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大口黑鲈肠道益生菌的筛选及其对大口黑鲈生长、免疫基因表达及抗LMBV的影响
1
作者 蒋祥宇 吕依诺 +1 位作者 张永安 涂加钢 《华中农业大学学报》 北大核心 2025年第6期273-282,共10页
为获得能够促进大口黑鲈生长并提高其抗大口黑鲈虹彩病毒(largemouth bass ranavirus,LMBV)能力的益生菌,从大口黑鲈肠道中分离芽孢杆菌和乳酸菌,通过溶血试验、药敏试验、产酶和产酸试验以及在大口黑鲈肠道的定殖试验对其进行筛选,最... 为获得能够促进大口黑鲈生长并提高其抗大口黑鲈虹彩病毒(largemouth bass ranavirus,LMBV)能力的益生菌,从大口黑鲈肠道中分离芽孢杆菌和乳酸菌,通过溶血试验、药敏试验、产酶和产酸试验以及在大口黑鲈肠道的定殖试验对其进行筛选,最终选取5株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS04、BS49、BS58、BS66和BS74)、2株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens,BA04和BA12)、1株粪肠球菌(Enterococcus faecalis,Efa01)和5株乳酸乳球菌(Lactococcus lactis,LL01、LL05、LL09、LL13和LL22),分别拌饲料投喂大口黑鲈30 d,研究其对大口黑鲈生长性能、抗LMBV能力的影响。结果显示,BS04、BS49、BS66、BS74、BA04、BA12、LL01、LL05、LL09、LL13和LL22均可以显著提高大口黑鲈的增重率和特定生长率,显著降低饲料转化效率。投喂带菌饲料后BS04、BS49和LL01组大口黑鲈脾脏和头肾中4种免疫因子IFN⁃γ、IL⁃1β、IL⁃8和TNF⁃α表达均显著升高。LMBV攻毒后各试验组脾脏及头肾中的病毒载量均显著降低,且相对保护率均高于20%,其中BS04组相对保护率最高,可达55.1%。综合分析,本研究分离的枯草芽孢杆菌BS04可有效提高大口黑鲈的生长性能、免疫应答和抗LMBV能力,具有制备饲料添加剂的潜力。 展开更多
关键词 大口黑鲈 芽孢杆菌 乳酸菌 促生长 抗lmbv
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大口黑鲈头肾抗大口黑鲈虹彩病毒(LMBV)应答的转录组学分析 被引量：1
2
作者 张晶晶 陈斌 +4 位作者 卓玉琛 翁可佳 林而舒 陈宇舒 樊海平 《中国农学通报》 2024年第35期148-155,共8页
为了分析大口黑鲈(Largemouth bass,Micropterus salmoides)抗大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)转录组图谱,揭示大口黑鲈响应LMBV感染的免疫应答机制。利用Illumina NovaSeq6000测序平台,对感染LMBV 72 h后的大口黑... 为了分析大口黑鲈(Largemouth bass,Micropterus salmoides)抗大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)转录组图谱,揭示大口黑鲈响应LMBV感染的免疫应答机制。利用Illumina NovaSeq6000测序平台,对感染LMBV 72 h后的大口黑鲈头肾组织进行转录组测序分析。研究共获得5953个差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs),其中1704个上调表达基因,4249个下调表达基因。通过GO功能注释发现,差异表达基因与单有机体过程、代谢过程、膜、细胞、结合、催化活性等功能相关。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因主要富集于糖酵解、初级胆汁酸生物合成等代谢途径。与免疫应答相关的信号通路4条,包括细胞因子与细胞因子受体相互作用、细胞外基质受体互作、吞噬体和免疫球蛋白A产生的肠道免疫网络。免疫应答相关DEGs提高的为cxcr4、il10、mrc、ncf4、itgb2、il27、ccl25等;下降的DEGs为cxcl12、tgfb3、il20ra、col4a5、itgb1等。PPI蛋白互作网络分析显示itgb1、itga8和itgb6为免疫相关DEGs的核心基因。本研究分析了大口黑鲈感染LMBV的转录组图谱,为大口黑鲈抗LMBV免疫的分子机制和疾病防控研究提供理论基础。 展开更多
关键词 大口黑鲈 lmbv 转录组 免疫应答
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大口黑鲈主要病害及防控措施(三)
3
作者 苏友禄 《科学养鱼》 2025年第11期1-3,共3页
不同规格的大口黑鲈感染LMBV的症状差异很大。小规格苗种(3~5厘米/尾)感染,常见病鱼腹部中央有红点;大规格苗种(6~10厘米/尾)感染,则以体表大量斑点状溃疡灶或头部、鳃颊红肿出血为主,有时可见肝脏出现白斑(不同于诺卡氏菌感染引起的肝... 不同规格的大口黑鲈感染LMBV的症状差异很大。小规格苗种(3~5厘米/尾)感染,常见病鱼腹部中央有红点;大规格苗种(6~10厘米/尾)感染,则以体表大量斑点状溃疡灶或头部、鳃颊红肿出血为主,有时可见肝脏出现白斑(不同于诺卡氏菌感染引起的肝脏结节,此白斑仅出现于肝脏,且触感较滑);中成鱼阶段(50~200克/尾),则以体表大面积深度溃疡为主(图5),但往往由于存在其他病原混合感染而表现出多种复杂症状。 展开更多
关键词 溃疡灶 lmbv 红点 红肿出血 肝脏白斑 大口黑鲈
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两种四氢异喹啉类药物体外抗大口黑鲈蛙虹彩病毒效果的研究
4
作者 王慧 袁雪梅 +3 位作者 陈静 焦锦彪 葛海霞 姚嘉赟 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第5期465-472,共8页
为探究四氢异喹啉类药物β-咔啉-3-羧酸乙酯(β-CCE)和Boc-D-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(Boc-DTic-OH)对大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBV)的体外抗病毒效果,本研究利用显微观察法测定细胞病变(CPE)效应、荧光定量PCR(qPCR)法检测病毒拷贝数以及... 为探究四氢异喹啉类药物β-咔啉-3-羧酸乙酯(β-CCE)和Boc-D-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(Boc-DTic-OH)对大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBV)的体外抗病毒效果,本研究利用显微观察法测定细胞病变(CPE)效应、荧光定量PCR(qPCR)法检测病毒拷贝数以及CCK-8法测定细胞活力,从阻断、抑制及直接杀灭3个方面,分析β-CCE和Boc-D-Tic-OH的体外抗LMBV的活性。结果显示,β-CCE和Boc-D-Tic-OH对胖头鱼肌肉细胞(FHM)的安全浓度分别为10μg/mL和100μg/mL,阻断结果显示两种药物均可显著降低FHM的CPE,其阻断率均在95%以上,药物处理组病毒拷贝数极显著低于LMBV对照组(P<0.01);抑制结果显示,两种药物可一定程度降低FHM的CPE,10μg/mLβ-CCE处理组对病毒的抑制率为76.86%,β-CCE处理组以及100μg/mL、10μg/mL Boc-D-Tic-OH处理组病毒拷贝数均极显著低于LMBV对照组(P<0.01),β-CCE、Boc-D-Tic-OH发挥最好阻断效果的作用时间分别为2 h和1 h;药物作用6 h抑制效果最好;直接杀灭结果显示,0.1μg/mLβ-CCE能一定程度降低FHM的CPE,0.1μg/mLβ-CCE和10μg/mL Boc-D-Tic-OH对病毒的直接杀灭率最高,分别为90.93%和102.21%,且可极显著降低病毒拷贝数(P<0.01),两种发挥最佳直接杀灭作用的时间为2 h。上述结果表明,两种四氢异喹啉类药物均具有较好的体外抗LMBV效果,本研究为抗LMBV药物的研制提供参考。 展开更多
关键词 大口黑鲈 蛙虹彩病毒 四氢异喹啉类药物 抗病毒活性
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珠三角地区大口黑鲈3种病毒的检测与流行规律分析 被引量：1
5
作者 黄伟民 江飚 +3 位作者 马壮 林昌毅 张家豪 苏友禄 《水产学杂志》 2025年第2期57-63,共7页
为研究珠三角地区大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖场中蛙属虹彩病毒(LMBV)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)以及弹状病毒(MSRV)的流行规律,对2021年3月—2022年2月在广州、佛山、肇庆和江门等地采集的820份样品进行荧光定量PCR检测,分... 为研究珠三角地区大口黑鲈(Micropterus salmoides)养殖场中蛙属虹彩病毒(LMBV)、传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)以及弹状病毒(MSRV)的流行规律,对2021年3月—2022年2月在广州、佛山、肇庆和江门等地采集的820份样品进行荧光定量PCR检测,分析这3种病毒在不同时间、不同地区和宿主不同生长阶段的感染情况和流行趋势。结果显示,大口黑鲈的LMBV、ISKNV和MSRV的阳性率分别为12.44%(102/820)、0.49%(4/820)和3.05%(25/820),且存在以LMBV和MSRV为主的混合感染。LMBV在3种病毒中检出率最高,全年均可检出,较集中在夏季,而MSRV则集中于气温较低的冬季。广州地区大口黑鲈病毒阳性率最高,达到21.05%,大口黑鲈幼鱼阶段更易感染病毒;LMBV的感染率随鱼体发育阶段呈正相关,而MSRV感染规律则与此相反。大口黑鲈的LMBV主要集中在夏季暴发,为其最易感的病毒性病原;ISKNV在大口黑鲈中检出率较低;MSRV是大口黑鲈苗期阶段的重要病原。在幼鱼阶段大口黑鲈感染病毒的概率最高,常伴有混合感染。佛山是大口黑鲈3种病毒感染最严重的地区,而广州地区仅检出LMBV。本研究可为大口黑鲈病毒病防控提供数据参考。 展开更多
关键词 大口黑鲈 蛙属虹彩病毒 传染性脾肾坏死病毒 弹状病毒 流行规律
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大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白单克隆抗体制备与抗原表位鉴定
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作者 宋占林 明胜利 +5 位作者 曾磊 潘佳佳 赵黎明 刘桃雪 王江 刘忠虎 《河南农业科学》 北大核心 2024年第10期149-158,共10页
以大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass iridovirus,LMBV)主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)为检测靶蛋白,利用原核表达系统表达MCP重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP/20)融合,经亚克隆筛选、小鼠... 以大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass iridovirus,LMBV)主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)为检测靶蛋白,利用原核表达系统表达MCP重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP/20)融合,经亚克隆筛选、小鼠腹腔接种、收集腹水等过程获得单克隆抗体;利用免疫印迹技术对所制备的单克隆抗体免疫识别的特异性以及其识别的抗原表位进行研究分析,为研制适于养殖现场快速检测LMBV的胶体金检测试纸条奠定基础。结果表明,获得了1株单克隆抗体2C9-6。特异性分析结果显示,单克隆抗体2C9-6可以特异性识别真核表达的LMBV-MCP和LMBV病毒颗粒。抗原表位分析结果表明,单克隆抗体2C9-6识别LMBV-MCP的抗原表位位于LMBV-MCP蛋白N端第1—20位氨基酸。 展开更多
关键词 大口黑鲈虹彩病毒 主衣壳蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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