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题名枸杞LmP5CS基因的克隆及表达分析
被引量：10
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作者
冯远航
王罡
季静
关春峰
金超
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机构
天津大学遗传工程研究所
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期33-40,共8页
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基金
国家自然科学基金(31271419
31271793)
+1 种基金
国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011zx08003-005)
2010年度高等学校博士生导师专项科研基金(20100032110060)资助项目
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文摘
目的:为进一步研究枸杞抗逆境胁迫的机制,并为转基因育种,提供理论依据。提高农作物的抗逆性提供优质的基因资源。方法:提选取盐胁迫后脯氨酸含量变化较大的耐盐植物枸杞为材料,用1.5%NaCl处理后,提取枸杞叶片总RNA,利用RT-PCR及3'RACE方法克隆获得吡咯啉-5-羧酸合成酶(delta 1-pyrroline-5-carboxylate synthetase,P5CS)基因的全长cDNA,命名为LmP5CS,构建pH7m24GW,3rc-LmP5CS植物表达载体。结果:LmP5CS基因的ORF长2 154 bp,编码1个等电点为6.07、分子量为77.5kDa、由717个氨基酸组成的蛋白。枸杞在200 mmol/LNaCl盐胁迫下,LmP5CS基因表达量随处理时间,有先升高后降低的趋势,9h基因表达量最高,脯氨酸含量变化与之一致。结论:LmP5CS基因在盐胁迫下脯氨酸含量的变化中起关键作用。
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关键词
枸杞
lmp5cs
基因克隆
脯氨酸
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Keywords
Lycium chinense Miller lmp5cs Gene cloning Proline
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分类号
Q781
[生物学—分子生物学]
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