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Lin28基因在肝母细胞瘤中的表达及其对肝母细胞瘤细胞生物学功能的影响 被引量：1
1
作者 吕敏 周婷婷 +1 位作者 刘嘉梅 张浩川 《温州医科大学学报》 2025年第2期128-133,共6页
目的:研究Lin28基因在肝母细胞瘤(HB)中的表达情况,并探讨Lin28的表达对HB细胞生物学功能的影响。方法:综合分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库和3个不同来源的基因表达数据库(GEO)数据集中Lin28基因的表达差异情况;通过转染构建的siRNA分... 目的:研究Lin28基因在肝母细胞瘤(HB)中的表达情况,并探讨Lin28的表达对HB细胞生物学功能的影响。方法:综合分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库和3个不同来源的基因表达数据库(GEO)数据集中Lin28基因的表达差异情况;通过转染构建的siRNA分别敲低HB细胞系Huh-6和HepG2的表达水平,通过细胞克隆集落形成实验、CCK-8、流式细胞术检测Lin28对HB细胞生物学表型的影响。结果:在TCGA数据库中,Lin28在大多数肿瘤中的表达均上调(P<0.05)。在GEO数据库中,Lin28在HB肿瘤组织较癌旁组织表达上调(P<0.05)。成功构建转染si-Lin28后,Lin28在mRNA及蛋白水平表达显著下降(P<0.05);敲低Lin28的表达可以显著抑制HB细胞系Huh-6和HepG2增殖能力(P<0.01),增加细胞凋亡率(P<0.05)。结论:Lin28在HB中表达上调,敲低Lin28的表达可以抑制细胞恶性表型,提示Lin28可能是HB一个潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 lin28 肝母细胞瘤 细胞增殖
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多浪羊LIN28A基因启动子区克隆、序列分析及蛋白表达研究
2
作者 李伟 黄巧艳 +4 位作者 王鑫昆 谷若怀 孙慧萍 朱乐萧 邢凤 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期2992-3003,共12页
【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN... 【目的】探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律,为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号:NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对,获取多浪羊LIN28A基因启动子区序列,并利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。采集幼年期、初情期前、初情期及初情期后多浪羊的下丘脑、垂体和卵巢组织,利用Western blotting检测LIN28A蛋白在下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴中的表达情况。【结果】多浪羊LIN28A基因启动子区序列长2089 bp,GC含量为56.28%。LIN28A基因启动子序列包含MEIS1、STAT3、COMP1等65个转录因子结合位点,3个TATA-box,1个CpG岛,以及9个潜在转录起始位点。LIN28A蛋白在多浪羊3个组织中均有表达,以卵巢中表达水平最高,下丘脑次之,垂体中表达量最低。在初情期前多浪羊下丘脑中LIN28A蛋白表达量显著高于幼年期(P<0.05),在幼年期和初情期前多浪羊垂体中LIN28A蛋白表达量显著高于初情期及初情期后(P<0.05),卵巢中LIN28A蛋白表达量在初情期启动前后呈现稳定趋势(P>0.05);在同一时期,LIN28A蛋白在多浪羊下丘脑、垂体和卵巢组织中的表达量均无显著差异(P>0.05)。【结论】多浪羊LIN28A基因启动子区有多个与初情期相关的转录因子结合位点,为后续转录因子验证和启动子活性检测提供了试验材料。LIN28A蛋白在多浪羊HPO轴表达差异显著,为进一步研究LIN28A基因功能及调控机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 多浪羊 lin28A基因 启动子 初情期 下丘脑-垂体-卵巢轴
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LncRNA SNHG11通过上调LIN28A表达促进胰腺癌细胞干性
3
作者 于正悦 王慧之 +3 位作者 丁运韬 周雨静 龚爱华 徐岷 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期93-101,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)对胰腺癌细胞增殖和干性的影响及其可能的机制。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析SNHG11在泛癌和对应癌旁组织、... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因11(small nucleolar RNA host gene 11,SNHG11)对胰腺癌细胞增殖和干性的影响及其可能的机制。方法:通过TCGA和GTEx数据库分析SNHG11在泛癌和对应癌旁组织、胰腺癌和胰腺组织中的表达;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SNHG11在胰腺癌PANC1、PaTu8988、MIApaca-2细胞中的表达;在胰腺癌PANC1和PaTu8988细胞中分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-SNHG11质粒,在胰腺癌PANC1和MIApaca-2细胞中分别转染sh-EGFP、sh-SNHG11质粒,qRT-PCR检测质粒转染效率,CCK-8法检测细胞增殖率,克隆形成实验检测细胞克隆数及大小,qRT-PCR及蛋白免疫印迹法分别检测干性指标NANOG同源框蛋白(NANOG homeobox protein,NANOG)、Y染色体性别决定区相关HMG盒基因2(sex determining region of Y-chromosome related HMG-box2,SOX2)、八聚体结合转录因子4(octamer binding transcription factor 4,OCT4)、细胞癌基因myc(cellular oncogene myc,c-myc)和LIN28同源物A(LIN28 homolog A,LIN28A)mRNA和蛋白相对表达水平,干细胞成球实验检测干细胞成球数量及直径变化;RNA免疫沉淀实验检测SNHG11和LIN28A结合情况。共转染pcDNA3.1-SNHG11+sh-LIN28A或sh-SNHG11+3×Flag-LIN28A,qRT-PCR检测干性指标NANOG、SOX2、OCT4、c-myc mRNA相对表达水平,干细胞成球实验检测干细胞成球数量和直径变化。结果:LncRNA SNHG11在多种恶性肿瘤中高表达,包括胰腺癌。SNHG11在胰腺癌细胞中相对表达量从低到高依次为胰腺癌PaTu8988、PANC1、MIApaca-2细胞(P均<0.05)。上调SNHG11表达,胰腺癌细胞增殖和干性能力明显增强,下调则与之相反(P均<0.05)。SNHG11可以与LIN28A结合。过表达SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显增强,干扰LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显降低,在过表达SNHG11的胰腺癌细胞中下调LIN28A表达,胰腺癌细胞的干性促进能力明显被抑制(P均<0.05);与之相反,干扰SNHG11致胰腺癌细胞干性能力明显降低,过表达LIN28A致胰腺癌细胞干性能力明显增强,在低表达SNHG11的胰腺癌细胞中上调LIN28A表达,可明显逆转胰腺癌细胞的干性抑制作用(P均<0.05)。结论:LncRNA SNHG11可能通过上调LIN28A表达,促进胰腺癌细胞的增殖能力并增强其干性能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA(lncRNA) 核仁小分子RNA宿主基因11(SNHG11) lin28A 干性 胰腺癌
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hDPSCs中RNA结合蛋白Lin28对let-7家族调控的生物信息学方法分析
4
作者 刘昕昕 李婉怡 +4 位作者 孙梦馨 张雨欣 吴宇熙 段荣泉 刘岩 《上海口腔医学》 2025年第5期457-464,共8页
目的:采用生物学信息方法分析RNA结合蛋白Lin28调控人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSCs)增殖的可能机制。方法:通过慢病毒介导稳定转染Lin28基因至hDPSCs,RNA结合蛋白免疫共沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation... 目的:采用生物学信息方法分析RNA结合蛋白Lin28调控人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSCs)增殖的可能机制。方法:通过慢病毒介导稳定转染Lin28基因至hDPSCs,RNA结合蛋白免疫共沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)检测过表达Lin28富集的mRNA浓度和总量。RIP测序(RIP-seq)检测Lin28富集的mRNA和相关通路变化。RIP-PCR验证RIP-seq测序结果,Real-time PCR检测Lin28和let-7家族各成员miRNA表达水平,TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_71/)预测let-7a相关靶基因mRNA及具体结合位点,Western免疫印迹法检测let-7a相关靶基因IGF1R、IRS2和IGF2BPs蛋白表达水平的变化。结果:RNA结合蛋白Lin28作为一种重要的调节因子,在细胞生长发育、组织代谢等方面起着关键作用。过表达Lin28的hDPSCs中,pri-let-7a/b/c/d/e/f/i/98及pre-let-7a/b/c/d/e/f/i/98均有不同程度下降。Lin28过表达可上调let-7相关靶基因IGF2BP1和IGF2BP2蛋白表达水平。结论:Lin28在多条途径上通过特异性互补结合pri-let-7及pre-let-7阻断let-7家族的加工成熟。Lin28对let-7靶基因mRNA具有间接调控作用,富集的mRNA主要在生长进程、信号传导、蛋白质加工及遗传信息表达翻译上发挥作用,与细胞增殖联系紧密。 展开更多
关键词 lin28 let-7家族 人牙髓干细胞 慢病毒载体转染 IGF2BPs
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LIN28A/B在肿瘤发生发展中的作用研究进展
5
作者 张译文 黄琴 +2 位作者 吴艳芸 孙月 韦永龙 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期452-465,共14页
LIN28A及其同源蛋白LIN28B是高度保守的RNA结合蛋白,在胚胎早期发育、体细胞重编程、葡萄糖代谢以及肿瘤发生发展中具有重要作用。LIN28A/B在乳腺癌等恶性肿瘤中高表达,在肿瘤的起始、维持和转移中均发挥重要作用,并与预后不良相关。研... LIN28A及其同源蛋白LIN28B是高度保守的RNA结合蛋白,在胚胎早期发育、体细胞重编程、葡萄糖代谢以及肿瘤发生发展中具有重要作用。LIN28A/B在乳腺癌等恶性肿瘤中高表达,在肿瘤的起始、维持和转移中均发挥重要作用,并与预后不良相关。研究表明,LIN28A/B主要通过抑制let-7s等microRNA和直接靶向mRNA的方式发挥调控作用。本文主要综述了LIN28A/B在肝癌、乳腺癌、结直肠癌等恶性肿瘤中的功能及其分子调控机制,以期为进一步研究LIN28A/B的作用机制及其在临床治疗中的可能应用提供理论参考。 展开更多
关键词 lin28A lin28B let-7 miRNA 肿瘤发生发展 治疗靶点
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MiRNA Let-7和Lin28在散发性听神经瘤中的表达及意义 被引量：3
6
作者 黄孝文 许胜 +3 位作者 褚汉启 王少立 崔永华 张平 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期520-524,共5页
目的研究微小RNA Let-7与Lin28在散发性听神经瘤中的表达及二者之间的关系,探讨其对肿瘤进展可能的影响。方法收集18例经过术后病理证实的散发性听神经瘤组织作为实验组,7例正常胃迷走神经为对照组。采用RT-PCR、免疫组织化学染色方法,... 目的研究微小RNA Let-7与Lin28在散发性听神经瘤中的表达及二者之间的关系,探讨其对肿瘤进展可能的影响。方法收集18例经过术后病理证实的散发性听神经瘤组织作为实验组,7例正常胃迷走神经为对照组。采用RT-PCR、免疫组织化学染色方法,检测Let-7d和Lin28A/B mRNA的表达,以及Lin28蛋白的表达。结果 RT-PCR检测显示,Let-7dmRNA表达量在听神经瘤组织显著高于对照神经组织(P<0.001),Lin28A/B mRNA表达量在听神经瘤组织显著低于对照组织(PLin 28A=0.004,PLin28B=0.001)。在听神经瘤组织中,Let-7d与Lin28A/B mRNA的表达存在负相关关系(r=-0.671,P=0.002;r=-0.662,P=0.003)。免疫组织化学检测显示在听神经瘤与正常神经组织中均未发现Lin28蛋白阳性染色。结论在听神经瘤的生长及恶性转化抑制机制中,以微小RNA为主导的Let-7d/Lin28双向负反馈调节可能起重要作用。 展开更多
关键词 听神经瘤 Let-7d lin28A lin28B
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胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达及其临床意义 被引量：9
7
作者 李良庆 宋俊 潘敦 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2015年第2期176-181,共6页
目的检测胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达,分析其临床意义,并初步探讨其可能的作用机制。方法应用免疫组化SP法检测90例胃癌和30例癌旁正常胃黏膜石蜡组织中LIN28B和c-myc蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR方法和Western blotting法检... 目的检测胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达,分析其临床意义,并初步探讨其可能的作用机制。方法应用免疫组化SP法检测90例胃癌和30例癌旁正常胃黏膜石蜡组织中LIN28B和c-myc蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR方法和Western blotting法检测23例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常组织中LIN28B和c-myc mRNA及蛋白的表达量。结果胃癌组织中LIN28B mRNA(△Ct:6.33±2.54)及蛋白(0.601±0.22)的表达水平显著高于癌旁正常组织(△Ct:1.05±0.64,0.124±0.088,P<0.05);LIN28B在胃癌组织中表达阳性率(76.7%,69/90)较癌旁正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(66.7%,20/30)高,差异有统计学意义(H=4.195,P<0.05);c-myc在胃癌组织中表达阳性率(81.1%,73/90)较正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(60.0%,18/30)高,差异有统计学意义(H=3.887,P<0.05);LIN28B蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、临床分期有相关性(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、部位无相关性(P>0.05);LIN28B与c-myc在胃癌组织中的表达有显著相关性(r=0.252,P<0.05)。结论LIN28B和c-myc基因的表达及相互作用与胃癌的发生、发展及生物学行为密切相关,对判断预后有参考作用,其机制可能与胃癌干细胞及LIN28B/let-7/c-myc信号环路有关。 展开更多
关键词 lin28B C-MYC 胃癌 lin28B/let-7/c-myc通路
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性早熟雌性Sprague-Dawle大鼠下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常 被引量：2
8
作者 杨芳琳 于宝生 +3 位作者 单晔 王安茹 高兰英 彭娅 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第12期2210-2213,2218,共5页
目的:研究正常雌性Sprague-Dawle(SD)大鼠不同性发育阶段及雌激素诱导性早熟后下丘脑Lin28a和Lin28b的表达及意义。方法:1)于雌性SD大鼠出生后15日(postnatal day 15,PND15)、PND23、PND35荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRN... 目的:研究正常雌性Sprague-Dawle(SD)大鼠不同性发育阶段及雌激素诱导性早熟后下丘脑Lin28a和Lin28b的表达及意义。方法:1)于雌性SD大鼠出生后15日(postnatal day 15,PND15)、PND23、PND35荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,同时以ELISA法检测血清黄体生成素(LH)和雌二醇(E2)水平变化;2)苯甲酸雌二醇(estradiol benzoate,EB)诱导的性早熟大鼠随机分为EB-1组和EB-2组,分别于阴道开口(vaginal opening,VO)时及PND56两个时间点处死,相应的发育阶段的大鼠用无菌芝麻油(sesame oil,OIL)作为对照分为OIL-1和OIL-2组;荧光实时定量PCR分析下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA的表达,ELISA法检测LH和E2水平变化,并观察性早熟对大鼠阴道开口、体重、顶臀径、胫骨长等生长发育指标的影响。结果:1)PND15、PND23和PND35组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达、血清LH和E2水平无统计学差异(P>0.05);2)EB-1组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-1组(P<0.05),血清LH和E2水平与OIL-1组相比无统计学差异(P>0.05);EB-2组下丘脑Lin28a和Lin28b mRNA表达高于OIL-2组(P<0.05),血清LH和E2水平低于OIL-2组(P<0.05);3)与OIL-2组比较,EB-2组VO时间明显提前(P<0.01),体重、顶臀长、胫骨长差异无统计学差异(P>0.05)。结论:外源性雌激素引起的性早熟可能导致下丘脑Lin28a和Lin28b表达异常。 展开更多
关键词 性早熟 lin28a lin28b 下丘脑
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过表达Lin28a/Lin28b对let-7家族活性的影响 被引量：3
9
作者 刘雪荣 田文洪 +3 位作者 董小岩 吴效哲 吕建新 吴小兵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期533-541,共9页
研究在HeLaS3细胞中过表达Lin28a/Lin28b对let-7家族miRNA表达水平和活性的影响。首先,构建Lin28a和Lin28b的表达载体pAAV2neo-Lin28a和pAAV2neo-Lin28b,分别转染HeLaS3细胞并筛选获得Lin28a和Lin28b的稳定表达细胞株HeLaS3/pAAV2neo-Li... 研究在HeLaS3细胞中过表达Lin28a/Lin28b对let-7家族miRNA表达水平和活性的影响。首先,构建Lin28a和Lin28b的表达载体pAAV2neo-Lin28a和pAAV2neo-Lin28b,分别转染HeLaS3细胞并筛选获得Lin28a和Lin28b的稳定表达细胞株HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b。然后,以pAAV2neo-Gluc-(Fluc)为基本骨架,构建并获得检测let-7家族miRNA活性的8种质粒型载体,并包装为相应的重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV),作为检测miRNA靶序列介导的转录后抑制活性的传感器,命名为Asensor。在此基础上,以HeLaS3细胞为对照,用Western blot检测HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b细胞中Lin28a和Lin28b表达水平,用QRT-PCR测定let-7家族各成员表达水平,用Asensor检测let-7家族各成员活性。Western blot结果显示,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a和HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b均能有效地表达Lin28a和Lin28b蛋白;QRT-PCR检测结果显示,相比于HeLaS3细胞,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a细胞中let-7家族各成员表达水平都下降(除let-7e外),但不同成员下降幅度存在差异;Asensor检测结果显示,let-7家族所有成员活性水平都下降,但不同成员下降幅度也存在差异,且同一成员活性水平与表达水平及其下降趋势也不一致。相比于HeLaS3细胞,HeLaS3/pAAV2neo-Lin28b细胞中let-7家族成员的表达和活性水平均明显下降,但表达水平的下降幅度比HeLaS3/pAAV2neo-Lin28a细胞大,而活性的下降幅度却与之相近。本研究建立了一种检测和比较miRNA靶序列介导的转录后抑制活性的方法,首次研究了过表达Lin28a和Lin28b对细胞中的let-7家族miRNA活性影响,并发现Lin28a和Lin28b对let-7家族miRNA表达水平的影响和对其相应活性的影响不一致性,说明在检测miRNA表达水平的同时检测miRNA活性能更全面揭示miRNA的调节功能,为进一步研究let-7家族的调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 lin28a lin28b let-7家族 活性 过表达
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NF-κBp65、Lin28B和IL-6在不同临产状态孕妇外周血中的表达 被引量：8
10
作者 马薇 朱天垣 +2 位作者 关慧敏 崔红梅 刘金英 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期906-909,共4页
目的:探讨NF-κBp65、Lin28B和IL-6在早产和足月妊娠孕妇外周血中的表达情况,进一步明确其在分娩发动中的预测价值。方法:采集先兆早产组、早产临产组、足月临产组和正常妊娠组各25例孕妇的外周血血清,采用ELISA法检测并比较4组血清中NF... 目的:探讨NF-κBp65、Lin28B和IL-6在早产和足月妊娠孕妇外周血中的表达情况,进一步明确其在分娩发动中的预测价值。方法:采集先兆早产组、早产临产组、足月临产组和正常妊娠组各25例孕妇的外周血血清,采用ELISA法检测并比较4组血清中NF-κBp65、IL-6、Lin28B的表达情况;同时将先兆早产组与早产临产组、临产组(包括早产临产组和足月临产组)与正常妊娠组NF-κBp65、IL-6、Lin28B表达水平行直线相关分析。结果:(1)NF-κBp65的表达水平在早产临产组中最高(13.99±0.72 ng/ml),IL-6的表达水平在早产临产组中最高(54.34±6.66 pg/ml),Lin28B的表达水平在正常妊娠组中最高(10.67±0.52 ng/ml),经LSD-t检验,4组中NF-κBp65、IL-6及Lin28B的表达水平两两间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)先兆早产组和早产临产组中NF-κBp65与IL-6的表达均呈正相关(r=0.557,P<0.05;r=0.587,P<0.05),NF-κBp65与Lin28B的表达及IL-6与Lin28B的表达均无相关性(P>0.05)。(3)临产组中NF-κBp65与IL-6的表达呈高度正相关(r=0.899,P<0.05),NF-κBp65与Lin28B的表达呈高度负相关(r=-0.863,P<0.05);IL-6表达水平与Lin28B的表达呈高度负相关(r=-0.798,P<0.05)。结论:IL-6和NF-κBp65对早产临产具一定预测价值;Lin28B与胎儿成熟程度相关,对早产无预测价值。 展开更多
关键词 NF—κp65 lin28B IL-6 早产 临产 正常妊娠
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微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌血管新生的关系研究 被引量：6
11
作者 李鹏 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期44-48,共5页
目的探讨微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌促血管生成因子的关系,并研究这一关系的作用机制。方法选取2012年4月-2014年在湖北省襄阳市中心医院耳鼻喉科就诊的鼻咽癌患者54例。另选取同期40例慢性鼻炎患者和32例健康者作为对照组。采... 目的探讨微小RNA Let-7/Lin28调节环与鼻咽癌促血管生成因子的关系,并研究这一关系的作用机制。方法选取2012年4月-2014年在湖北省襄阳市中心医院耳鼻喉科就诊的鼻咽癌患者54例。另选取同期40例慢性鼻炎患者和32例健康者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测组织中Lin28A、Lin28B及Let-7a mi RNA相对表达量,ELISA检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(b FGF)及内皮抑素(ES)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测H-Ras/PTEN/PI3K/Akt通路蛋白表达情况,分析mi RNA Let-7a/Lin28调节环与血管新生因子的关系。结果 RT-PCR检测发现鼻咽癌患者Lin28A miRNA和Lin28B mi RNA相对表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组(P<0.05),而Let-7a miRNA的相对表达量低于上述两组(P<0.05);ELISA检测结果发现鼻咽癌患者组VEGF、b GFG、ES表达量均高于慢性鼻炎组和健康对照组(P<0.05);Western blot检测发现鼻咽癌患者组病理组织中H-Ras、p-PI3K及p-Akt表达量高于慢性鼻炎患者组和健康对照组(P<0.05),而p-PTEN表达量低于上述两组(P<0.05);相关性分析发现,Lin28A、Lin28B mi RNA与VEGF、b FGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈正相关(P<0.05),Let-7a miRNA与VEGF、b FGF、H-Ras、p-PI3K及p-Akt呈负相关(P<0.05)。结论 miRNA Lin28/Let-7调节环与血管新生有定的关联性,而这一关联性可能与激活Ras/PI3K/PTEN/Akt通路有关。 展开更多
关键词 lin28A lin28B Let-7a 促血管生成因子 H-Ras/PTEN/PI3K/Akt
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Lin28B/let-7d环路调控成纤维细胞功能参与肺纤维化发生 被引量：9
12
作者 梁海海 李天宇 +1 位作者 解岩 单宏丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期175-180,共6页
目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth facto... 目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞(MRC-5)纤维性变;qRT-PCR检测组织及细胞中Lin28B、collagen 1α1、collagen 3α1变化;Western blot检测Lin28B蛋白表达;MTT、Edu染色和免疫荧光实验分别检测细胞活力、增殖及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转变。结果 Lin28B在肺纤维化小鼠和细胞中表达明显升高。Lin28B可诱导MRC-5细胞胶原合成增加,而过表达let-7d则减轻Lin28B的这一作用。进一步研究发现,Lin28B可诱导成纤维细胞增殖,并促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转变,这一作用是通过抑制let-7d来实现的。结论 Lin-28B通过抑制let-7d进而促进成纤维细胞增殖、分化,最终增加成纤维细胞胶原合成,诱发肺纤维化的发生,Lin28B可能作为肺纤维化的治疗新靶点。 展开更多
关键词 肺纤维化 lin28B let-7d MRC-5细胞 肌成纤维细胞 细胞增殖
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正常妊娠滋养层组织中Lin28B表达变化的研究 被引量：5
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作者 杨小梅 高媛 +2 位作者 王春晖 葛红 乔宠 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期446-450,共5页
目的：探讨Lin28B在正常妊娠不同阶段滋养层细胞中的表达变化及其临床意义。方法：收集40例正常早期妊娠者（孕早期组），包括20例妊娠5～7＋6周（孕早A组）和20例妊娠耻12＋2周（孕早B组），15例孕17-27周（孕中期组），以及20例孕37... 目的：探讨Lin28B在正常妊娠不同阶段滋养层细胞中的表达变化及其临床意义。方法：收集40例正常早期妊娠者（孕早期组），包括20例妊娠5～7＋6周（孕早A组）和20例妊娠耻12＋2周（孕早B组），15例孕17-27周（孕中期组），以及20例孕37～41周（孕晚期组），共75例正常孕妇的绒毛和胎盘组织。采用RT—qPCR、Westernblotting和免疫组织化学方法检测胎盘组织Lin28B基因和蛋白的表达差异及细胞定位。结果：①在正常妊娠不同时期的滋养层组织中细胞滋养细胞和合体滋养细胞中均可检测到Lin28B蛋白的表达。②Lin28BmRNA表达量各组间有统计学差异（P〈0．05），早孕A组最高，随着孕周进展逐渐下降，至孕晚期达最低水平。③正常妊娠不同时期的滋养层组织中Lin28B蛋白表达呈现为随着孕周的增加而逐渐下降趋势。结论：Lin28B在正常妊娠进展过程中表达下调，提示其可能参与了滋养细胞的增殖和浸润及胎盘的发育。 展开更多
关键词 lin28B 正常妊娠 绒毛 胎盘 滋养细胞
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宁夏回、汉族群体LIN28B基因多态性 被引量：4
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作者 裴利国 屈蕾 +4 位作者 贾飞 张钏 郭孟境 陆宏 霍正浩 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期128-133,共6页
目的探讨LIN28B基因rs314277和rs314276位点在宁夏地区回、汉族群体中及不同性别间的分布特征。方法研究对象来自宁夏医科大学2011级健康学生共705例,其中男性回、汉族分别为144例和167例,女性回、汉族分别为188例和206例。SNPs分型均... 目的探讨LIN28B基因rs314277和rs314276位点在宁夏地区回、汉族群体中及不同性别间的分布特征。方法研究对象来自宁夏医科大学2011级健康学生共705例,其中男性回、汉族分别为144例和167例,女性回、汉族分别为188例和206例。SNPs分型均采用基因测序来检测。结果宁夏回族群体LIN28B基因两个多态位点基因型频率及等位基因频率分别为:男性rs314277(AC:4.5%,CC:38.9%;A:2.3%,C:41.1%);rs314276(AA:2.7%,AC:21.4%,CC:19.3%;A:13.4%,C:30.0%);女性rs314277(AA:0.6%,AC:7.5%,CC:48.5%;A:4.4%,C:52.3%);rs314276(AA:3.3%,AC:28.9%,CC:24.4%;A:17.8%,C:38.9%);宁夏汉族群体LIN28B基因两个多态位点基因型频率及等位基因频率分别为:男性rs314277(AC:3.2%,CC:41.6%;A:1.6%,C:43.2%);rs314276(AA:4.6%,AC:17.4%,CC:22.8%;A:13.3%,C:31.5%);女性rs314277(AC:4.6%,CC:50.7%;A:2.3%,C:52.9%);rs314276(AA:4.8%,AC:18.8%,CC:31.6%;A:14.2%,C:41.0%)。结论宁夏人群LIN28B基因rs314277多态性位点等位基因频率在回、汉族之间差异有显著性(P<0.05);rs314276多态性位点基因型频率在回、汉族之间差异有显著性(P<0.05);LIN28B基因两个多态性位点在宁夏不同性别之间差异无显著性(P>0.05);宁夏人群两个多态性位点基因型和等位基因型频率的分布与人类基因组计划扫描所得不同种族人群相比差异有显著性(P<0.05)。 展开更多
关键词 lin28B基因 基因多态性 基因测序 回族 汉族
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LIN28A、E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量：10
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作者 李幼梅 张思仪 +2 位作者 赵连梅 单保恩 张超 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2017年第4期304-308,312,共6页
目的:研究RNA结合蛋白LIN28A、上皮间质转化相关因子E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及三者的相关性,探讨其对乳腺癌进展的影响。方法:收集40例浸润性乳腺癌组织标本及其对应的癌旁组织,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化... 目的:研究RNA结合蛋白LIN28A、上皮间质转化相关因子E-cadherin和vimentin在浸润性乳腺癌中的表达及三者的相关性,探讨其对乳腺癌进展的影响。方法:收集40例浸润性乳腺癌组织标本及其对应的癌旁组织,实时荧光定量PCR(qPCR)和免疫组织化学法分别检测LIN28A、E-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白的表达,分析其与临床病理指标之间的关系,TUNNEL法检测LIN28A阳性癌组织中的细胞凋亡情况,统计分析LIN28A和EMT相关蛋白之间的相关性及其与乳腺癌患者生存率之间的关系。结果:qPCR结果显示,LIN28A mRNA在乳腺癌组织中的相对表达水平高于癌旁组织,其与E-cadherin mRNA的表达水平呈负相关,与vimentin mRNA呈正相关(r依次=-0.340和0.380,P均<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,在乳腺癌组织中,LIN28A、Ecadherin和vimentin蛋白表达率分别为60%、55%和65%。LIN28A蛋白的表达与E-cadherin蛋白呈负相关(r依次=-0.533和0.364,P均<0.05),与vimentin蛋白呈正相关。LIN28A蛋白表达与肿瘤大小、病理分级和淋巴结转移有关。TUNEL检测结果显示,LIN28A蛋白表达阳性的乳腺癌组织中凋亡细胞率低于与癌旁组织(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,乳腺癌组织LIN28A蛋白表达阳性患者的生存率低于LIN28A蛋白表达阴性者(P<0.05)。结论:RNA结合蛋白LIN28A可能通过EMT促进乳腺癌的进展和转移,并且LIN28A高表达可能影响乳腺癌患者的预后。 展开更多
关键词 浸润性乳腺癌 lin28A E-钙黏蛋白 波形蛋白 上皮间质转化 凋亡
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宫颈上皮病变组织中LIN28B表达与高危型HPV感染的关系及临床意义 被引量：6
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作者 曹学全 王四玲 +4 位作者 卢洪胜 孙刚 章辉 杨朝晖 赵武干 《中国卫生检验杂志》 CAS 北大核心 2014年第15期2225-2228,2231,共5页
目的探讨LIN28B在宫颈上皮病变组织中表达与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染的关系及临床意义。方法应用免疫组化方法检测102例宫颈癌、83例宫颈上皮内瘤变(CIN)及33例宫颈炎组织中LIN28B表达情况,同时于术前采用第二代基因杂交捕获法... 目的探讨LIN28B在宫颈上皮病变组织中表达与高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)感染的关系及临床意义。方法应用免疫组化方法检测102例宫颈癌、83例宫颈上皮内瘤变(CIN)及33例宫颈炎组织中LIN28B表达情况,同时于术前采用第二代基因杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测患者HR-HPV感染情况。对随访3年以上宫颈癌患者进行生存分析。结果 LIN28B在宫颈癌中高表达率均高于CIN和宫颈炎(P<0.05)。LIN28B表达与组织学分级、FIGO分期、浸润深度及淋巴结是否转移有关(P<0.05)。HR-HPV在宫颈炎、CIN和宫颈癌中感染率依次升高(P<0.05),但与临床病理参数均无关(P>0.05)。LIN28B表达与HR-HPV感染呈正相关(P<0.05)。LIN28B表达与预后有关(P<0.05),而HR-HPV感染与预后无关(P>0.05)。结论 LIN28B表达和HR-HPV感染可反映宫颈上皮病变的程度,联合检测二者有助于宫颈癌筛查及临床病理因素的判断,LIN28B表达与宫颈癌患者的预后密切相关。 展开更多
关键词 lin28B 人乳头状瘤病毒 宫颈癌 第二代基因杂交捕获法 预后
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Lin28对肝癌HepG2细胞5-Fu敏感性的影响及其分子机制 被引量：3
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作者 陈少坚 林拥华 +2 位作者 吴友谊 魏剑锋 廖政戎 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期261-266,共6页
目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化... 目的:探讨RNA结合蛋白Lin28对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响及其机制。方法:应用pcDNA3.1-Lin28或si-Lin28转染HepG2细胞,采用q PCR及WB法检测转染后HepG2细胞Lin28的表达水平,CCK-8法检测5-Fu作用后转染细胞增殖活性变化并计算5-Fu对细胞作用的IC50,流式细胞术检测5-Fu处理后细胞凋亡情况、WB法检测凋亡相关蛋白的表达变化,qPCR法检测转染后耐药相关miRNA(let-7a和let-7b)及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的mRNA表达水平。结果:与空载对照组(HepG2/Vector)相比,HepG2/Lin28组细胞中Lin28 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),过表达Lin28可显著抑制HepG2细胞对5-Fu作用的敏感性(IC50明显升高,P<0.05)和增强细胞增殖活性、使细胞凋亡率和凋亡相关蛋白caspase-3表达明显降低(均P<0.01)。与阴性对照组(si-control)相比,si-Lin28细胞中Lin28表达水平显著下降(P<0.01);敲减Lin28可使细胞增殖活性及5-Fu的IC50显著降低(均P<0.01),凋亡率及凋亡蛋白表达明显增加(P<0.01)。与HepG2/Vector组比较,HepG2/Lin28细胞中let-7a、let-7b及肿瘤干细胞标记物(Oct4、Nanog和Sox2)的表达水平明显上调(均P<0.01),而si-Lin28细胞中let-7a、let-7b及Oct4、Nanog、Sox2的表达水平较si-control组明显下调(均P<0.01)。结论:Lin28可通过调节miRNAs的表达及肿瘤干细胞的形成从而调节肝癌HepG2细胞对化疗的敏感性,靶向调节Lin28表达有望成为提高肝癌化疗疗效的手段。 展开更多
关键词 肝细胞癌 HEPG2细胞 lin28 5-氟尿嘧啶 化疗敏感性 肿瘤干细胞 凋亡
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微小RNA Let-7/Lin28调节环在鼻咽癌中的表达及意义 被引量：3
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作者 黄孝文 饶丽华 +2 位作者 许胜 崔伟伟 崔永华 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期60-63,共4页
目的观察miRNA Let-7和Lin28在鼻咽癌组织中的相对表达并分析其相关性,探讨该调节环在鼻咽癌病理机制中的可能作用和意义。方法以正常鼻咽组织为对照,运用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法分别检查鼻咽癌组织中Lin28A/B和Let-7a... 目的观察miRNA Let-7和Lin28在鼻咽癌组织中的相对表达并分析其相关性,探讨该调节环在鼻咽癌病理机制中的可能作用和意义。方法以正常鼻咽组织为对照,运用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法分别检查鼻咽癌组织中Lin28A/B和Let-7amiRNA的相对表达量,并对两组数据进行相关性分析。采用免疫组织化学技术检查Lin28A/B在鼻咽癌组织中的表达部位和水平。结果 Real-time PCR实验显示,Lin28miRNA在鼻咽癌组织中的相对表达量较对照组升高,而Let-7amiRNA在鼻咽癌组织的相对表达量较对照组降低,差异有统计学意义;鼻咽癌组织中Lin28A/B miRNA和Let-7amiRNA的相对表达量呈负相关。免疫组织化学分析证实,Lin28蛋白在鼻咽癌组织呈阳性表达,定位于细胞质中;而在正常鼻咽组织中,Lin28无表达。结论在鼻咽癌组织中Lin28表达上调而Let-7amiRNA表达下调,且二者呈显著的负相关,提示Let-7/Lin28双向负反馈调节异常可能参与了鼻咽癌的发生发展。 展开更多
关键词 鼻咽癌 lin28 LET-7 实时定量聚合酶链反应 免疫组织化学
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男性原始生殖细胞中LIN28和OCT4的表达 被引量：2
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作者 汪亚芬 冯涵琪 +5 位作者 王兴玲 胡旭林 纪家葵 管一春 李丽 刘芳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期389-392,共4页
目的：分析LIN28在男性原始生殖细胞（PGCs）中的表达变化。方法：收集男性胚胎/胎儿,胎龄为7周、8周、9周、10周、11-12周、13-14周各3例。分离早期胚胎性腺组织,运用免疫荧光技术分析PGCs中LIN28和OCT4的表达。结果：6组睾丸组织中LI... 目的：分析LIN28在男性原始生殖细胞（PGCs）中的表达变化。方法：收集男性胚胎/胎儿,胎龄为7周、8周、9周、10周、11-12周、13-14周各3例。分离早期胚胎性腺组织,运用免疫荧光技术分析PGCs中LIN28和OCT4的表达。结果：6组睾丸组织中LIN28和OTC4阳性细胞百分数比较,差异均有统计学意义（F=15.651,6.501,P均〈0.05）。胎龄第7-14周,OCT4一直定位于PGCs的细胞核中;胎龄第8-9周时,OCT4在PGCs中的表达低于第7周,第10-12周OCT4表达再次升高,而在第13周后,OCT4表达逐渐降低。从胎龄第7周开始直至第14周,PGCs中LIN28蛋白的表达逐渐增强,在胎龄第13-14周达到最高峰。在定位上,在胎龄第7周时LIN28表达于PGCs胞核内;在胎龄第8-9周时,PGCs胞核和胞质中均可观察到LIN28的表达;而在胎龄第10周以后,部分PGCs仅胞质中表达LIN28;在胎龄第11-14周时LIN28均定位于PGCs的胞质中。结论：LIN28可能是一个可行的、比较稳定的雄性生殖细胞标记因子。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 lin28 OTC4 男性
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Lin28/let-7调控区SNP对妊娠期糖尿病易感性的影响与机制研究 被引量：5
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作者 童佩 刘云 +1 位作者 孙丽洲 卢红梅 《临床和实验医学杂志》 2017年第1期20-23,共4页
目的探究Lin28/let-7调控区SNP对妊娠期糖尿病(GDM)易感性的影响,从基因角度为妊娠期糖尿病的检测提供依据。方法选取2013年1月至2015年12月收治的212例患有妊娠期糖尿病的孕妇为观察组,同期入院进行检的262例正常孕妇为对照组,收集所... 目的探究Lin28/let-7调控区SNP对妊娠期糖尿病(GDM)易感性的影响,从基因角度为妊娠期糖尿病的检测提供依据。方法选取2013年1月至2015年12月收治的212例患有妊娠期糖尿病的孕妇为观察组,同期入院进行检的262例正常孕妇为对照组,收集所有孕妇外周血样本。比较两组患妊娠期糖尿病指标,采用Real-time PCR对两组患者let-7的表达水平进行检测,采用生物信息学方法对两组患者let-7上3个前提启动子调控区域标签进行检测和筛选。使用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法对所有患者前期检测筛选出的3个SNP进行基因分型。采用RT-qPCR、Western blotting和免疫组织化学方法对胎盘组织中的Lin28B基因以及Lin28基因表达生成的蛋白进行检测,并比较基因和蛋白差异及细胞定位。结果 Real-time PCR监测结果发现,观察组多数患者let-7基因表达水平较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);rs3811463、rs3811464以及rs11247955三个结合位点的预测杂合度最高。结论 Lin28/let-7的基因多态性与GDM的易感性相关,其机制可能为Lin28基因的非同义突变改变了Lin28或let-7的表达水平,Lin28与let-7进一步平衡放大,进而影响细胞的糖代谢和胰岛素敏感性,从而造成个体对GDM遗传易感性的变化。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 lin28/let-7 SNP 易感性
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