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LINC00657通过吸附miR-30a-5p调控Skp2表达促进宫颈癌恶性进展
1
作者 周常慧 任敬秦 +4 位作者 陈珍 闫琪 杨楠 赵佳琪 李榕 《肿瘤防治研究》 2026年第2期103-111,共9页
目的探讨LINC00657在宫颈癌进展中的作用及其调控机制。方法采用生物信息学工具预测LINC00657与miR-30a-5p、miR-30a-5p与Skp2之间的潜在结合位点,并通过RNA免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因实验进行验证。应用RT-qPCR技术检测宫颈癌组... 目的探讨LINC00657在宫颈癌进展中的作用及其调控机制。方法采用生物信息学工具预测LINC00657与miR-30a-5p、miR-30a-5p与Skp2之间的潜在结合位点,并通过RNA免疫共沉淀和双荧光素酶报告基因实验进行验证。应用RT-qPCR技术检测宫颈癌组织和细胞系中LINC00657、miR-30a-5p和Skp2 mRNA的表达水平;通过Western blot及免疫组织化学染色分别检测体外细胞模型及裸鼠移植瘤模型中Skp2的蛋白表达。采用CCK-8、细胞划痕实验和Transwell实验评估LINC00657对宫颈癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。结果LINC00657与Skp2均存在与miR-30a-5p互补的结合位点。在宫颈癌组织与细胞中,LINC00657与Skp2的表达均显著上调(P<0.05),而miR-30a-5p的表达则显著下调(P<0.05)。功能实验表明,LINC00657可正向调控Skp2的表达,且这一过程依赖于其对miR-30a-5p的吸附作用。结论LINC00657通过特异性吸附miR-30a-5p解除其对靶基因Skp2的抑制作用,进而上调Skp2表达,最终促进宫颈癌细胞的恶性进展。 展开更多
关键词 linc00657 miR-30a-5p SKP2 分子海绵 宫颈癌
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山莨菪碱通过lncRNA LINC00657/miR-496通路对MPP^(+)诱导SK-N-SH细胞损伤的保护作用研究 被引量：1
2
作者 齐献忠 邢英瀛 秦慧兵 《新中医》 CAS 2021年第21期7-12,共6页
目的:探讨山莨菪碱(Ani)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导SK-N-SH细胞损伤的作用及分子机制。方法:将SK-N-SH细胞分为Con组,MPP^(+)组,MPP+Ani-L、M、H组,MPP^(+)+si-NC组,MPP^(+)+si-LINC00657组,MPP^(+)+Ani+pcDNA组,MPP^(+)+Ani+pc... 目的:探讨山莨菪碱(Ani)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导SK-N-SH细胞损伤的作用及分子机制。方法:将SK-N-SH细胞分为Con组,MPP^(+)组,MPP+Ani-L、M、H组,MPP^(+)+si-NC组,MPP^(+)+si-LINC00657组,MPP^(+)+Ani+pcDNA组,MPP^(+)+Ani+pcDNA-LINC00657组。试剂盒检测丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽(GSH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00657和miR-496的表达;双荧光素酶报告实验检测LINC00657和miR-496的靶向关系。结果:不同浓度山莨菪碱处理后,MPP+诱导SK-N-SH细胞中MDA含量降低,GSH活性升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低,LINC00657表达水平降低,miR-496表达水平升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。LINC00657靶向调控miR-496的表达;抑制LINC00657表达后,MPP+诱导SK-N-SH细胞中MDA含量降低,GSH活性升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低(P<0.05)。LINC00657过表达逆转了山莨菪碱对MPP^(+)诱导SK-N-SH细胞损伤的作用。结论:山莨菪碱通过调控lncRNA LINC00657/miR-496通路对MPP+诱导SK-N-SH细胞损伤起保护作用。 展开更多
关键词 山莨菪碱 lncRNA linc00657 miR-496 帕金森病 SK-N-SH细胞 损伤
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LINC00657对氧糖剥夺诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及机制研究
3
作者 史倩 王保奇 +1 位作者 齐桃桃 鲍汉中 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第13期82-86,共5页
目的探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理,建立损伤模型,将正常培养的HT22细胞作为对照;将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimic... 目的探讨LINC00657对氧糖剥夺(OGD)诱导的小鼠海马神经元细胞损伤的影响及作用机制。方法对小鼠海马神经元细胞HT22进行OGD处理,建立损伤模型,将正常培养的HT22细胞作为对照;将si-NC、si-LINC00657、微小RNA(miR)-NC、miR-224-3p mimics分别转染至HT22细胞,然后进行OGD处理;向HT22细胞共转染si-LINC00657和anti-miR-NC,或共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p,然后进行OGD处理。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00657、miR-224-3p相对表达量;采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞存活率、细胞凋亡率;采用试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-224-3p过表达对野生型LINC00657载体(WT-LINC00657)、突变型LINC00657载体(MUT-LINC00657)荧光素酶活性的影响。结果与对照细胞相比,OGD诱导的HT22细胞中LINC00657表达上调,miR-224-3p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05);分别与转染si-NC或转染miR-NC相比,转染si-LINC00657或转染miR-224-3p mimics后,细胞存活率、SOD活性和GSH-Px活性升高,细胞凋亡率、LDH活性和MDA水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-224-3p过表达降低了WT-LINC00657的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05);与共转染si-LINC00657和anti-miR-NC的细胞相比,共转染si-LINC00657和anti-miR-224-3p的细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,LDH活性、MDA水平升高,SOD、GSH-Px活性降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰LINC00657可通过上调miR-224-3p而促进细胞增殖,并抑制细胞凋亡和氧化应激反应,从而减轻OGD诱导的小鼠海马神经元细胞损伤。 展开更多
关键词 海马神经元细胞 氧糖剥夺 linc00657 微小RNA-224-3p 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激
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长链非编码RNA LINC00657作为ceRNA促进肝癌细胞的增殖和迁移
4
作者 叶蓓玮 韩辉 +3 位作者 曹鹏博 秦庚 李海北 周钢桥 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期736-743,765,共9页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA) LINC00657在肝细胞癌(肝癌,hepatocellular carcinoma,HCC)中所发挥的生物学功能,明确LINC00657在肝癌中的表达情况及其与预后的关系。方法通过慢病毒包装方法将稳定干扰LINC00657的短发夹RNA(short hair... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA) LINC00657在肝细胞癌(肝癌,hepatocellular carcinoma,HCC)中所发挥的生物学功能,明确LINC00657在肝癌中的表达情况及其与预后的关系。方法通过慢病毒包装方法将稳定干扰LINC00657的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)转染进肝癌细胞株Bel-7402和Hep G2细胞系,筛选得到稳定干扰LINC00657的肝癌细胞系;采用瞬时转染pc DNA3. 1(+)-LINC00657质粒方法建立过表达LINC00657的Bel-7402细胞系;采用CCK-8、平板克隆和细胞迁移(Transwell)实验检测敲低和过表达LINC00657对细胞生长和迁移能力的影响;利用RNA pull-down实验确认LINC00657是否可直接吸附miR-194;采用qRT-PCR和Western印迹实验(WB)检测敲低LINC00657后miR-194靶基因的mRNA和蛋白水平变化;采用Log-rank检验比较LINC00657高表达组和低表达组肝癌患者的生存期差异。结果 LINC00657可显著促进肝癌细胞的增殖和迁移能力;与LINC00657的突变体序列相比,其野生型序列可显著富集miR-194;在敲低LINC00657的细胞中,miR-194的靶基因THBS1的mRNA和蛋白表达水平均显著下调;来自TCGA的数据分析显示,LINC00657高表达与肝癌患者的不良预后显著相关。结论 LINC00657可通过吸附miR-194上调凝血酶敏感蛋白(THBS1)的表达,从而促进肝癌细胞的生长和迁移。 展开更多
关键词 linc00657 癌 肝细胞 细胞增殖 细胞运动 转染 RNA 信使 竞争性内源RNA 肿瘤发生
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