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siRNA沉默小鼠原代成骨细胞LIMK2基因的实验研究
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作者 李友瑞 覃峰 +4 位作者 张艺平 邵敏锋 陈睿 沈韵 付强 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2010年第2期17-20,共4页
目的探讨采用RNA干扰抑制原代成骨细胞中LIMK2的表达及其抑制效率,为进一步研究LIMK2基因的作用奠定基础。方法针对小鼠LIMK2基因,化学合成3条siRNA,分别编号为R1、R2、R3,用脂质体分别介导转染到小鼠原代成骨细胞中,转染后24、48h提取... 目的探讨采用RNA干扰抑制原代成骨细胞中LIMK2的表达及其抑制效率,为进一步研究LIMK2基因的作用奠定基础。方法针对小鼠LIMK2基因,化学合成3条siRNA,分别编号为R1、R2、R3,用脂质体分别介导转染到小鼠原代成骨细胞中,转染后24、48h提取细胞的总RNA和总蛋白,分别进行RT-PCR和Western blot检测,研究3条siRNA在不同时间点对LIMK2基因的抑制效率。结果RT-PCR结果显示编号为R3的siRNA对LIMK2mRNA表达的抑制效率最高,两组应用R3siRNA后的LIMK2 mRNA表达量分别为对照组的19.30%(转染后24h)、18.63%(转染后48h);Westernblot检测显示编码为R3的siRNA对LIMK2蛋白表达的抑制效果最明显,两组应用R3siRNA的LIMK2蛋白表达量分别仅为空白对照组的1.32%(转染后24h)、1.19%(转染后48h)。结论编号为R3的siRNA可以很好地抑制小鼠原代成骨细胞的LIMK2表达。 展开更多
关键词 limk2基因 RNA干扰 成骨细胞
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LIM激酶2在高级别浆液性卵巢癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 刘鑫慧 毕芳芳 杨清 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第8期1870-1872,共3页
目的探讨LIM激酶2 (LIMK2)在高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)及正常卵巢组织中的表达情况,研究LIMK2在HGSOC发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR (RT-PCT)方法检测LIMK2在41例HGSOC组织与30例正常卵巢组织中LIMK... 目的探讨LIM激酶2 (LIMK2)在高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)及正常卵巢组织中的表达情况,研究LIMK2在HGSOC发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学法、实时荧光定量PCR (RT-PCT)方法检测LIMK2在41例HGSOC组织与30例正常卵巢组织中LIMK2蛋白的表达,分析其表达与临床病理参数的关系。结果 LIMK2在HGSOC中的表达较正常卵巢组织表达明显增高,且LIMK2表达与FIGO分期、血清CA125水平相关(P<0. 05),与年龄、淋巴结转移、肿瘤大小及腹水量无关(P>0. 05)。结论 LIMK2可能参与卵巢癌的发生发展,有可能成为卵巢癌诊断及治疗的新靶点。 展开更多
关键词 limk2 HGSOC 免疫组织化学 RT-PCT
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Viral exploitation of actin: force-generation and scaffolding functions in viral infection 被引量:2
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作者 Mark Spear Yuntao Wu 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2014年第3期139-147,共9页
As a fundamental component of the host cellular cytoskeleton, actin is routinely engaged by infecting viruses. Furthermore, viruses from diverse groups, and infecting diverse hosts, have convergently evolved an array ... As a fundamental component of the host cellular cytoskeleton, actin is routinely engaged by infecting viruses. Furthermore, viruses from diverse groups, and infecting diverse hosts, have convergently evolved an array of mechanisms for manipulating the actin cytoskeleton for efficacious infection. An ongoing chorus of research now indicates that the actin cytoskeleton is critical for viral replication at many stages of the viral life cycle, including binding, entry, nuclear localization, genomic transcription and reverse transcription, assembly, and egress/dissemination. Specifically, viruses subvert the force-generating and macromolecular scaffolding properties of the actin cytoskeleton to propel viral surfing, internalization, and migration within the cell. Additionally, viruses utilize the actin cytoskeleton to support and organize assembly sites, and eject budding virions for cell-to-cell transmission. It is the purpose of this review to provide an overview of current research, focusing on the various mechanisms and themes of virus-mediated actin modulation described therein. 展开更多
关键词 viral infection actin cytoskeleton cofilin LIMK Arp2/3 GTPase
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microRNA-93靶向调控Rho相关激酶2/LIMK/Cofilin通路影响骨癌痛小鼠痛行为 被引量:2
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作者 张旭东 任鹏程 +2 位作者 何印斌 孙丽 刘九虎 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2017年第8期688-694,共7页
目的观察microRNA-93(miR-93)及Rho相关激酶(rho associated coiled-coil forming protein kinase, ROCK)通路对小鼠骨癌痛(bonecancerpain,BCP)行为的影响并探讨其潜在机制。方法将C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为对照组(Co... 目的观察microRNA-93(miR-93)及Rho相关激酶(rho associated coiled-coil forming protein kinase, ROCK)通路对小鼠骨癌痛(bonecancerpain,BCP)行为的影响并探讨其潜在机制。方法将C57BL/6J小鼠采用随机数字表法分为对照组(Control组)、假手术组(Sham组)及BCP组、BCP+PBS组、BCP+Y-27632(ROCK抑制剂)组,每组13只。建模前1d及建模后3、5、7、10、14d进行动物痛行为学评估,观察小鼠对机械和热刺激的反应。建模后第14天处死小鼠,取术侧L4-L6背根神经节(dorsal root ganglion,DRG),SYBRGreen实时荧光定量PCR法观察miR-93表达变化,双荧光素酶实验检测miR-93对ROCK2基因的靶向调控。Westernblot法观察ROCK2、LIMK(LIM domain kinase,LIMK)和Cofilin蛋白在DRG神经元中表达。结果C57BL/6J小鼠股骨接种NCTC2472细胞后,患侧后肢分别在第5、7天开始出现明显的触诱发痛[Sham组(6.81±1.04)g,BCP组(5.12±0.47)g]和热痛过敏[Sham组(11.75±1.46)s,BCP组(7.61±1.07)s],并呈进行性加重(P〈0.05);BCP组小鼠miR-93表达随疼痛加重呈时间依赖性降低,而ROCK2表达呈时间依赖性增加(P〈0.05),进而激活LIMK/Cofilin通路。双荧光素酶实验证实miR-93可与ROCK2mRNA3’-UTR直接结合,从而发挥对ROCK2转录后翻译的抑制作用(P〈0.05)。鞘内注射ROCK抑制剂能有效缓解小鼠触诱发痛[BCP+PBS组(3.43±0.89)g,BCP+Y-27632组(5.74±1.02)g]和热痛过敏[BCP+PBS组(5.48±1.03)S,BCP+Y-27632组(9.82±1.24)s],同时抑制通路主要因子ROCK2、磷酸化-LIMK(phospho-LIMK,p-LIMK)、磷酸化-Cofilin(phospho-Cofilin,p-Cofilin)的表达(P〈0.05)。结论小鼠BCP疼痛过程中miR-93表达降低,进而激活R0cK2/LIMK/Cofilin通路,鞘内注射ROCK抑制剂可抑制该通路的活化,缓解小鼠BCP症状。 展开更多
关键词 骨癌痛 镇痛 microRNA-93 Rho相关激酶2/LIMK/Cofilin通路
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