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The Role of Innate Immune Cells in the Response of Heat-Treated Mycobacterium tuberculosis (M.tb) Antigens Stimulating PBMCs 被引量:3
1
作者 ChaoWang JunLi +3 位作者 HuaixinZheng HaimingWei RuijunZhang BaiqingLi 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2004年第6期467-470,共4页
The proliferation response of γδT cells to the antigen from heat-treated Mycobacterium tuberculosis H37Ra (M.tb Ag)was used as a good model in γδT cell research.From preliminary research it is found that activated... The proliferation response of γδT cells to the antigen from heat-treated Mycobacterium tuberculosis H37Ra (M.tb Ag)was used as a good model in γδT cell research.From preliminary research it is found that activated NK cells positively elevated γδT cells proliferation after simulating PBMCs with M.tb Ag.To investigate different behaviors of NK cells,γδNKT cells,γδT cells and relationships between these cell subsets,activation and proliferation of different cell subsets of PBMCs in response to M.tb Ag were analyzed.We demonstrated that NK cells,γδNKT cells and γδT cells could be activated after stimulation with M.tb Ag.γδNKT cells and γδT cells proliferated while the number of NK cells decreased after 11 day-simulation with M.tb Ag.Meanwhile,at the early time of stimulation the cytotoxicity of PBMCs was enhanced.Cellular & Molecular Immunology. 2004;1(6):467-470. 展开更多
关键词 tuberculosis m.tb Ag NK cell NKT cell γδT cell
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结核分枝杆菌H37Rv刺激巨噬细胞后差异表达lncRNA分析及鉴定 被引量:6
2
作者 谭杨 刘胜 +1 位作者 罗凤玲 章晓联 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1-9,共9页
分析毒性结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)H37Rv刺激RAW264.7巨噬细胞的表达谱芯片以及筛选和鉴定M.tb H37Rv感染巨噬细胞RAW264.7后差异表达的lncRNA。首先,分析热灭活的H37Rv刺激RAW264.7细胞24h后lncRNA表达谱芯片,... 分析毒性结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)H37Rv刺激RAW264.7巨噬细胞的表达谱芯片以及筛选和鉴定M.tb H37Rv感染巨噬细胞RAW264.7后差异表达的lncRNA。首先,分析热灭活的H37Rv刺激RAW264.7细胞24h后lncRNA表达谱芯片,并对差异表达的lncRNA和mRNA进行生物信息分析,然后采用实时定量聚合酶链反应对16条在芯片中差异表达的lncRNA进行细胞水平验证;进一步在H37Rv感染小鼠的脾脏和肺脏中检测差异表达的lncRNA。结果显示,表达谱芯片中4 730条lncRNA的表达水平上调,9 558条lncRNA的表达水平下调。生物信息分析筛选的16条lncRNA,其染色体定位于附近蛋白质编码基因的基因间区或者与外显子区域有重叠,mRNA功能注释显示差异表达的mRNA主要集中于转录调节、磷酸化、凋亡等生化过程以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等抗结核的信号通路中。在H37Rv作用下的细胞水平和动物感染模型的组织中RT-q PCR验证出与芯片结果相同的4条lncRNA,其中上调的有3条,下调的有1条。研究中异常表达的lncRNA可为巨噬细胞在结核分枝杆菌感染中的功能紊乱提供线索,为后续的研究奠定基础,进一步的研究将集中于发掘lncRNA在宿主调控中发挥的功能。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌(m.tb) 巨噬细胞 长链非编码RNA MRNA 芯片分析
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结核分枝杆菌Ag85B DNA疫苗免疫效果的初步评价 被引量:5
3
作者 王娜 刘琼 +5 位作者 杨雨欣 李慧 张炜 马国荣 陈耀庚 万巧凤 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1427-1431,共5页
目的初步评价结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Ag85B DNA疫苗的免疫效果。方法对含HSV2-gD信号肽基因和Rv1886c基因(共963 bp核苷酸序列)的重组质粒pcD-sRv1886c进行双酶切和测序鉴定。将鉴定正确的重组质粒pcD-s Rv1886... 目的初步评价结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Ag85B DNA疫苗的免疫效果。方法对含HSV2-gD信号肽基因和Rv1886c基因(共963 bp核苷酸序列)的重组质粒pcD-sRv1886c进行双酶切和测序鉴定。将鉴定正确的重组质粒pcD-s Rv1886c转染CHO细胞,Western blot法检测CHO细胞培养液中Ag85B蛋白的表达情况。将重组质粒pcD-sRv1886c经肌肉注射免疫C57BL/6J小鼠,共免疫2次,间隔14 d,首次免疫后14、28及42 d经小鼠眼眶后静脉丛采血,分离血清,间接ELISA法检测小鼠血清中IgG及IgG1抗体效价;首次免疫后42 d无菌取小鼠脾脏,制成单细胞悬液,流式细胞术检测分泌IFNγ^(+)的CD4^(+)T及CD8+T细胞比例,CCK8法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果双酶切和测序鉴定证明重组质粒pcD-sRv1886c构建正确,转染CHO细胞后表达的蛋白可与鼠抗Ag85B单克隆抗体发生特异性结合。首次免疫后14 d,重组质粒免疫组小鼠血清中IgG及IgG1特异性抗体效价分别为1∶1720和1∶460,28 d后为1∶5760和1∶2560,42 d后为1∶6080和1∶2720。首次免疫后42 d,重组质粒免疫组和PBS阴性对照组小鼠脾细胞中CD3^(+)CD4^(+)IFNγ^(+)细胞比例分别为(2.03±0.23)%和(0.14±0.02)%,CD3^(+)CD8+IFNγ^(+)细胞比例分别为(1.05±0.08)%和(0.13±0.01)%,差异均有统计学意义(t分别为18.38和11.58,P均<0.001)。重组质粒免疫组小鼠脾淋巴细胞SI为5.02,明显高于PBS对照组(1.06),且差异有统计学意义(t=15.66,P<0.001)。结论M.tb Ag85B DNA疫苗可有效诱导机体产生体液免疫及细胞免疫效应。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 DNA疫苗 Ag85B蛋白
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结核分枝杆菌Rv0057-Rv1352融合蛋白的制备及其初步应用 被引量:2
4
作者 阳幼荣 冯金栋 +6 位作者 张俊仙 赵卫国 刘宇 梁艳 白雪娟 王兰 吴雪琼 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第6期851-855,共5页
目的制备结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Rv0057-Rv1352融合蛋白,并通过化学发光酶免疫法分析其抗原性,以评价其应用价值。方法根据Rv0057和Rv1352蛋白序列,合成Rv0057和Rv1352基因片段并进行扩增,分别插入质粒pET30aSET... 目的制备结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Rv0057-Rv1352融合蛋白,并通过化学发光酶免疫法分析其抗原性,以评价其应用价值。方法根据Rv0057和Rv1352蛋白序列,合成Rv0057和Rv1352基因片段并进行扩增,分别插入质粒pET30aSETB中,构建重组质粒Rv0057/pET30aSETB和Rv1352/pET30aSETB。用NheⅠ和XhoⅠ双酶切重组质粒Rv1352/pET30aSETB,SpeⅠ和XhoⅠ双酶切重组质粒Rv0057/pET30aSETB,将回收的Rv1352基因片段插入Rv0057/pET30aSETB质粒中,构建重组质粒Rv0057-Rv1352/pET30aSETB,转化感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的包涵体蛋白经His.Bind蛋白纯化试剂盒纯化后,以其作为抗原建立化学发光酶免疫分析法,检测患者血清中抗结核抗体,并与市售M.tb抗体诊断试剂盒和痰涂片法进行比较。结果构建的重组质粒Rv0057-Rv1352/pET30aSETB的核苷酸序列与设计序列完全一致;表达的重组融合蛋白Rv0057-Rv1352相对分子质量约为30 500,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的30%;纯化的重组融合蛋白的浓度为1.6 mg/ml,纯度为95%;以其为抗原建立的化学发光酶免疫分析法检测患者血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性分别为66.70%和90.00%,而市售M.tb抗体诊断试剂盒的灵敏度和特异性分别为80.00%和63.33%;30例活动性肺结核患者经痰涂片检测,灵敏度为20.0%,化学发光酶免疫分析法检测灵敏度为66.7%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功制备了M.tb Rv0057-Rv1352融合蛋白,以其为抗原建立的化学发光酶免疫分析法检测抗结核抗体具有较高的灵敏度和特异性,在结核病血清学快速诊断方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv0057抗原 Rv1352抗原 融合蛋白 抗体
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结核杆菌对利福平耐药的分子机理的研究 被引量:1
5
作者 李燕 杨正林 +1 位作者 杜琼 李明远 《四川省卫生管理干部学院学报》 2002年第1期1-2,共2页
目的 :研究本地区临床分离的结核杆菌利福平 (RFP)耐药表型与rpoB基因突变的关系。方法 :应用全自动DNA测序仪对 1株RFP敏感株和 2株RFP耐药株的rpoB基因的突变集中区域进行了测序分析。结果 :RFP敏感株证实无rpoB基因突变 ,而 2株RFP... 目的 :研究本地区临床分离的结核杆菌利福平 (RFP)耐药表型与rpoB基因突变的关系。方法 :应用全自动DNA测序仪对 1株RFP敏感株和 2株RFP耐药株的rpoB基因的突变集中区域进行了测序分析。结果 :RFP敏感株证实无rpoB基因突变 ,而 2株RFP耐药株均发生rpoB基因的碱基置换突变 ,1株为Leu511→Val ,Ser53 1→Leu ;另一株为Ser512 →Gly。结论 展开更多
关键词 结核杆菌 耐药 RPOB基因
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结核分枝杆菌复苏因子D的克隆及测序分析
6
作者 佴静 朱雪薇 刘忠泉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期2359-2361,共3页
目的克隆结核分枝杆菌Rv2389c基因。方法常规方法提取结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA,PCR扩增结核分枝杆菌Rv2389c基因,经内切酶酶切、胶回收,将片段亚克隆到T载体中,转化至DH5α。以PCR鉴定的阳性菌落转至LB中培养,菌液进行质粒提取、酶... 目的克隆结核分枝杆菌Rv2389c基因。方法常规方法提取结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA,PCR扩增结核分枝杆菌Rv2389c基因,经内切酶酶切、胶回收,将片段亚克隆到T载体中,转化至DH5α。以PCR鉴定的阳性菌落转至LB中培养,菌液进行质粒提取、酶切、胶回收,回收片段再克隆至表达载体pET30a中,转化至DH5α中。PCR阳性菌落转至LB中培养,测序确定插入片段的正确性。结果构建了Rv2389c重组表达质粒PET30a-Rv2389c。结论成功克隆了结核分枝杆菌复苏因子Rv2389c基因。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 复苏因子 克隆 测序分析
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高糖上调肺泡上皮细胞大麻素受体1表达加重结核分枝杆菌感染引起的细胞损伤
7
作者 马庭喜 唐朦 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期1234-1239,共6页
目的探讨大麻素受体(CB)1对高糖环境下结核分枝杆菌(M.tb)感染的肺泡上皮细胞损伤模型细胞生物学的调节作用。方法使用0、5、10、25、50 mmol/L葡萄糖分组培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,检测CB1在高糖环境下的表达变化。将A549细胞进行分组... 目的探讨大麻素受体(CB)1对高糖环境下结核分枝杆菌(M.tb)感染的肺泡上皮细胞损伤模型细胞生物学的调节作用。方法使用0、5、10、25、50 mmol/L葡萄糖分组培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,检测CB1在高糖环境下的表达变化。将A549细胞进行分组:空白对照(NC)组、高糖(HG)组、M.tb组、高糖M.tb(HG+M.tb)组、CB1激动剂处理(HG+M.tb+WIN)组及拮抗剂处理(HG+M.tb+LM)组,构建高糖环境下M.tb感染的肺泡上皮细胞损伤模型,对细胞活力、凋亡、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子水平等进行检测,探讨CB1在高糖环境下对M.tb感染细胞的生物学特性的影响。结果A549细胞中CB1受体的表达随葡萄糖浓度的升高发生上调。与对照组相比,高糖环境或者M.tb感染均导致A549细胞活力显著下降,炎性分子水平显著升高(P<0.05);而与单独高糖处理或者M.tb感染相比,高糖共M.tb感染导致细胞活力显著下降,炎性因子水平显著升高(P<0.05)。CB1受体激动剂共处理能显著降低A549细胞活力(P<0.05),提高凋亡率及炎症因子水平[肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-6和IL-8],上调Toll样受体(TLR)炎症通路蛋白水平。而CB1受体拮抗剂作用后,A549细胞活力增强,凋亡率下降,炎症因子水平降低,TLR炎症通路蛋白水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高糖环境导致的肺泡上皮细胞表面大麻素CB1受体上调促进M.tb感染后A549细胞的损伤。 展开更多
关键词 肺结核 合并糖尿病 结核分枝杆菌(m.tb) 大麻素受体1
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抗结核治疗中患者外周结核分枝杆菌抗原水平与特异性免疫应答相关性分析 被引量:12
8
作者 梁宇硕 陈颖盈 +4 位作者 蔡潭溪 季萍 胡晔 程齐俭 王颖 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期203-209,共7页
目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原... 目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原特异性T细胞应答水平的动态变化,探讨外周抗结核特异性细胞免疫应答的理论依据。方法:利用外周血抗原富集-质谱鉴定技术动态检测外周血浆中结核特异性抗原CFP-10在患者抗结核治疗过程中含量的动态变化,并采用流式细胞术同步分析CFP-10刺激后的T细胞应答水平,分析CFP-10含量变化与不同细胞因子分泌T细胞数量的相关性。结果:CFP-10抗原水平在患者治疗过程中呈现个体化差异,同时在TB治疗中CFP-10含量与CFP-10特异性IFN-γ^+CD4^+T细胞比例具有显著相关性(P=0.029),但是CFP-10的含量与TNF-α^+CD4^+T细胞比例之间则无相关性(P=0.98)。结论:本研究获得了结核病患者治疗过程中外周结核病原菌抗原的动态变化特征,据此可推断目前所采用的IFN-γ释放实验某种程度上可以反映患者外周结核分枝杆菌抗原的载量,上述基于结核病原学和机体免疫应答水平的同步检测,有利于进一步解析抗结核免疫应答的抗原驱动因素,并为建立新型抗结核治疗疗效评价的生物标志物提供前期理论依据。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌特异性抗原 CFP-10 抗原特异性细胞免疫反应
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结核分枝杆菌ESAT6-Fc DNA疫苗的免疫效应评价 被引量:2
9
作者 姚思 杨洁琼 +5 位作者 杨雨欣 李慧 王天松 张炜 马国荣 万巧凤 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期897-901,共5页
目的 评价结核分枝杆菌ESAT6-Fc DNA疫苗的免疫效应,为下一步疫苗抗M.tb感染的保护性试验奠定基础。方法 将雌性C57BL/6J小鼠随机分为2组,每组5只,分别经大腿肌内注射含HSV2gD信号肽基因、Rv3875基因和小鼠Fc基因(共1 116 bp核苷酸)的... 目的 评价结核分枝杆菌ESAT6-Fc DNA疫苗的免疫效应,为下一步疫苗抗M.tb感染的保护性试验奠定基础。方法 将雌性C57BL/6J小鼠随机分为2组,每组5只,分别经大腿肌内注射含HSV2gD信号肽基因、Rv3875基因和小鼠Fc基因(共1 116 bp核苷酸)的重组质粒pcD-ESAT6-Fc及PBS,剂量均为50μg/条腿,共100μg。初次免疫后每周免疫1次,连续免疫3次。初次免疫后14、28、42 d采血,分离血清,采用间接ELISA法检测血清中IgG、IgG1及IgG2a抗体效价;采集初次免疫后42 d的血清及脾脏,分离脾细胞,采用流式细胞术检测分泌IFNγ的CD4^(+)及CD8^(+)T细胞比例,ELISA法检测血清中IFNγ和IL-2含量。结果 初次免疫后14 d,重组质粒免疫组小鼠血清中即可检测到特异性IgG、IgG1及IgG2a抗体,且抗体效价持续升高;初次免疫后42 d,重组质粒免疫组CD3^(+)CD4^(+)IFNγ^(+)和CD3^(+)CD8^(+)IFNγ^(+)细胞比例以及IFNγ和IL-2含量均显著高于PBS组(t分别为12.43、13.35、7.04和6.65,P均<0.001)。结论 重组质粒pcDESAT6-Fc可有效诱导小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,为ESAT6-Fc DNA疫苗的进一步研制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv3875基因 真核表达载体 体液免疫 细胞免疫 DNA疫苗
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结核分枝杆菌潜伏期抗原Rv3044的原核表达及其免疫原性 被引量:2
10
作者 张京燕 郭旭霞 王晓春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第7期748-753,761,共7页
目的表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)潜伏期特异抗原Rv3044,并检测其能否被结核(tuberculosis,TB)感染者外周血T细胞识别,及其在小鼠模型中的免疫原性。方法以分子克隆技术构建质粒pET28aRv3044,IPTG诱导表达、亲和... 目的表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)潜伏期特异抗原Rv3044,并检测其能否被结核(tuberculosis,TB)感染者外周血T细胞识别,及其在小鼠模型中的免疫原性。方法以分子克隆技术构建质粒pET28aRv3044,IPTG诱导表达、亲和层析纯化r Rv3044蛋白,Western blot法进行鉴定;全血IFNγ分析试验(whole blood IFNγanalysis test,WBIA)检测其是否被TB感染者识别;联合融合佐剂DMT免疫C57BL/6小鼠,检测特异性CD4+Th1型应答和体液免疫应答水平。结果构建的重组表达质粒p ET28a-Rv3044经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达及纯化的rRv3044蛋白相对分子质量均为38600。r Rv3044刺激的TB感染者,尤其TB潜伏感染(latent TB infection,LTBI)者,外周血T细胞分泌的IFNγ水平均显著高于健康对照者(P<0.05);BCG+rRv044/DMT组诱导小鼠产生显著高水平的IgG抗体及其亚类,趋向于Th1型免疫应答,同时诱导小鼠脾细胞分泌高水平的特异性IFNγ和TNF-α。结论r Rv3044可被TB感染者T细胞识别,具有较强的免疫原性,为具有潜力的TB候选疫苗靶抗原,可用于TB感染尤其是潜伏感染的预防及诊断。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 Rv3044 原核表达 免疫原性
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结核病亚单位疫苗的临床研究进展 被引量:5
11
作者 杜京津 逄宇 李凌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期673-677,共5页
结核病是造成全世界成年人死亡的主要传染病,在过去25年里也一直是全球公共卫生的挑战。目前唯一批准的结核疫苗只有卡介苗,因此开发安全有效的新型结核疫苗任重而道远。重组亚单位疫苗成分明确、安全性高、可诱导高效的免疫应答、提供... 结核病是造成全世界成年人死亡的主要传染病,在过去25年里也一直是全球公共卫生的挑战。目前唯一批准的结核疫苗只有卡介苗,因此开发安全有效的新型结核疫苗任重而道远。重组亚单位疫苗成分明确、安全性高、可诱导高效的免疫应答、提供长期的免疫保护效果,因而具有较好的应用前景。本文针对结核病重组亚单位疫苗的组分、临床研究现状、应用等方面的进展进行综述。 展开更多
关键词 结核病 结核分枝杆菌 亚单位疫苗 抗原 佐剂
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结核分枝杆菌Ag85B-Fc2a DNA疫苗的免疫原性及免疫保护性评价
12
作者 王天松 杨媛 +4 位作者 姚思 杨雨欣 王婧 张炜 万巧凤 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第7期806-810,816,共6页
目的 评价结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Ag85B-Fc2a DNA疫苗在小鼠体内产生的免疫原性及免疫保护性,以期为该疫苗的研发提供实验依据。方法 将重组质粒pcD-Ag85B-Fc2a经双酶切和测序鉴定后,转染CHO-K1细胞,采用Western... 目的 评价结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)Ag85B-Fc2a DNA疫苗在小鼠体内产生的免疫原性及免疫保护性,以期为该疫苗的研发提供实验依据。方法 将重组质粒pcD-Ag85B-Fc2a经双酶切和测序鉴定后,转染CHO-K1细胞,采用Western blot法检测融合蛋白Ag85B-Fc2a的表达。将载体pcDNA3.1(+)及重组质粒pcD-Ag85BFc2a经大腿肌内分别注射雌雄C57BL/6J小鼠(对照组及免疫组),每组10只,初次免疫后2周进行加强免疫。初次免疫后14、28及42 d,经小鼠眼眶采血,分离血清,采用间接ELISA法检测血清中IgG抗体效价;初次免疫后42 d,无菌取小鼠脾脏,制备为单细胞悬液,采用流式细胞术检测CD4^(+)及CD8^(+)T细胞比例;初次免疫后42 d,经尾静脉注射M.tb H37Ra,10~6 CFU/只,攻毒28 d后,断颈处死小鼠,无菌分离小鼠肺脏及脾脏,采用平板法检测左侧肺脏及脾脏荷菌数,金胺O荧光染色法检测右侧肺脏的荷菌情况。结果 经双酶切及测序鉴定,重组质粒pcD-Ag85B-Fc2a构建正确,转染CHO-K1细胞后,可检测到相对分子质量约70 000的融合蛋白Ag85B-Fc2a。初次免后14、28、42d,免疫组小鼠血清Ag85B特异性IgG抗体效价分别为1:3 200、1:12 160、1:12 800,对照组小鼠血清中均未检测到抗体效价。初次免疫后42 d,对照组及免疫组小鼠脾脏中CD4+T细胞比例分别为(23.61±0.64)%及(26.92±0.80)%,CD8^(+)T细胞比例分别为(14.12±0.87)%及(18.78±0.94)%,差异均有统计学意义(t分别为3.23和3.64,P均<0.05)。M.tb H37Ra感染28 d,对照组及免疫组小鼠左侧肺脏荷菌数分别为(4.73±0.13)及(3.81±0.14) CFU,脾脏荷菌数分别为(5.02±0.19)及(4.30±0.13) CFU,差异均有统计学意义(t分别为4.65和3.12,P均<0.01);右侧肺脏荷菌情况与左侧一致。结论 Ag85B-Fc2a DNA疫苗在小鼠体内可诱导特异性体液及细胞免疫效应,对M.tb H37Ra感染可产生良好的保护力。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 DNA疫苗 体液免疫 细胞免疫 保护力
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结核分枝杆菌通过诱导宿主产生S100A8/A9促进T细胞死亡的机制研究 被引量:2
13
作者 孙月华 杨玉玲 +4 位作者 李林昊 屈沛杰 柳卫凰 章晓联 潘勤 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第1期49-54,共6页
目的探讨结核分枝杆菌(Mtb)诱导宿主产生的S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)促进T细胞死亡的作用及机制。方法灭活毒性Mtb H37Rv(iMtb H37Rv)与野生型(WT)小鼠全脾细胞体外共同培养不同时间,通过流式细胞术得到S100A8与S100A9的表... 目的探讨结核分枝杆菌(Mtb)诱导宿主产生的S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)促进T细胞死亡的作用及机制。方法灭活毒性Mtb H37Rv(iMtb H37Rv)与野生型(WT)小鼠全脾细胞体外共同培养不同时间,通过流式细胞术得到S100A8与S100A9的表达差异以及产生S100A8/A9的细胞群。Mtb H37Rv体外诱导WT和S100a9^(-/-)小鼠全脾细胞,通过流式细胞术检测S100A8/A9对CD4^(+)T细胞死亡的影响。采用不同浓度S100A8/A9与人T淋巴细胞系Jurkat细胞共同培养、S100A8/A9与细胞共培养不同时间或是S100A8、S100A9单体以及S100A8/A9复合物与细胞共同培养,通过流式细胞术得到S100A8/A9对Jurkat细胞死亡的影响。通过Western blot检测不同细胞表面TLR4的表达差异。封闭Jurkat细胞表面TLR4受体后与S100A8/A9共同培养,通过流式细胞术得到Jurkat细胞死亡的变化。结果与对照组相比,iMtb H37Rv能诱导脾细胞产生更多的S100A8和S100A9蛋白。S100A8/A9能促进小鼠CD4^(+)T细胞死亡。低剂量的S100A8/A9复合物能诱导Jurkat细胞死亡,且S100A8和S100A A9单体无以上作用。S100A8/A9复合物诱导T细胞死亡为TLR4非依赖通路。结论Mtb通过诱导宿主产生S100A8/A9并促进T细胞死亡。 展开更多
关键词 S100A8/A9 CD3^(+)CD4^(+)T细胞 Mtb H37Rv 细胞死亡
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Annexin 1抑制BCG诱导的巨噬细胞RAW246.7细胞炎性应答及凋亡 被引量:2
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作者 姬文兰 王启源 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第8期1121-1126,共6页
目的建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用。方法用BCG感染RAW246.7细胞。用RT-q PCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达。Western blot检测ANXA1及... 目的建立体外结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型,探讨膜联蛋白A1(ANXA1)对卡介苗(BCG)菌株诱导的RAW246.7细胞炎性反应及凋亡的调控作用。方法用BCG感染RAW246.7细胞。用RT-q PCR检测ANXA1、IL-6和TNF-αmRNA表达。Western blot检测ANXA1及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及caspase-3的表达;用MTT检测细胞存活率;用ELISA检测细胞的凋亡率;ELISA试剂盒检测细胞因子IL-6和TNF-α的含量。结果 ANXA1在BCG感染的巨噬细胞RAW246.7中明显下调(P<0.05),并呈时间依赖性。ANXA1高表达显著降低BCG刺激诱导的炎性细胞因子IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.05)。此外,过表达ANXA1明显提高BCG感染的巨噬细胞的存活率(P<0.05),并抑制细胞凋亡,通过上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达同时下调促凋亡蛋白Bax的表达水平(P<0.05),并降低caspase-3的蛋白表达量(P<0.05)。结论 ANXA1能够抑制BCG刺激诱导巨噬细胞的炎性应答进程及凋亡,为结核病的临床研究和治疗提供了理论基础。 展开更多
关键词 膜联蛋白A1(ANXA1) 细胞凋亡 炎性应答 结核分枝杆菌
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Antigen-Specific Antibody Profiles in TB-Exposed and Infected Patients: A Cohort Study from Pakistan
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作者 Hina Farzana Natasha Anwar 《Journal of Tuberculosis Research》 2024年第4期203-214,共12页
Background: Circulating antibodies against specific M. tuberculosis (M. tb) antigens offer promising diagnostic biomarkers and an appealing alternative due to their ease of application, cost-effectiveness, and relativ... Background: Circulating antibodies against specific M. tuberculosis (M. tb) antigens offer promising diagnostic biomarkers and an appealing alternative due to their ease of application, cost-effectiveness, and relatively non-invasive nature. This study aimed to quantify and characterize the IgG antibody response against a panel of eight Mycobacterium tuberculosis (M. tb) antigens in TB-exposed and infected patients. The overarching hypothesis was that the IgG profiles and median fluorescence intensity (MFI) against each M. tb antigen could potentially differentiate between pulmonary, extrapulmonary, index contacts and healthy controls in a high TB burden setting. Methods: A multiplex microbead immunoassay (MMIA) was used to measure the serological response in 524 blood samples against eight M. tb antigens namely Rv-3881, Ag85-a, Ag85-b, Ag85-c, P-38, HspX, CFP-10 and MPT-32, with antibody concentrations determined using MFI and antigen’s cut off was established to determine the percentage of patients with positive antibody response for each antigen. Diagnostic accuracy of panel antigens was determined through ROC (Receiver operating characteristic) curve analysis and AUC (area under the curve) with 95% CI by using SPSS version 22. Results: ROC analysis demonstrated that all eight TB antigens in the panel are suitable for diagnosing TB infection in endemic areas, with an AUC ranging from 0.996 to 0.999 (p Conclusions: The M. tb antigen-specific IgG antibody profiles, with established cutoffs, could be incorporated into current immunological tests to enable rapid and accurate diagnosis and differentiation of TB infection types in TB endemic settings. 展开更多
关键词 M. tuberculosis (M. tb) MMIA Antibody Response
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结核分支杆菌耐药机制的研究
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作者 潘荣辉 陈智强 +2 位作者 李真 郭文丽 付文颖 《吉林畜牧兽医》 2005年第9期10-14,共5页
结核分支杆菌(结核杆菌,Mycobacterium TuberculoSiS,M.TB)已经对多种药物产生耐药性,使得对结核病的治疗无效或者疗效降低,导致近年来结核病的发病率呈上升趋势。本文综述了结合分支杆菌对几种药物产生的耐药性的机理。
关键词 结核分支杆菌 耐药性 耐药机理
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两种结核分枝杆菌快速检测方法的比较
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作者 吴健 张建明 +5 位作者 何洪涛 陈建东 黄永欣 雷兆良 朱云枫 黄红敏 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2011年第5期315-317,325,共4页
目的比较荧光定量PCR检测和直接扩增检测两种方法对结核分枝杆菌检测的敏感性、特异性,及在国境口岸卫生检疫工作中的应用前景。方法应用结核分枝杆菌荧光定量PCR和直接扩增检测47份疑似或确诊活动性肺结核空腹痰标本,并与液体培养结果... 目的比较荧光定量PCR检测和直接扩增检测两种方法对结核分枝杆菌检测的敏感性、特异性,及在国境口岸卫生检疫工作中的应用前景。方法应用结核分枝杆菌荧光定量PCR和直接扩增检测47份疑似或确诊活动性肺结核空腹痰标本,并与液体培养结果进行比较。结果荧光定量PCR法与直接扩增法对结核分枝杆菌检测敏感性分别为46.7%和100%,特异性分别为81.2%和84.4%。结论结核分枝杆菌直接扩增检测是一种较为敏感而特异的快速检测方法,在国境口岸卫生检疫部门具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 液体培养 荧光定量PCR 结核分枝杆菌直接扩增检测
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