目的研究肝癌细胞系HepG2中乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs)与C53蛋白是否存在共定位,查明LHBs与C53蛋白的结合区域。方法分别构建pEGFP-C1·LHBs和pDsRedl-N1·C53质粒,共同转染...目的研究肝癌细胞系HepG2中乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs)与C53蛋白是否存在共定位,查明LHBs与C53蛋白的结合区域。方法分别构建pEGFP-C1·LHBs和pDsRedl-N1·C53质粒,共同转染肝癌细胞系HepG2,激光共聚焦观察它们在细胞内的共定位。构建质粒pCDNA-3.1(-)myc/his-LHBs和pCMV-5a-C53,并将C53基因截短构建质粒pCMV-5a-C53N、pCMV-5a-C1、pCMV-5a-C2和pCMV.5a-C3,将pCDNA-3.1(-)myc/his.LHBs和pc-MV-5a-C53及各截短质粒共转染HepG2细胞,免疫共沉淀方法验证LHBs结合的C53区域。结果成功构建pEGFP-C1-LHBs、pDsRedl-N1-C53、pCDNA-3.1(-)myc/his-LHBs、pCMV-5a-C53、pCMV-5a-C53N、pCMV-5a-C1、pCMV-5a-C2和pCMV-5a-C3质粒;用激光共聚焦的方法证实了LHBs与C53在HepG2细胞内存在共定位;免疫共沉淀方法证实了在HepG2细胞内LHBs与C53的结合区域为其c1区。结论LHBs与C53在肝癌细胞系HepG2内存在明确的相互作用,但仍需做进一步的功能研究。展开更多
目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis Bvirus large surface protein,LHBs)与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒,共同转染肝癌细胞...目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis Bvirus large surface protein,LHBs)与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒,共同转染肝癌细胞系HepG2后,分别检测其相互作用对Chkl活性的影响;BrdU法细胞增殖检测明确其对细胞有丝分裂及增殖的影响。结果成功构建pc—MV-5a—pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒;其在细胞内的相互作用增加细胞Cdkl活性并促进细胞的增殖和有丝分裂过程。结论肝癌细胞系HepG2内pres2LHBs及C53的相互作用对细胞生物学功能存在影响,提示可能与HBV后肝癌的发病机制相关。展开更多
目的检测乙型肝炎病毒表面大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs),并与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)相比较,探讨LHBs的临床应用价值。方法分别采用ELISA和PCR法检测乙型肝炎257例血清中LHBs,乙型肝炎病毒标志物(H...目的检测乙型肝炎病毒表面大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs),并与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)相比较,探讨LHBs的临床应用价值。方法分别采用ELISA和PCR法检测乙型肝炎257例血清中LHBs,乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)和HBV DNA,并进行相关性分析。结果 LHBs与HBV DNA的检出率差异无统计学意义(P>0.05);LHBs的阳性率(83.12%)高于乙肝e抗原(HBeAg)的阳性率(54.63%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中LHBs水平能反映HBV感染者体内的病毒复制情况,将其作为HBV复制指标,灵敏度高于HBeAg,可作为反映HBV感染者体内的病毒复制情况的新的血清学指标,尤其是针对HBeAg阴性患者。展开更多
文摘目的研究肝癌细胞系HepG2中乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs)与C53蛋白是否存在共定位,查明LHBs与C53蛋白的结合区域。方法分别构建pEGFP-C1·LHBs和pDsRedl-N1·C53质粒,共同转染肝癌细胞系HepG2,激光共聚焦观察它们在细胞内的共定位。构建质粒pCDNA-3.1(-)myc/his-LHBs和pCMV-5a-C53,并将C53基因截短构建质粒pCMV-5a-C53N、pCMV-5a-C1、pCMV-5a-C2和pCMV.5a-C3,将pCDNA-3.1(-)myc/his.LHBs和pc-MV-5a-C53及各截短质粒共转染HepG2细胞,免疫共沉淀方法验证LHBs结合的C53区域。结果成功构建pEGFP-C1-LHBs、pDsRedl-N1-C53、pCDNA-3.1(-)myc/his-LHBs、pCMV-5a-C53、pCMV-5a-C53N、pCMV-5a-C1、pCMV-5a-C2和pCMV-5a-C3质粒;用激光共聚焦的方法证实了LHBs与C53在HepG2细胞内存在共定位;免疫共沉淀方法证实了在HepG2细胞内LHBs与C53的结合区域为其c1区。结论LHBs与C53在肝癌细胞系HepG2内存在明确的相互作用,但仍需做进一步的功能研究。
文摘目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白(hepatitis Bvirus large surface protein,LHBs)与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒,共同转染肝癌细胞系HepG2后,分别检测其相互作用对Chkl活性的影响;BrdU法细胞增殖检测明确其对细胞有丝分裂及增殖的影响。结果成功构建pc—MV-5a—pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒;其在细胞内的相互作用增加细胞Cdkl活性并促进细胞的增殖和有丝分裂过程。结论肝癌细胞系HepG2内pres2LHBs及C53的相互作用对细胞生物学功能存在影响,提示可能与HBV后肝癌的发病机制相关。
文摘目的检测乙型肝炎病毒表面大蛋白(hepatitis B virus large surface protein,LHBs),并与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)相比较,探讨LHBs的临床应用价值。方法分别采用ELISA和PCR法检测乙型肝炎257例血清中LHBs,乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)和HBV DNA,并进行相关性分析。结果 LHBs与HBV DNA的检出率差异无统计学意义(P>0.05);LHBs的阳性率(83.12%)高于乙肝e抗原(HBeAg)的阳性率(54.63%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清中LHBs水平能反映HBV感染者体内的病毒复制情况,将其作为HBV复制指标,灵敏度高于HBeAg,可作为反映HBV感染者体内的病毒复制情况的新的血清学指标,尤其是针对HBeAg阴性患者。