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Circ_0022382/let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞增殖和迁移 被引量:1
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作者 刘伟 张俊 +6 位作者 张佳雯 叶雨 诸健琴 虞绮雯 李涛 孙晓春 陈华标 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期145-153,共9页
目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测... 目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测差异表达的circRNA所结合的miRNA,最后通过韦恩图对circRNA结合的miRNA和GEO数据库预测的miRNA取交集,得到交集的miRNA及其对应的circRNA。②分别予以收敛引物和发散引物对乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的互补DNA(cDNA)和基因组DNA(gDNA)进行PCR,并通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR产物进行分离以验证circ_0022382的环形结构。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,乳腺癌组织和癌旁组织中circ_0022382表达水平。④在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染si-NC、si-circ_0022382,采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移;qRT-PCR检测let-7a-5p的表达水平;在si-circ_0022382组中分别转染let-7a-5p inhibitor NC、let-7a-5p inhibitor,克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移。⑤通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析let-7a-5p的下游信号通路;在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染let-7a-5p NC、let-7a-5p mimic,蛋白质印迹法和细胞荧光免疫法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达,蛋白质印迹法检测let-7a-5p inhibitor和si-circ_0022382共转染后乳腺癌细胞p-AKT表达。结果:①GSE165884差异分析得到37个高表达的circRNA,GSE45498差异分析得到6个低表达的miRNA,37个高表达的circRNA中,circ_0022382对应的miRNA和6个低表达的miRNA有交集基因let-7。②乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的cDNA既可以通过发散引物又可以通过收敛引物来扩增,而gDNA只能通过收敛引物来扩增。③与MCF-10A细胞相比,circ_0022382在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中均显著高表达(P均<0.001);乳腺癌组织中circ_0022382表达亦明显高于癌旁组织(P<0.05)。④下调circ_0022382表达后,MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力均显著下降(P均<0.001),let-7a-5p的表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05);在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移能力的下降(P<0.01和P<0.001)。⑤KEGG信号通路富集分析结果显示,PI3K-AKT和mTOR信号通路显著富集;与let-7a-5p NC组相比,let-7a-5p mimic组的p-AKT、p-PI3K和mTOR的蛋白水平显著下降;在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞中p-AKT表达水平的降低。结论:circ_0022382在乳腺癌中高表达,通过靶向let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其有可能作为乳腺癌治疗和诊断的潜在靶点。 展开更多
关键词 circ_0022382 let-7a-5p PI3K/AKT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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let-7b-5p靶向IGF1R调控脑胶质瘤细胞生长的机制
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作者 刘喜红 杜晓丹 +4 位作者 范孟杨 徐柳清 杨丽萍 侯俊林 赵培源 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第3期359-364,共6页
目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染... 目的探讨let-7b-5p在脑胶质瘤中的表达及其对U251细胞生长的影响和潜在的作用机制。方法采用qRT-PCR法检测let-7b-5p在脑胶质瘤细胞和组织中的表达量,通过CGGA数据库分析let-7b-5p表达与脑胶质瘤WHO分级和总生存率的关系;通过瞬时转染法下调脑胶质瘤细胞U251中let-7b-5p和胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF1R)的表达,采用qRT-PCR、CCK8、克隆形成实验、Western blot、双荧光素酶报告基因等技术检测let-7b-5p在U251细胞生长中的作用及潜在的机制。结果let-7b-5p在脑胶质瘤细胞(A172:3.64±0.64、V251:4.56±0.52、U87-MG:3.31±0.50)和组织中(2.18±0.22)的表达显著高于星形胶质细胞(HMC3:1.00±0.21,P<0.05或P<0.01)和正常脑组织(1.01±0.19,P<0.05),其表达水平与脑胶质瘤患者WHO分级呈负相关(P<0.0001),与原发性和复发性脑胶质瘤患者的生存率呈正相关(P<0.0001,P=0.028);敲减U251细胞中let-7b-5p的表达可促进脑胶质瘤细胞的生长(CCK8:let-7b-5p敲减组126.00±12.09 vs miR-NC组90.93±5.13,P<0.05),激活PI3K/AKT信号通路;在U251细胞中抑制IGF1R表达可以逆转let-7b-5p低表达促进脑胶质瘤细胞生长[CCK8:let-7b-5p敲减组+IGF1R敲减组(92.08±6.14)vs let-7b-5p敲减组+sh-NC组(116.67.08±8.50)]、激活PI3K/AKT信号通路的效应。结论let-7b-5p在脑胶质瘤细胞中起抑癌基因作用,let-7b-5p可能通过靶向IGF1R激活PI3K/AKT信号通路参与脑胶质瘤细胞的进程。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 let-7b-5p IGF1R PI3K/AKT
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血清let-7a、肿瘤坏死因子-α在喉癌中的表达及与患者术后复发的关系
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作者 周航 崔粲 +3 位作者 马慧敏 连荣 余文发 王银鑫 《癌症进展》 2025年第4期460-463,共4页
目的探讨血清let-7a、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在喉癌中的表达及与患者术后复发的关系。方法选取67例喉癌患者和54例喉部良性疾病患者,比较喉癌及喉部良性疾病患者血清let-7a、TNF-α水平。随访1年,记录喉癌患者的术后复发情况,喉癌患... 目的探讨血清let-7a、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在喉癌中的表达及与患者术后复发的关系。方法选取67例喉癌患者和54例喉部良性疾病患者,比较喉癌及喉部良性疾病患者血清let-7a、TNF-α水平。随访1年,记录喉癌患者的术后复发情况,喉癌患者术后复发的影响因素采用多因素Logistic回归模型分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估血清let-7a、TNF-α对喉癌患者术后复发的预测价值。结果喉癌患者血清let-7a水平低于喉部良性疾病患者,TNF-α水平高于喉部良性疾病患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。随访1年,67例喉癌患者复发21例,未复发46例,复发患者分化程度为中低分化、TNM分期为Ⅲa期比例均高于未复发患者,血清let-7a水平低于未复发患者,TNF-α水平高于未复发患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,let-7a水平升高为喉癌患者术后复发的保护因素(P﹤0.05),TNF-α水平升高为喉癌患者术后复发的危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线显示,血清let-7a预测喉癌患者术后复发的AUC为0.837(95%CI:0.736~0.939),高于TNF-α的0.654(95%CI:0.516~0.793)。结论喉癌患者血清let-7a水平降低,TNF-α水平升高。let-7a对喉癌患者的术后复发具有一定的预测价值,有望成为预测喉癌患者预后的生物标志物。 展开更多
关键词 喉癌 let-7a 肿瘤坏死因子-Α 术后复发 影响因素 预测价值
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锦鲤let-7家族系统进化、靶基因预测及表达分析
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作者 李泓 田月瑶 +4 位作者 崔开明 秦楠 范道省 田雪 朱文锦 《河南农业科学》 北大核心 2025年第1期144-152,共9页
对锦鲤let-7家族成员的前体序列进行比对和系统进化分析,检测锦鲤let-7家族成员表达量在体色形成过程中的变化,通过TargetScan和miRWalk对let-7j的靶基因进行预测,并对靶基因的本体特征和代谢通路进行富集分析,为了解let-7家族的进化历... 对锦鲤let-7家族成员的前体序列进行比对和系统进化分析,检测锦鲤let-7家族成员表达量在体色形成过程中的变化,通过TargetScan和miRWalk对let-7j的靶基因进行预测,并对靶基因的本体特征和代谢通路进行富集分析,为了解let-7家族的进化历史及其在锦鲤及硬骨鱼类体色形成中的作用提供参考。结果表明,锦鲤let-7家族成员在鱼类中高度保守,且其前体序列的5'端保守性高于3'。锦鲤let-7家族成员表达量在体色形成的4个阶段均表现为逐步升高的趋势,在体色完全形成的孵化后47 d达到最高。利用TargetScan和miRWalk对let-7j的靶基因进行预测,其中571个靶基因在2个软件中均被预测到,这571个候选靶基因富集到了10个与体色形成相关的GO条目,包括色素沉积、发育过程的色素沉积、色素细胞分化、黑色素细胞分化、细胞色素沉积、黑色素小体转运、色素颗粒转运、色素代谢过程、黑色素小体定位的建立和黑色素小体定位;富集到与体色相关的KEGG调控通路主要有Wnt信号通路、ErbB信号通路和黑色素沉积通路。以上GO和KEGG通路中存在ltk、pmel、plin6、kitlga和pax7a等多个与色素细胞分化和迁移相关的基因。综上,let-7家族成员在鱼类进化过程中高度保守,可能靶向色素细胞分化相关的基因参与锦鲤红色体色的形成。 展开更多
关键词 锦鲤 let-7家族 系统进化 let-7j 靶基因 体色
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太子参多糖经Let-7d-3p下调伪狂犬病病毒感染小鼠的炎症基因转录水平
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作者 罗诗师 陈蓓蕾 +9 位作者 张蕾 冯启贤 吴瑞森 陈佳祺 王媛 简子昕 许丽惠 陈秋勇 马玉芳 王全溪 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2438-2450,共13页
本研究旨在探究太子参多糖(Radix pseudostellariae polysaccharide,RPP)调控微小核糖核酸(microRNA,miRNA)Let-7d-3p对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染引起炎症基因表达的影响及其机理。体外培养猪肾细胞(porcine kidney 15,... 本研究旨在探究太子参多糖(Radix pseudostellariae polysaccharide,RPP)调控微小核糖核酸(microRNA,miRNA)Let-7d-3p对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染引起炎症基因表达的影响及其机理。体外培养猪肾细胞(porcine kidney 15,PK-15),使用不同浓度RPP(0.5~32.0 mg·mL^(-1))处理PK-15细胞,通过细胞增殖与活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法检测细胞存活率。接着将PK-15细胞分为空白组、PRV组、0.5 mg·mL^(-1)RPP组、1.0 mg·mL^(-1)RPP组、2.0 mg·mL^(-1)RPP组,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测各组细胞中炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-17的mRNA转录水平。转染Let-7d-3p抑制物至PK-15细胞,经0或0.5 mg·mL^(-1)RPP干预后,采用qPCR检测Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。选择15只健康小鼠随机分为空白组、PRV组、RPP(10 mg·kg^(-1))组(每组5只),qPCR检测小鼠肾组织中Let-7d-3p和炎症因子mRNA转录水平。结果显示,在0~4.0 mg·mL^(-1)浓度RPP无细胞毒性。与空白组相比,PRV感染PK-15细胞会显著上调炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平(P<0.01),显著下调Let-7d-3p转录水平(P<0.01)。与PRV组相比,三个浓度的RPP作用细胞后均显著上调Let-7d-3p的转录水平(P<0.01),同时显著下调3个炎症因子的mRNA转录水平(P<0.01)。抑制Let-7d-3p后,与PRV组相比Let-7d-3p抑制组的IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平呈现显著上调(P<0.01)。而与PRV+RPP组相比,抑制Let-7d-3p后加入RPP干预,细胞炎症因子的mRNA转录水平显著上调(P<0.01)。体内试验结果表明,与空白组相比,PRV感染组小鼠肾中Let-7d-3p的转录水平显著下降(P<0.01),且炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的mRNA转录水平显著上调(P<0.01)。与PRV组相比,RPP处理小鼠后肾脏中Let-7d-3p转录水平显著上升(P<0.01),炎症因子IL-6、TNF-α、IL-17的转录水平显著下降(P<0.01)。体内体外结果表明,RPP可通过Let-7d-3p下调PRV感染引起的炎症基因转录水平,在mRNA水平上发现RPP具有一定的抗炎效用,为后续研究太子参多糖缓解PRV引起的炎症提供思路。 展开更多
关键词 太子参多糖 伪狂犬病病毒 let-7d-3p 炎症
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Let-7b-5p靶向MSI2和FOXC1调控绒山羊毛囊干细胞的增殖和分化
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作者 闫海龙 李艳 +6 位作者 金妙函 高晔 李进霞 孙文慧 康佳琪 王小龙 陈玉林 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第10期36-43,共8页
该研究旨在揭示miRNA let-7b-5p在绒山羊毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)增殖和分化过程的调控机制。对绒山羊的毛囊干细胞进行鉴定、分离和培养,通过Lipofectamine○R 3000将let-7b-5p和对照组miRNA(NC mimics)转染至绒山... 该研究旨在揭示miRNA let-7b-5p在绒山羊毛囊干细胞(hair follicle stem cells,HFSCs)增殖和分化过程的调控机制。对绒山羊的毛囊干细胞进行鉴定、分离和培养,通过Lipofectamine○R 3000将let-7b-5p和对照组miRNA(NC mimics)转染至绒山羊毛囊干细胞,利用CCK8和EdU法检测方法评估let-7b-5p对细胞增殖能力的影响,并分析与细胞增殖相关的基因(PCNA、KI67、AKT和mTOR)的表达水平。此外,检测与细胞分化相关的基因(S100A3、K6、Notch1和β-catenin)的表达变化;为了进一步验证let-7b-5p与其预测靶基因之间的相互作用,构建双萤光素酶报告系统,检测let-7b-5p和预测靶基因之间的靶向关系。结果表明,let-7b-5p对HFSCs的增殖能力有显著的抑制作用(P<0.01),let-7b-5p处理的HFSCs中细胞增殖关键标志基因PCNA、KI67以及AKT信号通路相关基因的表达显著下降(P<0.01)。let-7b-5p显著激活了毛囊分化相关标志基因K6和S100A3以及Notch1通路的表达(P<0.01)。let-7b-5p过表达时,MSI2和FOXC1基因的萤光素酶报告活性有显著下降。综上所述,let-7b-5p直接靶向FOXC1和MSI2基因,经AKT信号通路抑制绒山羊HFSCs的增殖;同时,let-7b-5p通过Notch信号通路促进了绒山羊HFSCs向毛囊细胞的定向分化。 展开更多
关键词 绒山羊 毛囊干细胞 增殖 let-7b-5p
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let-7靶向调控Wnt/β-catenin通路抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 刘小莹 王妍心 +4 位作者 苏春波 刘昕 段艳浩 赵佳红 仇永乐 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第6期547-552,共6页
目的阐明let-7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病中的作用及其潜在的分子机制。方法采用实时定量PCR检测人口腔角质细胞系(HOK)、OSCC组织以及OSCC细胞系(CAL-27、SCC-25、SCC-9)中let-7的表达。分别采用克隆形成实验、划痕实验、Trans-well... 目的阐明let-7在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病中的作用及其潜在的分子机制。方法采用实时定量PCR检测人口腔角质细胞系(HOK)、OSCC组织以及OSCC细胞系(CAL-27、SCC-25、SCC-9)中let-7的表达。分别采用克隆形成实验、划痕实验、Trans-well实验和流式细胞术检测let-7对SCC-25细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,采用Western blotting检测Wnt、β-catenin蛋白的表达。分析let-7的表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果let-7在OSCC组织和OSCC细胞中低表达。过表达let-7可通过抑制Wnt/β-catenin通路的激活,有效抑制SCC-25细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。let-7表达水平与患者肿瘤分期、淋巴转移和生存状态密切相关,let-7低表达的患者总生存率较低。结论let-7靶向调控Wnt/β-catenin通路,实现抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 let-7 WNT/Β-CATENIN 增殖 侵袭
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外周血miR-let-7a联合子宫动脉血流动力学指标对重度子痫前期患者妊娠结局的影响
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作者 姜克萍 彭丽 +1 位作者 杨静 贺燕 《中国妇产科临床杂志》 北大核心 2025年第1期55-58,共4页
目的分析外周血微小RNA-let-7a(miR-let-7a)、子宫动脉血流动力学指标对重度子痫前期(SPE)患者妊娠结局的影响。方法回顾性收集2021年4月至2024年4月于南阳市第一人民医院建档并完成分娩的122例早发型SPE患者临床资料为病例组,根据妊娠... 目的分析外周血微小RNA-let-7a(miR-let-7a)、子宫动脉血流动力学指标对重度子痫前期(SPE)患者妊娠结局的影响。方法回顾性收集2021年4月至2024年4月于南阳市第一人民医院建档并完成分娩的122例早发型SPE患者临床资料为病例组,根据妊娠结局分为不良妊娠结局组(n=39)和良好妊娠结局组(n=83);收集同期于医院建档并完成分娩的122例正常孕妇的临床资料为对照组。探讨外周血miR-let-7a联合子宫动脉血流动力学指标对SPE患者妊娠结局的影响。结果病例组外周血miR-let-7a相对表达量、子宫动脉搏动指数(PI)值、阻力指数(RI)值、收缩期与舒张期血流速度比值(S/D)均高于对照组(P<0.05);Logistic回归分析,24 h尿蛋白定量、白蛋白、miR-let-7a相对表达量、PI、RI、S/D是SPE患者不良妊娠结局的影响因素(P<0.05)。Logistic回归模型预测不良妊娠结局曲线下面积为0.859(95%CI:0.793~0.925)。结论外周血miR-let-7a、子宫动脉血流动力学指标是影响SPE患者不良妊娠结局的因素,二者联合可有效地预测患者不良妊娠结局的风险。 展开更多
关键词 重度子痫前期 微小RNA-let-7a 子宫动脉血流动力学 妊娠结局
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miR-let-7a-5p靶向调控SNAP23影响食管鳞状细胞癌发展的研究 被引量:1
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作者 陈娇 刘清 +3 位作者 黄丛改 郑树涛 刘涛 卢晓梅 《癌变·畸变·突变》 2025年第1期63-71,共9页
目的:探讨微小RNA miR-let-7a-5p靶向调控突触体相关蛋白23(SNAP23)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)发展的机制。方法:在人类癌症差异表达的miRNA数据库(dbDEMC)中分析了食管癌组织和癌旁正常组织中miR-let-7a-5p的表达水平,在人类癌症miRNA... 目的:探讨微小RNA miR-let-7a-5p靶向调控突触体相关蛋白23(SNAP23)影响食管鳞状细胞癌(ESCC)发展的机制。方法:在人类癌症差异表达的miRNA数据库(dbDEMC)中分析了食管癌组织和癌旁正常组织中miR-let-7a-5p的表达水平,在人类癌症miRNA的交互式分析和可视化数据库(CancerMIRNome)中,采用Kaplan-Meier生存曲线及对数秩检验探讨了食管癌组织中miR-let-7a-5p的表达水平与患者预后之间的关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测人永生化食管上皮细胞SHEE和ESCC细胞系中miR-let-7a-5p的表达;利用慢病毒载体转染技术,构建miR-let-7a-5p过表达的稳定转染细胞株;分别采用EdU细胞增殖实验、集落形成实验检测细胞增殖情况;细胞划痕实验检测细胞迁移;Transwell实验检测细胞侵袭。在dbDEMC和CancerMIRNome数据库中分析miR-let-7a-5p在食管癌患者外周血中的表达情况。在ENCORI、Diana Tarbase、miRDB数据库寻找miR-let-7a-5p的下游靶基因。Western blot法检测SNAP23蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验分析miR-let-7a-5p和SNAP23的靶向关系。结果:在食管癌组织中,miR-let-7a-5p的表达水平较癌旁正常组织降低,其表达水平与患者总生存期呈正相关(HR=0.57,P<0.05)。与人永生化食管上皮细胞SHEE相比,ESCC细胞系中miR-let-7a-5p呈低表达(P<0.01)。与对照组相比,增强miR-let-7a-5p表达后,ESCC细胞系TE-13的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05或P<0.01)。在ESCC患者的外周血中,miR-let-7a-5p的表达水平较健康对照组增加(P<0.01)。分泌蛋白SNAP23被预测出是miR-let-7a-5p的下游靶基因。过表达miR-let-7a-5p后SNAP23的蛋白表达水平下降(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-let-7a-5p可下调野生型-SNAP23的相对荧光素酶活性(P<0.01)。结论:miR-let-7a-5p通过靶向下调SNAP23的表达,抑制ESCC的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 miR-let-7a-5p 突触体相关蛋白23 侵袭转移 靶向治疗
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基于12nm FinFET器件的可变LET值重离子单粒子效应实验方法研究
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作者 韩云昊 罗尹虹 +4 位作者 陈伟 张凤祁 汤晓斌 郝培培 陈飞达 《现代应用物理》 2025年第5期151-157,共7页
倒封装技术的发展对器件重离子单粒子效应实验技术提出了新的要求。本文提出了一种基于重离子在Si中的布拉格曲线与等效因子计算的可变线性能量转移(LET)实验方法,建立了降能片厚度与Si衬底内布拉格峰位移之间的等效关系,实现了在单一... 倒封装技术的发展对器件重离子单粒子效应实验技术提出了新的要求。本文提出了一种基于重离子在Si中的布拉格曲线与等效因子计算的可变线性能量转移(LET)实验方法,建立了降能片厚度与Si衬底内布拉格峰位移之间的等效关系,实现了在单一离子种类和能量条件下,器件灵敏区多个有效LET值的快速改变和精确获取。利用哈尔滨工业大学空间地面模拟装置提供的Ar离子,基于12 nm FinFET型SRAM开展可变LET值重离子单粒子效应实验方法的验证,并结合Kr离子实验数据拟合获得器件单粒子翻转截面曲线,为准确评价倒装器件抗单粒子性能提供了一种有效的实验手段。 展开更多
关键词 重离子 单粒子翻转 FINFET 可变let 布拉格曲线
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“三美论”视角下赏析歌曲Let It Go的姚、林两个中文译本
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作者 刘珈池 《现代语言学》 2025年第10期579-589,共11页
《冰雪奇缘》堪称动画电影史上的杰作,一举斩获了金球奖、安妮奖与奥斯卡最佳动画长片奖项。其主题曲Let It Go不仅赢得奥斯卡最佳原创歌曲奖,更因歌词鼓舞人心、旋律优美而易于传唱,迅速风靡全球,并被改编为25种语言版本。本文基于许... 《冰雪奇缘》堪称动画电影史上的杰作,一举斩获了金球奖、安妮奖与奥斯卡最佳动画长片奖项。其主题曲Let It Go不仅赢得奥斯卡最佳原创歌曲奖,更因歌词鼓舞人心、旋律优美而易于传唱,迅速风靡全球,并被改编为25种语言版本。本文基于许渊冲的“三美论”对Let It Go的两个中文译本进行了对比赏析,探讨在歌词翻译中如何再现歌词的“意美”、“音美”和“形美”。 展开更多
关键词 “三美论” 歌词翻译 let It Go
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hDPSCs中RNA结合蛋白Lin28对let-7家族调控的生物信息学方法分析
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作者 刘昕昕 李婉怡 +4 位作者 孙梦馨 张雨欣 吴宇熙 段荣泉 刘岩 《上海口腔医学》 2025年第5期457-464,共8页
目的:采用生物学信息方法分析RNA结合蛋白Lin28调控人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSCs)增殖的可能机制。方法:通过慢病毒介导稳定转染Lin28基因至hDPSCs,RNA结合蛋白免疫共沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation... 目的:采用生物学信息方法分析RNA结合蛋白Lin28调控人牙髓干细胞(human dental pulp stem cell,hDPSCs)增殖的可能机制。方法:通过慢病毒介导稳定转染Lin28基因至hDPSCs,RNA结合蛋白免疫共沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)检测过表达Lin28富集的mRNA浓度和总量。RIP测序(RIP-seq)检测Lin28富集的mRNA和相关通路变化。RIP-PCR验证RIP-seq测序结果,Real-time PCR检测Lin28和let-7家族各成员miRNA表达水平,TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_71/)预测let-7a相关靶基因mRNA及具体结合位点,Western免疫印迹法检测let-7a相关靶基因IGF1R、IRS2和IGF2BPs蛋白表达水平的变化。结果:RNA结合蛋白Lin28作为一种重要的调节因子,在细胞生长发育、组织代谢等方面起着关键作用。过表达Lin28的hDPSCs中,pri-let-7a/b/c/d/e/f/i/98及pre-let-7a/b/c/d/e/f/i/98均有不同程度下降。Lin28过表达可上调let-7相关靶基因IGF2BP1和IGF2BP2蛋白表达水平。结论:Lin28在多条途径上通过特异性互补结合pri-let-7及pre-let-7阻断let-7家族的加工成熟。Lin28对let-7靶基因mRNA具有间接调控作用,富集的mRNA主要在生长进程、信号传导、蛋白质加工及遗传信息表达翻译上发挥作用,与细胞增殖联系紧密。 展开更多
关键词 Lin28 let-7家族 人牙髓干细胞 慢病毒载体转染 IGF2BPs
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子宫内膜癌组织中dMMR蛋白和miRNA Let-7表达水平及临床价值的研究 被引量:1
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作者 张亚军 刘裴丽 +4 位作者 江月 闫莉 陈云云 蒋欣 孟凡菲 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第3期48-52,108,共6页
目的探讨子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中微小RNA Let-7(miRNA Let-7)表达水平与DNA错配修复(DNA mismatch repair,dMMR)蛋白表达缺失的关系及意义。方法选取2016年5月~2022年12月在江苏省连云港市妇幼保健院行根治性手术切除... 目的探讨子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中微小RNA Let-7(miRNA Let-7)表达水平与DNA错配修复(DNA mismatch repair,dMMR)蛋白表达缺失的关系及意义。方法选取2016年5月~2022年12月在江苏省连云港市妇幼保健院行根治性手术切除的子宫内膜癌患者74例,分别用免疫组织化学法检测dMMR蛋白(包括MLH1,PMS2,MSH2,MSH6)的表达、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miRNA Let-7的相对表达量,按照dMMR蛋白表达情况,将EC患者分为表达完整组(n=43)和表达缺失组(n=31),采用Logistic多因素回归分析与dMMR蛋白缺失相关的危险因素、绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估相关因素的预测价值。结果74例EC病例中,miRNA Let-7的表达水平在肌层浸润<1/2组显著高于肌层浸润≥1/2组,差异具有统计学意义(t=1.79,P=0.04);dMMR蛋白表达的缺失率为41.89%,且年龄<55岁组和miRNA Let-7低表达组(<0.715)患者中的dMMR蛋白缺失率高于≥55岁组和miRNA Let-7高表达组(≥0.715),差异具有统计学意义(χ2=3.92,4.50,均P<0.05);Logistic多因素回归分析结果显示miRNA Let-7表达水平是发生dMMR表达缺失的独立危险因素(P=0.012);Spearman相关分析表明,miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失呈明显负相关(r=-0.247,P=0.034);ROC曲线分析结果显示,miRNA Let-7表达水平对于预测EC患者中发生dMMR蛋白的缺失具有一定的价值,其AUC为0.737,最佳临界值为0.77,敏感度和特异度分别为0.651,0.806。结论子宫内膜癌患者中miRNA Let-7的表达水平与dMMR蛋白缺失具有相关性,也是发生dMMR蛋白缺失的危险因素,有望为预测dMMR的表达缺失提供帮助。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 林奇综合征 DNA 错配修复蛋白 微小RNA let-7
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食管鳞癌中microRNA let-7a-3甲基化与IGF-Ⅱ的相关性 被引量:1
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作者 朱公建 郭红云 +4 位作者 白悦 王晓敏 朱小康 刘东彦 刘玉琴 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2024年第3期173-178,共6页
目的探讨食管鳞癌组织中microRNA let-7a-3甲基化状态与血浆中类胰岛素样生长因子2(Insulin like growth factor 2,IGF-Ⅱ)表达的相关性。方法采用甲基化特异性PCR法(Methylation specific PCR,qMSP)检测83例食管癌及相对应的癌旁正常... 目的探讨食管鳞癌组织中microRNA let-7a-3甲基化状态与血浆中类胰岛素样生长因子2(Insulin like growth factor 2,IGF-Ⅱ)表达的相关性。方法采用甲基化特异性PCR法(Methylation specific PCR,qMSP)检测83例食管癌及相对应的癌旁正常组织中let-7a-3甲基化状态,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中IGF-Ⅱ的表达水平。结果83例食管鳞癌患者癌组织中的microRNA let-7a-3甲基化程度显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。83例食管鳞癌患者血浆中IGF-Ⅱ的表达水平与let-7a-3基因的甲基化程度总体上呈正相关,具有统计学意义(r=0.600,P<0.001)。结论microRNA let-7a-3可能通过对下游分子的甲基化调控参与食管鳞癌的发生发展,这对了解食管鳞癌形成的机制具有重要意义,可为食管鳞癌的诊断和预后提供依据。 展开更多
关键词 食管鳞癌 let-7a-3 甲基化 类胰岛素样生长因子2
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miR-let-7d-HMGA2通路调控缺氧诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维样细胞增殖 被引量:1
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作者 虞珊珊 李静 +3 位作者 谭琪 丁梦蕾 宗明 范列英 《同济大学学报(医学版)》 2024年第1期17-23,共7页
目的 研究缺氧在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖中的作用及机制。方法 采用HE染色法检测RA和对照骨关节炎(osteoarthritis,OA)滑膜组织FLS增生情况。分离原代RA-FLS并... 目的 研究缺氧在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜成纤维样细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)增殖中的作用及机制。方法 采用HE染色法检测RA和对照骨关节炎(osteoarthritis,OA)滑膜组织FLS增生情况。分离原代RA-FLS并采用流式细胞术鉴定;将RA-FLS置于常氧(21%O_(2))或缺氧环境(3%O_(2))中培养,CCK-8法检测细胞增殖水平的变化,RT-PCR检测miR-let-7d表达的变化。通过类似物或抑制物改变miR-let-7d的表达,观察其对RA-FLS增殖、凋亡的影响;探究miR-let-7d靶基因在缺氧诱导的RA-FLS增殖中的作用。结果 FLS在RA滑膜中增生明显,在缺氧环境下RA-FLS增殖加快,miR-let-7d表达水平降低;过表达miR-let-7d抑制RA-FLS增殖,但对细胞凋亡水平无明显影响;进一步的研究证实miR-let-7d靶基因HMGA2参与缺氧诱导的RA-FLS增殖。结论 miR-let-7d-HMGA2通路调控缺氧诱导的RA-FLS增殖。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 滑膜成纤维样细胞 缺氧 miR-let-7d HMGA2
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Ⅰ型子宫内膜癌中miRNA Let-7的表达及意义
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作者 张亚军 孟凡菲 +4 位作者 陈云云 江月 闫莉 蒋欣 刘裴丽 《牡丹江医学院学报》 2024年第6期16-20,共5页
目的 检测Ⅰ型子宫内膜癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中miRNA Let-7的表达,并探讨其与患者临床病理特征及预后的关系;方法 选取我院2016年1月至2022年12月期间,经病理确诊和根治手术切除的EA患者59例作为病例组,及同期因子宫... 目的 检测Ⅰ型子宫内膜癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中miRNA Let-7的表达,并探讨其与患者临床病理特征及预后的关系;方法 选取我院2016年1月至2022年12月期间,经病理确诊和根治手术切除的EA患者59例作为病例组,及同期因子宫肌瘤或肌腺瘤切除的15例子宫组织作为对照组;收集肿瘤患者的临床病理参数及术后随访资料,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miRNA Let-7的表达以及在不同临床病理特征间的差异;采用Kaplan-Meier法分析不同miRNA Let-7表达水平与患者生存时间关系、Cox回归模型对影响EA预后的危险因素进行分析;结果 74例检测样本中,病例组的miRNA Let-7表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(t=3.232,P<0.05);且病例组中,复发患者的miRNA Let-7表达明显低于未复发患者;绘制miRNA Let-7预测EA发生的ROC曲线分析显示,当约登指数最大时,对应的miRNA Let-7值为0.831,其诊断灵敏度为0.881,特异度为0.95;EA患者中miRNA Let-7的表达与肿瘤的临床分期、肌层浸润、淋巴结转移及复发情况有关(均P<0.05);由Log-rank检验可见,临床分期、肌层浸润深度、淋巴结转移情况以及miRNA Let-7表达水平与患者的预后生存相关(均P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线图可见miRNA Let-7低表达组的生存时间显著低于高表达组(P<0.05);多因素Cox风险分析结果显示,肿瘤的组织学级别、淋巴结转移以及miRNA Let-7表达水平是影响EA患者生存时间的独立危险因素。结论 miRNA Let-7的表达水平与Ⅰ型子宫内膜癌的恶性程度有关,并且是患者复发的独立危险因素,对于评估患者的预后复发具有较好的敏感度和特异度,有可能成为Ⅰ型子宫内膜癌鉴别诊断和复发的新标记物。 展开更多
关键词 Ⅰ型子宫内膜癌 miRNAlet7 复发 COX多因素分析
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MicroRNA-let-7a对中耳胆脂瘤细胞侵袭和凋亡的调控作用
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作者 陈晓华 秦兆冰 《医药论坛杂志》 2024年第11期1132-1136,共5页
目的探讨MicroRNA-let-7a对中耳胆脂瘤细胞的侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法选取2017年8月至2021年3月于郑州大学第一附属医院中耳胆脂瘤患者手术标本65例,提取并培养中耳胆脂瘤细胞进行原代培养,以介导microRNA-let-7a mimics的... 目的探讨MicroRNA-let-7a对中耳胆脂瘤细胞的侵袭和凋亡的影响及其作用机制。方法选取2017年8月至2021年3月于郑州大学第一附属医院中耳胆脂瘤患者手术标本65例,提取并培养中耳胆脂瘤细胞进行原代培养,以介导microRNA-let-7a mimics的慢病毒载体分别转染的中耳胆脂瘤角质细胞,分为microRNA-let-7a mimics组、Mock组和NC组,利用实时定量PCR检测胆脂瘤细胞中microRNA-let-7a mimics的表达,观察细胞的生长趋势,并利用FCM测细胞周期,AnnexinV-FITC/PI双染法测定胆脂瘤细胞的凋亡,以及Transwell小室法对胆脂瘤细胞侵袭性进行检测。结果MicroRNA-let-7a mimics在转染microRNA-let-7a mimics的胆脂瘤细胞生长显著低于Mock组和NC组,差异有统计学意义(P<0.05),microRNA-let-7a mimics组和Mock组及NC组的细胞周期分布存在显著性差异,G0/G1期的胆脂瘤细胞比例显著增高,差异有统计学意义(P<0.05);Mock组和NC组的胆脂瘤细胞早期凋亡率显著低于microRNA-let-7a mimics组,差异有统计学意义(P<0.05),两对照组的早期细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);microRNA-let-7a mimics组的胆脂瘤角质细胞侵出小室的细胞数显著高于其他两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MicroRNA-let-7a mimics可以抑制中耳胆脂瘤细胞的生长和侵袭,同时促进中耳胆脂瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 MicroRNA-let-7a 中耳胆脂瘤 侵袭 凋亡
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Let-7a-2 rs629367和pri-miR-218 rs11134527与肺癌铂类联合化疗毒副反应的相关性研究 被引量:1
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作者 龚卫静 周涛 +5 位作者 曾鸿岸 程冰瑀 吕永宁 张玉 刘昭前 伍三兰 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期576-584,共9页
目的:探讨Let-7a-2 rs629367及pri-miR-218 rs11134527与肺癌铂类联合化疗毒副反应的相关性,探索其作为毒副反应预测生物标志物的可能。方法:纳入467例2011年11月至2013年5月期间在中南大学湘雅医院和附属肿瘤医院住院,并接受至少2个周... 目的:探讨Let-7a-2 rs629367及pri-miR-218 rs11134527与肺癌铂类联合化疗毒副反应的相关性,探索其作为毒副反应预测生物标志物的可能。方法:纳入467例2011年11月至2013年5月期间在中南大学湘雅医院和附属肿瘤医院住院,并接受至少2个周期铂类联合化疗的肺癌患者,使用飞行时间质谱对rs629367和rs11134527进行基因分型,采用卡方检验分析毒副反应与临床特征的相关性,并采用非条件逻辑回归分析评估基因型与化疗后毒副反应的相关性。结果:rs629367及rs11134527位点的等位基因与肺癌铂类联合化疗的总毒副反应、胃肠道毒副反应及血液毒副反应均无显著相关性。通过分层分析发现,rs11134527在女性人群与总毒副反应(加性模型:校正OR=0.442,95%CI=0.214~0.914,P=0.028;显性模型:校正OR=0.283,95%CI=0.109~0.732,P=0.009)和胃肠道毒副反应(加性模型:校正OR=0.388,95%CI=0.182~0.826,P=0.014;显性模型:校正OR=0.231,95%CI=0.089~0.598,P=0.003)显著相关;rs11134527在非小细胞肺癌(加性模型:校正OR=0.655,95%CI=0.452~0.950,P=0.026;显性模型:校正OR=0.497,95%CI=0.300~0.826,P=0.007)和肺腺癌(加性模型:校正OR=2.063,95%CI=1.187~3.585,P=0.010)与血液毒副反应显著相关。结论:Let-7a-2 rs629367与肺癌铂类联合化疗毒副反应无相关性;pri-miR-218 rs11134527与女性肺癌患者铂类药物化疗总毒副反应和胃肠道毒副反应,及非小细胞肺癌、特别是肺腺癌患者血液毒副反应显著相关,有可能作为预测该类人群铂类药物化疗相关不良反应的候选生物标志物。 展开更多
关键词 let-7a-2 rs629367 pri-miR-218 rs11134527 肺癌 铂类联合化疗 毒副反应
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let-7c参与肺泡巨噬细胞M2极化在煤矿粉尘致大鼠肺组织上皮-间质转化中的作用 被引量:2
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作者 王茹 卢丽媛 +3 位作者 李萌 刘洋 贺小玉 张慧芳 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期687-693,共7页
[背景]煤工尘肺(CWP)是一种危害严重的职业性肺病,是我国法定职业病之一。上皮-间质转化(EMT)参与尘肺病肺组织弥漫性纤维化,其机制可能与let-7c调控巨噬细胞极化有关。[目的]通过动物体内实验,探讨let-7c参与巨噬细胞极化在不同含量游... [背景]煤工尘肺(CWP)是一种危害严重的职业性肺病,是我国法定职业病之一。上皮-间质转化(EMT)参与尘肺病肺组织弥漫性纤维化,其机制可能与let-7c调控巨噬细胞极化有关。[目的]通过动物体内实验,探讨let-7c参与巨噬细胞极化在不同含量游离SiO_(2)的煤矿粉尘致大鼠肺组织EMT中的作用。[方法]将SD大鼠随机分为对照组、5%SiO_(2)组、30%SiO_(2)组和99.9%SiO_(2)组,每组16只。各组大鼠分别气管滴注100μL 20 mg·mL^(-1)混悬液(5%SiO_(2)、30%SiO_(2)、99.9%SiO_(2))或生理盐水,并在1、3个月时,收集支气管肺泡灌洗液。采用免疫荧光检测肺泡巨噬细胞(AMs)中M1标志物(CD86)或M2标志物(CD206)相对表达水平。采用苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察肺组织炎症和纤维化。采用蛋白质免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、E-钙黏连蛋白及波形蛋白表达水平;采用荧光定量PCR检测let-7c、c/EBP-δ基因表达水平。[结果]HE及Masson染色结果显示:与对照组相比,随着染尘时间的增加,5%SiO_(2)组、30%SiO_(2)组和99.9%SiO_(2)组大鼠肺组织纤维化程度逐渐加重。与对照组相比,5%SiO_(2)组、30%SiO_(2)组和99.9%SiO_(2)组大鼠CD86、CD206的表达在1个月时均逐渐增加(F=330.904、146.801,P<0.05),3个月时各组CD86的表达逐渐减少(F=331.781,P<0.05),而CD206的表达增加(F=1164.190,P<0.05)。1个月时,5%SiO_(2)组、30%SiO_(2)组和99.9%SiO_(2)组TGF-β1(F=8.847,P<0.05)及波形蛋白(F=13.275,P<0.05)表达逐渐增加,E-钙黏连蛋白(F=6.253,P<0.05)表达逐渐减少;3个月时,各组TGF-β1(F=16.833,P<0.05)及波形蛋白(F=55.021,P<0.05)表达增加,E-钙黏连蛋白减少(F=12.790,P<0.05)。PCR结果显示:与对照组相比,5%SiO_(2)组、30%SiO_(2)组和99.9%SiO_(2)组let-7c mRNA的表达在1个月和3个月时均增加(F=11.251、28.136,P<0.05);各组c/EBP-δmRNA的表达在1个月和3个月时均减少(F=49.204、177.090,P<0.05)。[结论]在粉尘刺激下,let-7c通过调节巨噬细胞极化促进EMT的发生,从而参与肺纤维化的形成,进而影响CWP的进展。 展开更多
关键词 煤工尘肺 let-7c 巨噬细胞极化 上皮-间质转化 游离二氧化硅
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血清TLR4 let-7e及MCP-1在儿童变应性鼻炎中的表达及与疾病活动度的相关性 被引量:3
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作者 李娟娟 沈天琪 唐旭霞 《中国妇幼保健》 CAS 2024年第6期1047-1050,共4页
目的 探讨血清单核细胞球样受体4(TLR4)、let-7e及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在儿童变应性鼻炎中的表达及与疾病活动度的相关性。方法 选择2021年1月—2022年10月于浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)进行治疗的86例儿童变应性鼻... 目的 探讨血清单核细胞球样受体4(TLR4)、let-7e及单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在儿童变应性鼻炎中的表达及与疾病活动度的相关性。方法 选择2021年1月—2022年10月于浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)进行治疗的86例儿童变应性鼻炎患儿设为病例组,并选择该院同期进行体检的70例健康儿童作为对照组,分析血清TLR4、let-7e及MCP-1水平变化情况及与病情程度的相关性。结果 病例组血清let-7e表达水平(0.71±0.12)较对照组(1.36±0.42)更低,TLR4及MCP-1[(56.05±7.15)ng/L、(87.84±20.54)pg/ml]表达水平较对照组[(22.41±4.84)ng/L、(60.31±18.41)pg/ml]更高,差异有统计学意义(P<0.05);轻度患儿血清let-7e(0.86±0.14)较中度、重度(0.58±0.15、0.46±0.11)患儿更高,TLR4及MCP-1[(48.56±6.78)ng/L、(80.58±20.12)pg/ml]表达水平较于中度、重度[(58.38±7.08)ng/L、(78.51±8.56)ng/L、(89.49±22.05)pg/ml、(111.08±25.16)pg/ml]患儿更低,中度患儿血清let-7e(0.58±0.15)较重度(0.46±0.11)患儿更高,TLR4及MCP-1[(58.38±7.08)ng/L、(89.49±22.05)pg/ml]表达水平较重度[(78.51±8.56)ng/L、(111.08±25.16)pg/ml]患儿更低,差异均有统计学意义(均P<0.05);相关性分析结果中显示,血清let-7e和病情程度之间呈负相关,血清TLR4及MCP-1和病情程度之间呈正相关(P<0.05)。结论 血清TLR4、let-7e及MCP-1在儿童变应性鼻炎中表达异常,与病情程度之间关系密切,对于病情控制具有重要临床意义。 展开更多
关键词 单核细胞球样受体4 let-7e 单核细胞趋化蛋白1 儿童 变应性鼻炎 疾病活动度 相关性
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