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异补骨脂素通过LncRNA THOR/miR-153-5p影响喉癌细胞Tu686增殖、迁移和侵袭的机制 被引量:5
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作者 徐茂林 陈晓华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第1期161-166,共6页
目的探索异补骨脂素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)THOR/微小RNA-153-5p(miR-153-5p)影响喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法使用10、30、90μg/ml浓度的异补骨脂素处理喉癌细胞Tu686,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵... 目的探索异补骨脂素是否通过长链非编码RNA(LncRNA)THOR/微小RNA-153-5p(miR-153-5p)影响喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭。方法使用10、30、90μg/ml浓度的异补骨脂素处理喉癌细胞Tu686,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵袭,Western印迹检测细胞核相关抗原(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测LncRNA THOR和miR-153-5p表达。DINAN工具和双荧光素酶报告实验分析LncRNA THOR与miR-153-5p的靶向关系。在Tu686细胞中转染si-LncRNA THOR或miR-153-5p,观察沉默LncRNA THOR或过表达miR-153-5p对Tu686细胞增殖、迁移和侵袭的影响。在Tu686细胞中转染pcDNA-LncRNA THOR或anti-miR-153-5p,并使用异补骨脂素处理,评价过表达LncRNA THOR或干扰miR-153-5p对异补骨脂素作用的Tu686细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果不同浓度的异补骨脂素明显减少Tu686细胞的Ki-67、PCNA蛋白表达量、细胞增殖率、MMP-2、MMP-9蛋白表达量、细胞迁移数和细胞侵袭数、LncRNA THOR表达量(P<0.05),显著增加miR-153-5p表达量(P<0.05),均呈浓度依赖性。LncRNA THOR靶向调控miR-153-5p的表达。沉默LncRNA THOR或过表达miR-153-5p明显降低Tu686细胞的LncRNA THOR表达量、Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白水平、细胞增殖率、细胞迁移数、细胞侵袭数(P<0.05),显著提高miR-153-5p表达量(P<0.05)。过表达LncRNA THOR或干扰miR-153-5p部分逆转异补骨脂素对Tu686细胞增殖、迁移、侵袭、Ki-67、PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用。结论异补骨脂素显著抑制喉癌细胞Tu686的增殖、迁移和侵袭能力,其机制与上调LncRNA THOR表达和下调miR-153-5p表达有关。 展开更多
关键词 异补骨脂素 喉癌 lncrna thor miR-153-5p 增殖 迁移 侵袭
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非小细胞肺癌组织中长链非编码RNA-THOR的表达意义及生物学作用 被引量:1
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作者 郑颖颖 《临床肺科杂志》 2021年第6期930-934,共5页
目的探讨非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)癌组织和癌旁正常组织中睾丸相关高度保守的致癌长链非编码RNA(testis-associated highly-conserved oncogenic long non-coding RNA,THOR)的表达及其与NSCLC临床病理特征关系;... 目的探讨非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)癌组织和癌旁正常组织中睾丸相关高度保守的致癌长链非编码RNA(testis-associated highly-conserved oncogenic long non-coding RNA,THOR)的表达及其与NSCLC临床病理特征关系;并初步探讨其作用和机制。方法选取79例诊断确认的NSCLC患者癌组织和其对应的癌旁正常组织(距离肿瘤组织>5cm),采用实时荧光PCR方法,比较THOR在二者中的表达差异情况,并通过肿瘤直径、组织学类型、TMN分期、分化程度等临床病理特征因素分析THOR表达量与患者预后的相关性。瞬时转染siRNA沉默A549细胞中THOR的表达,通过CCK-8法检测对细胞增殖的影响,Western blot法检测,对细胞周期蛋白cyclin D1及凋亡相关蛋白Bcl2、BAX、cleaved-caspase-3的影响。结果实时荧光RT-PCR结果显示NSCLC癌组织中的THOR表达量显著高于对应的癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。THOR的表达量与肿瘤直径、TMN分期及分化程度因素有相关性(P<0.05)。THOR高表达的NSCLC患者生存率低于THOR低表达的NSCLC患者。THOR表沉默后,A549细胞增殖受到抑制,cyclin D1及Bcl2表达降低,BAX、cleaved-caspase-3蛋白表达增多。结论THOR在NSCLC癌组织中的高表达,与NSCLC发生、发展及临床病理特征关系密切;并促进A549细胞增殖,并拮抗细胞凋亡,其可能的机制与调控周期蛋白cyclin D1表达有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA thor 预后
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THOR在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞干性的影响 被引量:1
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作者 许雁晗 宋虎 +4 位作者 宋军 宗启言 邹钰 李想 辛科 《现代临床医学》 2020年第4期249-252,共4页
目的:探究睾丸相关的高保守的致癌长链非编码RNA(THOR)在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞干性的影响。方法:收集徐州医科大学附属医院36对胃癌及癌旁正常组织标本,进行相关细胞培养、细胞活力测定、实时荧光定量PCR、慢病毒包和稳定的细... 目的:探究睾丸相关的高保守的致癌长链非编码RNA(THOR)在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞干性的影响。方法:收集徐州医科大学附属医院36对胃癌及癌旁正常组织标本,进行相关细胞培养、细胞活力测定、实时荧光定量PCR、慢病毒包和稳定的细胞株构建、mRNA稳定性分析、细胞球形形成分析、RNA测序分析、ALDH1活动分析,并对实验数据进行对比分析。结果:RNA测序分析发现胃癌组织中THOR水平较癌旁正常组织明显上调(P<0.01)。随着THOR的稳定敲除,胃癌细胞中的干性标志物(ALDH1,Nanog,Oct1,Oct 2,Oct 4,SOX2,SOX9,CD44)的表达显著降低(均P<0.01)。并且THOR的敲除降低了胃癌细胞形成球状体的能力,表现为球体尺寸变小和数量减少(P<0.01)。结论:THOR在胃癌细胞中的表达显著升高,敲除THOR可以降低胃癌细胞的干性。THOR与胃癌细胞中的干性标志物之间具有明显的作用关系,THOR可能是胃癌治疗的一个新的靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA thor 胃癌细胞 干性
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敲低长链非编码RNA THOR对结直肠癌细胞糖代谢重编程和转移能力的影响
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作者 牛子薇 张勇 +2 位作者 李璐 褚菲菲 吴慧丽 《医学研究杂志》 2024年第8期96-101,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)THOR对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞糖代谢重编程、迁移和侵袭能力的影响,以及其与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶C(fructose-1,6-bisphosphate aldolase C,ALDOC)之间的靶向调控关... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)THOR对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞糖代谢重编程、迁移和侵袭能力的影响,以及其与果糖-1,6-二磷酸醛缩酶C(fructose-1,6-bisphosphate aldolase C,ALDOC)之间的靶向调控关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测THOR在CRC细胞系中的表达,使用THOR特异性siRNA转染HCT116和SW480细胞沉默THOR的表达,通过细胞划痕实验和Transwell实验检测THOR对CRC细胞迁移、侵袭能力的影响,通过检测CRC细胞的葡萄糖摄取量及丙酮酸生成量探讨THOR对CRC细胞糖代谢重编程的影响,采用RT-qPCR法和Western blot法检测ALDOC mRNA和蛋白质的表达水平。结果RT-qPCR法检测结果显示,THOR在HCT116和SW480细胞中的表达水平显著高于正常人肠上皮细胞NCM460。沉默THOR后,细胞划痕实验及Transwell实验结果表明,HCT116和SW480细胞的迁移与侵袭能力均受到抑制,葡萄糖摄取量及丙酮酸生成量均下降,RT-qPCR法和Western blot法检测结果显示,ALDOC mRNA及蛋白的表达水平显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA THOR在CRC细胞中高表达,可能通过靶向调控ALDOC影响CRC细胞糖代谢重编程促进细胞的迁移与侵袭。 展开更多
关键词 lncrna thor 结直肠癌细胞 转移 糖代谢重编程 ALDOC
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