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IPI-504通过LINC00312/let-7b-5p/EBF1轴抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移
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作者 胡耀元 谭晓冬 李锐 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1014-1020,共7页
目的探讨IPI-504诱导的LINC00312对胰腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间质转化的抑制作用,并阐明其作用机制。方法通过生物信息学分析预测let-7b-5p与LINC00312、EBF1 mRNA的潜在结合位点,应用双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系。将PANC-1... 目的探讨IPI-504诱导的LINC00312对胰腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间质转化的抑制作用,并阐明其作用机制。方法通过生物信息学分析预测let-7b-5p与LINC00312、EBF1 mRNA的潜在结合位点,应用双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系。将PANC-1细胞分为对照组、IPI-504组、IPI-504+敲减对照组、IPI-504+敲减LINC00312组、IPI-504+NC mimics组、IPI-504+let-7b-5p mimics组和IPI-504+敲减EBF1组,实时荧光定量PCR检测细胞LINC00312和let-7b-5p的表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell检测细胞迁移能力,Western blotting检测细胞EBF1蛋白表达。结果let-7b-5p与LINC00312、EBF1 mRNA结合,敲减LINC00312、转染let-7b-5p模拟物和敲减EBF1均降低经IPI-504处理的PANC-1细胞中EBF1蛋白表达,促进细胞增殖和迁移。结论IPI-504上调胰腺癌细胞LINC00312表达,LINC00312通过海绵化let-7b-5p上调EBF1表达,从而抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 IPI-504 胰腺癌 linc00312 let-7b-5p EBF1
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长链非编码LINC00312通过内质网IRE1-JNK途径促进病理性瘢痕成纤维细胞凋亡 被引量：4
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作者 李涛 林简 +1 位作者 王荣坤 李娜 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1221-1227,共7页
目的探讨长链非编码RNA LINC00312(LncRNA LINC00312)对人病理性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响及其可能机制。方法体外分离培养人病理性瘢痕成纤维细胞,并采用LINC00312 shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒感染细胞,qRT-PCR法检测感染前后细胞中LI... 目的探讨长链非编码RNA LINC00312(LncRNA LINC00312)对人病理性瘢痕成纤维细胞凋亡的影响及其可能机制。方法体外分离培养人病理性瘢痕成纤维细胞,并采用LINC00312 shRNA慢病毒和阴性对照慢病毒感染细胞,qRT-PCR法检测感染前后细胞中LINC00312的表达水平。根据实验需求,将细胞分为4组:空白对照组(Blank)、阴性对照慢病毒组(NC-shRNA)、LINC00312 shRNA慢病毒组(LINC00312-shRNA)及IRE1α特异性抑制剂组(LINC00312-shRNA+KIRA6)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;Hoechst染色法观察各组细胞形态变化;Annexin V-FITC/PI法检测各组细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、Bax、Bcl-2以及内质网应激相关蛋白GRP78、IRE1、p-IRE1、JNK、p-JNK的表达水平。结果LINC00312 shRNA慢病毒感染后细胞中LINC00312的表达水平显著降低(P<0.05);与Blank组和NC-shRNA组比较,LINC00312-shRNA组细胞增殖活性明显降低,细胞核呈大量碎块致密浓染,凋亡水平明显升高,cleaved Caspase-3、Bax、GRP78、p-IRE1、p-JNK等蛋白表达水平明显升高,Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与LINC00312-shRNA组比较,LINC00312-shRNA+KIRA6组细胞增殖活性明显升高,细胞核的碎块致密浓染数量减少,凋亡水平明显降低,cleaved Caspase-3、Bax、GRP78、p-IRE1、p-JNK蛋白表达水平明显降低,而Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论沉默LINC00312可能通过激活内质网IRE1-JNK介导的凋亡途径,并诱导人病理性瘢痕成纤维细胞凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA linc00312 人病理性瘢痕成纤维细胞 内质网应激 细胞凋亡
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