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沉默lncRNA TPT1-AS1对非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制研究 被引量：1
1
作者 惠珂 霍树芬 +2 位作者 刘凌华 王君 田应选 《临床肺科杂志》 2021年第10期1545-1550,共6页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及对沉默lncRNA TPT1-AS1非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制。方法检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织lncRNA TPT1-AS1表达情况,做细胞培养及lncRNA TPT1-AS1转染,分为... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织中的表达及对沉默lncRNA TPT1-AS1非小细胞肺癌生物学行为的影响及机制。方法检测非小细胞肺癌组织和癌旁组织lncRNA TPT1-AS1表达情况,做细胞培养及lncRNA TPT1-AS1转染,分为空白组、过表达组、沉默组,过表达组转染si-TPT1-AS1-NC质粒,沉默组转染si-TPT1-AS1质粒,空白组细胞不做任何处理,转染24h后鉴定转染效率。检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及PTEN-PI3K-AKT信号通路蛋白表达情况。结果与癌旁组织相比,癌组织TPT1-AS1 mRNA表达量升高(P<0.05)。与空白组相比,过表达组TPT1-AS1 mRNA表达量升高,沉默组TPT1-AS1 mRNA表达量降低(P<0.05),说明转染成功。与过表达组相比,沉默组各时间点细胞增殖率、细胞迁移数、侵袭数、p-PI3K、p-AKT、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,凋亡率、PTEN、Bax蛋白表达量升高(P<0.05)。结论lncRNA TPT1-AS1在非小细胞肺癌组织高表达,沉默lncRNA TPT1-AS1可抑制肺癌细胞增殖、迁移、侵袭,促进凋亡,其机制可能与调控PTEN-PI3K-AKT信号通路相关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA tpt1-as1 非小细胞肺癌 细胞生物学行为 PTEN-PI3K-aKT信号通路
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敲减LncRNA TPT1-AS1抑制肝癌细胞侵袭及迁移
2
作者 刘清秀 汪晓梅 +3 位作者 吕娇健 卢毅 赵园 樊晓鹏 《世界华人消化杂志》 CAS 2021年第7期340-346,共7页
背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1(tumor protein translationally controlled regulator 1-antisence RNA 1,TPT1-AS1)TPT1-AS1可通过不同的作用方式影响肿瘤的侵袭转移,但其在肝癌中的... 背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1(tumor protein translationally controlled regulator 1-antisence RNA 1,TPT1-AS1)TPT1-AS1可通过不同的作用方式影响肿瘤的侵袭转移,但其在肝癌中的具体作用和相关作用机制还有待进一步的实验验证.目的探讨lncRNA TPT1-AS1在肝癌中的表达及其对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响.方法实时荧光定量PCR检测肝癌组织及肝癌细胞系(Huh7、SMMC-7721、HCCLM3和HepG2)中lncRNA TPT1-AS1的表达.靶向TPT1-AS1的小分子干扰RNA(siRNA targeted for TPT1-AS1,si-TPT1-AS1)转染后,经Transwell实验和划痕实验检测HepG2细胞侵袭及迁移能力的变化;Western blot评估上皮-间充质转分化进程(epithelial-mesenchymal transition,EMT)以及磷酸肌醇3激酶(phosphotylinosital 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)信号通路的活性.结果肝癌组织及肝癌细胞系(Huh7、SMMC-7721、HCCLM3和HepG2)中均可检测到lncRNA TPT1-AS1的高表达.转染siRNA-TPT1-AS1可抑制肝癌细胞HepG2的侵袭及迁移,同时抑制HepG2细胞的EMT进程.此外,下调lncRNA TPT1-AS1可抑制MMP-9的表达及PI3K/AKT信号通路的活性.结论LncRNA TPT1-AS1在肝癌中高表达.敲减lncRNA TPT1-AS1可抑制肝癌细胞HepG2的侵袭迁移,其作用机制可能与下调PI3K/AKT信号通路的活性以及下游基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)的表达,进而抑制细胞的EMT进程有关. 展开更多
关键词 lncrna tpt1-as1 肝癌 侵袭 迁移 PI3K/AKT
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lncRNA TPT1-AS1在正常与胃癌组织中的差异表达及其诊断、预后价值的评价 被引量：7
3
作者 方新鑫 孙明军 宫月华 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2019年第10期1113-1116,共4页
目的明确TPT1-AS1在胃癌及远端基本正常组织中的差异表达,探讨其表达水平与胃癌临床病理特征的相关性,评价其作为胃癌生物标志物的可能性。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)方法检测TPT1-AS1在胃癌患者的... 目的明确TPT1-AS1在胃癌及远端基本正常组织中的差异表达,探讨其表达水平与胃癌临床病理特征的相关性,评价其作为胃癌生物标志物的可能性。方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)方法检测TPT1-AS1在胃癌患者的肿瘤组织(73例)及远端基本正常组织(66例)标本的表达水平。结果TPT1-AS1在胃癌组织中的表达水平较远端基本正常组织低表达,其表达水平与胃癌临床病理特征如年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤生长部位等无相关性( P >0.05)。TPT1-AS1作为胃癌诊断生物标志物时,曲线下面积、灵敏度及特异性分别为0.641、72.6%及51.5%。生存分析结果显示,高表达患者预后优于低表达患者,但差异无统计学意义( P >0.05)。结论TPT1-AS1在胃癌组织中表达降低,具有作为胃癌诊断生物标志物的可能,本研究为胃癌的早诊、早治提供新的线索。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 诊断 tpt1-as1
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lncRNA PCBP1-AS1在子宫内膜癌组织中表达及对细胞增殖和侵袭的影响
4
作者 贾冬丽 齐晓臻 《医药论坛杂志》 2025年第13期1370-1374,共5页
目的探讨子宫内膜癌组织中lncRNA PCBP1-AS1表达,以及下调该基因对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞增殖及侵袭的影响。方法收集2018年3月至2021年3月在漯河市中心医院接受手术切除的子宫内膜癌患者121例,培养Ishiwaka细胞并分为siRNA组、NC组... 目的探讨子宫内膜癌组织中lncRNA PCBP1-AS1表达,以及下调该基因对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞增殖及侵袭的影响。方法收集2018年3月至2021年3月在漯河市中心医院接受手术切除的子宫内膜癌患者121例,培养Ishiwaka细胞并分为siRNA组、NC组和C组,分别转染PCBP1-AS1的小分子干扰序列,阴性对照序列及仅加入转染液,qRT-PCR检测组织和细胞中PCBP1-AS1表达,分别采用MTT实验、划痕实验和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果子宫内膜癌组织中PCBP1-AS1相对表达量高于癌旁组织,两者比较有显著差异(t=63.201,P<0.001);PCBP1-AS1在不同FIGO分期、分化程度和淋巴结转移的子宫内膜癌组织表达量差异有统计学意义(P<0.05);siRNA组细胞中PCBP1-AS1相对表达量低于NC组和C组(P<0.05);与NC组和C组比较,siRNA组细胞24 h、48 h、72 h和96 h时增殖活性明显降低(P<0.05),24 h和48 h时划痕愈合率均显著降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中PCBP1-AS1表达升高,抑制Ishiwaka细胞中PCBP1-AS1表达可减少细胞增殖,抑制细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 lncrna PCBP1-as1 临床指标 细胞增殖 细胞侵袭
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LncRNA CTBP1-AS2调节miR-433-3p/DPP8信号轴对急性髓系白血病细胞恶性生物学行为的影响
5
作者 刘苏慧 段丽娟 +2 位作者 李超 秦凡 尚淼 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第11期2631-2636,共6页
目的:探讨LncRNA C-末端结合蛋白-1反义RNA2(CTBP1-AS2)调节miR-433-3p/二肽基肽酶8(DPP8)信号轴对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学行为的影响。方法:AML细胞HL-60随机分为si-NC组、si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组、si-CTBP... 目的:探讨LncRNA C-末端结合蛋白-1反义RNA2(CTBP1-AS2)调节miR-433-3p/二肽基肽酶8(DPP8)信号轴对急性髓系白血病(AML)细胞恶性生物学行为的影响。方法:AML细胞HL-60随机分为si-NC组、si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组、si-CTBP1-AS2+anti-miR-433-3p组。CCK-8法和EdU染色检测HL-60细胞增殖;流式细胞术检测HL-60细胞凋亡;Transwell检测HL-60细胞迁移和侵袭;Western blot检测HL-60细胞PCNA、Bax、MMP-9、DPP8蛋白表达;ELISA检测HL-60细胞IFN-γ、IL-1β表达;双荧光素酶报告基因实验分析LncRNA CTBP1-AS2与miR-433-3p、miR-433-3p与DPP8的相互作用。结果:si-CTBP1-AS2组HL-60细胞LncRNA CTBP1-AS2、DPP8 mRNA、A_(450)、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、DPP8蛋白、IL-1β蛋白表达低于si-NC组,miR-433-3p表达、凋亡率、Bax蛋白、IFN-γ蛋白表达高于si-NC组(P<0.05);与si-CTBP1-AS2组、si-CTBP1-AS2+anti-NC组比较,si-CTBP1-AS2+anti-miR-433-3p组miR-433-3p、凋亡率、Bax蛋白、IFN-γ蛋白表达降低,DPP8 mRNA、A_(450)、EdU阳性细胞率、迁移细胞数、侵袭细胞数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、DPP8蛋白、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。LncRNA CTBP1-AS2靶向负调控miR-433-3p,miR-433-3p靶向负调控DPP8。结论:敲低LncRNA CTBP1-AS2可能抑制AML细胞恶性生物学行为,其机制可能通过调节miR-433-3p/DPP8信号轴实现。 展开更多
关键词 lncrna CTBP1-as2 miR-433-3p DPP8 急性髓系白血病
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LncRNA PSMA3-AS1调节miR-340-5p/TFAM轴对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响
6
作者 杨绪莉 王蕾 +2 位作者 黄实仁 梁海梅 欧宗兴 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第7期692-699,共8页
目的探究长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型反义RNA1(LncRNA PSMA3-AS1)调节微小RNA-340-5p(miR-340-5p)/线粒体转录因子A(TFAM)轴对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法将A549细胞分为NC组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3... 目的探究长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型反义RNA1(LncRNA PSMA3-AS1)调节微小RNA-340-5p(miR-340-5p)/线粒体转录因子A(TFAM)轴对肺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法将A549细胞分为NC组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor NC组、si-PSMA3-AS1+miR-340-5p inhibitor组。双荧光素酶实验和AGO2 RNA免疫沉淀分析LncRNA PSMA3-AS1、miR-340-5p、TFAM的相互作用;qRT-PCR检测正常人肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞A549中LncRNA PSMA3-AS1、miR-340-5p表达;Western blot检测BEAS-2B细胞、A549细胞TFAM蛋白表达;CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭和迁移;流式细胞术检测细胞中活性氧(ROS)含量;裸鼠异种移植实验检测肿瘤生长。结果与BEAS-2B细胞相比,A549细胞LncRNA PSMA3-AS1、TFAM水平显著上调,miR-340-5p表达显著下调(均P<0.05)。沉默LncRNA PSMA3-AS1可降低A549细胞增殖活力、迁移与侵袭细胞数,升高miR-340-5p表达、细胞凋亡率、ROS含量,并降低裸鼠肿瘤体积和肿瘤质量(均P<0.05);抑制miR-340-5p表达可减弱沉默LncRNA PSMA3-AS1对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和肿瘤生长的影响(均P<0.05);双荧光素酶实验和AGO2 RNA免疫沉淀证实LncRNA PSMA3-AS1负调控miR-340-5p,miR-340-5p负调控TFAM。结论干扰LncRNA PSMA3-AS1可诱导A549细胞凋亡,抑制A549细胞迁移、侵袭和增殖,其机制可能与提高miR-340-5p并降低TFAM表达有关。 展开更多
关键词 lncrna PSMA3-as1 miR-340-5p/TFAM轴 肺癌 增殖 凋亡
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LncRNA DNAH17-AS1在胃癌中的表达及意义
7
作者 张纯 张文波 蒋鹏程 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期110-117,共8页
目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)动力蛋白轴丝重链17的反义链1(dynein axonemal heavy chain 17-antisense strand 1,DNAH17-AS1)在胃癌组织中的表达水平和临床意义,以及对胃癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方... 目的:研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)动力蛋白轴丝重链17的反义链1(dynein axonemal heavy chain 17-antisense strand 1,DNAH17-AS1)在胃癌组织中的表达水平和临床意义,以及对胃癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测组织标本(108例胃癌组织及其相应的癌旁组织)、血浆标本(胃癌患者和健康体检者各25例)中lncRNA DNAH17-AS1相对表达;分析lncRNA DNAH17-AS1表达与胃癌患者临床病理特征的相关性。将胃癌AGS、HGC-27细胞分别分成si-NC对照组和siRNA敲减组,采用脂质体转染方法,分别转染si-NC和si-DNAH17-AS1,通过细胞计数、平板克隆形成实验及Transwell实验分别检测胃癌AGS、HGC-27细胞增殖、克隆、迁移及侵袭;采用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测胃癌细胞中相关基因mRNA和蛋白相对表达水平。结果:与癌旁组织相比,lncRNA DNAH17-AS1在胃癌组织中相对表达量明显增加(P<0.001);胃癌组织中lncRNA DNAH17-AS1相对表达量与患者TNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05);DNAH17-AS1高表达组患者5年生存率较低表达组明显降低(P<0.05);胃癌患者血浆中lncRNA DNAH17-AS1相对表达量较健康体检者明显增加(P<0.01);血浆DNAH17-AS1检测胃癌的ROC曲线下面积为0.721(P<0.01)。与si-NC对照组比较,siRNA敲减组胃癌AGS、HGC-27细胞增殖、克隆、迁移及侵袭明显降低(P均<0.001),E-cad mRNA和蛋白相对表达明显增加(P<0.01),而N-cad、Slug、Snail、ZEB1、MMP9、β-catenin mRNA和蛋白相对表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:LncRNA DNAH17-AS1在胃癌患者癌组织及血浆中呈高表达,且与患者不良预后相关;降低DNAH17-AS1表达可抑制胃癌细胞增殖、克隆、侵袭及迁移,其作用机制可能与调控上皮间充质转化相关分子表达有关。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA(lncrna) DNAH17-as1 上皮间充质转化(EMT)
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敲降人组织特异性lncRNA MEK6-AS1改善衰老间充质干细胞成骨分化能力
8
作者 陈运华 李迪 +3 位作者 赵晓妍 陈明 李红凌 赵春华 《基础医学与临床》 2025年第5期568-574,共7页
目的旨在探讨一条新发现的人组织特异性长链非编码RNA(lncRNA)MEK6-AS1在改善人间充质干细胞(hMSCs)衰老后的成骨分化能力中的作用及分子机制。方法建立体外hMSCs复制性衰老细胞模型,利用RT-qPCR检测MEK6-AS1在衰老过程中的表达差异;采... 目的旨在探讨一条新发现的人组织特异性长链非编码RNA(lncRNA)MEK6-AS1在改善人间充质干细胞(hMSCs)衰老后的成骨分化能力中的作用及分子机制。方法建立体外hMSCs复制性衰老细胞模型,利用RT-qPCR检测MEK6-AS1在衰老过程中的表达差异;采用慢病毒敲降技术抑制MEK6-AS1的表达,利用转录组测序技术分析MEK6-AS1对成骨相关转录组的影响;通过诱导细胞中成骨分化标志物的mRNA及蛋白质表达水平以及碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP活性,评估验证以MEK6-AS1为干预靶点对人衰老间充质干细胞成骨分化能力的改善效果。结果随着衰老的进展,hMSCs的成骨分化能力明显下降,MEK6-AS1的表达显著上调(P<0.0001)。在成骨诱导过程中,与衰老的对照组细胞相比,敲降MEK6-AS1的衰老细胞中成骨标志物的表达更高,诱导细胞的ALP活性更强(P<0.001)。结论敲降人组织特异性lncRNA MEK6-AS1可提升衰老MSCs的成骨分化能力,lncRNA MEK6-AS1可作为衰老相关骨质疏松防治的新靶点。 展开更多
关键词 间充质干细胞(MSCs) 衰老 成骨分化 长链非编码RNA(lncrna) MEK6-as1
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基于LncRNA ELFN1-AS1表达探究BrMC对溃疡性结肠炎相关结直肠癌变的调控作用
9
作者 张荣菊 苗玉 +1 位作者 周玮玮 田亮 《西部医学》 2025年第4期490-496,504,共8页
目的观察8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)对溃疡性结肠炎相关结直肠癌变(UCAC)小鼠的疗效,并基于长链非编码RNA(LncRNA)ELFN1-AS1表达探讨BrMC调控小鼠UCAC的分子机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)联合氧化偶氮甲烷(AOM)法构建小鼠UCAC模型,... 目的观察8-溴-7-甲氧基白杨素(BrMC)对溃疡性结肠炎相关结直肠癌变(UCAC)小鼠的疗效,并基于长链非编码RNA(LncRNA)ELFN1-AS1表达探讨BrMC调控小鼠UCAC的分子机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(DSS)联合氧化偶氮甲烷(AOM)法构建小鼠UCAC模型,将15只SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、BrMC组,每组5只。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测3组小鼠结肠组织ELFN1-AS1表达变化。另选取50只SPF级C58BL/6小鼠分为对照组、模型组、BrMC组、BrMC+NC组、BrMC+ELFN1-AS1组,每组10只,除对照组外的其余4组小鼠均构建UCAC模型,给予BrMC灌胃或尾静脉注射ELFN1-AS1阴性对照(NC)、过表达ELFN1-AS1质粒脂质体复合物;给药结束后,观察各组小鼠一般情况,测定各组小鼠的体质量与疾病活动指数(DAI),检查各组小鼠结肠病理学损伤及成瘤情况,苏木精-伊红(HE)染色观察各组小鼠结肠组织病理学变化,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位末端标记(TUNEL)染色检测各组小鼠结肠组织细胞凋亡情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组小鼠结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12水平,qRT-PCR检测各组结肠组织中ELFN1-AS1表达水平。结果模型组小鼠结肠组织内ELFN1-AS1相对表达量较对照组显著上调(P<0.05),BrMC组小鼠结肠组织内ELFN1-AS1相对表达量较模型组显著下调(P<0.05)。进一步研究表明,与模型组比较,BrMC组小鼠活动程度、精神状态等均得到明显改善,体质量显著升高(P<0.05),DAI评分显著降低(P<0.05),结肠黏膜充血、水肿及溃烂等现象明显减轻,肿瘤数目显著减少(P<0.05),结肠黏膜组织上皮细胞损伤、炎症细胞浸润程度均减小,TUNEL标记的凋亡细胞数目比例显著降低(P<0.05),结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12水平显著下降(P<0.05),同时,结肠组织内ELFN1-AS1相对表达量显著下调(P<0.05)。与BrMC组比较,BrMC+ELFN1-AS1组小鼠活动程度下降、精神萎靡,体质量显著下降(P<0.05),DAI评分显著升高(P<0.05),结肠黏膜仍充血、溃烂,肿瘤数目显著增加(P<0.05),结肠黏膜组织上皮细胞受损并且伴有炎症细胞浸润,TUNEL标记的凋亡细胞数目比例显著升高(P<0.05),结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12水平显著升高(P<0.05),结肠组织内ELFN1-AS1相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论LncRNA ELFN1-AS1异常表达可能与小鼠UCAC有关,BrMC能够通过下调LncRNA ELFN1-AS1表达抑制UCAC。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎相关结直肠癌变 小鼠 8-溴-7-甲氧基白杨素 lncrna ELFN1-as1
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LncRNA GAS6-AS1调节miR-708-5p/PDK4轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响
10
作者 谢洋 麻琳 +2 位作者 要兆旭 刘琳 何冰 《临床肿瘤学杂志》 2025年第8期729-734,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节微小RNA-708-5p(miR-708-5p)/丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测喉癌组织标本中LncRNA GAS6... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节微小RNA-708-5p(miR-708-5p)/丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测喉癌组织标本中LncRNA GAS6-AS1、miR-708-5p、PDK4的表达;将喉癌TU686细胞分为:siRNA阴性对照组(si-NC组)、单独抑制GAS6-AS1组(si-GAS6-AS1组)、si-GAS6-AS1与抑制剂阴性对照共转染组(si-GAS6-AS1+anti-NC组)以及si-GAS6-AS1与anti-miR-708-5p共转染组(si-GAS6-AS1+anti-miR-708-5p组);检测各组TU686细胞中LncRNA GAS6-AS1、miR-708-5p及PKD4的表达水平;平板克隆法、流式细胞仪、Transwell实验分别检测TU686细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;Western blotting法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证基因的靶向关系。结果喉癌组织LncRNA GAS6-AS1、PDK4的表达水平显著升高,而miR-708-5p表达水平显著降低(P<0.05)。si-GAS6-AS1组TU686细胞中LncRNA GAS6-AS1表达、PDK4 mRNA表达、克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数及PCNA、MMP-9和PDK4的蛋白表达均低于si-NC组,而miR-708-5p表达、细胞凋亡率及Bax蛋白表达高于si-NC组(P<0.05);与si-GAS6-AS1组、si-GAS6-AS1+anti-NC组比较,si-GAS6-AS1+anti-miR-708-5p组PDK4 mRNA表达、克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数及PCNA、MMP-9和PDK4的蛋白表达水平升高,而miR-708-5p表达、凋亡率及Bax蛋白表达降低(P<0.05)。LncRNA GAS6-AS1靶向负调控miR-708-5p表达,miR-708-5p靶向负调控PDK4表达。结论抑制LncRNA GAS6-AS1可能通过靶向miR-708-5p来下调PDK4表达,进而抑制TU686细胞增殖、侵袭,促进其凋亡。 展开更多
关键词 喉癌 lncrna GAS6-as1 miR-708-5p PDK4 增殖 侵袭
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lncRNA CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF12信号轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 王瑾 高倩 +1 位作者 刁丛 刘蓬 《中国优生与遗传杂志》 2025年第5期1040-1046,共7页
目的该研究旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF转录因子12(KLF12)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法对宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)进行表型筛选,选择CaSki细胞分为si-NC组、si-CCDC18... 目的该研究旨在探讨长链非编码RNA(lncRNA)CCDC183-AS1调节miR-628-5p/KLF转录因子12(KLF12)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法对宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)进行表型筛选,选择CaSki细胞分为si-NC组、si-CCDC183-AS1组、mimic NC组、miR-628-5p mimic组、si-CCDC183-AS1+inhibitor NC组、si-CCDC183-AS1+miR-628-5p inhibitor组。qRT-PCR检测lncRNA CCDC183-AS1、miR-628-5p、KLF12 mRNA表达水平;EdU检测CaSki细胞增殖;Transwell检测CaSki细胞迁移和侵袭情况;流式检测CaSki细胞凋亡率;Western blot检测KLF12蛋白表达;双荧光素酶检测lncRNA CCDC183-AS1与miR-628-5p、miR-628-5p与KLF12的相互关系。结果与人正常宫颈细胞相比,宫颈癌细胞(CaSki、HeLa、SiHa、MS751)miR-628-5p表达降低,CCDC183-AS1和KLF12 mRNA表达提高,CaSki细胞表型变化最明显(P<0.05);与si-NC组比较,si-CCDC183-AS1组CaSki中CCDC183-AS1和KLF12表达、细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,miR-628-5p表达和凋亡率升高(P<0.05);与si-CCDC183-AS1+inhibitor NC组比较,si-CCDC183-AS1+miR-628-5p inhibitor组CaSki中KLF12表达、细胞增殖、迁移和侵袭能力提高,miR-628-5p表达和凋亡率降低(P<0.05);双荧光素酶检测显示,lncRNA CCDC183-AS1与miR-628-5p、miR-628-5p与KLF12存在靶向关系(P<0.05)。结论lncRNA CCDC183-AS1可能通过抑制miR-628-5p,促进KLF12表达,促进宫颈癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 lncrna CCDC183-as1 miR-628-5p KLF12 宫颈癌细胞 恶性生物学行为
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lncRNA PFN1-AS1在奶牛乳腺上皮细胞炎症反应中的作用
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作者 虎喜敏 罗仍卓么 +2 位作者 周冉 李宇航 王兴平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5875-5887,共13页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)炎症反应中的作用。因该lncRNA的序列与肌动蛋白单体结合蛋白反义链(profilin1 antisense, PFN1-AS1)相同,将其命名为lncRNA PFN1-AS1。采用RT-PCR技术克隆lncRNA PFN1-AS1,预测lncRNA PFN1-AS1的功能。采用脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导bMECs建立炎症细胞模型,探究在炎症模型中干扰lncRNA PFN1-AS1对细胞炎症、增殖和凋亡的影响。结果显示:lncRNA PFN1-AS1长度为811 bp,可能参与调控细胞凋亡和炎症过程。lncRNA PFN1-AS1主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中,lncRNA PFN1-AS1表达水平显著下降(P<0.05);干扰lncRNA PFN1-AS1后,促炎细胞因子白介素(interleukin, IL)6、IL-8和IL-1β的转录和分泌水平均显著增加(P<0.05)。增殖基因细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase,CDK)2、CDK4和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达水平显著下降(P<0.05),细胞活力值和增殖率显著下降(P<0.05);凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,CASP)3、CASP8和Bcl-2相关X蛋白(bcl-2-associated X protein,BAX)的表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率极显著增加(P<0.01)。干扰lncRNA PFN1-AS1后促进了IL-6、IL-8和IL-1β的转录和蛋白分泌,促进了细胞凋亡水平,同时降低了细胞活力和增殖能力,这些结果揭示了lncRNA PFN1-AS1在bMECs炎症中的作用,为进一步探究其在奶牛乳腺炎中的作用提供了科学依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 lncrna PFN1-as1 脂多糖 炎症反应
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干扰lncRNARNF5-AS1对奶牛乳腺上皮细胞炎症反应的影响
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作者 虎喜敏 周冉 +3 位作者 王正兴 李宇航 罗仍卓么 王兴平 《生物技术通报》 北大核心 2025年第5期333-342,共10页
【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)能够通过直接调控下游分子或竞争性结合微小RNA(microRNA,miRNA)参与奶牛乳房炎症过程。lncRNA RNF5-AS1是新发现的lncRNA,旨在分析lncRNA RNF5-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammar... 【目的】长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)能够通过直接调控下游分子或竞争性结合微小RNA(microRNA,miRNA)参与奶牛乳房炎症过程。lncRNA RNF5-AS1是新发现的lncRNA,旨在分析lncRNA RNF5-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,bMECs)炎症反应中的作用。【方法】利用RT-PCR技术进行lncRNA RNF5-AS1的克隆,采用核质分离法探究其在bMECs中的亚细胞定位情况。采用脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导bMECs建立炎症模型,并利用RTqPCR检测lncRNA RNF5-AS1在炎性bMECs中的表达水平;干扰lncRNA RNF5-AS1后,检测促炎细胞因子表达水平,并利用CCK-8法和EdU法分别评估细胞活力和增殖能力;通过流式细胞术分析细胞凋亡情况。进一步通过在线工具预测lncRNA RNF5-AS1的潜在靶基因。【结果】lncRNA RNF5-AS1长度为1125 bp,主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中,lncRNA RNF5-AS1表达水平显著上调;干扰lncRNA RNF5-AS1后,促炎因子IL-6和IL-8的表达水平显著下调,细胞活力和增殖能力显著增加,细胞凋亡水平极显著降低。KEGG结果表明,lncRNA RNF5-AS1可能通过靶向bta-miR-375、bta-miR-615、bta-miR-193a-5p、btamiR-1291和bta-miR-1468而调控细胞炎症反应。【结论】lncRNA RNF5-AS1在bMECs炎症反应中表达上调,干扰后会抑制促炎因子的表达和细胞凋亡,提升细胞活力和增殖能力,提示其参与奶牛乳房炎的调控。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 lncrna RNF5-as1 乳腺上皮细胞 炎症因子
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结直肠癌患者的血清lncRNA OTUD6B-AS1和lncRNA ITGB8-AS1表达及临床意义
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作者 任宪琳 王金婕 +1 位作者 张英 林秋菊 《国际消化病杂志》 2025年第3期159-164,共6页
目的探究血清长链非编码RNA(lncRNA)OTUD6B-AS1和lncRNA ITGB8-AS1表达对结直肠癌(CRC)患者早期诊断及预后预测的临床价值。方法选择2020年3月至2021年3月康复大学青岛中心医院收治的108例CRC患者设为研究组,并将同期在该院接受体检的10... 目的探究血清长链非编码RNA(lncRNA)OTUD6B-AS1和lncRNA ITGB8-AS1表达对结直肠癌(CRC)患者早期诊断及预后预测的临床价值。方法选择2020年3月至2021年3月康复大学青岛中心医院收治的108例CRC患者设为研究组,并将同期在该院接受体检的108名健康者设为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清lncRNA OTUD6B-AS1、lncRNA ITGB8-AS1表达水平。采用多因素logistic回归模型分析影响CRC患者死亡的因素。采用ROC曲线分析血清lncRNA OTUD6B-AS1、lncRNA ITGB8-AS1表达水平对CRC患者死亡的预测价值。结果与对照组相比,研究组血清lncRNA OTUD6B-AS1表达水平显著降低,血清lncRNA ITGB8-AS1表达水平显著升高(P均<0.05)。随访结果显示,108例CRC患者中有33例死亡(设为死亡组),其余75例设为生存组,2组在年龄、性别、BMI、肿瘤直径、肿瘤发生部位、肿瘤组织学分型、肿瘤分化程度、CRC家族史、手术治疗与否、化学治疗与否方面的差异均无统计学意义(P均>0.05),而TNM分期的差异具有统计学意义(P<0.05)。与生存组相比,死亡组血清lncRNA OTUD6B-AS1表达水平显著降低,血清lncRNA ITGB8-AS1表达水平显著升高(P均<0.05)。多因素logistic回归模型分析结果显示,TNM分期、血清lncRNA ITGB8-AS1表达水平均是CRC患者死亡的独立危险因素(P均<0.05),血清lncRNA OTUD6B-AS1表达水平为CRC患者死亡的独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清lncRNA OTUD6B-AS1、lncRNA ITGB8-AS1单项检测及联合检测预测CRC患者死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.848、0.796和0.933,提示联合检测的预测效能分别高于单项检测(P均<0.05)。结论CRC患者血清lncRNA OTUD6B-AS1表达水平较低,血清lncRNA ITGB8-AS1表达水平较高,且血清lncRNA ITGB8-AS1、lncRNA OTUD6B-AS1分别为CRC患者死亡的独立危险因素和独立保护因素。血清lncRNA OTUD6B-AS1、lncRNA ITGB8-AS1均有望作为预测CRC患者死亡的生物标志物。 展开更多
关键词 结直肠癌 lncrna OTUD6B-as1 lncrna ITGB8-as1 预后
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LncRNA FBXL19-AS1靶向miR-149-5p/RAB31对膀胱癌细胞增殖、侵袭及EMT的影响
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作者 闫志胜 何正光 彭心霞 《中国细胞生物学学报》 2025年第8期1900-1908,共9页
该文探讨了长链非编码RNA F-box和富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA1(LncRNA FBXL19-AS1)靶向微小RNA-149-5p/Ras相关蛋白31(miR-149-5p/RAB31)对膀胱癌细胞增殖、侵袭、上皮–间质转化(EMT)的影响。将T24细胞分为5组:Control组、sh-NC组... 该文探讨了长链非编码RNA F-box和富含亮氨酸的重复蛋白19反义RNA1(LncRNA FBXL19-AS1)靶向微小RNA-149-5p/Ras相关蛋白31(miR-149-5p/RAB31)对膀胱癌细胞增殖、侵袭、上皮–间质转化(EMT)的影响。将T24细胞分为5组:Control组、sh-NC组、sh-FBXL19-AS1组、sh-FBXL19-AS1+anti-miR-NC组、sh-FBXL19-AS1+anti-miR-149-5p组。RT-qPCR检测LncRNA FBXL19-AS1、miR-149-5p和RAB31 mRNA表达情况,MTT法检测细胞活力,平板克隆实验检测细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞侵袭情况,双荧光素酶报告实验检测LncRNA FBXL19-AS1与miR-149-5p、miR-149-5p与RAB31的靶向关系,Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin蛋白含量,裸鼠成瘤实验检测肿瘤体积、质量以及miR-149-5p、RAB31蛋白水平。结果显示,与sh-NC组相比,sh-FBXL19-AS1组T24细胞miR-149-5p水平、E-cadherin蛋白水平显著升高,而LncRNA FBXL19-AS1水平、RAB31 mRNA水平、D值、克隆形成数、侵袭数、N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05);而sh-FBXL19-AS1+anti-miR-149-5p组可以逆转上述结果;双荧光素酶报告结果显示LncRNA FBXL19-AS1与miR-149-5p以及mi R-149-5p与RAB31之间存在靶向关系;裸鼠成瘤实验表明沉默LncRNA FBXL19-AS1后,肿瘤的体积、质量以及RAB31蛋白表达量显著减少,miR-149-5p表达水平显著升高(P<0.05)。该研究首次发现,干扰LncRNA FBXL19-AS1可能通过上调miR-149-5p、下调RAB31的表达,抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭、EMT,为临床治疗膀胱癌提供了新的靶点。 展开更多
关键词 lncrna FBXL19-as1 miR-149-5p RAB31 膀胱癌 EMT
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LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 陈海洋 王春梅 +1 位作者 石金升 代贺阳 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1593-1603,共11页
该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI... 该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI2与miR-296-5p的靶向关系;将HCT116细胞分为Control组、sh-NC组、sh-PRR34-AS1组、sh-PRR34-AS1+antiNC组、sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组,除Control组外,其余各组转染质粒;用克隆法、划痕法和Transwell法分别检测HCT116细胞增殖、迁移、侵袭能力;免疫印迹和免疫组化法检测相关蛋白表达水平;裸鼠成瘤实验检测LncRNA PRR34-AS1对CRC移植瘤生长及对miR-296-5p、DDI2表达的影响。在CRC细胞和组织中,LncRNA PRR34-AS1、DDI2 mRNA表达水平升高,miR-296-5p表达水平降低(P<0.05)。在线预测显示,LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p、DDI2与miR-296-5p有靶向关系。与sh-NC组比较,sh-PRR34-AS1组细胞LncRNA PRR34-AS1、DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达下调,miR-296-5p表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目降低(P<0.05);与sh-PRR34-AS1+anti-NC组比较,sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组miR-296-5p表达下调,DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目上升(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-PRR34-AS1组肿瘤体积更小、质量更低,LncRNA PRR34-AS1、DDI2表达下调,miR-296-5p表达上调(P<0.05)。抑制LncRNA PRR34-AS1可通过靶向miR-296-5p/DDI2轴,抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 lncrna PRR34-as1 miR-296-5p DDI2 增殖 迁移 侵袭
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LncRNA MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌细胞的影响
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作者 李晓雪 高月月 +1 位作者 左慧 张萍 《激光生物学报》 2025年第4期365-373,共9页
为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MA... 为探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)MAGI2-AS3调节miR-143-3p/PTP4A1轴对宫颈癌(CC)细胞的影响,通过RT-qPCR检测54例CC患者术中切除的CC组织及癌旁组织中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达。将HeLa细胞随机分为对照组、sh-NC组、sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组、sh-MAGI2-AS3+antimiR-143-3p组,测定各组细胞中MAGI2-AS3、miR-143-3p、PTP4A1的表达;检测细胞的增殖、迁移、侵袭情况及PTP4A1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达。利用动物试验验证敲除MAGI2-AS3对CC肿瘤生长及PTP4A1表达的影响。结果显示:CC组织MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量分别为1.97±0.35、1.73±0.34,高于癌旁组织(1.02±0.33、0.98±0.31),miR-143-3p表达量为0.48±0.14,低于癌旁组织(1.01±0.16)(P<0.05)。相较于sh-NC组和对照组,sh-MAGI2-AS3组HeLa细胞中的A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及MAGI2-AS3、PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均降低,miR-143-3p mRNA的表达量升高(P<0.05)。相较于sh-MAGI2-AS3组、sh-MAGI2-AS3+anti-NC组,shMAGI2-AS3+anti-miR-143-3p组miR-143-3p mRNA的表达量降低,A490 nm值、EdU阳性细胞率、划痕愈合率、侵袭数以及PTP4A1 mRNA的表达量和PCNA、PTP4A1、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平升高(P<0.05)。相较于sh-NC组,sh-MAGI2-AS3组移植瘤的质量、体积、Ki-67阳性率、PTP4A1阳性率均降低(P<0.05)。综上所述,MAGI2-AS3靶向负调控mi R-143-3p,mi R-143-3p靶向负调控PTP4A1。敲除MAGI2-AS3可能抑制CC细胞的侵袭、迁移和增殖,可能是通过调节mi R-143-3p/PTP4A1轴实现的。本研究可能为CC的靶向治疗研究提供新的靶点。 展开更多
关键词 lncrna MAGI2-as3 miR-143-3p/PTP4A1轴 宫颈癌 迁移 侵袭
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基于miR-216a-5p/Smad7轴探讨lncRNA OIP5-AS1在慢性心力衰竭心肌纤维化中的影响
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作者 陶金松 张婷 +5 位作者 李伟章 陆翊超 Seidu A.Richard 顾剑 李健 韩进 《中国循证心血管医学杂志》 2025年第9期1085-1089,共5页
目的探讨lncRNA OIP5-AS1通过miR-216a-5p/Smad7轴在慢性心力衰竭心肌纤维化中的影响。方法利用主动脉弓缩窄法(TAC)构建慢性心力衰竭小鼠模型,研究lncRNA OIP5-AS1在体内心脏纤维化中的作用,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)用于激活心脏成纤维细胞... 目的探讨lncRNA OIP5-AS1通过miR-216a-5p/Smad7轴在慢性心力衰竭心肌纤维化中的影响。方法利用主动脉弓缩窄法(TAC)构建慢性心力衰竭小鼠模型,研究lncRNA OIP5-AS1在体内心脏纤维化中的作用,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)用于激活心脏成纤维细胞(CFs)模拟体外心肌纤维化。采用qRT-PCR和Western blot检测lncRNA OIP5-AS1在CFs中的表达,转染lncRNA OIP5-AS1过表达质粒,验证lncRNA OIP5-AS1过表达对体外心肌纤维化的影响。此外,使用生物信息学分析预测miR-216a-5p为lncRNA OIP5-AS1的下游靶点,Smad7为miR-216a-5p的下游靶点。qRT-PCR检测血清样本中lncRNA OIP5-AS1和miR-216a-5p的水平。结果LncRNA OIP5-AS1在心力衰竭小鼠心脏组织和AngⅡ处理的CFs中表达显著下调(P<0.001)。lncRNA OIP5-AS1表达上调显著抑制AngⅡ诱导的CFs纤维化表型(P<0.001)。LncRNA OIP5-AS1在CFs中的过表达逆转了AngⅡ诱导的CFs增殖(P<0.01)。在CFs中,lncRNA OIP5-AS1过表达后,miR-216a-5p的表达水平显著下调(P<0.001)。此外,在转染miR-216a-5p模拟物的CFs中,Smad7的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001)。结论LncRNA OIP5-AS1可能通过miR-216a-5p/Smad7轴抑制心脏纤维化,为慢性心力衰竭抗心脏纤维化治疗提供一个新的靶点。 展开更多
关键词 lncrna OIP5-as1 miR-216a-5p SMAD7 心肌纤维化 慢性心力衰竭 小鼠
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LncRNA ZNF384-AS激活PD-L1转录对下咽癌顺铂耐药及细胞焦亡的影响
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作者 杨久梅 苟浩铖 +3 位作者 刘良蓉 范丽 朱钰锋 冯俊 《中国医药导报》 2025年第29期12-17,共6页
目的探究lncRNA ZNF384-AS激活程序性死亡配体-1(PD-L1)转录参与下咽癌顺铂耐药及细胞焦亡的作用机制。方法采用大剂量顺铂冲击刺激+小剂量顺铂维持刺激法构建下咽癌顺铂耐药细胞株(FaDu/DDP),RT-qPCR和Western blot法检测ZNF384-AS、PD... 目的探究lncRNA ZNF384-AS激活程序性死亡配体-1(PD-L1)转录参与下咽癌顺铂耐药及细胞焦亡的作用机制。方法采用大剂量顺铂冲击刺激+小剂量顺铂维持刺激法构建下咽癌顺铂耐药细胞株(FaDu/DDP),RT-qPCR和Western blot法检测ZNF384-AS、PD-L1表达。将FaDu/DDP细胞分为空白组、阴性对照组、ZNF384-AS敲低组、ZNF384-AS敲低+PD-L1过表达组,分组转染后,CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测细胞焦亡率,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测LDH释放量,并检测细胞焦亡信号通路相关蛋白半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-18及IL-1β表达。结果与FaDu细胞比较,不同浓度顺铂处理后FaDu/DDP细胞活力降低(P<0.05),FaDu/DDP细胞IC50、ZNF384-AS、PD-L1 mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。与空白组比较,ZNF384-AS敲低组PD-L1 mRNA及蛋白表达,ZNF384 mRNA,24、48、72 h时细胞OD450 nm值均降低,细胞焦亡率,LDH释放率,cleaved-Caspase-1、GSDMD、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均升高(P<0.05);与ZNF384-AS敲低组比较,ZNF384-AS敲低+PD-L1过表达组PD-L1 mRNA及蛋白表达,24、48、72 h时细胞OD450 nm值均升高,细胞焦亡率,LDH释放率,cleaved-Caspase-1、GSDMD、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。结论敲低ZNF384-AS可抑制PD-L1表达,增加Caspase-1介导的细胞焦亡,降低下咽癌细胞顺铂耐药性。 展开更多
关键词 下咽癌 lncrna ZNF384-as 程序性死亡配体-1 顺铂耐药 细胞焦亡
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人羊膜间充质干细胞外泌体介导lncRNA OIP5-AS1/miR-142-5p/CTRP3轴改善脑出血继发脑损伤
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作者 张万钦 朱芳 《解剖科学进展》 2025年第3期416-420,共5页
目的探究静脉输注人羊膜间充质干细胞外泌体(hAMSCs-Exos)对脑出血(ICH)大鼠继发脑损伤的改善作用及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、人羊膜间充质干细胞外泌体组(hAMSCs-Exos组)、人羊膜间充质干细胞外... 目的探究静脉输注人羊膜间充质干细胞外泌体(hAMSCs-Exos)对脑出血(ICH)大鼠继发脑损伤的改善作用及其机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、人羊膜间充质干细胞外泌体组(hAMSCs-Exos组)、人羊膜间充质干细胞外泌体+敲减对照组(hAMSCs-Exos+sh-NC组)和人羊膜间充质干细胞外泌体+敲减OIP5-AS1组(hAMSCs-Exos+sh-OIP5-AS1组),每组15只,采用自体注血法建立ICH模型,分离hAMSCs和hAMSCs-Exos并鉴定后经静脉输注大鼠,采用Longa评分评价大鼠神经功能损伤,检测大鼠脑含水量并通过检测伊文思蓝含量评价大鼠血脑屏障渗漏程度;HE染色观察大鼠脑组织神经元损伤;RT-qPCR检测大鼠脑组织lncRNA OIP5-AS1、miR-142-5p和CTRP3 mRNA表达;Western blot检测大鼠脑组织CTRP3蛋白表达;生物信息学分析miR-142-5p与lncRNA OIP5-AS1和CTRP3 mRNA的潜在结合位点并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果提取并鉴定了hAMSCs-Exos。hAMSCs-Exos治疗降低脑出血大鼠Longa评分、脑含水量和EB含量,改善大鼠脑组织神经元病理损伤,增加脑出血大鼠脑组织中OIP5-AS1和CTRP3表达并降低miR-142-5p表达;敲减OIP5-AS1逆转hAMSCs-Exos对脑出血大鼠脑损伤的改善作用、miR-142-5p表达的下调作用以及CTRP3表达的上调作用;miR-142-5p与lncRNA OIP5-AS1和CTRP3 mRNA结合。结论hAMSCs-Exos携带的lncRNA OIP5-AS1改善脑出血继发脑损伤,其机制可能与海绵化miR-142-5p并上调CTRP3表达有关。 展开更多
关键词 人羊膜间充质干细胞外泌体 脑出血 lncrna OIP5-as1 miR-142-5p CTRP3
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