let-7b-5p靶向IGF1R调控脑胶质瘤细胞生长的机制

1

作者 刘喜红 杜晓丹 +4 位作者 范孟杨 徐柳清 杨丽萍 侯俊林 赵培源 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期359-364,共6页

目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染... 目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染法下调脑胶质瘤细胞U251中let-7b-5p和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的表达,采用qRT-PCR、CCK8、克隆形成实验、Western blot、双荧光素酶报告基因等技术检测let-7b-5p在U251细胞生长中的作用及潜在的机制。结果let-7b-5p在脑胶质瘤细胞(A172:3.64±0.64、V251:4.56±0.52、U87-MG:3.31±0.50)和组织中(2.18±0.22)的表达显著高于星形胶质细胞(HMC3:1.00±0.21,P<0.05或P<0.01)和正常脑组织(1.01±0.19,P<0.05),其表达水平与脑胶质瘤患者WHO分级呈负相关(P<0.0001),与原发性和复发性脑胶质瘤患者的生存率呈正相关(P<0.0001,P=0.028);敲减U251细胞中let-7b-5p的表达可促进脑胶质瘤细胞的生长(CCK8:let-7b-5p敲减组126.00±12.09 vs miR-NC组90.93±5.13,P<0.05),激活PI3K/AKT信号通路;在U251细胞中抑制IGF1R表达可以逆转let-7b-5p低表达促进脑胶质瘤细胞生长[CCK8:let-7b-5p敲减组+IGF1R敲减组(92.08±6.14)vs let-7b-5p敲减组+sh-NC组(116.67.08±8.50)]、激活PI3K/AKT信号通路的效应。结论let-7b-5p在脑胶质瘤细胞中起抑癌基因作用,let-7b-5p可能通过靶向IGF1R激活PI3K/AKT信号通路参与脑胶质瘤细胞的进程。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 let-7b-5p IGF1R PI3K/AKT

暂未订购

Let-7b-5p靶向MSI2和FOXC1调控绒山羊毛囊干细胞的增殖和分化

2

作者 闫海龙 李艳 +6 位作者 金妙函 高晔 李进霞 孙文慧 康佳琪 王小龙 陈玉林 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第10期36-43,共8页

该研究旨在揭示miRNA let-7b-5p在绒山羊毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)增殖和分化过程的调控机制。对绒山羊的毛囊干细胞进行鉴定、分离和培养,通过Lipofectamine○R 3000将let-7b-5p和对照组miRNA(NC mimics)转染至绒山... 该研究旨在揭示miRNA let-7b-5p在绒山羊毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)增殖和分化过程的调控机制。对绒山羊的毛囊干细胞进行鉴定、分离和培养,通过Lipofectamine○R 3000将let-7b-5p和对照组miRNA(NC mimics)转染至绒山羊毛囊干细胞,利用CCK8和EdU法检测方法评估let-7b-5p对细胞增殖能力的影响,并分析与细胞增殖相关的基因(PCNA、KI67、AKT和mTOR)的表达水平。此外,检测与细胞分化相关的基因(S100A3、K6、Notch1和β-catenin)的表达变化;为了进一步验证let-7b-5p与其预测靶基因之间的相互作用,构建双萤光素酶报告系统,检测let-7b-5p和预测靶基因之间的靶向关系。结果表明,let-7b-5p对HFSCs的增殖能力有显著的抑制作用(P<0.01),let-7b-5p处理的HFSCs中细胞增殖关键标志基因PCNA、KI67以及AKT信号通路相关基因的表达显著下降(P<0.01)。let-7b-5p显著激活了毛囊分化相关标志基因K6和S100A3以及Notch1通路的表达(P<0.01)。let-7b-5p过表达时,MSI2和FOXC1基因的萤光素酶报告活性有显著下降。综上所述,let-7b-5p直接靶向FOXC1和MSI2基因,经AKT信号通路抑制绒山羊HFSCs的增殖;同时,let-7b-5p通过Notch信号通路促进了绒山羊HFSCs向毛囊细胞的定向分化。 展开更多

关键词 绒山羊 毛囊干细胞 增殖 let-7b-5p

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-Let-7b靶向LOX-1减轻子宫内膜纤维化的机制

3

作者 秦晓洋 戚静宜 +1 位作者 王芳 宋瑞芳 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2024年第6期407-415,共9页

目的:检测miR-Let-7b及LOX-1在纤维化子宫内膜中的表达,分析miR-Let-7b靶向LOX-1在减轻子宫内膜纤维化中的作用。方法:分别构建人子宫内膜间质细胞株(hESCs)纤维化模型(TGF-β1-hESCs)及小鼠宫腔粘连模型,qRT-PCR法检测miR-Let-7b及LOX-... 目的:检测miR-Let-7b及LOX-1在纤维化子宫内膜中的表达,分析miR-Let-7b靶向LOX-1在减轻子宫内膜纤维化中的作用。方法:分别构建人子宫内膜间质细胞株(hESCs)纤维化模型(TGF-β1-hESCs)及小鼠宫腔粘连模型,qRT-PCR法检测miR-Let-7b及LOX-1表达。慢病毒转染法将TGF-β1-hESCs细胞分为NC组、miR-con组、miR-Let-7bmimic组、miR-Let-7b+pcDNA组和miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组,CCK-8法、EdU法及细胞划痕试验检测各组细胞增殖、迁移能力。将小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组(宫腔注射miR-Let-7bmimic),HE染色观察子宫内膜病理变化,Masson染色法观察子宫内膜纤维化面积,Westernbloting检测各组细胞及子宫内膜组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达。双荧光素酶报告基因法验证miR-Let-7b和LOX-1间的靶向关系。结果:TGF-β1-hESCs细胞及宫腔粘连小鼠子宫内膜组织中miR-Let-7b均呈低表达,而LOX-1呈高表达,差异显著(P<0.001)。miR-Let-7bmimic组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均低于NC组及miR-con组,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均高于miR-Let-7b+pcDNA组,细胞内α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b与WT-LOX-1共转染后,miR-Let-7bmimic组细胞荧光素酶活性明显低于miR-con组,差异显著(P<0.001)。与模型组相比,治疗组小鼠子宫内膜腺体数量增多,纤维化面积减少,α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达降低,差异明显(P<0.05)。结论:miR-Let-7b在纤维化子宫内膜中低表达,而LOX-1呈高表达,miR-Let-7b可靶向LOX-1减轻子宫内膜纤维化,机制可能与抑制上皮间充质转化有关。 展开更多

关键词 miR-let-7b LOX-1 子宫内膜 纤维化 宫腔粘连

暂未订购

Hsa-let-7b-5p抑制非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭 被引量：1

4

作者 程泳铭 董欢欢 徐晖 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2024年第3期157-167,共11页

目的探讨hsa-let-7b-5p在非小细胞肺癌临床诊断和靶向治疗中的价值。方法收集2020年9月-10月的13对哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理类型相同的非小细胞肺癌癌组织及其癌旁组织,通过RNA-Seq获得差异表达的miRNA,并通过qRT-PCR验证候选mi... 目的探讨hsa-let-7b-5p在非小细胞肺癌临床诊断和靶向治疗中的价值。方法收集2020年9月-10月的13对哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理类型相同的非小细胞肺癌癌组织及其癌旁组织,通过RNA-Seq获得差异表达的miRNA,并通过qRT-PCR验证候选miRNA在非小细胞肺癌组织和细胞中的表达水平。通过CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验验证miRNA对非小细胞肺癌增殖、迁移和侵袭能力的影响。利用MiRDB、TarBase和ENCORI数据库预测靶基因,并利用FunRich工具进行基因富集分析。结果与癌旁组织及正常支气管上皮细胞系(Human bronchial epithelial cell,HBE)相比,hsa-let-7b-5p在非小细胞肺癌组织及非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H358和H460)中低表达(P<0.05)。hsa-let-7b-5p的高表达可以抑制非小细胞肺癌增殖、迁移和侵袭能力(P<0.01)。靶基因预测及富集分析结果显示hsa-let-7b-5p的378个靶基因及其相关基因中,147个基因与hsa-let-7b-5p的表达呈负相关(P<0.05)。结论Hsa-let-7b-5p对非小细胞肺癌的增殖、迁移和侵袭有抑制作用。 展开更多

关键词 hsa-let-7b-5p 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭 生物标志物

暂未订购

miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后脊髓NF-200、GFAP表达的影响 被引量：9

5

作者 徐玉生 崔浩 +4 位作者 张松 王培松 朱海洋 钟斌 苗金红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期400-403,共4页

目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's... 目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制。方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只。采用改良Allen's法制备脊髓损伤模型。造模后1周,BMSCs组行BMSCs移植,miRNA组移植miRNA let-7b慢病毒载体感染的BMSCs,对照组注射生理盐水。移植后第3天至8周,按BBB标准量表对大鼠后肢运动功能进行评分,用免疫组化方法检测脊髓中神经丝蛋白-200(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:实验时间内,各组大鼠BBB评分和脊髓NF-200表达持续升高;不同时间点BBB评分和脊髓NF-200表达以miRNA组最高,BMSCs组次之,对照组最低(P<0.05)。移植后各组脊髓GFAP表达均呈持续性增高,各时间点GFAP阳性表达面积以对照组最大,BMSCs次之,miRNA组最小(P<0.05)。结论:miRNA let-7b可能通过促进BMSCs分化为神经元样细胞、抑制脊髓损伤后反应性胶质细胞的增生及胶质瘢痕形成等机制促进损伤后的神经功能恢复。 展开更多

关键词 MIRNA let-7b 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 细胞移植 大鼠

暂未订购

热适应/热射病大鼠血清中microRNA let-7b的变化及意义 被引量：3

6

作者 李腾达 谷明莉 +7 位作者 邓顺江 孙懿 张薇薇 郭杰 刘云 黄元兰 钱琤 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第2期19-22,共4页

目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组... 目的探究热适应/热射病大鼠模型血清中microRNA let-7b表达的变化及其与HSP70,IL-6,TNF-αTGF-β和IL-12的相关性,分析其临床意义。方法在第二军医大学实验动物中心选取肛温、体重、用龄基本一致的雄鼠60只随机均分为对照组、热适应组、热射病组,于仿真热气候动物舱中建立热适应/热射病大鼠模型后采集心尖血并分离血清。以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中microRNA let-7b,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HSP70,IL-6,TNF-α,TGF-β和IL-12的蛋白水平。三组间计量资料的比较采用Kruskal-Wallis H检验,以Spearman秩相关系数表示热射病组两变量之间的相关性。结果 miRNA let-7b在对照组、热适应组、热射病组的M分别为0.99,1.04和1.93,Q分别为0.30,0.25和0.44,差异具有统计学意义(x^2=38.95,P<0.001),组间两两比较结果显示let-7b在对照组与热适应组表达差异无统计学意义(P>0.05),在对照组与热射病组、热适应组与热射病组表达差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析显示热射病组let-7b/与HSP70,TNF-α和IL-6呈正相关,差异具有统计学意义(r_s=0.579,0.498和0.609,P<0.05)。结论 miRlet-7b可能参与了热射病病理过程,为临床监测高温湿环境下患者的状态提供了潜在的评价指标。 展开更多

关键词 MICRORNA let-7b 热射病 热适应 热休克蛋白 肿痛坏死因子-α

暂未订购

miR-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡 被引量：6

7

作者 秦琴 宁花兰 +3 位作者 陈小燕 陈少英 张艳珍 陈大江 《中国美容医学》 CAS 2018年第7期79-82,共4页

目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-le... 目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的增殖能力的变化情况;流式细胞术检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的凋亡行为的变化情况。结果:与癌旁正常皮肤组织相比,黑色素瘤组织中mi R-let-7b的表达水平相对上调,与其他黑色素瘤细胞株相比,A375细胞中mi R-let-7b表达最高;双荧光素酶实验证实mi R-let-7b能与CCND1的3’UTR特异性结合,可以调控CCND1的表达与活性;抑制mi R-let-7b的表达后可以抑制黑色素瘤细胞的增殖能力;同时可以促进黑色素瘤细胞的凋亡行为。结论:mi R-let-7b可以调控CCND1的表达从而影响黑色素瘤细胞的增殖和凋亡。 展开更多

关键词 mi R-let-7b 黑色素瘤 CCND1 凋亡 增殖

暂未订购

miRlet-7b抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移及其机制 被引量：3

8

作者 曲杰 王胜林 +2 位作者 吕喜英 李青山 杨宗伟 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2012年第4期328-331,共4页

目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后M... 目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后MCF-7细胞内IL-6表达水平的变化。最后通过信息生物学软件及双荧光酶素报告基因方法验证miR let-7b与IL-6结合。结果:与对照组比较,转染miR let-7b的MCF-7细胞迁移能力明显降低,而anti-miR let-7b明显促进细胞迁移。转染miR let-7b的乳腺癌MCF-7细胞中IL-6的表达水平较对照组明显降低,而转染anti-miR let-7b的细胞内IL-6的表达水平明显提高。信息生物学软件和双荧光酶素报告基因证实miR let-7b与IL-6结合。结论:miR let-7b在转录水平抑制乳腺癌MCF-7细胞IL-6的表达从而抑制MCF-7细胞的迁移。 展开更多

关键词 miRlet-7b IL-6 乳腺癌MCF-7细胞 迁移

暂未订购

microRNA let-7b在急性淋巴细胞白血病的表达分析与表观遗传学研究 被引量：2

9

作者 许文前 黄源茂 肖慧芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1535-1541,共7页

目的:探讨microRNA let-7b在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及其作用机制,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对ALL患者和非恶性血液病患者骨髓单个核细胞(对照组)中microRNA let-7b启动子区Cp... 目的:探讨microRNA let-7b在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达及其作用机制,为寻求新的靶向治疗方法提供依据。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)对ALL患者和非恶性血液病患者骨髓单个核细胞(对照组)中microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化状态进行分析;应用实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)检测其microRNA let-7b的表达水平;5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-d C,DAC)对成人ALL细胞株MOLT-4进行处理;用MSP对药物处理后细胞内microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化状态进行分析;应用q PCR检测药物处理后细胞内microRNA let-7b的表达水平,探讨microRNA let-7b表达的调控机制。结果:ALL患者microRNA let-7b启动子区CpG岛的甲基化率明显高于非恶性血液病患者,其microRNA let-7b的相对表达量明显降低;5-aza-d C能够显著地抑制MOLT-4细胞株的生长,使细胞周期停滞于G1期,抑制细胞RNA和蛋白质的生物合成,促进细胞发生凋亡,与此同时,能上调microRNA let-7b的表达。结论:在ALL患者中microRNA let-7b的表达受基因组启动子区CpG岛甲基化修饰的调控,microRNA let-7b可能作为抑癌基因,其低表达可能参与ALL的发生、发展,提示microRNA let-7b可能成为治疗ALL的新靶向。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 MICRORNA let-7b 表观遗传学 甲基化

暂未订购

mir-17-5p、mir-92a、let-7b表达水平与非小细胞肺癌顺铂耐药的关系 被引量：4

10

作者 宋先璐 廖志伟 +2 位作者 余宏伟 杨光平 殷俊 《分子影像学杂志》 2016年第3期286-291,共6页

目的探讨mir-17-5p、mir-92a、let-7b表达水平与非小细胞肺癌顺铂耐药关系。方法以人非小细胞肺癌细胞系A549及其耐药株A549/DDP为研究对象,采用RT-PCR法检测mir-17-5p、mir-92a及let-7b在细胞中的表达水平,采用cck8检测其细胞存活情况... 目的探讨mir-17-5p、mir-92a、let-7b表达水平与非小细胞肺癌顺铂耐药关系。方法以人非小细胞肺癌细胞系A549及其耐药株A549/DDP为研究对象,采用RT-PCR法检测mir-17-5p、mir-92a及let-7b在细胞中的表达水平,采用cck8检测其细胞存活情况,采用细胞克隆平台方法,检测转染前后细胞的增殖情况,采用流式细胞仪检测转染前后细胞的凋亡情况。结果(1)A549/DDP细胞mir-17-5p的表达水平是A549细胞的2.11±0.25倍(P<0.05);A549/DDP细胞mir-92a的表达水平是A549细胞的7.40±1.05倍(P<0.05);而A549/DDP细胞let-7b的表达水平是A549细胞的(26.54±2.90)%(P<0.05);(2)A549转染mir-17-5pmimic,mir-92a mimic以及let-7b inhibitor后对顺铂的敏感性下降(P<0.05);A549/ddp转染mir-17-5p inhibitor,mir-92a inhibitor以及let-7b mimic后对顺铂的敏感性增加(P<0.05);(3)A549转染mir-17-5p mimic,mir-92a mimic以及let-7b inhibitor后,细胞形成克隆集落数量数量多于对照组(P<0.05);而A549/ddp转染mir-17-5p inhibitor,mir-92a inhibitor以及let-7b mimic后,细胞形成克隆集落数量数量少于对照组(P<0.05);(4)A549转染mir-17-5p mimic,mir-92a mimic以及let-7b inhibitor后,细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.05);而a549/ddp转染mir-17-5p inhibitor,mir-92a inhibitor以及let-7b mimic后,细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05)。结论 Mir-17-5p、mir-92a表达水平升高,let-7b表达水平下降,可以促进肺癌细胞增殖,抑制其凋亡以及使肺癌细胞对顺铂敏感性下降。 展开更多

关键词 肺癌 mir-17-5p mir-92a let-7b 顺铂 敏感性

暂未订购

let-7b通过靶向调控SALL4影响肝母细胞瘤细胞增殖能力的机制研究 被引量：1

11

作者 程继文 赵璞 +5 位作者 杨薇粒 郑百俊 潘伟康 龚伟 余强 李鹏 《临床小儿外科杂志》 CAS 2020年第5期404-409,共6页

目的初步研究let-7b和SALL4在肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)细胞恶性行为中的作用及二者间的相互作用机制。方法采用qRT-PCR检测let-7b在正常肝细胞(HL-7702)与HB细胞系、HB组织及癌旁组织中的表达水平,采用免疫组化法检测SALL4在HB组... 目的初步研究let-7b和SALL4在肝母细胞瘤(hepatoblastoma,HB)细胞恶性行为中的作用及二者间的相互作用机制。方法采用qRT-PCR检测let-7b在正常肝细胞(HL-7702)与HB细胞系、HB组织及癌旁组织中的表达水平,采用免疫组化法检测SALL4在HB组织及癌旁组织中的表达水平,并分析HB组织中let-7b与SALL4表达水平的相关性。通过MTT、细胞周期和凋亡等实验方法上调或抑制HB细胞中let-7b的表达水平,观察let-7b对HB细胞生物学功能的影响;通过生物信息学预测软件、双荧光素酶报告系统、qRT-PCR和western blot等实验,从体外水平验证let-7b与SALL4的靶向关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同let-7b与SALL4表达水平的肝母细胞瘤患者总体生存率的差异。结果与癌旁组织相比,let-7b在HB组织中表达量显著降低,而SALL4表达量显著升高;let-7b在肝母细胞瘤组织中的表达水平与PRETEXT分期存在相关性(P=0.002),且HB组织标本中let-7b与SALL4的表达水平存在负相关性(r=-0.716,P<0.001)。let-7b低表达组HB患者的总体生存率显著低于let-7b高表达组(P=0.017)。SALL4阳性组HB患者的总体生存率显著低于SALL4阴性和弱阳性组(P=0.034)。MTT、细胞周期和凋亡实验结果显示,let-7b可抑制肝癌Hep G2细胞增殖,促进细胞的凋亡。而抑制内源性的let-7b可促进Hep G2细胞增殖,抑制细胞的凋亡。生物信息学软件预测及构建双荧光报告载体荧光检测等实验结果显示,let-7b与SALL4存在一定的靶向关系。结论let-7b和SALL4可作为肝母细胞瘤不良预后的潜在标记物;let-7b作为抑癌基因可以靶向调控SALL4的表达,抑制HB细胞的增殖。 展开更多

关键词 let-7b 肝肿瘤 SALL4 细胞增殖

暂未订购

Let-7b慢病毒载体构建及对大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为神经细胞的影响 被引量：1

12

作者 张静 徐小隔 +6 位作者 龚哲 赵绍云 何霞 王天舒 焦淑洁 滕军放 贾延劼 《中国实用神经疾病杂志》 2014年第23期1-4,共4页

目的探讨Let-7b过表达和Let-7b抑制慢病毒载体在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法构建Let-7b过表达和Let-7b抑制慢病毒载体并感染大鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI);实验分未感染组、感染组1(感染LV-rno-L... 目的探讨Let-7b过表达和Let-7b抑制慢病毒载体在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法构建Let-7b过表达和Let-7b抑制慢病毒载体并感染大鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI);实验分未感染组、感染组1(感染LV-rno-Let-7b-up)、感染组2(感染LV-rno-Let-7b-inhibition)、阴性对照组(感染空病毒);采用法舒地尔诱导感染后大鼠MSCs分化为神经元细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后荧光表达情况;采用免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶(NSE)、神经微管结合蛋白(MAP-2)的表达变化;PT-PCR检测MAP-2mRNA的表达变化;MTT法检测细胞存活率。结果倒置显微镜下观察大鼠LV-rno-Let-7b-up和LV-rno-Let-7b-inhibition慢病毒载体感染成功,MOI值为10,感染3d时大鼠LV-rno-Let-7b-up慢病毒感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达(92.1±4.3)%;MOI为20,感染5d时大鼠LV-rno-Let-7b-inhibition慢病毒感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达(90.3±4.2)%。法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,感染组1诱导MSCs为神经细胞显著高于阴性对照组和感染组2,NSE、MAP-2表达率明显高于阴性对照组和感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结论 LV-rno-Let-7b-up可更高效感染大鼠MSCs,感染LV-rno-Let-7b-up后大鼠MSCs经法舒地尔诱导向神经细胞分化比率增加。 展开更多

关键词 let-7b 骨髓间充质干细胞 神经元

暂未订购

miRNA-Let-7b调控胃癌顺铂耐药性的机制研究 被引量：2

13

作者 韩啸 张竞竞 韩正全 《中国卫生标准管理》 2017年第6期64-66,共3页

目的探究miRNA-Let-7b调控胃癌细胞顺铂化疗耐药的分子机理。方法将胃癌细胞系SGC-7901耐药株作为研究对象,采用RT-PCR法对miRNA-Let-7b在胃癌细胞中的表达水平进行检测,对细胞存活情况、转染前后细胞增殖情况及凋亡情况进行综合分析。... 目的探究miRNA-Let-7b调控胃癌细胞顺铂化疗耐药的分子机理。方法将胃癌细胞系SGC-7901耐药株作为研究对象,采用RT-PCR法对miRNA-Let-7b在胃癌细胞中的表达水平进行检测,对细胞存活情况、转染前后细胞增殖情况及凋亡情况进行综合分析。结果 SGC-7901/DDP细胞miRNA-Let-7b表达水平是SGC-7901的(27.37±2.84)%(P<0.05),差异有统计学意义;SGC-7901转染Let-7b inhibitor后对顺铂的敏感性降低(P<0.05),差异有统计学意义,SGC-7901转染miRNA-Let-7b minmic后对顺铂的敏感性则得到了增强(P<0.05);SGC-7901转染miRNA-Let-7b mimic后,细胞凋亡率增强,高于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论miRNA-Let-7b表达水平的降低能够在一定程度上加快胃癌细胞增殖,抑制细胞凋亡,使胃癌细胞对顺铂敏感度降低,为临床抗癌药物的研发提供参考。 展开更多

关键词 miRNA-let-7b 胃癌细胞 顺铂 耐药性 分子机理

暂未订购

组织微阵列方法检测let-7b在乳腺癌组织中的表达

14

作者 马琳 李贵柱 孟刚 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第2期148-150,共3页

目的:探讨let-7b在乳腺癌组织中的表达。方法:建立组织微阵列,应用原位分子杂交检测80例人乳腺癌组织和22例乳腺良性病变组织中let-7b的表达。结果:乳腺癌组织中let-7b阳性率为35.0%,低于乳腺良性病变组织中的59.1%(P<0.05)。结论:le... 目的:探讨let-7b在乳腺癌组织中的表达。方法:建立组织微阵列,应用原位分子杂交检测80例人乳腺癌组织和22例乳腺良性病变组织中let-7b的表达。结果:乳腺癌组织中let-7b阳性率为35.0%,低于乳腺良性病变组织中的59.1%(P<0.05)。结论:let-7b低表达可以促进乳腺癌的发生、发展。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 let-7b MIRNA

暂未订购

LncRNA MVIH通过调节let-7b-5p促进胃癌细胞顺铂耐药

15

作者 胡婷 李琦梅 +2 位作者 汪婷婷 曾会会 汪子书 《包头医学院学报》 CAS 2023年第10期11-17,22,共8页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MVIH与胃癌细胞顺铂耐药的关系及其调控机制。方法:构建胃癌顺铂耐药细胞,CCK8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC50),并计算耐药系数;实时定量PCR(qRT-PCR)分析耐药细胞中lncRNA MVIH和let-7b-5p... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)MVIH与胃癌细胞顺铂耐药的关系及其调控机制。方法:构建胃癌顺铂耐药细胞,CCK8法检测细胞增殖能力和顺铂半数抑制浓度(IC50),并计算耐药系数;实时定量PCR(qRT-PCR)分析耐药细胞中lncRNA MVIH和let-7b-5p的表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bax和Caspase3的表达;通过lncLocator数据库和lncRNASNP2数据库分析lncRNA MVIH在细胞中的分布情况和可能调控的miRNA,双萤光素酶报告基因实验进行验证;生物信息学分析let-7b-5p在胃癌和癌旁组织的表达情况以及对胃癌预后的影响。结果:胃癌顺铂耐药细胞MGC803R中lncRNA MVIH的表达高于其亲本细胞MGC803(P<0.05);在MGC803R中转染siMVIH显著增加了顺铂诱导的细胞凋亡,凋亡相关蛋白Bax和Caspase3显著上调,同时抑制了其增殖(P<0.05);lncRNA MVIH富集在细胞质中,可以靶向调控let-7b-5p,且let-7b-5p在胃癌中低表达,并与胃癌预后呈正相关(P<0.05);在MGC803中同时转染siMVIH和let-7b-5p抑制剂,逆转了lncRNA MVIH对细胞顺铂敏感性的调控。结论:LncRNA MVIH通过调节let-7b-5p促进胃癌细胞顺铂耐药。 展开更多

关键词 LncRNA MVIH 胃癌 顺铂耐药 let-7b-5p

暂未订购

结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中Let-7b的表达水平及临床意义 被引量：8

16

作者 路雁惠 郭斌 +5 位作者 张锐毅 温璐璐 吴凯敏 李燕飞 何谦益 贾延劼 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2018年第12期1107-1110,共4页

目的研究结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中Let-7b的表达水平及临床意义。方法采用病例对照研究,收集结核性脑膜炎患者、病毒性脑膜炎患者及健康对照者脑脊液各15例,使用试剂盒法分离提纯脑脊液外泌体,应用荧光实时定量聚合酶链反应法检... 目的研究结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中Let-7b的表达水平及临床意义。方法采用病例对照研究,收集结核性脑膜炎患者、病毒性脑膜炎患者及健康对照者脑脊液各15例,使用试剂盒法分离提纯脑脊液外泌体,应用荧光实时定量聚合酶链反应法检测各组脑脊液外泌体中let-7b相对表达水平。结果 (1)结核性脑膜炎和病毒性脑膜炎及对照组脑脊液中均可以检测到外泌体,透射电镜下呈圆形或椭圆形,直径约30～100 nm。荧光定量PCR检测发现3组脑脊液外泌体中均可检测到let-7b;(2)结脑组脑脊液外泌体中let-7b的表达显著低于对照组,差异具有明显统计学意义(P <0. 05);(3)病脑组与对照组相比,病脑组let-7b表达下调,差异具有统计学意义(P <0. 05);(4)结脑组与病脑组相比,结脑组let-7b表达下调,但该差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论 let-7b在结核性脑膜炎患者脑脊液外泌体中表达下调,可作为该疾病的诊断及相关脑炎的鉴别诊断的潜在生物学标志物。 展开更多

关键词 结核性脑膜炎 外泌体 let-7b

暂未订购

鸡let-7b在不同生长时期及不同组织中的表达及其生物信息学分析与靶基因预测 被引量：1

17

作者 黄正洋 王钱保 +4 位作者 黄华云 李春苗 穆春宇 黎寿丰 赵振华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第2期429-437,共9页

为探究let-7b在鸡不同生长时期和不同组织中的表达规律及生物信息学特点,以苏禽3号肉鸡为试验材料,检测鸡let-7b在不同时期和不同组织中的表达变化,通过生物信息学工具对常见脊椎动物的let-7b序列特点及基因组定位进行分析,构建系统进化... 为探究let-7b在鸡不同生长时期和不同组织中的表达规律及生物信息学特点,以苏禽3号肉鸡为试验材料,检测鸡let-7b在不同时期和不同组织中的表达变化,通过生物信息学工具对常见脊椎动物的let-7b序列特点及基因组定位进行分析,构建系统进化树,并对靶基因进行预测。结果表明,在鸡大脑、心、胸肌和腿肌中,let-7b的相对表达量较高,且90日龄相对表达量显著高于3日龄。let-7b位于1号染色体基因间隔区,不同物种let-7b的成熟序列同源性较高,进化树分析结果表明,鸡let-7b与鸟类聚为一类。靶基因预测分析共获得263个靶基因,对获得的靶基因进行基因本体(GO)功能富集分析,发现靶基因主要富集到蛋白质泛素化、miRNA介导的翻译抑制和mRNA 3′-非翻译区(3′-UTR)结合等方面。KEGG通路分析发现,靶基因主要富集到丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、转化生长因子β(TGF-β)通路和卵母细胞减数分裂等通路。总之,鸡let-7b在组织中广泛表达,物种间较为保守;结合靶基因富集分析结果,推测let-7b可能通过靶向MAPK和TGF-β等信号通路参与调控鸡肌肉生长及细胞增殖分化。 展开更多

关键词 let-7b 靶基因 生物信息学 表达分析 鸡

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在慢型克山病患者血清中表达及意义的研究 被引量：1

18

作者 甄荣霞 王铜 +4 位作者 冯红旗 侯杰 陈向丽 王哲 徐春艳 《中国地方病防治》 CAS 北大核心 2016年第11期1208-1211,共4页

目的通过检测慢型克山病和对照组外周血中miR-320a、miR-18b、miR-22、Let-7b的表达水平,探讨其作为疾病鉴别诊断的生物标志物的意义。方法收集克山病病区慢型克山病患者(40例)、非病区对照组(40例)及病区对照组(40例)的血样标本,采用... 目的通过检测慢型克山病和对照组外周血中miR-320a、miR-18b、miR-22、Let-7b的表达水平,探讨其作为疾病鉴别诊断的生物标志物的意义。方法收集克山病病区慢型克山病患者(40例)、非病区对照组(40例)及病区对照组(40例)的血样标本,采用实时荧光定量PCR技术检测各组研究对象血清中目标miRNA的表达水平。结果 miR-320a、miR-18b和Let-7b在两对照组间比较有统计学意义(P<0.05);比较克山病组和病区对照组,miR-320a和Let-7b有统计学意义(P<0.05),提示这3个目标miRNA与高血压具有相关性。miR-22在三组比较中均无意义。结论 miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在克山病患者中未见显著表达,为慢型克山病的鉴别诊断提供了新思路。 展开更多

关键词 克山病 生物标志物 miR-320a miR-18b miR-22 let-7b

原文传递

MicroRNA Let-7b介导甲型流感突变型PB1重组病毒的构建 被引量：1

19

作者 谭鸣鸣 沈小玥 +2 位作者 孙文逵 夏迪 施毅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第7期683-687,共5页

目的疫苗是预防流感所致疾病的最有效方法,MicroRNA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有miRNA Let-7b结合靶位PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对A/Nanjing/108/2009H1N1的PA、PB1、PB2与let-7b的... 目的疫苗是预防流感所致疾病的最有效方法,MicroRNA介导的基因沉默机制为构建新型疫苗提供了新思路。文中旨在构建包含装载有miRNA Let-7b结合靶位PB1基因的甲型流感重组病毒。方法比对A/Nanjing/108/2009H1N1的PA、PB1、PB2与let-7b的靶序列选定PB1基因为最优序列后,通过基因突变,插入Let-7b的结合靶位;构建p DP2000重组表达载体,设计p DP-mu-PB1,同时设计对照组p DP-sclb-PB1,并与其余7个质粒共转染MDCK细胞和293T细胞拯救病毒;留取上清接种鸡胚尿囊腔,血凝法检测病毒,TCID50检测病毒滴度;提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增病毒c DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析鉴定病毒。结果选择PB1片段最优序列(位置83 bp-107 bp),突变片段改变了3个氨基酸,同时有3个碱基不能与Let-7b靶序列配对;酶切鉴定重组质粒构建正确;重组病毒miRT(miRNA target elements)-H1N1和scramble(scbl)-H1N1的血凝效价分别为1∶32和1∶64,病毒滴度为4.68×105TCID50/m L和7.94×104TCID50/m L;测序确认突变病毒包含目的片段。结论构建成功重组病毒株,为进一步的毒力评估实验奠定了基础。 展开更多

关键词 H1N1流感 miRNA let-7b 基因重组 反向遗传学

暂未订购

HucMSC-ex通过Let-7b调控TGF-βR_1抑制肝星状细胞胶原合成 被引量：4

20

作者 蔡梦洁 钱嘉莉 +5 位作者 陈逸菲 王岩金 赵婷 刘锦文 沈松 严永敏 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第6期478-482,共5页

目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosome,Huc MSC-ex)对肝星状细胞LX-2胶原合成的影响及作用机制。方法:提取Huc MSC-ex,采用透射电镜分析Huc MSC-ex形态,蛋白质印迹法检... 目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosome,Huc MSC-ex)对肝星状细胞LX-2胶原合成的影响及作用机制。方法:提取Huc MSC-ex,采用透射电镜分析Huc MSC-ex形态,蛋白质印迹法检测特异性标志蛋白CD9和CD63的表达;建立TGF-βR_1诱导的人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC) LX-2细胞株活化模型,分别加入25,50和100μg/m L Huc MSC-ex共培养,另设对照组(常规培养),qRT-PCR检测4组Col1、Col3、TGF-βR_1和Let-7b mRNA表达,免疫印迹法检测对应的蛋白表达; Let-7b过表达转染LX-2细胞株,qRT-PCR和免疫印迹法检测LX-2中TGF-βR_1、αSMA蛋白和mRNA表达。结果:Huc MSC-ex是30～100 nm的膜性囊泡,表达外泌体的特异标志CD9和CD63。与对照组相比,Huc MSC-ex处理组中Col1、Col3和TGF-βR_1表达明显下调(P均<0. 001),而Let-7b表达明显上调(P均<0. 001); Let-7b过表达显著抑制LX-2细胞中TGF-βR_1和α-SMA的表达(P均<0. 05)。结论:Huc MSC-ex转运Let-7b到肝星状细胞,调控肝星状细胞TGF-βR_1表达,抑制肝星状LX-2细胞胶原合成。 展开更多

关键词 let-7b 人脐带间质干细胞来源的外泌体 肝星状细胞

暂未订购