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中国汉族人群LIPA rs1051338位点多态性与非酒精性脂肪性肝病发病风险的相关性分析
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作者 李梦昆 杜水仙 《临床医学进展》 2024年第5期1891-1901,共11页
目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是最重要的慢性肝脏疾病,其发生发展受遗传等因素影响。国外研究报道LIPA rs1051338是影响NAFLD发生的潜在位点,但在中国人群中尚未有报道。本研究拟探讨LIPA基因rs1... 目的:非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是最重要的慢性肝脏疾病,其发生发展受遗传等因素影响。国外研究报道LIPA rs1051338是影响NAFLD发生的潜在位点,但在中国人群中尚未有报道。本研究拟探讨LIPA基因rs1051338位点多态性与中国北方汉族人群NAFLD发生风险的相关性,并揭示其对于血脂等指标的影响。方法:本研究采用病例对照研究方法,对比NAFLD组与健康对照组间LIPA rs1051338位点的等位基因及基因型分布之间的差异,并通过logistic回归模型分析LIPA rs1051338位点基因多态性与NAFLD易感性的关系。对比不同基因型携带者之间临床资料间的差异揭示该位点突变对于各种指标的影响。结果:LIPA rs1051338位点的等位基因和基因型在NAFLD组和健康对照组间的分布均无显著差异(P= 0.195和0.434)。二元logistic回归模型分析LIPA rs1051338位点基因多态性与NAFLD发生风险无显著相关。在全部受试者和NAFLD患者中,CA/CC基因型携带者的SBP、DBP和LDL水平较AA基因型携带者明显升高(P均<0.05)。结论:在我国北方汉族人群中,LIPA基因rs1051338位点多态性与NAFLD发生风险不具有相关性。在全部受试者和NAFLD患者中,CA/CC基因型携带者的SBP、DBP和LDL水平较AA基因型携带者明显升高。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 基因多态性 lipa rs1051338
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二步法黑曲霉脂肪酶基因lipA的全基因合成及其在毕赤酵母中的高效表达 被引量:7
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作者 杨江科 严翔翔 +2 位作者 张正平 江雪青 闫云君 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期381-387,共7页
黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药等领域具有广泛的用途。获得黑曲霉脂肪酶高效表达的基因工程菌是该脂肪酶规模化应用的前提。通过全基因合成对目的基因进行分子改造和人工组建是实现基因高效表达和体外分子进化的有效手段... 黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶,在食品、制药等领域具有广泛的用途。获得黑曲霉脂肪酶高效表达的基因工程菌是该脂肪酶规模化应用的前提。通过全基因合成对目的基因进行分子改造和人工组建是实现基因高效表达和体外分子进化的有效手段。本研究主要针对一步法长片段基因合成中复杂结构的非特异性配对和过多的PCR引入碱基错配等问题,采用二步法(组装PCR和酶切-酶连)合成了黑曲霉脂肪酶基因lipA。首先在DNA2.0和Gene2Oliga软件辅助下对lipA基因密码子及RNA二级结构进行优化并引入ClaI(237位)和PstI(475位)酶切位点;通过组装PCR分别合成lipA基因的各片段F1(237bp)、F2(238bp)和F3(422bp);通过该基因内的ClaI和PstI限制性酶切位点连接成完整的全长lipA基因。本方法有效地降低了长片段合成过程中寡核苷酸片段的非特异性配对、复杂的二级结构以及碱基突变对DNA合成的影响,提高了长片段合成的成功率。经密码子优化后的脂肪酶基因(lipA-syn)在毕赤酵母GS115中经诱导表达72h后,发酵液酶活达176.0U/mL,蛋白质含量为143.7mg/L,较出发基因分别提高了10.8倍和5.6倍。实现了该基因的高效表达,并为产酶参数的优化和酶的规模化制备奠定了基础。 展开更多
关键词 黑曲霉脂肪酶基因lipa 全基因合成 二步法 毕赤酵母 高效表达
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建立以lipA和purH为靶基因的RTQ-PCR方法对水稻白叶枯病菌侵染过程进行定量分析 被引量:7
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作者 孙蕾 吴茂森 何晨阳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1660-1666,共7页
【目的】建立水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的分子定量法,测定Xoo侵染水稻植株后不同时间的种群量及其变化【。方法】选用以lipA和purH为靶基因序列的引物P4和P5,用SYBR Green I实时定量PCR(RTQ-PCR)分析在水稻接... 【目的】建立水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的分子定量法,测定Xoo侵染水稻植株后不同时间的种群量及其变化【。方法】选用以lipA和purH为靶基因序列的引物P4和P5,用SYBR Green I实时定量PCR(RTQ-PCR)分析在水稻接种植株内的病菌种群量。【结果】与细菌平板计数法相比,RTQ-PCR法定量结果基本相近或略高(≤10倍),变化趋势基本相似,用2对引物P4和P5进行RTQ-PCR定量无显著差异。接种3d的植株内己有菌量积累,但不显症;从接种5d开始,细菌明显增加,植株显症并逐渐加重;接种9~14d菌量增加到峰值,并进入稳定平台期,植株显症严重。病菌种群量与植株显症间的关系可能与细菌群体感应机制有关。【结论】用RTQ-PCR分子定量法可以直接对水稻植株内的Xoo进行动态定量研究;提出了水稻病害分子定量"病菌靶基因拷贝数-DNA总量-种群量-植物病症"的研究模式。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 lipa purH 实时定量PCR 病菌种群量
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表皮葡萄球菌SarA对atlE、lipA和zinC基因表达调控的研究 被引量:3
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作者 王海蛟 范长胜 +4 位作者 辛及娣 陶菊红 苑兴卉 高山峨 梁国新 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期180-186,共7页
表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT... 表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermids)是一种条件致病菌,SarA(StaphylococcalaccessoryregulatorA)是该菌中一个全局性调控因子,它控制着细胞中许多与毒性相关的基因表达.报道了SarA在转录水平直接调控atlE、lipA和zinC基因的表达.RT-PCR和lacZ报告基因的分析结果显示,在表皮葡萄球菌ATCC35984中,SarA对atlE(自溶酶基因)表达起负调控作用,而对lipA(脂肪酶基因)和zinC(膜相关锌金属蛋白酶基因)的表达则有正调控作用.生物信息学分析表明,SarA控制atlE,lipA和zinC3种基因表达可能是通过与被调控基因上游的特定DNA序列的结合来实现的,该DNA结合区保守并富含AT碱基.根据已报道的金黄色葡萄球菌中SarA的结合位点序列,利用Omiga软件分析并推测了SarA结合atlE,lipA和zinC的可能区域.基于SarA是一种多功能的毒素相关调控因子,结果提示,SarA能调控众多因子,可以作为防治表皮葡萄球菌感染的一个药物筛选靶点. 展开更多
关键词 SARA 自溶酶基因(atLE) 脂肪酶基因(lipa) 膜相关锌金属蛋白酶基因(zinC) 基因调控 表皮葡萄球菌
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结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因LiPA检测研究 被引量:1
5
作者 曾涛 朱中元 张荣意 《中国热带医学》 CAS 2009年第9期1655-1657,1661,共4页
目的利用LiPA技术检测结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因,评价LiPA技术临床应用的可行性。方法应用比例法确定80株结核分枝杆菌临床分离株其耐药性,用katG基因PCR扩增产物进行DNA测序,然后用LiPA检测技术检测结核分枝杆菌katG基因的突变,对... 目的利用LiPA技术检测结核分枝杆菌耐异烟肼katG基因,评价LiPA技术临床应用的可行性。方法应用比例法确定80株结核分枝杆菌临床分离株其耐药性,用katG基因PCR扩增产物进行DNA测序,然后用LiPA检测技术检测结核分枝杆菌katG基因的突变,对比3种方法的检测结果,评估LiPA检测技术的准确性。结果在80株结核分枝杆菌中,35株为异烟肼敏感株,45株为异烟肼耐药株。敏感株katG基因扩增阳性率为100%,耐药株为91.1%(41/45)。耐异烟肼菌株katG的缺失率为8.9%。41株扩增阳性耐药株中有26株检测到315位密码子的突变,分别为ACC(60.97%,25/41),ATC(2.44%,1/41),无突变(36.58%,15/41)。LiPA技术检测、药物敏感性试验和基因测序的结果基本一致。结论结核分枝杆菌katG基因突变的LiPA技术敏感性高,特异性强,可用于结核分枝杆菌的快速药物敏感性试验评价。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异烟肼 KATG lipa检测技术
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Wolman病临床及LIPA基因突变1例
6
作者 朱燕凤 张婷 +5 位作者 陈扬 林凯 陆铸今 王晓红 俞蕙 陆国平 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2013年第1期55-59,共5页
目的探讨Wolman病的临床特点及分子诊断的意义。方法对1例符合Wolman病临床表现的患儿进行白细胞溶酶体酸性脂酶LIPA基因测序,分析其突变的类型。结果约5月龄女婴,发现"皮肤黄染10余天,加重伴发热3d"入院。查体见肝脾显著肿大... 目的探讨Wolman病的临床特点及分子诊断的意义。方法对1例符合Wolman病临床表现的患儿进行白细胞溶酶体酸性脂酶LIPA基因测序,分析其突变的类型。结果约5月龄女婴,发现"皮肤黄染10余天,加重伴发热3d"入院。查体见肝脾显著肿大,黄疸。实验室检查提示贫血,肝功能衰竭,高三酰甘油血症;X线胸腹片和腹部增强CT均提示特征性双侧肾上腺增大和广泛钙化。骨髓涂片可见海蓝色泡沫状组织细胞,PAS染色提示脂质沉积。DNA测序显示,LIPA基因编码区第7外显子上发生c.796G>T,p.G266*的纯合无义突变,导致266位甘氨酸(GGA)突变为终止密码(TGA)(p.G266*),致溶酶体酸性脂酶缺失。结论 Wolman病婴儿期起病,以显著肝脾肿大、特征性双侧肾上腺增大和广泛钙化、高三酰甘油血症为特征,相应的酶学分析和LIPA基因检测均可确诊Wolman病。 展开更多
关键词 Wolman病 溶酶体酸性脂酶 lipa基因突变 肝脾大 肾上腺钙化
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Burkholderia sp.ZYB002中lipA基因的敲除对细胞脂肪酶活性的影响 被引量:1
7
作者 时韶磊 林红 +4 位作者 舒正玉 刘艳如 李欣 武海龙 黄建忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期123-129,共7页
Burkholderia sp.ZYB002菌株不仅能产生大量的胞外脂肪酶,还能产生大量的细胞结合脂肪酶。对细胞结合脂肪酶的种类进行定性研究,将为开发全细胞脂肪酶催化剂奠定基础。通过分析与Burkholderia sp.ZYB002菌株具有较高同源性的Burkholderi... Burkholderia sp.ZYB002菌株不仅能产生大量的胞外脂肪酶,还能产生大量的细胞结合脂肪酶。对细胞结合脂肪酶的种类进行定性研究,将为开发全细胞脂肪酶催化剂奠定基础。通过分析与Burkholderia sp.ZYB002菌株具有较高同源性的Burkholderia cepacia J2315菌株的脂肪酶基因家族,推测潜在的细胞结合脂肪酶编码基因。通过同源重组插入失活Burkholderia sp.ZYB002菌株的lipA基因,筛选出突变体转化子;测定突变体菌株细胞结合脂肪酶的活性,并与野生型菌株比较。试验结果表明,lipA基因插入失活的Burkholderia sp.ZYB002-ΔlipA菌株的细胞结合脂肪酶活性降低了42%。 展开更多
关键词 伯克霍尔德菌ZYB002 脂肪酶lipa 细胞结合脂肪酶 基因敲除 三亲本杂交
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Screening for anti-pancreatic lipase properties of 28 traditional Thai medicinal herbs 被引量:2
8
作者 Ananya Dechakhamphu Nattapong Wongchum 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第12期1042-1045,共4页
Objective:To screen the effect of 28 medicinal plants on inhibition of pancreatic lipase and evaluate the phytochemical contents of extracts.Methods:The ethanolic extracts of 28 traditional Thai herbal medicines were ... Objective:To screen the effect of 28 medicinal plants on inhibition of pancreatic lipase and evaluate the phytochemical contents of extracts.Methods:The ethanolic extracts of 28 traditional Thai herbal medicines were assayed for their in vitro activities against porcine pancreatic lipase using p-nitrophenyl butyrate as a substrate.Quantitative estimation of flavonoids,phenolics,and alkaloids was done.Results:Extracts from four herbs,Memecylon edule Roxb.,Garcinia vilersiana Pierre,Cryptolepis elegans Wall.and Phyllanthus chamaepeuce Ridl.,at a concentration of100 mg/m L,strongly inhibited porcine pancreatic lipase by 90.97%,92.04%,94.64%and95.38%,respectively.There was a significant positive correlation between phenolic content and inhibition activity.Inhibition activity was significantly correlated with flavonoid and with alkaloid contents.Conclusions:From this result,it could be concluded that herbs represent a rich of antipancreatic lipase compounds,in particular,Cryptolepis elegans Wall.and Phyllanthus chamaepeuce Ridl.It is suggested that the phytochemical compounds from these plants may be applied for the prevention and treatment of obesity or hyperlipidemia. 展开更多
关键词 OBESITY MEDICINAL plant HERB Anti-pancreatic lipas
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枯草芽孢杆菌脂肪酶LipA的生物信息学分析 被引量:1
9
作者 黎菁菁 赖昕珏 +9 位作者 李鑫尧 马俊炜 余铭怡 罗佳伟 陈胤熹 余洁婷 郑少鹏 郑敦锦 曹诗林 陈宛涓 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第7期113-119,10,共8页
该研究应用生物信息学方法对枯草芽孢杆菌脂肪酶LipA进行分析,旨在为LipA的后续研究奠定一定的理论基础。采用一系列在线网站或软件对LipA的一级结构、亲疏水性、基本特性、二级结构、特殊卷曲螺旋、模体以及富含脯氨酸(P)、谷氨酸(E)... 该研究应用生物信息学方法对枯草芽孢杆菌脂肪酶LipA进行分析,旨在为LipA的后续研究奠定一定的理论基础。采用一系列在线网站或软件对LipA的一级结构、亲疏水性、基本特性、二级结构、特殊卷曲螺旋、模体以及富含脯氨酸(P)、谷氨酸(E)、丝氨酸(S)和苏氨酸(T)的PEST序列等进行预测和分析,并对三级结构进行同源建模,对其表面电位、可及性分布以及Ramachandran图等进行分析。枯草芽孢杆菌脂肪酶LipA是一种由212个氨基酸组成的稳定的脂溶性蛋白质,其亲、疏水性最强的区域分别为Lys75~Asn81和Val9~Leu17;不存在稳定的二聚体、三聚体卷曲螺旋和非PEST序列;有3种可能参与不同的生化反应的模体;有5段α-螺旋、6段β-折叠的α/β类蛋白;整体呈弱正电势;LipA的可及性和Ramachandran图表明建模得到的三维结构是合理、可靠的。该研究为后续对枯草芽孢杆菌脂肪酶LipA的分子设计和改造提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌脂肪酶lipa 生物信息学 同源建模
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增产丙烯助剂LIPA和CDC剂在MIP上的应用
10
作者 高占峰 李春花 《黑龙江科技信息》 2008年第33期34-34,48,共2页
中国蓝星大庆工业园FCC装置为了提高汽油,液化气质量,降低汽油烯烃含量,于2003年改造为MIP,把汽油中烯烃含量控制在30%~35%(V)(荧光法).通过2006年5月使用MIP专用剂CGP-1Z和重油裂解剂CDC,使汽油辛烷值由89提高到92.7,同时掺入系统总藏... 中国蓝星大庆工业园FCC装置为了提高汽油,液化气质量,降低汽油烯烃含量,于2003年改造为MIP,把汽油中烯烃含量控制在30%~35%(V)(荧光法).通过2006年5月使用MIP专用剂CGP-1Z和重油裂解剂CDC,使汽油辛烷值由89提高到92.7,同时掺入系统总藏量3%的增产丙烯助剂LIPA,使丙烯占原料收率由5.5%提高到8.7%以上,效益可佳。 展开更多
关键词 MIP CGP-1Z CDC lipa 辛烷值 丙烯
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TB AccuProbe、INNO-LIPA^(TM)RIF.TB探针和rpoβDNA测序三种方法鉴定结核分枝杆菌的研究
11
作者 宋群锋 AkosSomoskovi +1 位作者 MaxSalfinger LindaM.Parsons 《贵州医药》 CAS 2002年第8期675-678,共4页
目的用 3种先进的技术 -TBAccuProbeDNA杂交法、INNO LIPATMRIF TB(LiPA)探针试验和rpoβDNA基因序列测定的前瞻性研究 ,以鉴定结核分枝杆菌复合物 (MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)及其成本效益。方法在BactecMGIT 96 0培养系统中将获得的 ... 目的用 3种先进的技术 -TBAccuProbeDNA杂交法、INNO LIPATMRIF TB(LiPA)探针试验和rpoβDNA基因序列测定的前瞻性研究 ,以鉴定结核分枝杆菌复合物 (MTBC)和非结核分枝杆菌(NTM)及其成本效益。方法在BactecMGIT 96 0培养系统中将获得的 10 5例阳性培养物筛选出 70例MTBC和 35例NTM ,用 3种技术鉴定并检测其rpoβ基因序列突变位点。 结果TBAccuProbe杂交阳性率是 95 7% (6 7/70 ) ,LiPADNA探针阳性率是 98 6 % (6 9/70 ) ,rpoβDNA序列测定阳性率是 97 1% (6 8/70 )。 3种方法两两比较差异在统计学上均无显著意义 (P >0 0 5 )。每份阳性培养物花费时间 :TBAc cuProbe杂交法和LiPADNA探针法在 2 4小时内完成 ,全部完成需 6~ 37天 ,平均为 15天 ;rpoβ基因序列测定需 4~ 5天完成 ,全部完成需 8~ 4 0天 ,平均 17天。比传统的 4~ 8周鉴定时间减少了很多。每份标本所需费用 3种方法各为 12 0、194和 96元。在 35例NTM中 ,3种方法均为MTBC阴性 ,同时rpoβDNA序列测定鉴定了NTM的种类。结论TBAccuProbe杂交和LiPADNA探针操作简便 ,所需时间短 ,只能鉴定MTBC和NTM。但LiPADNA探针还能鉴定rpoβ基因位点突变 ;rpoβ基因序列测定所需时间稍长 ,要有特定仪器和专门人员 ,但所需费用较低 ,除能鉴定MTBC外 。 展开更多
关键词 TB AccuProbe杂交 INNO-lipa^TM RIF.TB DNA探针 rpoβ DNA序列 鉴定
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移动边缘计算技术及其本地分流方案 被引量:74
12
作者 张建敏 谢伟良 +2 位作者 杨峰义 武洲云 谢亮 《电信科学》 北大核心 2016年第7期132-139,共8页
移动边缘计算(mobile edge computing,MEC)技术通过为无线接入网提供IT和云计算能力,使得业务本地化、近距离部署成为可能,从而促使无线网络具备低时延、高带宽的传输能力,并且回传带宽需求的降低极大程度减少了运营成本。同时,MEC通过... 移动边缘计算(mobile edge computing,MEC)技术通过为无线接入网提供IT和云计算能力,使得业务本地化、近距离部署成为可能,从而促使无线网络具备低时延、高带宽的传输能力,并且回传带宽需求的降低极大程度减少了运营成本。同时,MEC通过感知无线网络上下文信息(位置、网络负荷、无线资源利用率等)并向业务应用开放,可有效提升用户的业务体验,并且为创新型业务的研发部署提供平台。首先介绍MEC技术,细化并给出MEC平台框图。此外,针对基于MEC平台的本地分流功能,给出了详细的技术方案,并与3GPP本地分流方案LIPA/SIPTO进行对比分析。更进一步,针对MEC技术在网络应用中可能存在的问题与挑战进行了讨论,为后续研究发展提供参考。 展开更多
关键词 移动边缘计算 MEC平台 本地分流 lipa/sipto
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基于MEC的LTE本地分流技术 被引量:21
13
作者 张建敏 谢伟良 +1 位作者 杨峰义 武洲云 《电信科学》 北大核心 2017年第6期154-163,共10页
考虑到目前政企、校园以及部分垂直行业低时延以及大流量本地业务传输的需求,给出了一种基于MEC的LTE本地分流技术方案,并针对该方案的可行性进行了深入分析。相比于3GPP中的LIPA/SIPTO技术方案,基于MEC的本地分流方案可以实现MEC平台... 考虑到目前政企、校园以及部分垂直行业低时延以及大流量本地业务传输的需求,给出了一种基于MEC的LTE本地分流技术方案,并针对该方案的可行性进行了深入分析。相比于3GPP中的LIPA/SIPTO技术方案,基于MEC的本地分流方案可以实现MEC平台的透明部署,终端无需支持多个APN连接,从而为用户提供一种"虚拟的LTE局域网"体验。最后,针对该方案在现网应用中可能存在的问题与挑战进行了讨论,为后续研究发展提供参考。 展开更多
关键词 移动边缘计算 MEC平台 本地分流 lipa/sipto
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人乳头瘤病毒线性杂交分型技术的建立及评价 被引量:3
14
作者 田永强 朱中元 王海波 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第3期389-392,共4页
目的建立人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)线性探针反向杂交(1ine probe assay,LiPA)基因分型技术,通过基因测序技术对LiPA分型检测的效果进行评价。方法利用基因工具软件比对HPV L1基因,设计HPV型别的基因探针,手工将探针点样... 目的建立人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)线性探针反向杂交(1ine probe assay,LiPA)基因分型技术,通过基因测序技术对LiPA分型检测的效果进行评价。方法利用基因工具软件比对HPV L1基因,设计HPV型别的基因探针,手工将探针点样于条形尼龙膜上,再进行LiPA杂交分型。LiPA检测的样本结果与HPV基因测序的结果进行比较,以评价LiPA检测的效果。结果74例利用LiPA成功地作出了基因分型,其中单独一型HPV感染为40例,涉及13种不同基因型HPV,最常见的型别为HPV 16,占单独感染的37.5%(15/40);另34例为不同型别HPV混合感染,二、三重感染占主导地位,同时也检测出其它多重感染。6例HPV阳性的标本应用LiPA未能作出基因分型,DNA序列分析显示这6例分别为HPV 83、84、535、9感染,这几种型别不包括在LiPA所标记的探针内。LiPA检测与基因测序结果分型的符合率高达90.9%(20/22),可以检测常见的高危型和导致性传播疾病的HPV型别,结果可通过肉眼直接判读。结论HPV LiPA分型技术具有较高的敏感性和特异性,与基因测序的结果符合率高,具有临床推广使用潜力。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 lipa 基因分型
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定点突变Ca^(2+)平衡位点对粘质沙雷氏菌脂肪的影响 被引量:1
15
作者 陈英 陈小玲 黄俊 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期5205-5209,共5页
为了研究粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)脂肪酶lip A中的Ca^(2+)对酶活力的影响,采用定点突变的方法对平衡Ca^(2+)的位点D388进行定点突变,对突变体进行诱导表达后,纯化目的蛋白并进行酶学性质分析。与野生酶相比,突变酶的最适温度... 为了研究粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)脂肪酶lip A中的Ca^(2+)对酶活力的影响,采用定点突变的方法对平衡Ca^(2+)的位点D388进行定点突变,对突变体进行诱导表达后,纯化目的蛋白并进行酶学性质分析。与野生酶相比,突变酶的最适温度由40℃降低到25℃,最适p H值由8.5降到8.0,T_(1/2)值比野生酶提高了2℃。由此可知,该Ca^(2+)对脂肪酶lip A酶学性质有着至关重要的作用。 展开更多
关键词 粘质沙雷氏菌 脂肪酶lipa CA2+ 定点突变
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液体光声光谱及其应用 被引量:2
16
作者 左伯莉 邓延倬 曾云鹗 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期48-51,共4页
本文从理论与实践上介绍了液体脉冲光声信号产生的物理基础及光声检测的基本原理,液体光声池与传感器的设计及其特点。并介绍了液体光声光谱法在痕量分析、弱吸收测定、双光子吸收、泛音吸收光谱、高压液相色谱及生物领域中的应用,附有... 本文从理论与实践上介绍了液体脉冲光声信号产生的物理基础及光声检测的基本原理,液体光声池与传感器的设计及其特点。并介绍了液体光声光谱法在痕量分析、弱吸收测定、双光子吸收、泛音吸收光谱、高压液相色谱及生物领域中的应用,附有参考文献42篇。 展开更多
关键词 液体 光声光谱 lipaS PAS 光声池
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聚(3-羟基丁酸酯-co-4-羟基丁酸酯)的土壤降解和酶降解 被引量:4
17
作者 王好盛 丛川波 +2 位作者 乔虹 徐日炜 余鼎声 《北京化工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期42-46,共5页
采用溶剂涂膜法制备了共聚组成不同的(3-羟基丁酸酯)-(4-羟基丁酸酯)共聚物[poly(3HB-co-4HB)]生物可降解膜。通过土壤和猪胰脂肪酶降解实验,考察了降解过程中样品质量、分子量及表面形态的变化。结果表明,土壤降解和酶降解都经过表面... 采用溶剂涂膜法制备了共聚组成不同的(3-羟基丁酸酯)-(4-羟基丁酸酯)共聚物[poly(3HB-co-4HB)]生物可降解膜。通过土壤和猪胰脂肪酶降解实验,考察了降解过程中样品质量、分子量及表面形态的变化。结果表明,土壤降解和酶降解都经过表面腐蚀过程,无定形态首先降解,样品质量逐渐损失,分子量逐渐减少;结晶度对膜的腐蚀形貌有很大的影响,降解速率都随4HB含量的增加而增加;脂肪酶降解速率比土壤降解速率快,但分子量减少的程度不及土壤降解,并且在降解过程中出现了小分子量的低聚物。 展开更多
关键词 3-羟基丁酸酯 4-羟基丁酸酯 降解 土壤降解 猪胰脂肪酶
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快速筛选调节肝脂酶活性中药成分方法的研究 被引量:7
18
作者 贝伟剑 郭姣 +3 位作者 胡因铭 黄利华 胡旭光 曹扬 《广东药学院学报》 CAS 2009年第6期599-603,共5页
目的研究快速筛选调节肝脂酶活性中药成分的方法。方法利用大鼠肝组织匀浆和比色法检测肝脂酶(HL)活性,观察不同实验条件及中药成分对HL活性的影响。结果正常大鼠肝组织匀浆具有明显的HL酶促动力学特性,其HL脂解活性有明显Ca2+依赖性,... 目的研究快速筛选调节肝脂酶活性中药成分的方法。方法利用大鼠肝组织匀浆和比色法检测肝脂酶(HL)活性,观察不同实验条件及中药成分对HL活性的影响。结果正常大鼠肝组织匀浆具有明显的HL酶促动力学特性,其HL脂解活性有明显Ca2+依赖性,受钙调蛋白拮抗剂盐酸异丙嗪抑制,符合纯化HL的酶促动力学特性;筛选得到齐墩果酸和人参皂苷Rb22个增强肝脂酶活性成分。结论首次用大鼠肝组织匀浆和脂酶比色测定法建立了一种简便易行、快捷的调节肝脂酶活性中药有效成分筛选方法,可用于影响肝脂酶活性的中药调脂活性成分的筛选,并从有效方药组分中筛选得到有增强HL活性的组分。 展开更多
关键词 肝脂酶 快速筛选 大鼠肝匀浆 复方贞术调脂方 肝脂酶激活剂
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单链探针反向杂交试验快速检测结核分支杆菌5种耐药基因 被引量:2
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作者 梁疆莉 林琳 +2 位作者 刘渠 徐亚军 刘衡川 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第6期1283-1285,共3页
目的:建立可同时检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变的单链探针反向杂交试验技术(PCR-LiPA),评价该技术检测结核分支杆菌利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇耐药性的应用价值。方法:采集临床标本,按照实验规程培养、... 目的:建立可同时检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变的单链探针反向杂交试验技术(PCR-LiPA),评价该技术检测结核分支杆菌利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇耐药性的应用价值。方法:采集临床标本,按照实验规程培养、鉴定结核分支杆菌,并对分离到的结核分支杆菌进行药敏试验;PCR扩增结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、rrs、embB耐药基因,单链探针反向杂交试验技术检测耐药基因。将PCR-LiPA结果与DNA测序比较验证方法的准确性,将PCR-LiPA结果与药敏结果比较,了解结核分支杆菌耐药性表型与耐药基因突变的相关性。结果:50株结核分支杆菌传统药物敏感性试验结果显示,12株耐INH,7株耐RFP,15株耐SM,2株耐EMB。PCR-LiPA方法分析结果:耐RFP菌株中4株rpoB基因突变;耐INH菌株中5株KatG基因突变;耐SM菌株中7株、SM敏感株1株rpsl基因突变;耐EMB菌株1株、EMB敏感株1株embB基因突变。与DNA测序结果的符合率为100%。结论:用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌耐药株的rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变,可用于临床结核分支杆菌耐药性的辅助诊断手段。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 耐药 PCR-lipa
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