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猪圆环病毒2型可视化RPA快速检测方法的建立 被引量：7
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作者 陈思楠 王金凤 +6 位作者 张倩 刘立兵 顾文源 马宏伟 王建昌 韩庆安 石玉祥 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期304-309,共6页
本研究针对猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)的cap基因保守序列,设计特异性RPA引物和nfo探针,建立了一种快速检测PCV2的基于侧流层析试纸条的可视化RPA方法(lateral flow strip RPA,LFS-RPA)。结果,建立的LFS-RPA方法最佳反应... 本研究针对猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)的cap基因保守序列,设计特异性RPA引物和nfo探针,建立了一种快速检测PCV2的基于侧流层析试纸条的可视化RPA方法(lateral flow strip RPA,LFS-RPA)。结果,建立的LFS-RPA方法最佳反应条件是39℃恒温扩增20 min,可在5 min内实现对检测结果的肉眼可视化判定;该方法特异性强,仅对PCV2出现阳性扩增,对本研究涉及的其他猪重要病原均无交叉反应;以含PCV2全长序列的重组质粒为模板,LFS-RPA的检出限为10 copies/μL。进一步应用建立的LFS RPA方法对30份猪临床样品进行PCV2检测,并与real-time PCR方法进行比较,结果显示两种方法的检测一致性达86.7%(26/30),其中4份C;值在36~38之间的临床样品利用LFS-RPA方法检测为阴性。上述结果表明,本研究建立的LFS-RPA方法操作简单,对仪器设备要求低,可以快速且直观的实现对检测结果的判断,可以满足现场检测的要求,对养猪场一线PCV2快速诊断和防控具有重要现实意义。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 cap基因 lfs-rpa 可视化 快速检测
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