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LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
1
作者 陈海洋 王春梅 +1 位作者 石金升 代贺阳 《中国细胞生物学学报》 2025年第7期1593-1603,共11页
该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI... 该文旨在探究LncRNA PRR34-AS1调节miR-296-5p/DDI2轴对结直肠癌(CRC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR法检测CRC细胞与组织中LncRNA PRR34-AS1、miR-296-5p、DDI2 mRNA水平;用双荧光素酶实验检测LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p及DDI2与miR-296-5p的靶向关系;将HCT116细胞分为Control组、sh-NC组、sh-PRR34-AS1组、sh-PRR34-AS1+antiNC组、sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组,除Control组外,其余各组转染质粒;用克隆法、划痕法和Transwell法分别检测HCT116细胞增殖、迁移、侵袭能力;免疫印迹和免疫组化法检测相关蛋白表达水平;裸鼠成瘤实验检测LncRNA PRR34-AS1对CRC移植瘤生长及对miR-296-5p、DDI2表达的影响。在CRC细胞和组织中,LncRNA PRR34-AS1、DDI2 mRNA表达水平升高,miR-296-5p表达水平降低(P<0.05)。在线预测显示,LncRNA PRR34-AS1与miR-296-5p、DDI2与miR-296-5p有靶向关系。与sh-NC组比较,sh-PRR34-AS1组细胞LncRNA PRR34-AS1、DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达下调,miR-296-5p表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目降低(P<0.05);与sh-PRR34-AS1+anti-NC组比较,sh-PRR34-AS1+anti-miR-296-5p组miR-296-5p表达下调,DDI2、PCNA、MMP-2、MMP-9表达上调,克隆形成数目、划痕愈合率、侵袭细胞数目上升(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-PRR34-AS1组肿瘤体积更小、质量更低,LncRNA PRR34-AS1、DDI2表达下调,miR-296-5p表达上调(P<0.05)。抑制LncRNA PRR34-AS1可通过靶向miR-296-5p/DDI2轴,抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 lncrna prr34-as1 miR-296-5p DDI2 增殖 迁移 侵袭
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雷公藤多苷通过调控lncRNA PRR34-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响 被引量：2
2
作者 牟映运 舒涛 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第4期994-998,共5页
目的:研究雷公藤多苷通过调控长链非编码RNA(lncRNA)PRR34-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:培养结直肠癌细胞株HT29、SW620、HCT-116,用不同浓度(20、40、80、160μmol/L)雷公藤多苷处理后检测细胞增殖和凋亡,筛选出调控效应... 目的:研究雷公藤多苷通过调控长链非编码RNA(lncRNA)PRR34-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:培养结直肠癌细胞株HT29、SW620、HCT-116,用不同浓度(20、40、80、160μmol/L)雷公藤多苷处理后检测细胞增殖和凋亡,筛选出调控效应最显著的SW620细胞,用不同浓度雷公藤多苷处理,并转染阴性对照(NC)pcDNA3.1质粒或lncRNA PRR34-AS1 pcDNA3.1质粒后检测细胞增殖、凋亡及lncRNA PRR34-AS1、MVIH、PTENP1、TBX5-AS1和Foxo3a、Wnt2、β-catenin蛋白表达。结果:雷公藤多苷处理HT29、SW620、HCT-116细胞可浓度依赖性降低增殖、促进凋亡,其中雷公藤多苷对SW620细胞增殖和凋亡的调控作用最显著;雷公藤多苷处理SW620细胞可浓度依赖性降低lncRNA PRR34-AS1、MVIH及Wnt2、β-catenin蛋白表达,升高lncRNA PTENP1、TBX5-AS1及Foxo3a蛋白表达。转染lncRNA PRR34-AS1 pcDNA3.1质粒可减弱雷公藤多苷上述作用。结论:雷公藤多苷能抑制结直肠癌细胞增殖、促进结直肠癌细胞凋亡,其机制与降低lncRNA PRR34-AS1表达并调控下游Foxo3a/Wnt/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 雷公藤多苷 增殖 凋亡 长链非编码RNA prr34-as1
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lncRNA RPL34-AS1调控miR-670-5p/SMAD4对胃癌细胞生物学行为的影响 被引量：1
3
作者 朱朝玉 范长儒 刘贵峰 《临床和实验医学杂志》 2022年第2期141-145,共5页
目的探讨lncRNA RPL34-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其对miR-670-5p/SMAD4分子轴的调控作用。方法回顾性收集2018年5月至2019年6月期间临沂市肿瘤医院收治的33例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本。QRT-PCR检测RPL34-AS1、miR-670-5... 目的探讨lncRNA RPL34-AS1对胃癌细胞生物学行为的影响及其对miR-670-5p/SMAD4分子轴的调控作用。方法回顾性收集2018年5月至2019年6月期间临沂市肿瘤医院收治的33例胃癌患者的癌组织及其癌旁组织标本。QRT-PCR检测RPL34-AS1、miR-670-5p的表达量,蛋白质印迹法检测SMAD4表达。体外培养人胃癌细胞HGC-27,实验分组:pcDNA组(转染RPL34-AS1过表达载体的阴性对照)、pcDNA-RPL34-AS1组(转染RPL34-AS1过表达载体)、anti-miR-NC组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂的阴性对照)、anti-miR-670-5p组(转染miR-670-5p特异性寡核苷酸抑制剂)、pcDNA-RPL34-AS1+miR-NC组(共转染pcDNA-RPL34-AS1与阴性对照mimic NC序列)、pcDNA-RPL34-AS1+miR-670-5p组(共转染pcDNA-RPL34-AS1与miR-670-5p寡核苷酸模拟物)。MTT与平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验与Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测RPL34-AS1与miR-670-5p的靶向关系,以及miR-670-5p与SMAD4的靶向关系。结果与癌旁组织比较,胃癌组织中RPL34-AS1和SMAD4的表达量降低,miR-670-5p的表达量升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达RPL34-AS1或抑制miR-670-5p表达后,SMAD4表达量升高,细胞活力降低,集落形成数和侵袭细胞数减少,迁移距离减小,细胞凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。RPL34-AS1可靶向调控miR-670-5p,miR-670-5p可靶向调控SMAD4;而miR-670-5p过表达可逆转RPL34-AS1过表达对细胞生物学行为的作用。结论LncRNA RPL34-AS1过表达可通过调控miR-670-5p/SMAD4而抑制胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 lncrna RPL34-as1 miR-670-5p SMAD4 增殖 迁移 侵袭
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糖酵解参与的黑色素瘤细胞放射敏感性lncRNAs的初步筛选及相关性分析 被引量：2
4
作者 王琦 黄程辉 +2 位作者 胡一 严文广 龚恋 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期565-574,共10页
目的:通过微阵列芯片技术筛选糖酵解参与的黑色素瘤细胞放射治疗(以下简称放疗)敏感性相关的lncRNA和mRNA表达谱,初步探索lncRNA调控糖酵解途径影响黑色素瘤细胞放疗敏感性的分子机制。方法:以不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L)... 目的:通过微阵列芯片技术筛选糖酵解参与的黑色素瘤细胞放射治疗(以下简称放疗)敏感性相关的lncRNA和mRNA表达谱,初步探索lncRNA调控糖酵解途径影响黑色素瘤细胞放疗敏感性的分子机制。方法:以不同浓度(1.25、2.50、5.00、10.00 mmol/L)的2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)处理、不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)的X射线照射黑色素瘤细胞WM35。采用MTT法检测NC-0 Gy组(阴性对照组)、NC-4 Gy组(仅4 Gy X射线照射)、2-DG组(仅2.50 mmol/L 2-DG处理)、2-DG-4 Gy组(2.50 mmol/L 2-DG处理,4 Gy X射线照射)增殖能力;lncRNA和mRNA表达谱微阵列芯片检测NC-4 Gy组和2-DG-4 Gy组的lncRNA和mRNA表达谱的改变。采用CNC(coding-noncoding)分析预测表达最显著的10个lncRNA潜在靶基因,构建差异lncRNA和mRNA共表达网络。运用基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和KEGG(Kyoto EncyclopediaofGenesandGenomes)通路富集分析预测差异表达的lncRNA的功能分布;real-time RT-PCR定量检测差异表达上调最显著的5个和下调最显著的5个lncRNA的表达。结果:2-DG处理WM35细胞48和96 h,细胞增殖均受到明显抑制(均P<0.05),呈剂量依赖关系;大剂量X射线照射抑制WM35细胞的增殖,造成细胞大量死亡,4 Gy X射线照射后细胞增殖活性较阴性对照组下降61%;对NC-4 Gy组和2-DG-4 Gy组行lncRNA芯片分析,发现有1206个lncRNA和543个mRNA差异表达,real-time RT-PCR示lncRNA的变化与mRNA芯片基本一致;进一步CNC分析示这10个表达最显著的lncRNA与333个靶基因之间存在正/负相关,GO功能富集分析结果显示lncRNA主要富集于DNA结合、DNA损伤和修复、细胞周期阻滞、氧化应激等功能,KEGG通路富集分析结果显示这10个lnRNA主要与放疗敏感性相关。结论:采用微阵列芯片技术筛选出糖酵解参与的黑色素瘤细胞放疗敏感性相关的差异表达lncRNA,lncRNA RPL34-AS1可能是黑色素瘤放疗潜在的生物靶点。 展开更多
关键词 黑色素瘤 放疗敏感性 2-脱氧-D-葡萄糖 糖酵解 lncrna RPL34-as1
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