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FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响
被引量：
8
1
作者
王治校
林静
+3 位作者
陈彬
何少林
马絮明
李大主
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期154-157,161,共5页
目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA...
目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA慢病毒注射组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组。比较各组小鼠的斑块面积和不同组织Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;利用RT-PCR和Westernblot分析不同组织中FOXP3转录水平和Foxp3蛋白表达水平。结果:与对照组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组比较,FOXP3-siRNA慢病毒注射组小鼠斑块面积明显增加(P<0.05);Foxp3+ CD4+ CD25+Treg细胞的数目显著减少(P<0.05),功能下降;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平降低(P<0.05)。与对照组和FOXP3-siRNA慢病毒注射组比较,输注Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞组斑块面积显著减小(P<0.01);Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目显著增加(P<0.01),功能增强;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平增高(P<0.01)。结论:FOXP3可能通过调控体内炎症反应而产生抗动脉粥样硬化作用。
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关键词
FOXP3
APOE-/-小鼠
siRNA
慢病毒载体
Foxp3+
CD4+
CD25+
Treg细胞
原文传递
NELL-1调控RUNX2的P1启动子诱导成骨分化
被引量：
7
2
作者
张弘
姚宇
+2 位作者
孙佳栋
于潇楠
张志光
《中华口腔医学研究杂志(电子版)》
CAS
2017年第4期197-203,共7页
目的探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制。方法构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察...
目的探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制。方法构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察不同浓度外源NELL-1蛋白对RUNX2的P1启动子的调控作用。茜素红染色半定量法检测NELL-1促进M2-10B4细胞成骨作用以及实时定量聚合酶链反应(PCR)检测NELL-1蛋白对小鼠M2-10B4细胞成骨相关基因表达的影响。采用单因素方差分析数据。结果当加入800和1600 ng/ml NELL-1蛋白时,NELL-1蛋白组绿色荧光蛋白细胞记数值分别较对照组增高82.09%、92.36%,且差异均有统计学意义(F_(N800)=26.979,P_(N800)<0.05;F_(N1600)=28.410,P_(N1600)<0.01)。茜素红染色定量检测结果表明,800 ng/ml NELL-1组小鼠M2-10B4细胞较对照组产生的矿化结节升高约73.41%,差异具有统计学意义(F_(N800)=31.179,P_(N800)<0.01)。实时定量PCR结果显示,NELL-1蛋白促进成骨相关基因骨核心转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)表达上调。结论NELL-1蛋白可以通过调控RUNX2的P1启动子促进RUNX2表达诱导骨髓间充质细胞成骨分化。
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关键词
骨髓
基质细胞
小鼠
NELL-1基因
成骨分化
慢病毒属载体
原文传递
题名
FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响
被引量：
8
1
作者
王治校
林静
陈彬
何少林
马絮明
李大主
机构
华中科技大学附属协和医院心内科
十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)心内科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期154-157,161,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(C03030201)
文摘
目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA慢病毒注射组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组。比较各组小鼠的斑块面积和不同组织Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;利用RT-PCR和Westernblot分析不同组织中FOXP3转录水平和Foxp3蛋白表达水平。结果:与对照组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组比较,FOXP3-siRNA慢病毒注射组小鼠斑块面积明显增加(P<0.05);Foxp3+ CD4+ CD25+Treg细胞的数目显著减少(P<0.05),功能下降;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平降低(P<0.05)。与对照组和FOXP3-siRNA慢病毒注射组比较,输注Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞组斑块面积显著减小(P<0.01);Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目显著增加(P<0.01),功能增强;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平增高(P<0.01)。结论:FOXP3可能通过调控体内炎症反应而产生抗动脉粥样硬化作用。
关键词
FOXP3
APOE-/-小鼠
siRNA
慢病毒载体
Foxp3+
CD4+
CD25+
Treg细胞
Keywords
FOXP3
ApoE-/- mice
siRNA
lentivirusvector
Foxp3^＋ CD4^＋ CD25^＋ Tregs
分类号
R392.12 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
NELL-1调控RUNX2的P1启动子诱导成骨分化
被引量：
7
2
作者
张弘
姚宇
孙佳栋
于潇楠
张志光
机构
中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院
出处
《中华口腔医学研究杂志(电子版)》
CAS
2017年第4期197-203,共7页
基金
国家自然科学基金(81400491)
广东省医学科研基金(A2014254)
中山大学高校青年教师培育项目(15ykpy41)
文摘
目的探讨骨生长因子Nel样蛋白1(NELL-1)与骨核心转录因子RUNX2之间的调控机制。方法构建并产生含RUNX2的P1启动子和绿色荧光蛋白报告基因的慢病毒,感染小鼠骨髓间充质细胞系M2-10B4细胞,通过流氏细胞仪检测绿色荧光蛋白细胞记数值,观察不同浓度外源NELL-1蛋白对RUNX2的P1启动子的调控作用。茜素红染色半定量法检测NELL-1促进M2-10B4细胞成骨作用以及实时定量聚合酶链反应(PCR)检测NELL-1蛋白对小鼠M2-10B4细胞成骨相关基因表达的影响。采用单因素方差分析数据。结果当加入800和1600 ng/ml NELL-1蛋白时,NELL-1蛋白组绿色荧光蛋白细胞记数值分别较对照组增高82.09%、92.36%,且差异均有统计学意义(F_(N800)=26.979,P_(N800)<0.05;F_(N1600)=28.410,P_(N1600)<0.01)。茜素红染色定量检测结果表明,800 ng/ml NELL-1组小鼠M2-10B4细胞较对照组产生的矿化结节升高约73.41%,差异具有统计学意义(F_(N800)=31.179,P_(N800)<0.01)。实时定量PCR结果显示,NELL-1蛋白促进成骨相关基因骨核心转录因子RUNX2、骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)和碱性磷酸酶(ALP)表达上调。结论NELL-1蛋白可以通过调控RUNX2的P1启动子促进RUNX2表达诱导骨髓间充质细胞成骨分化。
关键词
骨髓
基质细胞
小鼠
NELL-1基因
成骨分化
慢病毒属载体
Keywords
Bone marrow
Stromal cells
Mice
NELL-1 gene
Osteogenic differentiation
lentivirusvector
分类号
R78 [医药卫生—口腔医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响
王治校
林静
陈彬
何少林
马絮明
李大主
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
原文传递
2
NELL-1调控RUNX2的P1启动子诱导成骨分化
张弘
姚宇
孙佳栋
于潇楠
张志光
《中华口腔医学研究杂志(电子版)》
CAS
2017
7
原文传递
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