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乳鹿分子身份证快速鉴定方法的建立及检测试剂盒的研制 被引量：4
1
作者 王艳双 姜海瀛 +6 位作者 张志杰 孙丽媛 艾金霞 高丽君 李明成 苑广信 张丽华 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第21期1787-1794,共8页
目的建立乳鹿分子身份证快速鉴定方法,研发出乳鹿分子身份证快速检测试剂盒。方法以乳鹿mtDNA Cytb作为靶基因,设计乳鹿特异性引物(扩增片段长度为46 bp),确定乳鹿分子身份证;应用分子克隆及测序技术,克隆乳鹿DNA检测的标准品并验证分... 目的建立乳鹿分子身份证快速鉴定方法,研发出乳鹿分子身份证快速检测试剂盒。方法以乳鹿mtDNA Cytb作为靶基因,设计乳鹿特异性引物(扩增片段长度为46 bp),确定乳鹿分子身份证;应用分子克隆及测序技术,克隆乳鹿DNA检测的标准品并验证分子身份证序列的正确性;开发出乳鹿分子身份证快速检测试剂盒,并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察。结果利用乳鹿mtDNACytb基因设计小片段引物,56℃时特异性最强,乳鹿对照药材及乳鹿正品均在46bp处出现一条特异性扩增条带,而阴性及空白对照均未出现扩增条带,确定了乳鹿的分子身份证;克隆测序后的乳鹿DNA序列与乳鹿mtDNA特异指纹区段序列同源性100%,同时验证了乳鹿分子身份证序列的正确性。自主研发的试剂特异性、重现性、稳定性良好,模板DNA最低检出量为5 pg·μL^-1。结论本实验建立的乳鹿分子身份证快速鉴定方法特异、准确、可靠,研制的试剂盒操作简便、结果稳定,适用于DNA降解严重的材料。 展开更多
关键词 乳鹿 分子身份证技术 快速检测试剂盒 分子克隆 测序技术.
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乳鹿中铅、镉、砷、汞、铜元素的含量测定 被引量：2
2
作者 邵大志 谢秋红 +1 位作者 马彧 赵磊 《中国医药导刊》 2021年第10期754-758,共5页
目的:建立乳鹿药材中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)元素含量的测定方法,以期为乳鹿药材的质量控制提供依据。方法:通过微波消解对乳鹿样品进行消解处理,采用原子吸收光谱法对铅、镉、砷、汞、铜元素进行测定。结果:通过对铅... 目的:建立乳鹿药材中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)元素含量的测定方法,以期为乳鹿药材的质量控制提供依据。方法:通过微波消解对乳鹿样品进行消解处理,采用原子吸收光谱法对铅、镉、砷、汞、铜元素进行测定。结果:通过对铅、镉、砷、汞、铜5种元素的测定及方法学考察,结果铅元素在5~40 ng·mL^(-1)、镉元素在0.8~6.0 ng·mL^(-1)、砷元素在5~40 ng·mL^(-1)、汞元素在2~20 ng·mL^(-1)、铜元素在50~800 ng·mL^(-1)浓度范围内有良好的线性关系,标准曲线的线性相关系数均大于0.996,10批样品测定结果均在国标规定限度范围内。结论:通过对乳鹿药材中铅、镉、砷、汞、铜的测定,可为动物药材的元素测定提供技术依据。 展开更多
关键词 乳鹿 原子吸收光谱法 铅 镉 砷 汞 铜
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乳鹿干燥工艺及聚合酶链式反应研究
3
作者 赵艳 王路宏 +2 位作者 孙艳涛 昝珂 赵磊 《中国卫生工程学》 CAS 2021年第6期912-914,共3页
目的建立乳鹿药材的工艺及质量标准研究。方法选取2018年7月至2019年3月之间收集到的10批乳鹿药材进行研究。所有样品采用以药材性状特征为指标,通过鼓风干燥法优化乳鹿的最佳干燥工艺。根据不同基源乳鹿的差异基因,设计特异性引物,以... 目的建立乳鹿药材的工艺及质量标准研究。方法选取2018年7月至2019年3月之间收集到的10批乳鹿药材进行研究。所有样品采用以药材性状特征为指标,通过鼓风干燥法优化乳鹿的最佳干燥工艺。根据不同基源乳鹿的差异基因,设计特异性引物,以乳鹿基因组DNA为模板,通过聚合酶链式反应对差异基因进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测目的基因,以聚合酶链式反应来进行定性鉴别。结果经验证,实验确定的乳鹿干燥方法,效果稳定,所采用的聚合酶链式反应测定结果重现性好,引物采用Primer F:5′-AACCTCCTCTCAGCAATTCC-3′;Primer R:5′-CATTCGACTAGGTTTGTGCC-3′专属性强。结论本实验乳鹿工艺可行,制定的定性鉴别方法可用于乳鹿的质量控制。 展开更多
关键词 乳鹿 干燥 聚合酶链式反应
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