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lncRNA Terc调控NLRP3对冠状动脉内皮细胞End-MT的影响
1
作者 王娟 祖力开尔·吐尔逊 +1 位作者 郑丽华 吕忠英 《医学研究杂志》 2025年第8期56-62,87,共8页
目的探究lncRNA Terc在人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cell,HCAEC)内皮间质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)中的功能及机制。方法以转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)... 目的探究lncRNA Terc在人冠状动脉内皮细胞(human coronary artery endothelial cell,HCAEC)内皮间质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)中的功能及机制。方法以转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)为诱导剂,构建HCAEC End-MT模型,并通过质粒转染敲低或过表达lncRNA Terc,或联合NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎性小体抑制剂、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)抑制剂干预细胞。采用CCK-8实验及Transwell实验检测细胞的增殖活力及迁移能力;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测炎性细胞因子的表达差异;Western blot法检测纤维化相关蛋白及炎性小体标志蛋白的表达水平;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测lncRNA Terc的表达水平。结果lncRNA Terc在End-MT细胞模型中表达上调(P<0.01);敲低lncRNA Terc后,HCAEC的增殖活力及迁移能力显著下降,α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、NLRP3炎性小体标志蛋白表达、炎性细胞因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)表达也显著下调(P<0.01),而过表达lncRNA Terc的结果则与之相反;NLRP3炎性小体抑制剂可以削弱lncRNA Terc对End-MT的诱导作用;加入NF-κB抑制剂后,NLRP3、胱冬肽酶-1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、IL-1β、IL-18的蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论lncRNA Terc可以通过调控NF-κB/NLRP3通路促进HCAEC的End-MT。 展开更多
关键词 心肌纤维化 内皮间质转化 lncrna terc NF-κB/NLRP3通路
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LncRNA TERC调控H3K27me3、DKK1在地塞米松干预间充质干细胞成骨细胞分化中的相关研究 被引量：1
2
作者 韩锁 齐岩松 +4 位作者 贾鹏 孙官文 王剑 呼和 高锦 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2024年第4期67-72,77,共7页
目的 研究地塞米松干预骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化后,过表达LncRNA TERC对组蛋白H3K27三甲基化(H3K27me3)及DKK1表达的影响,从而进一步验证其对成骨分化的作用。方法 (1)地塞米松干预BMSCs... 目的 研究地塞米松干预骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化后,过表达LncRNA TERC对组蛋白H3K27三甲基化(H3K27me3)及DKK1表达的影响,从而进一步验证其对成骨分化的作用。方法 (1)地塞米松干预BMSCs成骨分化,实验分为对照组(单纯成骨诱导组)及干预组(地塞米松干预成骨组),第14天使用茜素红染色检测的成骨分化能力,RT-PCR检测第3、7、14、21 d各组细胞中BMP-2、SMAD-1、Dlx5、Dlx3等成骨相关基因的表达。(2)地塞米松干预BMSCs成骨分化,构建TERC过表达载体,分别设置:空白对照组(地塞米松干预成骨组)、空白载体组、TERC过表达组。RT-PCR检测第3、7、14、21 d各组细胞中BMP-2、SMAD-1、Dlx5、Dlx3等成骨相关基因的表达,Western blot实验检测各组细胞中H3K27me3、DKK1的蛋白水平。结果 (1)地塞米松干预BMSCs成骨分化后,茜素红染色显示其成骨能力下降(P均<0.05),且RT-PCR显示,随着地塞米松干预时间的延长,BMP-2、SMAD-1、Dlx5、Dlx3等成骨相关基因均下调(P均<0.05)。(2)TERC过表达转染实验中,TERC过表达组细胞中BMP-2、SMAD-1、Dlx5、Dlx3等成骨相关基因与其他两组比较均上调(P均<0.05),其他两组以上成骨基因表达水平比较,差异无统计学意义(P均>0.05);TERC过表达组细胞中H3K27me3的蛋白表达水平较其他两组显著上升(P均<0.05),DKK1的蛋白水平较其他两组显著下降(P均<0.05)。其他两组中以上基因蛋白表达水平相近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 过表达LncRNA TERC能够显著调高地塞米松干预BMSCs向成骨细胞分化能力,并与H3K27me3及DKK1在地塞米松干预BMSCs向成骨细胞分化中存在有相关性。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 地塞米松 lncrna terc H3K27me3 DKK1
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六价铬通过lncRNA TERC对BEAS-2B细胞KLHL20与EHBP1L基因表达的影响
3
作者 徐彪 冯玲芳 +4 位作者 潘思苗 钱秋茜 李晓东 陈俊斐 楼建林 《工业卫生与职业病》 CAS 2024年第6期481-487,共7页
目的探究六价铬暴露对BEAS-2B细胞长链非编码RNA TERC及下游靶基因KLHL20和EHBP1L基因表达的影响,为六价铬致癌机制研究提供新思路。方法采用CCK8法检测不同浓度六价铬(K2Cr2O7)对BEAS-2B细胞活力的影响,选择不同浓度六价铬处理细胞24... 目的探究六价铬暴露对BEAS-2B细胞长链非编码RNA TERC及下游靶基因KLHL20和EHBP1L基因表达的影响,为六价铬致癌机制研究提供新思路。方法采用CCK8法检测不同浓度六价铬(K2Cr2O7)对BEAS-2B细胞活力的影响,选择不同浓度六价铬处理细胞24、48和72 h,或连续染毒7 d,采用实时荧光定量PCR法(RT-q PCR法)检测lncRNA TERC及其靶基因(KLHL20和EHBP1L1)表达水平变化。通过转染实验敲减或过表达BEAS-2B细胞lncRNA TERC后,选用1.00μmol/L六价铬染毒24 h,检测lncRNA TERC及其靶基因表达水平的变化。结果染毒24、48、72 h,六价铬处理组的细胞存活率随着染毒浓度的升高而逐渐降低(F=7.88、340.26、655.78,P<0.05)。不同浓度六价铬处理细胞24 h,lncRNA TERC与其靶基因KLHL20和EHBP1L1的表达水平随着六价铬浓度的升高而升高,呈现一定的浓度-效应关系(F=28.99、10.82、39.11,P<0.05)。0.50μmol/L六价铬处理BEAS-2B细胞1、3、5、7 d,lncRNA TERC的表达水平随着染毒时间的增加而升高(F=7.16,P<0.05),EHBP1L1的转录水平先升高后降低(F=37.34,P<0.05)。敲减lncRNA TERC后,KLHL20和EHBP1L1的表达水平为(0.90±0.01,0.83±0.01)低于对照组(1.00±0.04,1.00±0.05,F=176.40,74.40,P<0.05),而过表达lncRNA TERC后,KLHL20和EHBP1L1的表达水平为(1.20±0.06,1.67±0.15)均高于对照组(1.00±0.04,1.00±0.05,F=176.40、74.40,P<0.05)。结论六价铬可能通过lncRNA TERC调控BEAS-2B细胞下游靶基因KLHL20和EHBP1L1的表达。 展开更多
关键词 六价铬 lncrna terc KLHL20 EHBP1L1
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