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含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥杂草防效 被引量：1
1
作者 吕昆明 杨瑞青 +1 位作者 沈方科 陈裕新 《农业工程技术》 2021年第35期17-19,共3页
为探讨含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥的除草活性及其对柑橘园杂草防治效果,以含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥兑水10~15倍液,对杂草进行茎叶喷雾处理试验,并与化学除草剂30%草甘膦水剂兑水200倍液、10%草铵膦水剂兑水100倍液... 为探讨含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥的除草活性及其对柑橘园杂草防治效果,以含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥兑水10~15倍液,对杂草进行茎叶喷雾处理试验,并与化学除草剂30%草甘膦水剂兑水200倍液、10%草铵膦水剂兑水100倍液的处理效果相比较。结果表明:含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥兑水10~15倍液茎叶喷雾处理15天、30天杂草覆盖度防效及30天鲜质量防效分别为81.98%~90.82%、88.30%~93.58%及85.67%~93.03%,其对杂草的防除效果显著优于化学除草,尤其是对阔叶草除草的速效性和防效均优于化学除草剂。表明含枯草芽孢杆菌LTBS01的生物有机药肥对杂草的防治有很好的生物作用,且具有速效除草效果,特别是对阔叶杂草效果显著。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌ltbs01 生物有机肥 药肥 杂草 防治
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基于LTB4/BLT1/NF-κB信号通路研究阿魏酸对银屑病的抗炎机制 被引量：3
2
作者 徐瑶 孙雪淞 +1 位作者 薛宇 张丽宏 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第2期177-180,共4页
目的探讨阿魏酸对LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7银屑病炎症模型的保护作用及其机制,明确LTB4/BLT1/NF-κB信号通路在此过程中的作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分组培养,分为空白组(Control组)、模型组(Model组)、阿魏酸组(FA组)、齐留通组(Z... 目的探讨阿魏酸对LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7银屑病炎症模型的保护作用及其机制,明确LTB4/BLT1/NF-κB信号通路在此过程中的作用。方法将RAW264.7巨噬细胞分组培养,分为空白组(Control组)、模型组(Model组)、阿魏酸组(FA组)、齐留通组(Zileuton组)、齐留通+阿魏酸组(Zileuton+FA组)。在处理每组24 h后收集细胞和细胞培养液。采用酶联免疫法测量LTB4表达量,采用蛋白质免疫印迹法测定5-LOX、BLT1、P-65、p-P65蛋白表达量。并用5-LOX的抑制剂齐留通来研究阿魏酸抗银屑病炎症的作用机制。结果与Model组相比,FA组5-LOX(P<0.01)、LTB4(P<0.01)、BLT1(P<0.01)含量,p-P65/P65比值(P<0.05)均显著降低。Zileuton组5-LOX含量高于Control组(P<0.01),低于Model组(P<0.01);LTB4含量高于Control组(P<0.05),低于Model组(P<0.01);BLT1表达量低于Model组(P<0.01),且高于Control组,差异无统计学意义;p-P65/P65比值高于Control组,差异无统计学意义,低于Model组(P<0.05)。Zileuton+FA组5-LOX含量高于Control组(P<0.01),低于Model组,且差异无统计学意义;LTB4含量高于Control组(P<0.05),低于Model组(P<0.01);BLT1表达量均低于Model组(P<0.01),且高于Control组,差异无统计学意义;p-P65/P65比值高于Control组,差异无统计学意义,低于Model组(P<0.05)。结论阿魏酸对LTB4/BLT1/NF-κB信号活性的抑制作用可能是其防治银屑病机制之一。 展开更多
关键词 阿魏酸 银屑病 白三烯 5-LOX LTB4 BLT1 NF-κB
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基于LTB4/BLT1/NF-κB探讨柏丹消银洗发液对银屑病抗炎机制的影响 被引量：3
3
作者 徐瑶 孙雪淞 +1 位作者 薛宇 张丽宏 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第4期194-197,I0009,共5页
目的通过建立银屑病小鼠模型,观察柏丹消银洗发液对银屑病皮损及LTB4/BLT1/NF-κB通路的影响,探讨柏丹消银洗发液对银屑病的防治机制。方法采用咪喹莫特银屑病小鼠模型,外涂柏丹消银洗发液干预。观察小鼠背部皮损病理改变;免疫组化法检... 目的通过建立银屑病小鼠模型,观察柏丹消银洗发液对银屑病皮损及LTB4/BLT1/NF-κB通路的影响,探讨柏丹消银洗发液对银屑病的防治机制。方法采用咪喹莫特银屑病小鼠模型,外涂柏丹消银洗发液干预。观察小鼠背部皮损病理改变;免疫组化法检测皮损中LTB4表达;Western Blot法检测皮损中5-LOX、BLT1、P-65、p-P65的表达量。结果与IMQ组比较,ZLT组、BL组、BM组、BH组皮损明显改善,HE染色结果显示,BL组(P<0.05)、BM组(P<0.01)、BH组(P<0.01)表皮厚度均变薄,炎症浸润情况有所好转;免疫组化结果显示,与模型组比较,BL组、BM组、BH组皮损中LTB4含量均降低;Western Blot结果显示,BL组、BM组、BH组皮损中5-LOX、BLT1、p-P65含量均降低(P<0.01)。IMQ组出现明显银屑病样皮损,给药组均有不同程度缓解,以BH组效果最佳。结论柏丹消银洗发液可调节LTB4/BLT1/NF-κB信号通路,可能是其防治银屑病新的作用机制。 展开更多
关键词 柏丹消银洗发液 银屑病 白三烯 5-LOX LTB4 BLT1 NF-ΚB
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基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠的保护作用与机制 被引量：2
4
作者 周雪薇 张嘉豪 +5 位作者 呼田 巩洁 李媛 刘继平 王川 王斌 《中南药学》 2025年第5期1215-1220,共6页
目的 探讨黄芩苷与栀子苷配伍(BC/GD)对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠炎症及血脂水平的改善作用及机制。方法 采用高脂饲料喂养和双侧颈动脉结扎法建立“痰瘀互结”型脑卒中模型,分别给予60 mg·kg^(-1)的BC/GD与0.625 g·kg^(-1)... 目的 探讨黄芩苷与栀子苷配伍(BC/GD)对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠炎症及血脂水平的改善作用及机制。方法 采用高脂饲料喂养和双侧颈动脉结扎法建立“痰瘀互结”型脑卒中模型,分别给予60 mg·kg^(-1)的BC/GD与0.625 g·kg^(-1)的醒脑解郁胶囊治疗,空白组、假手术组与模型组灌胃等体积生理盐水。激光多普勒检测大鼠脑血流量;全自动生化分析仪检测大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)水平;全自动凝血分析仪检测大鼠血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和纤维蛋白原(FIB)水平;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和同型半胱氨酸(Hcy)含量。HE染色观察大鼠脑组织与肝脏病理学改变。结果 与空白组相比,模型组大鼠脑血流量显著降低;TG、TC、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低;APTT、PT、FIB值显著降低;TNF-α、IL-6、Hcy和hs-CRP含量显著升高;脑组织中5-LOX、BLT1与BLT2蛋白水平显著升高。与模型组相比,60 mg·kg^(-1)的BC/GD可以降低大鼠血清TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平及APTT值,降低TNF-α、IL-6、Hcy、hs-CRP水平及5-LOX、BLT1和BLT2蛋白表达水平。结论 BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,改善血脂水平与凝血功能,降低血清炎症因子表达,改善脑组织损伤。 展开更多
关键词 痰瘀互结 缺血性脑卒中 炎症 血脂异常 5-LOX/LTB4信号通路
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分枝井回接系统及应用
5
作者 熊育坤 周永霞 《国外石油机械》 1999年第1期15-20,共6页
一种Ｓｐｅｒｒｙ－Ｓｕｎ钻井服务公司开发的分枝井回接系统（ＬＴＢＳ）。该系统可用于钻任何一种多分枝井，并使所有分枝井连成一个整体。本文详细介绍这种分枝井回接系统中的４种相互作用的组件以及系统安装与应用情况。
关键词 分枝井 回接系统 结构 安装 钻井 ltbs
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玄参中环烯醚萜甙和苯丙素甙对LTB_4产生及血小板聚集的影响 被引量：53
6
作者 李医明 曾华武 +3 位作者 贺祥 姜远英 蒋山好 朱大元 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期301-303,共3页
目的：探讨玄参化学成分和药理活性关系。方法：应用大孔树脂、葡聚糖凝胶和正、反相硅胶等层析方法，摸索多种溶剂系统对玄参中含量高的水溶性成分进行分离，应用化学和光谱方法鉴定结构。观察分离得到的主要单体成分对大鼠腹腔中性白... 目的：探讨玄参化学成分和药理活性关系。方法：应用大孔树脂、葡聚糖凝胶和正、反相硅胶等层析方法，摸索多种溶剂系统对玄参中含量高的水溶性成分进行分离，应用化学和光谱方法鉴定结构。观察分离得到的主要单体成分对大鼠腹腔中性白细胞中花生四烯酸（ＡＡ）代谢产物白三烯Ｂ４（ＬＴＢ４）的影响，及对阈剂量的二磷酸腺苷，ＡＡ和２０ｎｍｏｌ／ＬＰＡＦ诱导的血小板聚集的抑制作用。结果：共分得１１种玄参水溶性成分，发现它们属于环烯醚萜甙和苯丙素甙类型。药理实验中苯丙素甙ＸＳ－８，ＸＳ－１０在０．５ｍｍｏｌ／Ｌ时对ＬＴＢ４产生较强抑制作用；环烯醚萜甙ＸＳ－６，ＸＳ－７在相同条件下作用较弱。苯丙素甙和环烯醚萜甙在０．５ｍｍｏｌ／Ｌ时，对体外诱导的血小板聚集都有不同程度的作用，但苯丙素甙的作用强于环烯醚萜甙。结论：玄参中的苯丙素甙和环烯醚萜甙成分与玄参的抗炎和抗血小板聚集作用有关。 展开更多
关键词 玄参 环烯醚萜甙 苯丙素甙 血小板聚集 LTB4
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大肠杆菌LTB与霍乱弧菌CTB基因的克隆和表达及鉴定 被引量：9
7
作者 夏肖萍 严杰 +2 位作者 钊守凤 毛亚飞 李淑萍 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2003年第1期17-20,共4页
目的 :克隆大肠杆菌不耐热肠毒素 B亚单位 (L TB)及霍乱弧菌肠毒素 B亚单位 (CTB)基因 ,构建其表达载体。方法 :采用高保真 PCR分别从 E.coli4 4 815株与 V.cholerae东 74株基因组 DNA中扩增 L TB与 CTB基因 ,T- A克隆后测定核苷酸序列... 目的 :克隆大肠杆菌不耐热肠毒素 B亚单位 (L TB)及霍乱弧菌肠毒素 B亚单位 (CTB)基因 ,构建其表达载体。方法 :采用高保真 PCR分别从 E.coli4 4 815株与 V.cholerae东 74株基因组 DNA中扩增 L TB与 CTB基因 ,T- A克隆后测定核苷酸序列。分别构建 p ET32 a的 LTB及 CTB表达载体 ,在 E.coli BL2 1DE3宿主菌中用不同浓度的 IPTG诱导表达。采用 SDS- PAGE及 GM1- EL ISA鉴定表达产物。结果 :所克隆的 LTB和 CTB基因与报道的相应核苷酸序列同源性分别为 99.12 %～ 99.71%和 98.5 4 %～ 99.4 2 % ,氨基酸序列同源性分别高达 97.5 8%～99.19%和 96.77%～ 99.19%。p ET32 a- L TB- BL2 1DE3和 p ET32 a- CTB- BL2 1DE3系统表达的融合蛋白产量分别占细菌总蛋白的 30 %和 10 %左右。GM1- EL ISA结果证实 LTB及 CTB融合蛋白均能与牛 GM1结合。结论 :本研究成功地构建了 LTB与 CTB表达系统 ,所表达的 L TB与 CTB融合蛋白具有粘膜免疫佐剂活性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 LTB基因 霍乱弧菌 CTB基因 分子克隆 LTB融合蛋白 CTB融合蛋白 免疫学
暂未订购
大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的构建 被引量：18
8
作者 许崇波 于凤芹 +5 位作者 卫广森 王卓 冯书章 王文成 马成国 李尚波 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期463-465,共3页
用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴＢ）基因的质粒ｐＸＬＴ１－１，回收５０５ｂｐ的ＬＴＢ基因片段，再用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌耐热肠毒素（ＳＴ１）基因的质粒ｐＸＳＴ１，与上述回收的... 用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴＢ）基因的质粒ｐＸＬＴ１－１，回收５０５ｂｐ的ＬＴＢ基因片段，再用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌耐热肠毒素（ＳＴ１）基因的质粒ｐＸＳＴ１，与上述回收的ＬＴＢ基因片段连接，转化至受体菌ＪＭ１０９中。经ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ、ＨｉｎｄⅢ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组子质粒ｐＸＳＬＴ１。ＥＬＩＳＡ检测到了ＳＴ１－ＬＴＢ融合蛋白，而且该融合蛋白无天然ＳＴ１生物毒性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 ST1基因 LTB基因 融合基因 基因克隆
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大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位在婴儿双歧杆菌中的表达 被引量：12
9
作者 罗耀玲 王勇 +3 位作者 黄雪萍 冉丹霞 马永平 宋方洲 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期113-115,共3页
目的将大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位(LTB)克隆到表达载体pBV220,使LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中稳定表达。方法将LTB基因克隆到表达载体pBV220中,再分别转化大肠埃希菌DH5α和婴儿双歧杆菌,使之表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定。... 目的将大肠埃希菌热不稳定肠毒素B亚单位(LTB)克隆到表达载体pBV220,使LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中稳定表达。方法将LTB基因克隆到表达载体pBV220中,再分别转化大肠埃希菌DH5α和婴儿双歧杆菌,使之表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定。并通过家兔肠袢实验验证表达蛋白的安全性。结果LTB基因在大肠埃希菌和双歧杆菌中均可稳定表达,毒性实验证明LTB保留轻微的毒性。结论稳定表达LTB的双歧杆菌为今后的口服疫苗佐剂奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 双歧杆菌 PBV220 LTB
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大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合蛋白工程菌株的免疫原性研究 被引量：10
10
作者 许崇波 卫广森 +5 位作者 王卓 冯书章 吴广谋 王文成 马成国 张万林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第1期43-45,共3页
已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，... 已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗１５ＭＬＤ的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ，ＳＴ＋，ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。 展开更多
关键词 大肠杆菌 ST1 LTB 免疫原性
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O型口蹄疫病毒VP1 T细胞、B细胞表位双拷贝基因与大肠杆菌LTB、STⅠ肠毒素基因融合表达产物的免疫应答 被引量：12
11
作者 庄娟 尤永进 +2 位作者 陈波 饶忠 潘洁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期557-562,共6页
合成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中与细胞免疫（21～40表位肽）及体液免疫（141～160表位肽）相关的基因序列2020VP1，运用基因工程技术构建了含有肠毒素大肠杆菌LTB、STⅠ基因及双拷贝2020VP1的融合表达载体r2020-B-2020-STⅠ，转化宿主菌BL2... 合成O型口蹄疫病毒VP1蛋白中与细胞免疫（21～40表位肽）及体液免疫（141～160表位肽）相关的基因序列2020VP1，运用基因工程技术构建了含有肠毒素大肠杆菌LTB、STⅠ基因及双拷贝2020VP1的融合表达载体r2020-B-2020-STⅠ，转化宿主菌BL21（DE3）RIL后的表达产物经SDS—PAGE分析，结果显示重组融合蛋白的分子量约为45kDa，表达量较高。ELISA实验结果显示，融合蛋白能与霍乱毒素（cholera toxin）CTB抗体特异结合。动物实验表明，融合蛋白能够诱发兔体产生较强的FMDV中和抗体，免疫豚鼠在低浓度FMDV刺激下能够产生特异性T淋巴细胞增殖反应，说明融合蛋白能诱导机体产生FMDV特异性细胞及体液免疫反应；同时，融合蛋白免疫雌鼠能够抵抗大肠杆菌强毒株攻击，免疫兔体能够产生STⅠ中和抗体，且融合蛋白不具STⅠ毒性，证明融合蛋白具有良好的LTB、STⅠ免疫原性。实验结果表明，此融合蛋白具有开发成为口蹄疫及肠毒素腹泻联合疫苗的应用价值。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VP1 T细胞表位 B细胞表位 肠毒素大肠杆菌 LTB ST Ⅰ 免疫应答
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草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白与大肠杆菌LTB亚基植物融合表达载体的构建 被引量：6
12
作者 周勇 曾令兵 +3 位作者 范玉顶 罗晓松 徐进 肖艺 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-7,共7页
根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)VP6蛋白的全基因序列(AF403394)和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的基因序列(M17874),设计并合成特异性引物,从感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾... 根据GenBank中草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)VP6蛋白的全基因序列(AF403394)和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的基因序列(M17874),设计并合成特异性引物,从感染草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾细胞(CIK)中提取病毒核酸作为模板,进行RT-PCR扩增,得到约1.3 kb的GCRV VP6基因读码框片段,同时提取大肠杆菌(Escherichia coli)H44815全基因组作为模板,进行PCR扩增得到约370 bp的LTB基因读码框片段。将获得的2个目的片段分别克隆到pCR2.1载体上,经酶切、PCR扩增检测和序列测定确认后,将其克隆到携带绿色荧光蛋白标记的植物表达载体pCAMBIA1302上,成功构建了可将草鱼呼肠孤病毒VP6蛋白、大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)、绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的植物载体pCAMBIA 1302-LTB-VP6。本研究旨为草鱼出血病可饲化转基因植物疫苗研制奠定基础。 展开更多
关键词 草鱼出血病 呼肠孤病毒 VP6基因 LTB基因 植物表达载体
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LTBR工艺在石化碱渣处理中的应用 被引量：5
13
作者 周超 《辽宁化工》 CAS 2015年第7期846-848,共3页
在运用LTBR工艺处理石化行业碱渣废水的过程中,通过引入LTBS生物强化器和优化工艺控制,提高了装置的抗冲击能力,使其运行更加平稳、高效,并为LTBR工艺在其他高浓度废水处理领域的进行尝试性探索。
关键词 LTBR工艺 碱渣废水 ltbs生物强化器
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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在大肠杆菌中的表达及其特性研究 被引量：5
14
作者 葛俊伟 姜艳平 +4 位作者 杨敏 哈卓 乔薪瑗 唐丽杰 李一经 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期109-112,共4页
将大肠杆菌不耐热性肠毒素B亚单位(LTB)基因eltb克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21/DE3/plyss。采用SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在大肠杆菌中高效表达了LTB蛋白,其产量约为细菌总蛋白的20%,GM1-ELISA方法鉴定目的重... 将大肠杆菌不耐热性肠毒素B亚单位(LTB)基因eltb克隆到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21/DE3/plyss。采用SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明,在大肠杆菌中高效表达了LTB蛋白,其产量约为细菌总蛋白的20%,GM1-ELISA方法鉴定目的重组蛋白可与GM1结合,具有潜在的佐剂活性;由纯化的重组蛋白免疫小鼠制备的抗血清效价为1:16000,并且可以特异性识别天然毒素。结果表明,所表达的LTB有良好的抗原性和佐剂活性,制备的抗血清具有良好的免疫活性,为下一步以LTB作为佐剂的黏膜疫苗研究提供基础材料。 展开更多
关键词 LTB 表达 活性
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醒脑静提取物对脑缺血再灌注炎性损伤5-LOX-CysLTs-CysLT通路的影响 被引量：7
15
作者 李敏 武璞 +3 位作者 吕腾 肖思源 王斌 侯建平 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期131-134,共4页
目的:通过检测缺血2h再灌22h时,实验性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织5-LOX、LTB4、LTD4、Cys LTs含量变化和Cys LTR受体在皮层和海马的表达,以期发现5-LOX通路在脑缺血再灌注损伤的作用,并探讨醒脑静对该通路的防治作用。方法:大鼠连续灌... 目的:通过检测缺血2h再灌22h时,实验性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织5-LOX、LTB4、LTD4、Cys LTs含量变化和Cys LTR受体在皮层和海马的表达,以期发现5-LOX通路在脑缺血再灌注损伤的作用,并探讨醒脑静对该通路的防治作用。方法:大鼠连续灌胃给药5天后,复制MCAO模型,缺血2h再灌注22h,用ELISA法检测上述时间点患侧脑匀浆中5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs的含量;用Western blot方法检测了Cys LT1和Cys LT2受体蛋白表达。结果:1大鼠脑缺血2h再灌注22h时,模型组大鼠脑匀浆中5-LOX含量与假手术组相比有明显增强,醒脑静(25mg/kg)与模型比较有明显降低,齐留通组亦出现显降低;2模型脑匀浆中LTB4与假手术相比明显增强,与模型比较,醒脑静25mg/kg组和齐留通组明显含量有所降低;3模型脑匀浆中LTD4与假手术有明显增强,与模型比较,各给药组均出现明显降低;4模型脑匀浆中Cys LTs与假手术有明显增强,与模型比较,醒脑静50mg/kg组现明显降低。结论:急性脑缺血损伤后5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs的模型含量均有不同程度增高,试验药醒脑静各剂量组和5-LOX阻断剂齐留通组可使造模组5-LOX、LTB4、LTD4和Cys LTs含量不同程度减轻,表明醒脑静可能通过抑制花生四烯酸5-LOX途径产生抗实验性脑缺血损伤。 展开更多
关键词 醒脑静 脑缺血再灌注 5-LOX LTB4 CysLTs CysLTR
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产肠毒素大肠杆菌肠毒素LTB、STⅠ和STⅡ融合基因的构建与表达研究 被引量：7
16
作者 葛艳 尤永进 +1 位作者 徐泉兴 饶忠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期346-348,共3页
PCR方法扩增产肠毒素大肠杆菌 (EnterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)LTB、STⅠ、STⅡ基因 ,将LTB、STⅠ、STⅡ基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pBST进行酶切分析、PCR检测以及核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LTB_STⅡ... PCR方法扩增产肠毒素大肠杆菌 (EnterotoxigenicEscherichiacoli,ETEC)LTB、STⅠ、STⅡ基因 ,将LTB、STⅠ、STⅡ基因重组入pET32a质粒载体 ,对构建的重组质粒pBST进行酶切分析、PCR检测以及核苷酸序列分析 ,结果表明 ,插入片段LTB_STⅡ_STⅠ的核苷酸序列与预期一致 ,且阅读框正确。pBST在宿主菌BL2 1(DE3 )RIL中的表达产物经SDS_PAGE初步分析 ,显示重组融合蛋白的分子量约为 40kD ,其表达量约占菌体总蛋白的 46 %。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 肠毒素 LTB STI STⅡ 融合基因 构建 幼畜 基因表达
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大肠杆菌不耐热性肠毒素LT_B基因的克隆及其核苷酸序列分析 被引量：14
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作者 许崇波 卫广森 +3 位作者 吴广谋 张立国 冯书章 刘晓明 《畜牧与兽医》 北大核心 1997年第4期154-156,共3页
用内切酶ＳａｃⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切大肠杆菌质粒ｐＥＷＤ２９９，回收５０５ｂｐ的ＬＴＢ基因片段，再将载体ｐＵＣ１８用ＳａｃⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，最后将ｐＵＣ１８ＤＮＡ与５０５ｂｐ的ＬＴＢＤＮＡ进行连接，转化至受体菌ＤＨ... 用内切酶ＳａｃⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切大肠杆菌质粒ｐＥＷＤ２９９，回收５０５ｂｐ的ＬＴＢ基因片段，再将载体ｐＵＣ１８用ＳａｃⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，最后将ｐＵＣ１８ＤＮＡ与５０５ｂｐ的ＬＴＢＤＮＡ进行连接，转化至受体菌ＤＨ５α中，经ＳａｃⅠ／ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲⅠ／ＨｉｎｄⅢ酶切反应鉴定重组子，得到了理想重组子质粒ｐＸＬＴ１。再将ｐＸＬＴ１进行ＥｃｏＲⅠ酶切、大肠杆菌聚合酶ⅠＫｌｅｎｏｗ大片段补平、ＨｉｎｄⅢ酶切处理，然后与用ＨｉｃⅡ和ＨｉｎｄⅢ酶切的ｐＵＣ１８连接，转化至受体菌ＤＨ５α中，经ＸｂａⅠ／ＨｉｎｄⅢ酶切反应鉴定重组子，得到了理想重组子质粒ｐＸＬＴ１－１。将质粒ｐＸＬＴ１－１进行核苷酸序列分析。 展开更多
关键词 大肠杆菌 LTB基因 基因克隆 核苷酸序列分析
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利金方对慢性阻塞性肺疾病大鼠LTB4表达及气道炎症的影响 被引量：5
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作者 陈斯宁 黄美杏 +3 位作者 龙学明 古立新 冯原 龚享文 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第7期1410-1412,共3页
目的:探讨利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白三烯B4(LTB4)的表达及气道炎症的影响。方法:将50只SPF级Wistar大鼠随机分为5组:空白组、模型组、补肺汤组、利金方低剂量组、利金方高剂量组。... 目的:探讨利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白三烯B4(LTB4)的表达及气道炎症的影响。方法:将50只SPF级Wistar大鼠随机分为5组:空白组、模型组、补肺汤组、利金方低剂量组、利金方高剂量组。采用复合因素造模法建立COPD大鼠模型。各药物组分别以相应剂量连续给药14天。14天后检测各组大鼠血清和BALF中LTB4的含量,并比较各组小气道炎症积分情况。结果:模型组小气道炎症积分、血清及BALF中LTB4的含量明显升高;与模型组比较,应用利金方、补肺汤干预后,小气道炎症积分、血清及BALF中LTB4的含量明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);利金方高剂量组与补肺汤组比较,小气道炎症积分、血清及BALF中LTB4的含量下降也有显著性差异(P<0.05)。结论:LTB4在COPD气道炎症中起重要作用,利金方对气道炎症有抑制作用,其机制与抑制血清及BALF中LTB4的表达有关。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 利金方 LTB4 气道炎症
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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在原核细胞中的高效表达 被引量：4
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作者 张锦霞 郭学军 +5 位作者 李毅 祝令伟 齐冲 刘军 孙洋 冯书章 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期160-163,共4页
从含有LT全毒素基因操纵子的质粒EWD299中扩增出LT的B亚单位基因后定向克隆于原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,用IPTG诱导表达后,将全菌裂解,用SDS-PAGE和Westernblot检测重组菌中外源蛋白的表达情况。结果表明,在原... 从含有LT全毒素基因操纵子的质粒EWD299中扩增出LT的B亚单位基因后定向克隆于原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyss,用IPTG诱导表达后,将全菌裂解,用SDS-PAGE和Westernblot检测重组菌中外源蛋白的表达情况。结果表明,在原核细胞中高效表达了LTB蛋白,表达的重组蛋白占菌体蛋白总量的38%。 展开更多
关键词 LTB 原核细胞 表达
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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位在毕赤酵母中的表达及鉴定 被引量：7
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作者 陈明 李超 +7 位作者 王瑞 王秋华 黄婷 雷爱莹 陈福艳 甘西 余晓丽 梁万文 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期2093-2097,共5页
为了在毕赤酵母中高效表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)及研制具有粘膜免疫佐剂活性的无毒重组LTB,采用PCR方法从产毒型大肠杆菌H44815菌株扩增获得LTB完整编码区DNA,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K的分泌信号肽基因下游,构建真核... 为了在毕赤酵母中高效表达大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)及研制具有粘膜免疫佐剂活性的无毒重组LTB,采用PCR方法从产毒型大肠杆菌H44815菌株扩增获得LTB完整编码区DNA,将其克隆到酵母表达载体pPIC9K的分泌信号肽基因下游,构建真核表达载体pPIC9K-LTB;重组质粒经核苷酸测序确认并线性化后电转化毕赤酵母菌株KM71,PCR筛选转化子,并以小量诱导表达筛选高效表达工程菌株,最后Western blotting分析甲醇诱导上清中的LTB及采用亲和层析和HiTrap Desalting预装柱脱盐纯化蛋白。结果表明,PCR克隆获得的LTB编码DNA序列与GenBank登录DNA序列完全一致,定向插入pPIC9K载体,可获得表达LTB的酵母分泌表达载体pPIC9K-LTB;电转化后的重组酵母菌KM71诱导表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析,发现甲醇诱导的培养基上清中含LTB,且具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 大肠杆菌肠毒素B亚单位(LTB) 基因表达 毕赤酵母 粘膜免疫佐剂
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