与m GluR5特异性结合较高的纳米抗体,为m Glu R5的靶向药物研发和G蛋白偶联受体的信号通路研究奠定了基础。 展开更多
关键词 代谢型谷氨酸受体5 m13噬菌体展示技术 纳米抗体
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抗犬瘟热病毒VHH抗体噬菌体库的构建与筛选 被引量:5
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作者 王召阳 蒋亚君 +6 位作者 刘雪婷 林伟东 鑫婷 侯绍华 郭晓宇 朱鸿飞 贾红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第6期1685-1693,共9页
为构建特异性犬瘟热病毒(CDV)的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑... 为构建特异性犬瘟热病毒(CDV)的纳米抗体库,获得抗CDV的VHH抗体,本试验利用CDV免疫羊驼,四免后采集外周血淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,利用巢式PCR扩增纳米抗体序列。将目的片段连接至pComb3x噬菌体展示载体,并电转至TG1宿主菌,挑取40个克隆进行菌液PCR验证,随机挑选13个阳性单克隆进行测序,计算抗体库库容量,加入辅助噬菌粒拯救获得的噬菌体展示抗体库。经过3轮淘选,富集对CDV结合力高的噬菌体。利用毕赤酵母系统表达两株结合力高的噬菌体,经Ni柱纯化后,利用ELISA进行噬菌体结合力的鉴定。结果表明,四免后羊驼血清效价达1∶25000,达到建库要求,构建的噬菌体展示文库库容量达3.41×109 PFU。经过3轮淘选,特异性抗体库经稀释100倍后,ELISA检测仍为阳性,表明特异性结合CDV的噬菌体得到明显的富集。ELISA结果表明,两株纯化的纳米抗体与CDV的反应性显著高于对照组。以上结果提示,本研究成功筛选出2株特异性结合CDV的VHH抗体,为VHH抗体在犬瘟热的诊断和治疗方面的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒(CDV) VHH抗体 m13噬菌体展示 真核表达
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“天然植物抗菌液”(PAMs)潜在抗SARS-CoV-2活性成分及机制 被引量:2
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作者 杨蕾 敖智广 +4 位作者 项坤 何佳萌 常苗 李栋 茆灿泉 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期34-39,共6页
为探寻云南普洱丹州制药股份有限公司出品的“天然植物抗菌液”(PAMs)潜在抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的可能活性成分及作用机制,应用TCMSP、BATMAN和YaTCM数据库查找PAMs中植物药材来源的化学成分和作用靶点;通过GeneCards数据库获取... 为探寻云南普洱丹州制药股份有限公司出品的“天然植物抗菌液”(PAMs)潜在抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的可能活性成分及作用机制,应用TCMSP、BATMAN和YaTCM数据库查找PAMs中植物药材来源的化学成分和作用靶点;通过GeneCards数据库获取冠状病毒靶点;Cytoscape作图构建“药材-成分-靶点-疾病”网络和潜在的靶点PPI网络;GO和KEGG富集分析预测PAMs的作用机制,并将PAMs主要活性成分与新型冠状病毒的关键蛋白进行分子模拟与对接。最后,以M13噬菌体为病毒模型,测定PAMs对噬菌体病毒的抑制作用。共得到166种PAMs中的药材活性成分、1007个药物靶点,调控新型冠状病毒的潜在作用靶点73个。构建的药材-成分-靶点-疾病网络中,靶点度数大于10的有PTGS2、PTGS1、PPARG、DPP4、CALM1、CASP3、RELA、BAX等。GO富集分析共得到2109个条目,主要包括细胞因子、蛋白磷酸化、免疫调节等;KEGG共富集到144条信号通路,排名前5的依次为人巨细胞病毒感染、TNF、卡波西氏肉瘤相关疱疹病毒感染、甲型流感以及乙型肝炎信号通路。分子对接结果显示,木犀草素、槲皮素、黄芩素与SARS-CoV-2的3CL水解酶(Mpro)、S刺突糖蛋白均呈现出强的结合能力;黄芩素、杨梅素、槲皮素与血管受体紧张素转化酶(ACE2)的结合能力强。PAMs对M13噬菌体的抑制测定显示,20%的PAMs对其抑制作用达到99%以上。PAMs可能通过多成分、多靶点、多通路作用于SARS-CoV-2,并且红花、紫草的主要活性成分槲皮素、黄芩素以及木犀草素与Mpro、ACE2以及S刺突糖蛋白均有较低的结合自由能,揭示其可能直接对COVID-19产生辅助治疗作用。 展开更多
关键词 天然植物抗菌液(PAMs) 网络药理学 新型冠状病毒 m13噬菌体
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M13-IN5重组噬菌体对沙眼衣原体的抑制机制
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作者 王江懿 尤聪 +5 位作者 赵乐然 王梅 魏世娟 练婷婷 邵丽丽 刘全忠 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期877-883,共7页
目的探索重组M13-IN5噬菌体抑制沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)生长作用的机制。方法通过噬菌斑法测定M13-IN5噬菌体的滴度;CCK-8法检测M13-IN5噬菌体和青霉素对HeLa细胞的毒性作用;将不同滴度的M13-IN5噬菌体与50 U/mL的青霉素... 目的探索重组M13-IN5噬菌体抑制沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)生长作用的机制。方法通过噬菌斑法测定M13-IN5噬菌体的滴度;CCK-8法检测M13-IN5噬菌体和青霉素对HeLa细胞的毒性作用;将不同滴度的M13-IN5噬菌体与50 U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后,通过免疫荧光计数包涵体数量;将滴度为10^(7)pfu/mL M13-IN5噬菌体与50 U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后进行子代感染力实验;采用定量逆转录PCR检测两组干预后CT_046、CT_111、CT_395、CT_443、CT_666、CT_823基因的转录变化,未干预沙眼衣原体感染组为阳性对照。两样本均数间比较采用t检验,多组样本均数间比较采用单因素ANOVA方法,多个样本间两两比较采用Bonferroni校正。结果滴度≤10^(9)pfu/mL的M13-IN5噬菌体以及50 U/mL的青霉素对HeLa细胞无毒性作用,10^(7)pfu/mL M13-IN5噬菌体与50 U/mL青霉素干预后,48 h形成的包涵体数量无明显区别,抑制率分别为19.62%和21.09%(P>0.05);M13-IN5噬菌体组干预形成的子代包涵体数量较青霉素干预组减少20.26%(P<0.05)。CT_046、CT_443在两个干预组转录水平均下降,M13-IN5噬菌体组较青霉素组下降明显(P<0.05);M13-IN5噬菌体干预组CT_666转录水平下降(P<0.05),青霉素干预组无变化(P>0.05);青霉素干预组压力应答基因CT_111、CT_395、CT_823转录水平增高(P<0.05),M13-IN5噬菌体干预组以上基因转录水平无变化(P>0.05)。结论重组M13-IN5噬菌体对沙眼衣原体的抑制作用强于青霉素,CT_046、CT_443、CT_666基因是重组噬菌体抑制沙眼衣原体生长的作用靶点。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 m13噬菌体 IN5 青霉素
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噬菌体展示蛋白质芯片的无标记检测
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作者 刘芳芳 罗昭锋 +2 位作者 定翔 朱圣庚 余兴龙 《清华大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1935-1939,共5页
为获得丰富的特异识别分子和实现无标记、高灵敏度检测,利用噬菌体展示技术,选择在pIII蛋白上展示12肽的噬菌体M13作探针,采用羧基-氨基共价耦联法制备噬菌体展示蛋白质芯片。在此基础上,与表面等离子体共振传感技术结合,使用Biacore300... 为获得丰富的特异识别分子和实现无标记、高灵敏度检测,利用噬菌体展示技术,选择在pIII蛋白上展示12肽的噬菌体M13作探针,采用羧基-氨基共价耦联法制备噬菌体展示蛋白质芯片。在此基础上,与表面等离子体共振传感技术结合,使用Biacore3000仪器,检测噬菌体展示蛋白质芯片与特异性抗体的反应,测定反应动力学常数。实验结果表明:当抗体浓度为0.4μmol.L-1时,响应信号可达365±8个单位;不同浓度的抗体与芯片反应的数据较好地与S型曲线吻合。该方法可望用于噬菌体展示蛋白质芯片的检测。 展开更多
关键词 表面等离子体共振 噬菌体m13展示系统 噬菌体展示蛋白质芯片 特异性抗体 动力学常数
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