LRRC4基因表达能降低胶质母细胞瘤细胞系U251的生长和成瘤潜能(英文) 被引量：14

1

作者 王洁如 李小玲 +5 位作者 范松清 谭琛 向娟娟 唐珂 王蓉 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期897-902,共6页

背景与目的:LRRC4是作者最近克隆的一个新基因,该基因在原发性脑肿瘤活检标本中明显表达下调。本研究旨在研究LRRC4基因是否具有抑制脑肿瘤生长的能力。方法:LRRC4基因的全长编码区被亚克隆至表达载体pcDNA3.1中,应用脂质体转染的方法... 背景与目的:LRRC4是作者最近克隆的一个新基因,该基因在原发性脑肿瘤活检标本中明显表达下调。本研究旨在研究LRRC4基因是否具有抑制脑肿瘤生长的能力。方法:LRRC4基因的全长编码区被亚克隆至表达载体pcDNA3.1中,应用脂质体转染的方法将重组的质粒载体导入胶质母细胞瘤细胞系U251,经G418筛选,建立稳定表达LRRC4基因的U251的细胞系。采用细胞增殖实验、软琼脂实验、肿瘤形成实验来考察LRRC4基因表达对于细胞生长和肿瘤形成的影响。结果:经过脂质体转染和筛选,建立了稳定表达LRRC4全长编码区的U251细胞系,用于进一步实验。比较未转染组和转染空白载体组,Northernblot实验证实转染了LRRC4基因的细胞LRRC4mRNA的表达增强。细胞增殖一定时间后,转染LRRC4基因的细胞较未转染细胞的生长速度明显减慢,克隆形成率明显降低。将这些细胞注射入无胸腺裸鼠体内,40天后处死裸鼠,测量肿瘤大小,结果显示转染LRRC4基因的细胞形成的肿瘤明显小于对照组。结论LRRC4基因可转染于人脑胶质母细胞瘤细胞系U251。LRRC4在U251细胞的表达有抑制瘤细胞增殖和抑制裸鼠移植瘤的形成和生长的作用。 展开更多

关键词 lrrc4 基因表达 胶质母细胞 瘤细胞系 U251生长 成瘤潜能

暂未订购

富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4的克隆与在脑瘤中的表达分析 被引量：19

2

作者 王洁如 钱骏 +6 位作者 董利 李小玲 谭琛 李江 张必成 周洁 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期233-239,共7页

在染色体 7q31 32多种肿瘤杂合性丢失 (lossofheterozygosity ,LOH)高频区 ,采用表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)介导的定位候选克隆策略获得了一个定位于人染色体 7q31 32的新基因 (GenBank登录号 :AF196 976 ) .该基因编码 6... 在染色体 7q31 32多种肿瘤杂合性丢失 (lossofheterozygosity ,LOH)高频区 ,采用表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)介导的定位候选克隆策略获得了一个定位于人染色体 7q31 32的新基因 (GenBank登录号 :AF196 976 ) .该基因编码 6 5 3个氨基酸 ,蛋白质理论pI m :6 5 8 72 7ku .它包含七个典型的LRR、一个IgC2样结构域 .此外 ,它还包含一个N端信号肽、一个C端跨膜区 .其结构特征表明它是富亮氨酸重复(leucine richrepeat,LRR)超家族的新成员 .经过人类基因组命名委员会的同意 ,将该基因命名为LRRC4.此外 ,通过序列相似性匹配还获得了定位于小鼠 6号染色体的LRRC4的同源基因 (GenBank登录号 :AF2 90 5 42 ) .RNA印迹和RT PCR检测发现LRRC4在正常人脑组织相对特异表达 ,而在多种原发性脑瘤表达明显下调或缺失 .综合考虑LRRC4基因的序列特征及表达谱 。 展开更多

关键词 富亮氨酸重复 超家族新成员 lrrc4 脑瘤 基因表达

暂未订购

5-Aza-CdR对胶质瘤细胞生长及LRRC4基因异常甲基化的影响 被引量：8

3

作者 张祖萍 武明花 +4 位作者 唐海林 王蓉 李丹 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期904-909,共6页

LRRC4是一个新发现的胶质瘤抑瘤基因,它在多种胶质瘤细胞系和胶质瘤组织表达缺失或下调,前期研究结果表明胶质瘤细胞和组织中LRRC4的编码区未发生突变、缺失或重排.为了获得LRRC4作为胶质瘤抑瘤基因的进一步证据,采用去甲基化制剂5-Aza-... LRRC4是一个新发现的胶质瘤抑瘤基因,它在多种胶质瘤细胞系和胶质瘤组织表达缺失或下调,前期研究结果表明胶质瘤细胞和组织中LRRC4的编码区未发生突变、缺失或重排.为了获得LRRC4作为胶质瘤抑瘤基因的进一步证据,采用去甲基化制剂5-Aza-CdR处理LRRC4表达缺失的SF126和SF767胶质瘤细胞,MSP和RT-PCR检测表明,LRRC4的启动子在表达缺失的SF126和SF767细胞存在完全的甲基化,而5-Aza-CdR能逆转LRRC4启动子的甲基化状态,恢复LRRC4的表达.MTT法测定显示,5-Aza-CdR使SF126和SF767胶质瘤细胞增殖受到明显抑制,并呈时间和剂量的依赖性.同时流式细胞仪检测显示,5-Aza-CdR使SF126和SF767胶质瘤细胞周期阻滞于G0/G1期.因此,5-Aza-CdR能抑制胶质瘤细胞SF126和SF767增殖并干扰其细胞周期,LRRC4启动子异常甲基化是其在胶质瘤细胞中表达缺失的重要机制,5-Aza-CdR能逆转LRRC4基因的甲基化,恢复LRRC4的表达,为LRRC4作为胶质瘤去甲基化治疗的靶标提供了科学依据. 展开更多

关键词 5-AZA-CDR 胶质瘤细胞 lrrc4基因 DNA甲基化

在线阅读 下载PDF 职称材料

LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力 被引量：7

4

作者 陈琼 武明花 +4 位作者 周艳宏 唐运莲 黄琛 李小玲 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期735-741,共7页

目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derivedfactor-1α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实... 目的:探讨LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derivedfactor-1α/CXC receptor 4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRC4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验,研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响。结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调。用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力。SDF-1α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力。结论:SDF-1α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力。 展开更多

关键词 lrrc4 SDF-1Α/CXCR4 脑胶质瘤 侵袭

暂未订购

LRRC4融合蛋白的构建与表达研究 被引量：2

5

作者 王洁如 董利 +7 位作者 蒋明 谭琛 李小玲 向娟娟 范松青 彭聪 唐珂 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期696-701,共6页

在前期工作中 ,采用EST介导的定位候选克隆策略 ,克隆了一个在脑瘤中表达下调的脑特异表达新基因LRRC4 ,为进一步研究其结构与功能的关系 ,构建了含LRRC4基因全长编码区的 pGEM TEasy质粒 ,在此基础上通过亚克隆构建了LRRC4融合蛋白的... 在前期工作中 ,采用EST介导的定位候选克隆策略 ,克隆了一个在脑瘤中表达下调的脑特异表达新基因LRRC4 ,为进一步研究其结构与功能的关系 ,构建了含LRRC4基因全长编码区的 pGEM TEasy质粒 ,在此基础上通过亚克隆构建了LRRC4融合蛋白的绿色荧光蛋白 (pEGFP C1)表达质粒 ,瞬时转染哺乳动物细胞 ,结果发现表达的LRRC4融合蛋白定位于活细胞的细胞膜上 .同时 ,构建了LRRC4全长和截短型原核表达 pGEX 4T 2质粒 ,成功而高效地在大肠杆菌BL2 1中表达LRRC4融合蛋白 .上述工作为制备多抗 。 展开更多

关键词 lrrc4 融合蛋白 构建 表达 EGFP GST 生物信息学

在线阅读 下载PDF 职称材料

LRRC4基因在脑胶质瘤细胞系中表达缺失 被引量：2

6

作者 武明花 李小玲 +3 位作者 黄琛 唐运莲 张祖平 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期231-234,共4页

目的:研究LRRC4基因在恶性脑胶质瘤细胞系中的表达情况。方法:采用RT-PCR结合Northern-blot检测LRRC4基因在U251,U87,SF126,SF767,BT325及M17等6种恶性脑胶质瘤细胞系中的表达;并应用聚合酶链反应结合DNA直接测序法检测LRRC4基因在恶性... 目的:研究LRRC4基因在恶性脑胶质瘤细胞系中的表达情况。方法:采用RT-PCR结合Northern-blot检测LRRC4基因在U251,U87,SF126,SF767,BT325及M17等6种恶性脑胶质瘤细胞系中的表达;并应用聚合酶链反应结合DNA直接测序法检测LRRC4基因在恶性胶质瘤细胞系中的突变情况;进一步结合生物信息学分析研究LRRC4基因在U251细胞系中表达缺失的原因。结果:LRRC4基因在6种恶性胶质瘤细胞系中均表达缺失。通过对胶质瘤细胞系基因组DNA中LRRC4的ORF序列的PCR扩增和测序分析,发现SF126,SF767,M17细胞中,ORF序列第279位氨基酸的第3个密码子存在同义点突变(3/5),而U251和U87细胞基因组DNA中发生了LRRC4基因的缺失突变(2/5)。结论:LRRC4基因在恶性胶质瘤细胞中表达缺失,染色体7q32-ter的纯合性缺失是LRRC4基因在U251细胞中表达缺失的原因。 展开更多

关键词 lrrc4基因 脑胶质瘤细胞 表达缺失 基因突变

暂未订购

脑组织特异性基因/脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4的功能研究进展 被引量：4

7

作者 武明花 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1234-1239,共6页

LRRC4是一个脑组织相对特异性表达基因,是采用表达序列标签(EST)介导的定位-候选克隆策略结合5′-RACE技术从染色体7q31～32区域克隆出来的一个富亮氨酸重复(LRR)超家族的新成员.LRRC4是神经系统发育与轴突生长的功能基因.LRRC4的表达... LRRC4是一个脑组织相对特异性表达基因,是采用表达序列标签(EST)介导的定位-候选克隆策略结合5′-RACE技术从染色体7q31～32区域克隆出来的一个富亮氨酸重复(LRR)超家族的新成员.LRRC4是神经系统发育与轴突生长的功能基因.LRRC4的表达与胶质瘤的级别进展呈负相关,其表达缺失参与脑胶质瘤进展的晚期事件.LRRC4能够下调一系列神经生长因子或受体(如IGF,EGF,PDGF,CNTF,bFGF,GDNF和BDNF等)的表达,通过调控多种信号转导通路(K-Ras/c-Raf/ERK/MAPK,PI-3K/AKT/NF-κB,p70S6/PKC,STAT3以及JNK2/c-Jun/mp53等)将U251细胞阻滞在G1晚期,抑制脑胶质瘤细胞的增殖和侵袭,而且这种抑制作用依赖于它的LRR结构域.LRRC4不能诱导胶质瘤细胞的凋亡,而是诱导胶质瘤细胞向胶质样细胞分化. 展开更多

关键词 lrrc4 富亮氨酸重复超家族 脑胶质瘤 信号转导

暂未订购

鼻咽癌癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化研究 被引量：1

8

作者 周小军 陈江华 +2 位作者 王士贞 王书芹 张丽娟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期341-344,共4页

目的:研究鼻咽癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化特征。方法:12例鼻咽癌10例鼻咽炎作为研究对象,抽提鼻咽组织DNA,以特异识别5-甲基胞嘧啶的抗体免疫沉淀DNA,实时荧光定量PCR分别检测5个基因含量,并设置不用5-甲基... 目的:研究鼻咽癌变前后ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4甲基化特征。方法:12例鼻咽癌10例鼻咽炎作为研究对象,抽提鼻咽组织DNA,以特异识别5-甲基胞嘧啶的抗体免疫沉淀DNA,实时荧光定量PCR分别检测5个基因含量,并设置不用5-甲基胞嘧啶抗体(非MeDIP-qPCR实验)及使用非特异性抗体IgG进行免疫沉淀作为双重对照。结果:无论鼻咽癌还是鼻咽炎患者,5个基因在使用非特异性抗体IgG实验时均未检验到甲基化,非MeDIP-qPCR实验显示5个基因在鼻咽癌及鼻咽炎荧光定量值无明显差异(P>0.05);MeDIP-qPCR实验显示,鼻咽癌5个基因均呈现明显的甲基化,ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC45在鼻咽癌校正值分别为:3.39±2.28、6.03±3.93、3.68±1.81、7.12±3.17、3.10±1.94,在鼻咽炎分别为0.00±0.00、0.01±0.01、0.25±0.49、0.20±0.20、0.00±0.00(均P<0.01)。结论:ADAM23、MIMT1、FAM150B、GRIN2A、LRRC4 5个基因甲基化为鼻咽癌变的重要特征。 展开更多

关键词 鼻咽癌 DNA甲基化 ADAM23 MIMT1 FAM150B GRIN2A lrrc4

暂未订购

Tet调控的脑相对特异性新基因LRRC4表达细胞系的构建 被引量：1

9

作者 张秋红 王莉莉 +4 位作者 彭聪 曹利 王洁如 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期325-330,共6页

LRRC4是一个在脑相对特异性表达的富亮氨酸重复超家族新成员,在神经胶质瘤表达明显下调或缺失且具有抑制脑胶质瘤细胞生长的潜能. 利用Tet-on基因表达系统,经过两轮转染,先后将调控质粒pTet-on和表达质粒pTRE-2hyg-LRRC4转染U251细胞系... LRRC4是一个在脑相对特异性表达的富亮氨酸重复超家族新成员,在神经胶质瘤表达明显下调或缺失且具有抑制脑胶质瘤细胞生长的潜能. 利用Tet-on基因表达系统,经过两轮转染,先后将调控质粒pTet-on和表达质粒pTRE-2hyg-LRRC4转染U251细胞系,分别用G418和潮霉素Hygromycin进行两次筛选. 在第一轮挑取的80个克隆中,利用pTRE-2hyg-luciferase报告基因进行最佳的低背景高表达的pTet-on细胞克隆筛选,在通过量效关系和动力学检测筛选的最佳克隆基础上,再进行pTRE-2hyg-LRRC4的转染,并通过RT-PCR和RNA印迹检测,成功获得了两个具有良好诱导性Tet调控的LRRC4双稳定表达细胞系,为进一步阐明LRRC4在脑胶质瘤发生发展中的作用,提供有利的研究基础和理想的实验平台. 展开更多

关键词 lrrc4 Tet-on基因表达系统 DOXYCYCLINE

暂未订购

富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4的IgC2结构域蛋白的原核表达和纯化 被引量：1

10

作者 董利 谭琛 +4 位作者 王洁如 钱骏 张小慧 李小玲 李桂源 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第2期147-151,共5页

富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4基因是新克隆的脑瘤相关基因 ,采用多聚酶链式反应 (PCR)方法获得长约 5 0 0bp含IgC2结构域的DNA序列 ,扩增产物克隆至pGEX 4T 2质粒中 ,构建GST融合表达质粒 ,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白 ,经包涵体沉... 富亮氨酸重复超家族新成员LRRC4基因是新克隆的脑瘤相关基因 ,采用多聚酶链式反应 (PCR)方法获得长约 5 0 0bp含IgC2结构域的DNA序列 ,扩增产物克隆至pGEX 4T 2质粒中 ,构建GST融合表达质粒 ,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白 ,经包涵体沉淀、溶解 ,Glutathione Sepharose亲和层析纯化获得融合蛋白 ,并以Westernblot鉴定证实 .通过IgC2结构域蛋白的纯化分离该结构域 ,为进一步研究该结构域及LRRC4基因的结构和功能奠定了基础 . 展开更多

关键词 lrrc4 原核表达 谷胱甘肽巯基转移酶 基因表达 融合蛋白 蛋白纯化 IgC2结构域蛋白 富亮氨酸重复超家族

在线阅读 下载PDF 职称材料

LRRC4通过MAPK信号通路阻滞U251细胞于G_0/G_1期

11

作者 武明花 黄琛 +4 位作者 李小玲 周鸣 周艳宏 张祖平 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期226-230,共5页

目的:探讨脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4通过MAPK信号通路阻滞U251细胞于G0/G1的机制。方法:通过脂质体转染法将LRRC4基因转染至U251细胞,G418筛选构建稳定转染的LRRC4/U251细胞株并验证LRRC4的阳性表达;通过Western-blot检测LRRC4对MAPK信号... 目的:探讨脑胶质瘤抑瘤基因LRRC4通过MAPK信号通路阻滞U251细胞于G0/G1的机制。方法:通过脂质体转染法将LRRC4基因转染至U251细胞,G418筛选构建稳定转染的LRRC4/U251细胞株并验证LRRC4的阳性表达;通过Western-blot检测LRRC4对MAPK信号通路的关键分子ERK,JNK及P38的表达影响;流式细胞仪、荧光素酶活性检测分析LRRC4对U251细胞周期及细胞周期素(cyclinD1)的影响。结果:LRRC4能够下调磷酸化ERK的表达,上调总蛋白JNK2和磷酸化c-Jun的表达。LRRC4下调了U251细胞中突变型P53的表达,以及cyclinD1的启动子活性和它的表达。LRRC4的重表达将U251细胞阻滞于G0/G1期。结论:LRRC4主要通过MAPK通路的关键分子JNK2上调磷酸化的c-Jun,抑制突变型的P53的表达,进而下调cyclinD1的启动子活性和cyclinD1的表达,将U251细胞阻滞于G0/G1期。 展开更多

关键词 胶质瘤 lrrc4 MAPK信号通路 U251细胞

暂未订购

LRRC4基因转染U251细胞的比较蛋白质组学分析

12

作者 杨静 武明花 +3 位作者 王蓉 张祖萍 李小玲 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期345-351,共7页

LRRC4是我室自主克隆的一个脑组织优势表达基因.前期研究结果表明,外源性LRRC4基因转染至U251细胞,可明显地抑制U251细胞的增殖、黏附、趋化和侵袭等生物学行为.因此,LRRC4亦是一个脑胶质瘤抑制性基因.为了进一步了解LRRC4在胶质瘤发生... LRRC4是我室自主克隆的一个脑组织优势表达基因.前期研究结果表明,外源性LRRC4基因转染至U251细胞,可明显地抑制U251细胞的增殖、黏附、趋化和侵袭等生物学行为.因此,LRRC4亦是一个脑胶质瘤抑制性基因.为了进一步了解LRRC4在胶质瘤发生发展中的调控作用,本研究采用荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)和质谱分析技术获得了LRRC4转染U251细胞的11个差异表达蛋白质,并用Western印迹证实了U251细胞在转染LRRC4基因前后热休克蛋白27、stathmin1和S100钙结合蛋白A11的差异表达变化.这些差异蛋白质涉及细胞代谢、增殖、转录、信号转导等众多事件,表明LRRC4基因转染U251细胞后可能通过调控这些蛋白质的表达而参与细胞的增殖、黏附、趋化和侵袭等生物学过程. 展开更多

关键词 lrrc4 胶质瘤 荧光差异凝胶电泳 MALDI-TOF/TOF-MS/MS

原文传递

LRRC4多抗制备及在构建不同级别脑胶质瘤差异表达中的应用 被引量：1

13

作者 李丹 武明花 +5 位作者 陈琼 黄河 黄琛 李伟松 李小玲 李桂源 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期373-379,共7页

目的:制备兔抗脑瘤候选抑瘤基因LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)的多克隆抗体,应用该抗体检测LRRC4表达与脑胶质瘤病理分级的相关性。方法:应用DSGene1.1软件分析LRRC4全长蛋白,避开跨膜结构域,选取亲水性及抗原性均好的蛋白... 目的:制备兔抗脑瘤候选抑瘤基因LRRC4(leucine-rich repeats containing 4)的多克隆抗体,应用该抗体检测LRRC4表达与脑胶质瘤病理分级的相关性。方法:应用DSGene1.1软件分析LRRC4全长蛋白,避开跨膜结构域,选取亲水性及抗原性均好的蛋白序列。构建相应的融合表达载体pGEX-4T-2/276bp,转入E.coliJM109中IPTG诱导表达。融合蛋白经纯化后免疫新西兰兔,收集并纯化抗血清,获得兔抗人LRRC4多抗,应用该抗体通过Western印迹和免疫组织化学检测LRRC4在正常人胚胎各器官组织中的表达及其在正常脑组织与各级脑胶质瘤中的表达差异。结果:制备了效价高、特异性好的兔抗人LRRC4多抗,进一步证实了LRRC4在正常人脑组织中相对特异高表达,在脑胶质瘤中表达下调(22例/37例)或缺失(15例/37例),其表达水平与脑胶质瘤的病理分级相关。结论:兔抗人LRRC4多抗效价高、特异性好,应用该抗体检测到LRRC4的表达水平与脑胶质瘤病理分级密切相关,为LRRC4后续的研究工作奠定了基础。 展开更多

关键词 lrrc4 多克隆抗体 脑胶质瘤 病理分级

暂未订购

新型脑组织特异性基因LRRC4的功能研究 被引量：1

14

作者 范松青 王洁如 +6 位作者 黄河 熊炜 肖炳燚 欧阳珏 曹莉 谭琛 李桂源 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期393-396,共4页

目的研究LRRC4基因的抑瘤作用,探讨LRRC4基因对U251细胞的生物学功能影响。方法将转染LRRC4基因的U251细胞、转染空白载体PcDNA3.1(+)的U251细胞和阴性对照的U251细胞分别进行HE染色、DNA染色和核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs)染色,并采用... 目的研究LRRC4基因的抑瘤作用,探讨LRRC4基因对U251细胞的生物学功能影响。方法将转染LRRC4基因的U251细胞、转染空白载体PcDNA3.1(+)的U251细胞和阴性对照的U251细胞分别进行HE染色、DNA染色和核仁组成区嗜银蛋白(AgNORs)染色,并采用图像分析系统分别进行平面形态参数、DNA含量、DNA倍体、细胞周期和AgNORs定量分析,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期分布,MTT检测各组细胞的增殖活性。结果转染LRRC4基因U251细胞的面积为(100.6±7.6)μm2,周长为(42.4±2.0)μm,细胞直径为(9.0±1.2)μm,平均DNA含量为(46.8±8.7)pg,AgNORs平均颗粒数为(1.2±0.4)个,AgNORs平均面积为(16.9±2.0)μm2,均显著低于转染空白载体和阴性对照细胞,DNA异倍体也显著低于转染空白载体和阴性对照细胞。转染LRRC4基因的U251细胞的G0/G1期百分比明显增高,而S期和G2/M期细胞减少。转染LRRC4基因的U251细胞增殖活性显著低于转染空白载体和阴性对照细胞(P<0.01)。结论LRRC4基因通过抑制细胞的DNA复制,减少细胞核仁组成区相关蛋白质的合成,使细胞停滞于G0/G1期,抑制细胞的增殖活性,进而发挥抑瘤功能。形态定量检测技术结合流式细胞检测、MTT检测等实验,能更加全面地阐明新基因的生物学功能。 展开更多

关键词 基因lrrc4 U251细胞 细胞周期 核仁组成区嗜银蛋白 抑瘤作用

原文传递

原发性脑瘤的分子遗传学研究进展 被引量：5

15

作者 武明花 王洁如 李桂源 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第3期223-226,共4页

原发性脑瘤是发生于神经系统常见的疾病,高度恶性的胶质瘤占原发性脑瘤的40%,主要分为Ⅰ型胶质母细胞瘤(继发性胶质母细胞瘤)和Ⅱ型胶质母细胞瘤(原发性胶质母细胞瘤),二者的产生有着不同的遗传学改变。Ⅰ型胶质母细胞瘤的产生途径是从... 原发性脑瘤是发生于神经系统常见的疾病,高度恶性的胶质瘤占原发性脑瘤的40%,主要分为Ⅰ型胶质母细胞瘤(继发性胶质母细胞瘤)和Ⅱ型胶质母细胞瘤(原发性胶质母细胞瘤),二者的产生有着不同的遗传学改变。Ⅰ型胶质母细胞瘤的产生途径是从一种恶性程度较低的星形细胞瘤(Ⅱ级,主要为p53基因突变和血小板来源的生长因子/受体过表达)至恶性的间变型星型细胞瘤(Ⅲ级,主要为Rb基因突变,CDK4基因扩增,9p、11p、13q和19q的等位基因缺失),再到胶质母细胞瘤(Ⅳ级,最常见的遗传学改变是7号和20号染色体的获得,10号染色体的丢失以及PTEN和LRRC4基因的缺失,PDGFα及其受体的过表达)的渐进的发展过程;而Ⅱ型胶质母细胞瘤则是一种没有恶性程度渐进过程的原发性胶质母细胞瘤,表皮生长因子受体基因的扩增是最常见的遗传学改变。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 遗传学 p53 表皮生长因子受体 血小板来源的生长因子/受体 lrrc4

暂未订购

富亮氨酸重复超家族成员与脑瘤的研究进展 被引量：2

16

作者 李丹 李桂源 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第6期466-469,共4页

富亮氨酸重复(LRR)超家族成员已达4 000多种,它们在进化上保守、功能多样。许多研究表明,LRR蛋白在神经系统的发育及正常功能的维持中扮演重要角色,与脑瘤的发生发展亦存在一定的联系。LG I1,LR-RC4主要分布于正常脑组织,与脑胶质瘤的... 富亮氨酸重复(LRR)超家族成员已达4 000多种,它们在进化上保守、功能多样。许多研究表明,LRR蛋白在神经系统的发育及正常功能的维持中扮演重要角色,与脑瘤的发生发展亦存在一定的联系。LG I1,LR-RC4主要分布于正常脑组织,与脑胶质瘤的恶性程度密切相关,随着胶质瘤恶性程度的增高,其表达逐渐下调甚至缺失。Slitrk,Slit及GAC1等亦参与了脑瘤的发生发展。 展开更多

关键词 富亮氨酸重复 脑瘤 LRRCA

暂未订购