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利用花药培养技术培育脂肪氧化酶(LOX)活性低的耐储小麦新品系 被引量：1
1
作者 赵远玲 谭巍巍 +5 位作者 刘昭军 李铁 李冬梅 孙铭隆 高凤梅 王永斌 《作物杂志》 北大核心 2025年第2期40-46,共7页
小麦储藏过程中的陈化变质会造成严重经济损失。利用RNA干扰(RNAi)技术获得的脂肪氧化酶(LOX)活性低的3个转基因小麦材料与7个本地主栽品种或中间材料杂交,分别在10个组合的F1~F3代材料中,采用适合黑龙江省春小麦的花药培养技术,在短时... 小麦储藏过程中的陈化变质会造成严重经济损失。利用RNA干扰(RNAi)技术获得的脂肪氧化酶(LOX)活性低的3个转基因小麦材料与7个本地主栽品种或中间材料杂交,分别在10个组合的F1~F3代材料中,采用适合黑龙江省春小麦的花药培养技术,在短时期内快速培育出6个农艺性状优良、LOX活性低的小麦新品系,实现了优良基因的快速转育。 展开更多
关键词 小麦 脂肪氧化酶(lox) 花药培养 快速转育
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基于5-LOX/LTB4信号通路探讨黄芩苷/栀子苷对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠的保护作用与机制 被引量：1
2
作者 周雪薇 张嘉豪 +5 位作者 呼田 巩洁 李媛 刘继平 王川 王斌 《中南药学》 2025年第5期1215-1220,共6页
目的 探讨黄芩苷与栀子苷配伍(BC/GD)对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠炎症及血脂水平的改善作用及机制。方法 采用高脂饲料喂养和双侧颈动脉结扎法建立“痰瘀互结”型脑卒中模型,分别给予60 mg·kg^(-1)的BC/GD与0.625 g·kg^(-1)... 目的 探讨黄芩苷与栀子苷配伍(BC/GD)对“痰瘀互结”型脑卒中大鼠炎症及血脂水平的改善作用及机制。方法 采用高脂饲料喂养和双侧颈动脉结扎法建立“痰瘀互结”型脑卒中模型,分别给予60 mg·kg^(-1)的BC/GD与0.625 g·kg^(-1)的醒脑解郁胶囊治疗,空白组、假手术组与模型组灌胃等体积生理盐水。激光多普勒检测大鼠脑血流量;全自动生化分析仪检测大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)水平;全自动凝血分析仪检测大鼠血浆活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)和纤维蛋白原(FIB)水平;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和同型半胱氨酸(Hcy)含量。HE染色观察大鼠脑组织与肝脏病理学改变。结果 与空白组相比,模型组大鼠脑血流量显著降低;TG、TC、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低;APTT、PT、FIB值显著降低;TNF-α、IL-6、Hcy和hs-CRP含量显著升高;脑组织中5-LOX、BLT1与BLT2蛋白水平显著升高。与模型组相比,60 mg·kg^(-1)的BC/GD可以降低大鼠血清TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平及APTT值,降低TNF-α、IL-6、Hcy、hs-CRP水平及5-LOX、BLT1和BLT2蛋白表达水平。结论 BC/GD可通过抑制5-LOX/LTB4信号通路表达,改善血脂水平与凝血功能,降低血清炎症因子表达,改善脑组织损伤。 展开更多
关键词 痰瘀互结 缺血性脑卒中 炎症 血脂异常 5-lox/LTB4信号通路
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大豆LOX基因家族的全基因组鉴定及GmLOX15A1基因等位变异对百粒重的影响 被引量：1
3
作者 王伟 吴传磊 +5 位作者 胡晓渝 李佳佳 白鹏宇 王郭伋 苗龙 王晓波 《中国农业科学》 北大核心 2025年第1期10-29,共20页
【目的】基于全基因组鉴定分析大豆LOX基因家族成员,了解各成员的分类进化关系,研究各基因成员在不同组织中的表达特异性以及对非生物胁迫的响应,为进一步研究LOX基因家族的分子特征、进化历程以及功能研究提供理论基础。【方法】基于En... 【目的】基于全基因组鉴定分析大豆LOX基因家族成员,了解各成员的分类进化关系,研究各基因成员在不同组织中的表达特异性以及对非生物胁迫的响应,为进一步研究LOX基因家族的分子特征、进化历程以及功能研究提供理论基础。【方法】基于Ensembl数据库中水稻和拟南芥物种LOX蛋白序列,在大豆全基因组数据库中BLASTP比对同源LOX蛋白序列,使用MEGA X软件构建系统进化树;采用网站MEME进行蛋白保守基序分析;运用在线软件GSDS 2.0分析基因结构;运用TBtools进行染色体定位绘制;用McscanX分析大豆LOX家族复制基因;利用PlantCARE网站预测大豆LOX基因家族启动子元件;通过TBtools绘制不同组织及非生物胁迫下大豆基因表达热图,并对与百粒重显著相关的优异等位变异位点GmLOX15A1-G/A进行分子标记开发。【结果】大豆中共鉴定到43个LOX基因,不均匀地分布在13条染色体上。共线性分析表明,GmLOX基因在进化过程中经历了广泛的复制。同时,在LOX基因启动子中检测到39种不同类型的顺式调控元件,表明它们可能参与了不同的生长发育、光反应、应激反应与激素诱导等途径。表达模式分析发现LOX基因在大豆不同组织中具有不同的表达程度,表明该家族成员具有组织和时空表达特异性。干旱胁迫条件下,GmLOX基因在大豆根系和叶片中表达差异显著(P<0.05),其中,GmLOX3A3、GmLOX7A1、GmLOX20B1、GmLOX13A1和GmLOX20A2在根系和叶片中均显著上调或下调表达,推测GmLOX基因可能在逆境胁迫响应中发挥重要作用。同时,发现GmLOX15A1在籽粒组织中高表达且在该基因编码区第七外显子存在一处G/A优异等位变异,对该变异位点开发分子标记,并利用来自不同生态-A区1200份大豆种质资源2年的百粒重数据,分析GmLOX15A1不同单倍型与百粒重的相关性,结果表明,相较于GmLOX15A1-^(A)基因型,携带GmLOX15A1-G等位基因大豆种质的平均百粒重提高2.33 g(P<0.001)。【结论】在大豆中共鉴定到43个LOX家族成员,可分为3个亚家族。GmLOX基因启动子区存在大量激素和胁迫响应的顺式作用元件,在干旱胁迫响应中发挥不同的作用。其中,GmLOX15A1在籽粒组织中高表达且该基因编码区第七外显子存在一处G/A优异等位变异,相较于GmLOX15A1-A基因型,携带GmLOX15A1-G等位基因大豆种质的平均百粒重显著提高2.33g,该位点可作为大豆籽粒大小遗传改良的优异单倍型。 展开更多
关键词 大豆 脂肪氧合酶 生物信息学 表达分析 逆境响应 百粒重
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宁夏枸杞LOX基因家族的全基因组鉴定与表达分析
4
作者 杨子君 吴佳俐 +1 位作者 南熊熊 王翠平 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第4期83-93,共11页
宁夏枸杞在生长过程中极易遭受各种各样的虫害,植物脂氧合酶(LOX)是生物合成抗虫植物激素茉莉酸的关键酶,脂氧合酶可能与植物抗虫紧密相关,参与植物诱导型防御。为了探讨枸杞LOX基因家族的分子特征和表达模式,以枸杞为研究对象,通过在... 宁夏枸杞在生长过程中极易遭受各种各样的虫害,植物脂氧合酶(LOX)是生物合成抗虫植物激素茉莉酸的关键酶,脂氧合酶可能与植物抗虫紧密相关,参与植物诱导型防御。为了探讨枸杞LOX基因家族的分子特征和表达模式,以枸杞为研究对象,通过在全基因组水平对枸杞LOX基因家族成员进行鉴定,并对该基因家族成员的蛋白理化性质、保守基序、染色体定位、系统进化、差异表达及顺势作用元件进行分析。结果表明,从枸杞全基因组中共鉴定出13个LOX家族成员,该家族成员包含773~924个氨基酸,蛋白相对分子量为87729.75~104405.08 u,等电点为5.42~7.58,脂溶指数为83.55~89.87,61%的LOX基因定位于细胞质。将枸杞的LOX家族基因与拟南芥及其他4个物种的LOX基因共同构建系统进化树,发现枸杞LOX基因家族共分为2个亚家族,且部分枸杞的LOX基因与拟南芥LOX基因间的进化关系较近;13个枸杞LOX基因不均匀地分布在6条染色体上,其中6号染色体分布得最多。转录组分析结果表明,不同LOX基因在枸杞不同器官中的表达不同,大多数枸杞基因在茎尖、青果、雌蕊、新叶中显著表达,推测这些基因可能在枸杞生长成熟过程中起作用。qPCR结果显示,大多LOX基因对非抗性植株更加敏感,在非抗性植株中,LOX基因总体上对有生物胁迫的处理组更敏感;在抗性植株中的表现则相反,表明不同LOX基因在不同胁迫、不同抗性植株中的表达具有特异性。 展开更多
关键词 宁夏枸杞 lox基因家族 鉴定 差异表达 瘿螨
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一种利用Cre/loxP系统进行标记基因删除与靶基因置换的细胞模型研究(英文) 被引量：2
5
作者 崔文涛 任立明 +3 位作者 侯健 张颖 陈永福 安晓荣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期650-660,共11页
Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究... Cre/lox系统可以介导DNA的定点插入和定点删除,可利用其实现转基因动物中'友好位点'的重复利用及标记基因的有效删除.为直观地评估该系统介导的以上两种重组反应的效果,通过标记基因并利用大鼠乳腺癌细胞系SHZ-88进行了模型研究.首先构建了两个载体:a.整合载体pTE-lox2272-DsRed-loxP-GFP-loxP,含有红色荧光标记基因DsRed和绿色荧光标记基因GFP;b.置换载体pT-lox2272-neo-loxP,含有筛选标记基因neo,用以置换DsRed基因.然后,用整合载体转染SHZ-88细胞,并随机挑取了3个同时表达DsRed和GFP的稳定整合细胞克隆.随后用置换载体和Cre表达载体PBS185对以上每个克隆分别进行了3次共转染,通过G418筛选并扩增培养后,总共获得1070个克隆.通过分析标记基因DsRed和GFP在这些克隆中的表达情况:Cre介导的删除效率为91.1%,定点置换效率为29.3%.最后对部分克隆进行了PCR和DNA印迹鉴定,分子鉴定结果与发光的表型状况一致.这一方法为Cre/lox系统在转基因家畜生产中的进一步应用提供了实验依据. 展开更多
关键词 lox2272 loxP CRE 标记基因删除 靶基因置换
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小麦籽粒成熟与萌发期间LOX的动态变化 被引量：2
6
作者 顾明超 吴萍 +2 位作者 郑文寅 张文明 姚大年 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期60-64,共5页
为了解小麦籽粒中脂肪氧化酶(LOX)同工酶的代谢过程,选用4个小麦品种(鲁麦22、中优9507、内乡188、蒿优9409)为材料,采用薄层等电聚焦电泳(IEF)活性染色法检测和分析了小麦在籽粒成熟与种子萌发期间LOX同工酶酶谱的变化,并采用分光光度... 为了解小麦籽粒中脂肪氧化酶(LOX)同工酶的代谢过程,选用4个小麦品种(鲁麦22、中优9507、内乡188、蒿优9409)为材料,采用薄层等电聚焦电泳(IEF)活性染色法检测和分析了小麦在籽粒成熟与种子萌发期间LOX同工酶酶谱的变化,并采用分光光度计法测定其活性。结果表明,在籽粒成熟期间,中优9507、内乡188、蒿优9409含有5条不同的同工酶条带,鲁麦22含有8条不同的LOX同工酶条带;随籽粒成熟度的增加,酸性和中性部分的LOX同工酶的合成与含量逐渐减少,碱性部分的LOX同工酶的合成与含量缓慢增加,说明成熟末期小麦籽粒主要积累碱性LOX;4个品种的LOX活性随籽粒成熟均呈现先逐渐降低至最低点后轻微反弹的变化趋势。在种子萌发期间,4个小麦品种都含有7条LOX同工酶条带,除萌发第一天外,随种子萌发的进行,酸性部分的LOX同工酶合成与含量减少,碱性和中性部分的LOX同工酶合成与含量缓慢增加,说明小麦种子在萌发过程中主要积累碱性LOX;4个品种的LOX活性均呈先保持一恒定高值后迅速下降至一恒定低值的变化趋势。无论是籽粒成熟期间还是种子萌发期间,影响小麦籽粒或种子中LOX酶活性大小的主要是酸性的LOX同工酶。 展开更多
关键词 小麦 籽粒成熟期 种子萌发期 lox酶活性 lox同工酶
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20个小麦品种(系)籽粒LOX活性和类胡萝卜素含量及全麦粉色泽的研究 被引量：16
7
作者 汪帆 郑文寅 +4 位作者 黄建华 王冠球 崔文礼 张文明 姚大年 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期68-73,共6页
为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明... 为给小麦粉营养品质与商品性的协同改良提供参考,以20个小麦品种(系)为试材,分析了不同角质类型的籽粒中脂肪氧化酶(LOX)活性和类胡萝卜素含量的变化,并初步探讨了LOX活性和类胡萝卜素含量的高低与全麦粉白度、黄度间的相关性。结果表明,不同品种(系)间LOX活性、类胡萝卜素含量、全麦粉白度、全麦粉黄度均存在极显著差异;LOX活性与类胡萝卜素含量呈极显著负相关,与全麦粉白度呈显著正相关,与全麦粉黄度相关性不显著;类胡萝卜素含量与全麦粉黄度呈显著正相关,与白度相关性不显著。采用欧式最长距离法对供试小麦品种(系)的LOX、类胡萝卜素以及全麦粉白度、黄度进行聚类分析,结果,LOX活性和白度较高、类胡萝卜素含量和黄度较低的周麦19和偃展4110聚为一类;LOX活性和白度较低、类胡萝卜素含量和黄度较高的烟农21、皖麦47等9个品种聚为一类;上述性状值居中的其他9个品种聚为一类。 展开更多
关键词 小麦 lox 类胡萝卜素 全麦粉白度、黄度 相关性
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PG和LOX对采后番茄果实软化及细胞超微结构的影响 被引量：53
8
作者 生吉萍 罗云波 申琳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期276-281,共6页
以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和... 以番茄 (Lycopersiconesculentum)品种‘丽春’为试验材料研究了果实采后多聚半乳糖醛酸酶 (PG)和脂氧合酶 (LOX)的活性变化与果实硬度的关系 ,并观察了细胞超微结构的变化。结果表明 ,随着果实采后呼吸强度和乙烯释放量不断增加 ,PG和LOX活性迅速增加 ,而果实硬度逐渐下降。呼吸强度和LOX活性高峰出现在发白期 (BR) ,而乙烯释放量高峰延迟至转色期 (TU)。PG活性随着果实的成熟逐渐增加 ,而LOX活性在发白期之后保持较高水平。分别用外源LOX和LOX加底物处理番茄组织切片 ,发现组织细胞的衰老进程加速 ,进而导致细胞膜瓦解、胞壁纤维松弛以及细胞器空胞化。PG和LOX都与果实的后熟软化有关 。 展开更多
关键词 番茄 果实软化 PG lox 酶活性 细胞超微结构
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Cre/lox位点特异性重组系统在高等真核生物中的研究进展 被引量：12
9
作者 龙定沛 谭兵 +2 位作者 赵爱春 许龙霞 向仲怀 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期177-189,共13页
来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真... 来自于P1噬菌体的Cre/lox系统通过位点特异性重组可以迅速而有效地实现各种生理环境下的基因定点插入、删除、替换和倒位等操作。Cre/lox系统作为目前基因打靶技术的核心工具,已被广泛应用于拟南芥、水稻、小鼠、果蝇、斑马鱼等高等真核模式生物。文章较为全面地介绍了Cre/lox系统的基本概况及其在高等真核生物中的应用,讨论了Cre/lox系统在研究中存在的主要问题和今后的发展方向,为利用该系统在不同高等生物中进行基因操作提供有用的参考。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 基因操作 位点特异性重组 基因打靶
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外源乙烯对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO和LOX活性变化的影响 被引量：14
10
作者 胡花丽 梁丽松 +1 位作者 王贵禧 李艳菊 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2007年第3期38-42,共5页
以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10～20μL.L-1和50～80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%～11%CO2+9%～11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果... 以‘八月脆’桃果实为材料,研究了常温条件下,不同浓度外源乙烯(10～20μL.L-1和50～80μL.L-1)处理对气调贮藏(9%～11%CO2+9%～11%O2)期间以及在20℃回温3 d后桃果实MDA(丙二醛)含量、PPO(多酚氧化酶)和LOX(脂氧合酶)活性的影响。结果表明:常温贮藏条件下,桃果实MDA含量随着果实的成熟而升高,PPO和LOX活性在第4 d出现高峰。外源乙烯提高了气调贮藏果实MDA含量,贮藏60 d时,高浓度外源乙烯处理果实MDA含量明显升高。回温后,冷藏对照果实MDA含量随着贮藏时间的延长而增加,且在贮藏60 d时,MDA含量高于常温贮藏果实的MDA含量。外源乙烯对LOX的作用与其对MDA的作用一致。高浓度的外源乙烯可抑制贮藏前期桃果实PPO活性,低浓度外源乙烯则降低了贮藏后期桃果实PPO活性,但回温后,低浓度外源乙烯处理果实PPO活性明显升高。综合考虑不同处理对CA贮藏桃果实MDA含量、PPO、LOX活性的作用特点,认为50～80μL.L-1外源乙烯处理对减轻桃果实的低温冷害、抑制果实褐变有一定的作用。 展开更多
关键词 桃果实 外源乙烯 CA贮藏 MDA PPO lox
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枇杷幼果PLD和LOX对低温胁迫的响应 被引量：10
11
作者 吴锦程 吴毕莎 +4 位作者 黄审剑 陈祠贤 颜亮 许宏斌 林建琼 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期203-209,共7页
以3年生枇杷品种‘早钟6号’（Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’）容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷... 以3年生枇杷品种‘早钟6号’（Eriobotrya japonica‘Zaozhong No.6’）容器嫁接苗为试材,于0℃、-1℃、-3℃人工气候室内进行低温胁迫处理,探讨枇杷幼果细胞膜磷脂及相关酶对低温胁迫的响应机制。结果显示,在不同温度胁迫过程中,枇杷幼果磷脂酶D（PLD,EC 3.1.4.4）和脂氧合酶（LOX,EC 1.13.11.12）活性均呈上升趋势;质膜磷脂酰胆碱（PC）和磷脂酰肌醇（PI）含量因逐渐被降解而呈下降趋势,磷脂酸（PA）含量出现积累、增加,而膜结合Ca2＋含量有不同程度的降低。随处理时间的延长和处理温度的降低,枇杷幼果细胞PLD和LOX活性增幅加大,从而加速了膜PC和PI的降解和PA的积累。低温胁迫过程中幼果细胞膜PC含量的降幅大于PI,膜结合Ca2＋含量的变化与PLD和LOX活性变化呈负相关。低温胁迫下枇杷幼果细胞膜结合Ca2＋含量的减少诱导了膜脂降解酶PLD和LOX活性的提高,并导致膜结构稳定性下降,加剧了低温胁迫对膜脂的降解和脂质过氧化伤害,其中尤以-3℃胁迫处理4~6 h对幼果细胞质膜的伤害最严重。表明低温胁迫下Ca2＋·Ca M信使系统可能参与枇杷幼果细胞膜PLD和LOX活性的调控。 展开更多
关键词 枇杷 低温胁迫 磷脂酶D(PLD) 脂氧合酶(lox) 膜结合Ca2+
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利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草 被引量：9
12
作者 宋洪元 任雪松 +2 位作者 司军 李成琼 宋明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期2973-2982,共10页
【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Bast... 【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%～100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。 展开更多
关键词 Cre/lox定位重组系统 无选择标记转基因烟草 绿色荧光蛋白 转基因
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瓜蒌薤白半夏汤对ApoE小鼠血脂代谢、氧化应激和主动脉Lox-1表达的影响 被引量：41
13
作者 郭建恩 米树斌 +4 位作者 闫秀川 辛思源 高飞 梁广和 李静华 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期752-757,共6页
观察瓜蒌薤白半夏汤(GXBD)在调节血脂代谢、抗氧化、干预ox-LDL/Lox-1通路的作用,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。以高脂饲料饲喂雄性Apo-E-/-小鼠42只,建立AS模型。AS模型小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、GXBD高、低剂量组,以C5... 观察瓜蒌薤白半夏汤(GXBD)在调节血脂代谢、抗氧化、干预ox-LDL/Lox-1通路的作用,探讨其抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。以高脂饲料饲喂雄性Apo-E-/-小鼠42只,建立AS模型。AS模型小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、GXBD高、低剂量组,以C57BL/6J雄性小鼠作为正常对照组;每组10只,连续灌胃给药8周。末次给药后24 h,检测血清TC,TG,LDL-C,HDL-C及SOD,MDA,GSH-px,ox-LDL水平;HE染色观察主动脉组织结构变化,Western blot和PCR分别检测主动脉Lox-1蛋白表达和mRNA水平。结果显示模型组小鼠血脂指标含量及血清MDA,ox-LDL水平显著高于正常对照组,SOD,GSH-px显著低于正常对照组,主动脉Lox-1蛋白表达水平及其mRNA水平显著高于正常对照组(P<0.05),模型组主动脉出现明显粥样硬化斑块;GXBD高、低剂量组和辛伐他汀组小鼠血脂指标含量及MDA,ox-LDL水平显著低于模型组,SOD,GSHpx显著高于模型组,主动脉Lox-1蛋白表达水平及其mRNA水平显著低于模型组(P<0.05),主动脉组织粥样硬化病变明显减轻。说明调节血脂代谢,抗氧化、抑制Lox-1的表达、干预ox-LDL/Lox-1通路,可能是其抗AS的机制之一。 展开更多
关键词 瓜蒌薤白半夏汤 动脉粥样硬化 抗氧化 血脂 ox-LDL/lox-1通路
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利用Cre/lox重组系统获得无选择标记的SKTI抗虫转基因烟草 被引量：6
14
作者 宋洪元 任雪松 +3 位作者 司军 李成琼 宋明 雷建军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期21-29,共9页
将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生... 将置于两个同向lox位点之间的Bar基因表达盒与大豆胰蛋白酶抑制剂SKTI基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草Wisconsin 38后获得对棉铃虫具有明显抗性的SKTI转基因植株。SKTI转基因植株通过叶盘二次转化法导入Cre基因,对再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,检测Bar基因的删除情况。结果表明：绝大多数再生植株对应叶盘在含8 mg/L PPT的筛选培养基上无法再生,Bar基因被删除的效率在38%-100%之间。对Bar基因删除区域进行PCR及克隆测序后发现Bar基因表达盒被精确删除。对Bar基因删除植株开花自交获得的分离后代进行NPTⅡ抗性检测,5株NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有SKTI基因而无Cre基因存在,为无选择标记基因的SKTI转基因植株。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 SKTI基因 无选择标记 抗虫转基因烟草
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鸭梨采后果肉LOX同工酶变化及其与果实褐变关系的研究 被引量：5
15
作者 李晓丹 宋方圆 +2 位作者 朱文嫱 梁丽雅 闫师杰 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第4期214-217,共4页
以河北鸭梨为试材,通过鸭梨果实褐变指数和果肉LOX同工酶变化的测定,研究缓慢和急速2种降温处理对不同成熟度鸭梨果肉褐变情况和LOX同工酶活性的影响。结果表明,果实褐变严重程度为:晚采果>早采果>中采果,急速降温>缓慢降温,因... 以河北鸭梨为试材,通过鸭梨果实褐变指数和果肉LOX同工酶变化的测定,研究缓慢和急速2种降温处理对不同成熟度鸭梨果肉褐变情况和LOX同工酶活性的影响。结果表明,果实褐变严重程度为:晚采果>早采果>中采果,急速降温>缓慢降温,因此,鸭梨的最佳储藏方法为中采鸭梨(9月中旬)采用缓慢降温处理。鸭梨果肉中LOX同工酶有9条,急降温和缓降温处理对不同成熟度鸭梨果实LOX同工酶表达有一定的影响。急速降温处理比缓慢降温的LOX同工酶活性高,不同成熟度LOX酶活性大小顺序为:晚采果>中采果>早采果,这与褐变指数测定的结果相一致,暗示了脂肪氧合酶与鸭梨果肉的褐变有密切的联系。 展开更多
关键词 鸭梨 果肉 褐变指数 lox酶同工酶 非变性PAGE
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热处理对黄瓜LOX和PLD活性的影响 被引量：5
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作者 王国泽 莎娜 +3 位作者 云月英 李俊芳 王文龙 付文菊 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第6期100-102,共3页
为了研究冷害温度(2℃)下PLD和LOX活性的变化规律,以黄瓜为研究对象,对其进行采后38,45和52℃30 min热水处理,测定2℃贮藏期间(15 d)黄瓜的细胞膜透性、丙二醛含量、PLD活性和LOX活性。结果表明:热水处理可以抑制果实细胞膜渗透率的升高... 为了研究冷害温度(2℃)下PLD和LOX活性的变化规律,以黄瓜为研究对象,对其进行采后38,45和52℃30 min热水处理,测定2℃贮藏期间(15 d)黄瓜的细胞膜透性、丙二醛含量、PLD活性和LOX活性。结果表明:热水处理可以抑制果实细胞膜渗透率的升高,减少低温贮藏期间丙二醛的积累,降低黄瓜低温贮藏过程中PLD及LOX的活性,且以45℃3、0 min热水处理效果最显著。 展开更多
关键词 热处理 黄瓜 PLD活性 lox活性
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姜黄素对匹罗卡品致痫大鼠海马COX-2和5-LOX表达的影响 被引量：7
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作者 林青 牛祥雨 +5 位作者 金国飞 詹妮娜 俞忆曦 马传花 徐晨凯 刘素芝 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第9期2224-2227,I0020,共5页
目的:观察氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马组织环氧酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LOX)表达,探讨姜黄素对癫痫大鼠神经保护作用机制。方法:动物随机分为5组,生理盐水对照组,癫痫组,丙戊酸钠组,姜黄素低剂量组,姜黄素高剂量组。癫痫模型采用氯... 目的:观察氯化锂-匹罗卡品致痫大鼠海马组织环氧酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LOX)表达,探讨姜黄素对癫痫大鼠神经保护作用机制。方法:动物随机分为5组,生理盐水对照组,癫痫组,丙戊酸钠组,姜黄素低剂量组,姜黄素高剂量组。癫痫模型采用氯化锂-匹罗卡品诱导大鼠癫痫持续状态(SE),SE后各治疗组分别予丙戊酸钠口服溶液(140 mg/kg)、低剂量姜黄素(100 mg/kg)及高剂量姜黄素(300 mg/kg)腹腔注射,大鼠癫痫造模后24 h和72 h取海马组织,苏木素-伊红(HE)染色观察海马组织病理形态学变化,荧光定量PCR检测COX-2和5-LOX mRNA表达,免疫印迹法(Westetn Blot)检测海马组织COX-2和5-LOX蛋白的表达。结果:癫痫组海马神经元脱失和损伤明显,丙戊酸钠组和姜黄素治疗组明显减轻;与对照组相比,癫痫组海马组织COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达增加(癫痫72 h组5-LOX除外),差异显著(P<0.05);与癫痫组比较,姜黄素治疗组海马组织COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达降低,差异显著(P<0.05),且姜黄素高剂量组上述指标下降幅度大于低剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:姜黄素治疗可降低匹罗卡品致痫大鼠海马神经元COX-2和5-LOX mRNA及蛋白表达,可能通过影响花生四烯酸代谢通路COX-2和5-LOX表达来减轻癫痫发作脑损伤发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 癫痫 姜黄素 COX-2 5-lox 大鼠 海马
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利用Cre/lox重组系统建立番茄基因工程雄性不育恢复系 被引量：3
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作者 宋洪元 任雪松 +3 位作者 司军 李成琼 宋明 雷建军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期3581-3591,共11页
【目的】利用Cre/lox重组系统具有的重组删除特性建立番茄工程恢复系,特异删除F1中的雄性不育基因恢复其育性。【方法】将TA29-Barnase雄性不育基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与NPTⅡ基因、Bar基因融合后获得植物表达载体pBinBarl... 【目的】利用Cre/lox重组系统具有的重组删除特性建立番茄工程恢复系,特异删除F1中的雄性不育基因恢复其育性。【方法】将TA29-Barnase雄性不育基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与NPTⅡ基因、Bar基因融合后获得植物表达载体pBinBarloxTABn,转化番茄获得雄性不育转基因植株。Cre基因在CaMV35S启动子的驱动下转入番茄获得工程恢复系。两者在开花时进行杂交,利用Cre重组酶删除F1中的TA29-Barnase不育基因表达盒使育性恢复。【结果】利用NPTⅡ作为转化筛选标记基因获得了番茄雄性不育转基因植株。转基因植株中的Bar基因能正常表达,真叶叶盘在含PPT3mg·L-1(phosphinothricin)分化培养基上能分化愈伤组织及芽;真叶具有抗PPT20mg·L-1浓度以上的能力。获得的TA29-Barnase转基因植株表现雄蕊退化、无花粉产生或产生少量形状畸形且无生活力的花粉。雄性不育植株自花授粉不能坐果,用非转基因保持系花粉授粉后,果实正常膨大结籽,杂交后代对除草剂Basta的抗性按1﹕1分离。不育植株与Cre转基因工程恢复系杂交后,果实也正常膨大结籽。对不育植株与Cre转基因工程恢复系杂交后代进行分子检测,结果发现同时含Bar基因和Cre基因F1植株中的TA29-Barnase雄性不育基因被精确删除。TA29-Barnase基因删除植株育性被恢复,能正常开花结果。【结论】利用Cre/lox重组系统建立的Cre工程恢复系成功将番茄F1代中的不育基因删除,恢复了F1的育性。该研究结果为植物基因工程雄性不育系的育性恢复提供了一条新的途径。 展开更多
关键词 Cre/lox重组系统 工程不育系 Cre工程恢复系 番茄
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小麦4B染色体上LOX基因的等位变异及其区域分布 被引量：3
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作者 王黎明 孔维玮 +5 位作者 高华利 董普辉 闫雪芳 王春平 王洪刚 李兴锋 《作物杂志》 北大核心 2021年第1期32-37,共6页
为了解中国不同麦区小麦种质资源籽粒脂肪氧化酶(lipoxygenase,LOX)活性相关基因TaLox-B1的差异和分布,利用小麦4B染色体上的功能标记LOX16和LOX18对7个麦区的436份种质资源进行分子检测。结果表明:在供试材料中共检测到3种TaLox-B1基... 为了解中国不同麦区小麦种质资源籽粒脂肪氧化酶(lipoxygenase,LOX)活性相关基因TaLox-B1的差异和分布,利用小麦4B染色体上的功能标记LOX16和LOX18对7个麦区的436份种质资源进行分子检测。结果表明:在供试材料中共检测到3种TaLox-B1基因等位变异类型,分别为TaLox-B1a(与高LOX活性相关)、TaLox-B1b(与低LOX活性相关)和杂合型,其频率分别为19.0%、70.4%和10.6%。小麦LOX活性基因不同变异类型在各生态区的分布存在明显差异:基因型TaLox-B1a在黄淮冬麦区、北部冬麦区和长江中下游冬麦区分布较多,其比例分别为21.1%、19.8%和17.6%;基因型TaLox-B1b在西南冬麦区和长江中下游冬麦区分布较多,比例分别为87.9%、72.5%;杂合型仅存在于北部冬麦区、黄淮冬麦区与长江中下游冬麦区,比例分别为14.2%、12.4%和9.8%。利用标记LOX16和LOX18对53个自选高代品系进行分子检测,发现自选品系仅有TaLox-B1b与杂合型两种基因型,其中基因型TaLox-B1ab有32个,比例为60.4%。采用分子标记辅助选择,有利于快速鉴定小麦籽粒LOX活性,加速LOX的遗传改良和新品种选育。 展开更多
关键词 普通小麦 lox 麦区 功能标记 MAS
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鲜食糯玉米己醛和己醇的生成与LOX活性及其基因表达的相关性 被引量：3
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作者 牛丽影 沈凌雁 +3 位作者 刘春菊 李大婧 刘春泉 肖丽霞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期1138-1143,共6页
为探讨生鲜糯玉米汁主要挥发性成分己醛与己醇的生成与脂氧合酶(LOX)的关系,对4个籽粒发育期的鲜食糯玉米京甜紫花糯2号和苏玉糯11号生鲜玉米汁中己醛与己醇含量、脂氧合酶活性以及Zm LOX1、ZmLOX2、Zm LOX3、Zm LOX10基因的相对表达量... 为探讨生鲜糯玉米汁主要挥发性成分己醛与己醇的生成与脂氧合酶(LOX)的关系,对4个籽粒发育期的鲜食糯玉米京甜紫花糯2号和苏玉糯11号生鲜玉米汁中己醛与己醇含量、脂氧合酶活性以及Zm LOX1、ZmLOX2、Zm LOX3、Zm LOX10基因的相对表达量进行了测定和比较。结果显示己醛与己醇含量显著正相关(P<0. 05),4种LOX基因的表达量之间显著正相关(P<0. 05),但LOX活性与其他指标之间未表现出显著的相关关系。主成分分析(PCA)结果显示所有指标聚为3类:4种LOX基因表达量、己醛与己醇含量、LOX活性,三者之间未表现出显著的相关性关系。 展开更多
关键词 鲜食糯玉米 己醛 脂氧合酶(lox) 基因表达量
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