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L-NAME和Leupeptin对庆大霉素所致耳蜗毛细胞损伤协同保护作用的观察 被引量:3
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作者 田媛 姜学钧 《解剖科学进展》 CAS 2006年第2期109-112,共4页
目的观察一氧化氮合酶抑制剂[L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NG-n itroargin ine m ethylester,L-NAME)]和钙蛋白酶抑制剂[leupeptin]对庆大霉素(gentam ic in,GM)所致耳蜗毛细胞损伤的协同防护作用。方法将20只出生后3~5天的W istar大鼠(40耳... 目的观察一氧化氮合酶抑制剂[L-NG-硝基精氨酸甲酯(L-NG-n itroargin ine m ethylester,L-NAME)]和钙蛋白酶抑制剂[leupeptin]对庆大霉素(gentam ic in,GM)所致耳蜗毛细胞损伤的协同防护作用。方法将20只出生后3~5天的W istar大鼠(40耳)平均分成5组,1组为正常对照,其余4组在施加GM的同时单独或联合应用不同的保护因素(L-NAME和leupeptin)。通过耳蜗器官离体培养,对基底膜铺片行TR ITC-Phalloid in荧光染色,观察各组耳蜗毛细胞的生长情况并比较存活率。结果GM组毛细胞存活极少,L-NAME和leupeptin单独应用时毛细胞存活率明显高于GM组(P<0.01),二者联合应用时耳蜗毛细胞存活率显著高于L-NAME和leupeptin单独用药组(P<0.01)。结论L-NAME和leupeptin对庆大霉素耳毒性所致毛细胞损伤具有较好的协同防护作用。 展开更多
关键词 L-NG-硝基精氨酸甲酯 leupeptin 耳蜗 毛细胞 庆大霉素
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蛋白酶抑制剂leupeptin增强抗肿瘤药物对肿瘤细胞的增殖抑制作用 被引量:2
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作者 王莹 吴淑英 甄永苏 《医学研究杂志》 2012年第10期56-60,共5页
目的研究蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)leupeptin对化疗药物紫杉醇(taxol,TAX)、吉西他滨(gemcitabine,GEM)以及平阳霉素(pingyangmycin,PYM)在体外抑制肿瘤细胞增殖作用的影响。方法选取一定浓度梯度的酶抑制剂leupep-tin单独或联... 目的研究蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)leupeptin对化疗药物紫杉醇(taxol,TAX)、吉西他滨(gemcitabine,GEM)以及平阳霉素(pingyangmycin,PYM)在体外抑制肿瘤细胞增殖作用的影响。方法选取一定浓度梯度的酶抑制剂leupep-tin单独或联合TAX、GEM和PYM与肿瘤细胞孵育,48h后采用MTT法测定肿瘤细胞生长的变化并与相应浓度的TAX、GEM和PYM单药组相比较。采用流式细胞术测定MCF-7细胞周期分布。结果 leupeptin在浓度高于50μmol/L时可增强化疗药物对肺癌PG细胞和乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。leupeptin对TAX的增效作用尤为显著。leupeptin与低浓度的GEM和TAX联合应用可改变MCF-7的细胞周期分布。结论 leupeptin可增强化疗药物对肿瘤细胞增殖的抑制作用,但其作用程度与肿瘤细胞株的种类、化疗药物的种类及leupeptin的浓度均相关。 展开更多
关键词 leupeptin MCF-7细胞 PG细胞 增殖抑制
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Inhibition and attenuation of pathogenicity of Porphyromonas gingivalis by leupeptin: A review
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作者 Hansa Jain 《Frontiers in Biology》 CAS CSCD 2017年第3期192-198,共7页
BACKGROUND: Porphyromonas gingivalis is a periodontal pathogen, which is considered to be a keystone pathogen for periodontitis. A diverse conglomerate of P. gingivalis virulence factors including lipopolysaccharide,... BACKGROUND: Porphyromonas gingivalis is a periodontal pathogen, which is considered to be a keystone pathogen for periodontitis. A diverse conglomerate of P. gingivalis virulence factors including lipopolysaccharide, fimbriae, capsular polysaccharide, haemagglutinin and cysteine proteases (Arg-gingipains and Lys-gingipain) are considered to be involved in the pathogenesis ofperiodontitis. Leupeptin is a cysteine protease inhibitor which is specific for Arg gingipains. The present review focuses on action of leupeptin on Arg gingipains. METHOD: A search was carried out systematically from the start till September, 2016. The search was made in Medline database via PubMed. The keywords enlisted were "leupeptin"; "gingipains"; "periodontitis" using Boolean operator "and." RESULTS: The result was selection of 58 articles which linked leupeptin to periodontitis and gingipains; pathogenesis of periodontitis, pathogenicity of gingipains and role of leupeptin. CONCLUSION: It was concluded that leupeptin inhibits and attenuates a number of destructive activities of Arg gingipains including inhibition ofplatelet aggregation; inhibit degradation of LL-37, which is an antimicrobial peptide; blocking inhibition ofmonocyte chemoattractant protein; restoring level ofinterleukin-2; inhibiting degradation of collagen type I and IV to name a few. 展开更多
关键词 Porphyromonas gingivalis GINGIPAINS leupeptin cysteine protease inhibitor PERIODONTITIS
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亮肽素、TLCK和乳铁蛋白对人结肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响 被引量:2
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作者 谢华 何韶衡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1411-1414,共4页
目的:探讨亮肽素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮(TLCK)和乳铁蛋白对人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响。方法:人结肠组织经酶消化后,细胞成份用全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸... 目的:探讨亮肽素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮(TLCK)和乳铁蛋白对人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响。方法:人结肠组织经酶消化后,细胞成份用全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定。结果:亮肽素、TLCK和乳铁蛋白无明显刺激人结肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。但可以剂量依赖性的方式抑制抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶释放,抑制范围在36.6%-47.6%。在37℃条件下同结肠细胞预培养20min与无预培养相比,亮肽素和TLCK对抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用无明显改变。亮肽素、TLCK和乳铁蛋白均可以抑制CI诱导的类胰蛋白酶释放,抑制范围在27.1%-44.1%。在37℃条件下同结肠细胞预培养20min与无预培养相比,亮肽素对CI诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用明显增强,TLCK则无此特点。结论:我们首次发现类胰蛋白酶抑制剂可抑制人结肠肥大细胞IgE依赖性和非依赖性类胰蛋白酶释放,提示类胰蛋白酶抑制剂可治疗炎症性肠病或其它肥大细胞相关疾病。 展开更多
关键词 亮肽菌素类 乳铁蛋白 肥大细胞
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高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸暴露的机制研究
5
作者 权国波 韩颖 +5 位作者 杨超 扈文博 刘敏霞 刘安 王艳 王捷熙 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1181-1184,共4页
本研究探讨高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸(PS)暴露的机制。将红细胞于葡萄糖缓冲液中孵育后用流式细胞术分析PS标记率和前向角值;检测caspase-3和caspase-8的活化情况;用流式细胞术和荧光显微镜观察亮抑酶肽对葡萄糖引起的红细胞P... 本研究探讨高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸(PS)暴露的机制。将红细胞于葡萄糖缓冲液中孵育后用流式细胞术分析PS标记率和前向角值;检测caspase-3和caspase-8的活化情况;用流式细胞术和荧光显微镜观察亮抑酶肽对葡萄糖引起的红细胞PS暴露的抑制效果。结果表明:葡萄糖可以诱导红细胞PS暴露,而且其效率和葡萄糖浓度密切相关。随着葡萄糖浓度的增加,红细胞的PS标记率呈逐步增加的趋势,当葡萄糖浓度为0.8mol/L时,红细胞的PS标记率在80%以上。然而,在葡萄糖引起的红细胞PS暴露过程中,caspase-3和caspase-8没有活化,而亮抑酶肽却可以很好地抑制红细胞PS暴露和使其体积缩小。随着亮抑酶肽浓度的增加,红细胞PS标记率呈逐步下降的趋势,而细胞体积却呈逐步增加的趋势。结论:高浓度葡萄糖可以导致严重的红细胞PS暴露,而且这种PS暴露和caspase无关,推测葡萄糖诱导的红细胞PS暴露是受一条对亮抑酶肽高度敏感的、未知的通路调控的。 展开更多
关键词 红细胞 磷脂酰丝氨酸 葡萄糖 亮抑酶肽
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蛋白酶体抑制剂MG132逆转子宫颈癌细胞HCE1多细胞球体对顺铂耐药的研究 被引量:4
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作者 吴宜林 杨红杰 +3 位作者 王可可 陶光实 刘毅智 胡芸 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期287-291,共5页
目的 构建宫颈鳞癌细胞系HCE1的多细胞球体模型,研究蛋白酶体抑制剂MG132对其顺铂天然耐药的影响,探讨MG132是否可以逆转HCE1多细胞球体的天然耐药及其可能的机制.方法 (1)采用液体重叠法和旋转法建立HCE1多细胞球体模型;(2)用MG13... 目的 构建宫颈鳞癌细胞系HCE1的多细胞球体模型,研究蛋白酶体抑制剂MG132对其顺铂天然耐药的影响,探讨MG132是否可以逆转HCE1多细胞球体的天然耐药及其可能的机制.方法 (1)采用液体重叠法和旋转法建立HCE1多细胞球体模型;(2)用MG132、顺铂分别干预HCE1单层细胞及多细胞球体,分为MG132组、顺铂组、MG132+顺铂组、对照组,锥虫蓝拒染法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率;(3)用蛋白印迹法和免疫组化方法分别检测HCE1单层细胞及药物干预前后多细胞球体中核因子kB(NF-kB)和B细胞淋巴瘤/白血病2蛋白(bcl-2)的表达.结果 (1)成功建立了HCE1多细胞球体模型.(2)HCE1单层细胞和多细胞球体的细胞抑制率:MG132组分别为(11.67±2.34)%和(10.78±1.17)%,两者比较,差异无统计学意义(P〉0.05);MG132+顺铂组分别为(92.67±2.52)%和(91.33±2.18)%,两者比较,差异也无统计学意义(P〉0.05);顺铂组分别为(45.01±7.44)%和(9.45±5.98)%,两者比较,差异有统计学意义(P〈0.05).(3)HCE1单层细胞和多细胞球体的凋亡率:MG132组两者凋亡率分别为8.14%和5.97%,MG132+顺铂组两者凋亡率分别为99.01%和95.22%;顺铂组两者凋亡率分别为33.61%和0.88%.(4)NF-kB的相对表达量和bcl-2的高表达率:HCE1多细胞球体对照组分别为0.67、60%,顺铂组分别为0.85、83%,MG132组分别为0.39、20%,MG132+顺铂组分别为0.47、33%.结论 (1)HCE1多细胞球体模型对顺铂可产生天然耐药,是体外研究宫颈癌对顺铂耐药的良好模型.(2)MG132对HCE1多细胞球体有抑制增殖、诱导凋亡的作用,可部分逆转HCE1多细胞球体对顺铂的天然耐药性,其机制可能与NF-kB、bcl-2表达下调有关. 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 细胞系 肿瘤 球形体 细胞 抗药性 肿瘤 顺铂 亮肽菌素类
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蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病PINK1蛋白聚集物的形成与特征 被引量:2
7
作者 张玉虎 唐北沙 +6 位作者 文路 许波 汤建光 郭纪锋 夏昆 沈璐 工泓 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期337-340,共4页
目的研究在蛋白酶体抑制剂作用下,帕金森病 PINK1蛋白聚集物的形成及其特征。方法应用 PCR 从胎脑 cDNA 文库扩增全长 PINK1基因,亚克隆至增强型绿色荧光蛋白载体(pEGFP-N1),经测序证实载体构建正确。PINK1-pEGFP-N1表达载体转染非洲绿... 目的研究在蛋白酶体抑制剂作用下,帕金森病 PINK1蛋白聚集物的形成及其特征。方法应用 PCR 从胎脑 cDNA 文库扩增全长 PINK1基因,亚克隆至增强型绿色荧光蛋白载体(pEGFP-N1),经测序证实载体构建正确。PINK1-pEGFP-N1表达载体转染非洲绿猴肾细胞株(COS-7细胞),应用 MG-132抑制蛋白酶体活性,Western blot 检测 PINK1蛋白表达量,荧光染色观察 PINK1蛋白是否形成蛋白聚集物,免疫荧光观察构成 Lewy 小体的两种主要成分:泛素和α-突触核蛋白是否存在于蛋白聚集物中。结果应用 MG-132诱导后 PINK1蛋白表达量明显增加,PINK1蛋白形成了蛋白聚集物,泛素和α-突触核蛋白与 PINK1蛋白聚集物共定位。结论在蛋白酶体抑制剂作用下,PINK1蛋白可形成蛋白聚集物,泛素和α-突触核蛋白是其组成成分。 展开更多
关键词 帕金森病 蛋白激酶类 亮肽菌素类 包涵体
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