目的:介绍冷冻超薄切片免疫电镜技术在肾活检病理中的应用。方法:肾活检组织经固定、蔗糖冷冻保护后,应用改良Tokuyasu技术冷冻超薄切片进行IgA、κ、λ、C3aR、Podocine、Nephrin免疫胶体金标记,结合免疫荧光标记,并与Epon812常规免疫...目的:介绍冷冻超薄切片免疫电镜技术在肾活检病理中的应用。方法:肾活检组织经固定、蔗糖冷冻保护后,应用改良Tokuyasu技术冷冻超薄切片进行IgA、κ、λ、C3aR、Podocine、Nephrin免疫胶体金标记,结合免疫荧光标记,并与Epon812常规免疫电镜技术及LR White Resin低温包埋免疫电镜技术进行对比,观察和比较冷冻超薄切片免疫电镜方法对肾活检组织超微结构、抗原保存及免疫标记的影响。结果:冷冻超薄切片肾组织免疫电镜微细结构保存良好,细胞内结构清晰,肾组织及细胞内抗原保存较好,但细胞内基质、糖原保存不理想。IgA、κ、λ免疫标记金颗粒密度高,分布特异、敏感性高。Epon812常规免疫电镜和LR White Resin低温包埋免疫电镜方法能很好地标记C3aR、Podocine、Nephrin较难检测的抗原。结论:肾活检冷冻超薄切片免疫电镜方法免疫标记特异度强、敏感度高,是研究肾脏病理超微结构较为理想的方法。展开更多
文摘目的:介绍冷冻超薄切片免疫电镜技术在肾活检病理中的应用。方法:肾活检组织经固定、蔗糖冷冻保护后,应用改良Tokuyasu技术冷冻超薄切片进行IgA、κ、λ、C3aR、Podocine、Nephrin免疫胶体金标记,结合免疫荧光标记,并与Epon812常规免疫电镜技术及LR White Resin低温包埋免疫电镜技术进行对比,观察和比较冷冻超薄切片免疫电镜方法对肾活检组织超微结构、抗原保存及免疫标记的影响。结果:冷冻超薄切片肾组织免疫电镜微细结构保存良好,细胞内结构清晰,肾组织及细胞内抗原保存较好,但细胞内基质、糖原保存不理想。IgA、κ、λ免疫标记金颗粒密度高,分布特异、敏感性高。Epon812常规免疫电镜和LR White Resin低温包埋免疫电镜方法能很好地标记C3aR、Podocine、Nephrin较难检测的抗原。结论:肾活检冷冻超薄切片免疫电镜方法免疫标记特异度强、敏感度高,是研究肾脏病理超微结构较为理想的方法。
