LEF1基因在鹅胚胎期皮肤毛囊中的表达

1

作者 孙越 刘静 +4 位作者 刘畅 王义冲 周宇轩 隋玉健 孙永峰 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期324-328,共5页

为了解LEF1基因在鹅胚胎期皮肤毛囊发育过程中的作用,以胚胎期12,18,28 d的吉林白鹅和胚胎期13,18,28 d的卡洛斯鹅为试验动物。利用苏木精-伊红染色法(HE染色)对皮肤组织进行组织形态学观察,采用荧光定量PCR对LEF1基因在胚胎期鹅背部皮... 为了解LEF1基因在鹅胚胎期皮肤毛囊发育过程中的作用,以胚胎期12,18,28 d的吉林白鹅和胚胎期13,18,28 d的卡洛斯鹅为试验动物。利用苏木精-伊红染色法(HE染色)对皮肤组织进行组织形态学观察,采用荧光定量PCR对LEF1基因在胚胎期鹅背部皮肤毛囊中的相对表达量进行检测及分析。结果表明:胚胎期为鹅初级毛囊的原始发育期,卡洛斯鹅胚胎期毛囊发育快于吉林白鹅;LEF1基因在胚胎期吉林白鹅及卡洛斯鹅的毛囊中均有表达,表达量在18 d时为高峰期。说明LEF1基因可能在胚胎期吉林白鹅及卡洛斯鹅的毛囊发育过程中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 lef1 吉林白鹅 卡洛斯鹅 皮肤 毛囊

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结直肠癌组织中淋巴增强子结合因子1(LEF1)高表达及其临床意义

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作者 杨晓宇 屈明 +2 位作者 武雪亮 张吉欣 薛军 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第5期878-882,共5页

目的:探讨结肠癌患者癌组织中淋巴增强子结合因子1(lymphatic enhancer binding factor 1,LEF1)的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化染色法结合Western blot观察结肠癌患者癌组织和癌旁组织中LEF1的表达情况,并对癌组织中LEF1的表达... 目的:探讨结肠癌患者癌组织中淋巴增强子结合因子1(lymphatic enhancer binding factor 1,LEF1)的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化染色法结合Western blot观察结肠癌患者癌组织和癌旁组织中LEF1的表达情况,并对癌组织中LEF1的表达与结肠癌患者临床病理特征的相关性进行统计学分析。Kaplan-Meier生存分析LEF1的表达与结肠癌患者预后的关联,多因素COX回归分析影响结肠癌患者生存预后的危险因素。进一步分析TCGA数据库结肠癌患者癌和癌旁组织中LEF1的表达水平,及其表达与患者预后以及淋巴结转移的相关性。此外,细胞水平采用Western blot检测结肠癌细胞系中LEF1的蛋白表达情况,并通过转染LEF1 siRNA观察对结肠癌HCT116细胞生物学功能的影响。结果:结肠癌组织中LEF1的表达较癌旁组织显著增加(P<0.05),且其表达水平与肿瘤病理分期、分化程度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、病理类型无关(P>0.05)。LEF1高表达结肠癌患者的生存期明显低于低表达患者(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,LEF1高表达、肿瘤病理分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移是结肠癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。TCGA数据库分析结果显示,结肠癌组织中LEF1的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且其表达水平与患者预后呈负相关(P<0.05),而与患者淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。此外,细胞实验结果显示,人结肠癌细胞系中LEF1的表达水平显著高于正常结肠上皮细胞(P<0.05),敲减LEF1可有效降低结肠癌HCT116细胞的迁移和侵袭能力,并抑制Wnt/β-catenin信号通路活性(P<0.05)。结论:LEF1高表达与结肠癌患者的短生存期和不良预后密切相关,可作为结肠癌患者术后复发和转移以及临床预后的重要生物标志物。 展开更多

关键词 结肠癌 lef1 淋巴转移 危险因素 预后

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LEF1、TUBB2B在卵巢癌中的表达及临床意义

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作者 刘硕 曹璜 +2 位作者 郭玉琳 吴绪峰 马全富 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2024年第9期1066-1070,共5页

目的:探讨LEF1、TUBB2B在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征关系。方法:采用多重荧光免疫组织化学方法检测143例卵巢癌组织中LEF1及TUBB2B的表达。结果:LEF1在复发卵巢癌组织的表达(3.55±1.99)明显高于未复发卵巢癌组织(2.90&#... 目的:探讨LEF1、TUBB2B在卵巢癌组织中的表达及其与临床病理特征关系。方法:采用多重荧光免疫组织化学方法检测143例卵巢癌组织中LEF1及TUBB2B的表达。结果:LEF1在复发卵巢癌组织的表达(3.55±1.99)明显高于未复发卵巢癌组织(2.90±1.49),差异具有统计学意义(P=0.035)。LEF1的表达与患者的年龄、病理类型、FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结阳性、是否有远处转移没有相关性。TUBB2B的表达与以上临床病理特征均无相关性。TUBB2B表达与LEF1呈正相关(r^(2)=0.852,P<0.0001)。结论:LEF1与TUBB2B在卵巢癌中的表达存在一定相关性,可能共同作用促进卵巢癌的发生发展。 展开更多

关键词 卵巢癌 lef1 TUBB2B 多重荧光免疫组织化学

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ABCB5和LEF1基因与高血压相关研究进展

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作者 纪仁晖 常丽 安彩艳 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2024年第4期235-239,共5页

动脉高血压的发病机制涉及许多因素和分子途径。最近有研究发现ATP结合盒超家族成员ABCB5与心血管相关疾病和WNT信号通路存在关联,有报告指出Wnt/β-catenin通路在高血压患者的病程和发展中的作用,且LEF1作为WNT信号通路中的关键转录因... 动脉高血压的发病机制涉及许多因素和分子途径。最近有研究发现ATP结合盒超家族成员ABCB5与心血管相关疾病和WNT信号通路存在关联,有报告指出Wnt/β-catenin通路在高血压患者的病程和发展中的作用,且LEF1作为WNT信号通路中的关键转录因子可能通过相关机制引起高血压,本文就其相关性研究进行综述。 展开更多

关键词 高血压 ABCB5基因 lef1基因 WNT信号通路

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白果内酯调控LEF1-AS1/miR-23b-3p分子轴缓解肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤 被引量：4

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作者 金晓立 许建平 +1 位作者 黄曦 曾云祥 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期15-21,共7页

目的探讨白果内酯对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的保护作用及其对lncRNA LEF1-AS1/miR-23b-3p分子轴的调控作用。方法用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型(感染组);分别转染si-NC、si-LEF1-AS1后,用肺炎链球菌感染细胞... 目的探讨白果内酯对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞损伤的保护作用及其对lncRNA LEF1-AS1/miR-23b-3p分子轴的调控作用。方法用肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞建立细胞损伤模型(感染组);分别转染si-NC、si-LEF1-AS1后,用肺炎链球菌感染细胞(感染+si-NC组和感染+si-LEF1-AS1组);pcDNA、pcDNA-LEF1-AS1分别转染至肺泡上皮细胞后用白果内酯与肺炎链球菌共同处理细胞(感染+白果内酯+pcDNA组和感染+白果内酯+pcDNA-LEF1-AS1组)。ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测LEF1-AS1、miR-23b-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测LEF1-AS1与miR-23b-3p的靶向关系;Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果白果内酯能够降低肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平和LEF1-AS1的表达量(P<0.05),并可降低凋亡率和Bax蛋白水平(P<0.05),还可促进miR-23b-3p和Bcl-2表达(P<0.05),且呈剂量依赖性;LEF1-AS1可靶向调控miR-23b-3p;转染si-LEF1-AS1可降低TNF-α、IL-1β、IL-6的水平以及凋亡率和Bax蛋白水平(P<0.05),增加Bcl-2蛋白水平(P<0.05);转染pcDNA-LEF1-AS1能够逆转白果内酯对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞炎性因子及凋亡的作用。结论白果内酯可通过调控LEF1-AS1/miR-23b-3p分子轴抑制肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞炎性反应及凋亡,进而减轻细胞损伤。 展开更多

关键词 白果内酯 lncRNA lef1-AS1 miR-23b-3p 肺泡上皮细胞 凋亡

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LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义 被引量：3

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作者 王文娟 南克俊 +3 位作者 王淑红 胡婷华 姜丽丽 马婕群 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期508-511,共4页

目的探讨淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义。方法采取免疫组化SP法检测184例人结直肠癌组织及184例癌旁正常组织中LEF1和Jagged1的表达,分析两者与人结直肠癌临床病理因素之... 目的探讨淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义。方法采取免疫组化SP法检测184例人结直肠癌组织及184例癌旁正常组织中LEF1和Jagged1的表达,分析两者与人结直肠癌临床病理因素之间的关系。结果 LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的阳性表达率分别为68.5%和65.8%,均明显高于癌旁正常组织(P<0.001)。LEF1的表达与患者的淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05);Jagged1的表达与患者的组织分化程度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05)。LEF1和Jagged1在结直肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.373,P<0.001)。结论 LEF1和Jagged1的高表达与结直肠癌发生发展以及转移密切相关,两者联合检测对人结直肠癌的早期诊断及判断预后具有一定的参考价值。 展开更多

关键词 结直肠癌 淋巴增强因子-1(lef1) JAGGED1 免疫组织化学

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LEF1介导MDR1/P-gp调控人结肠癌细胞多药耐药的研究 被引量：3

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作者 王文娟 刘梦洁 +2 位作者 徐瑞 王淑红 南克俊 《山西医科大学学报》 CAS 2018年第8期905-911,共7页

目的通过调节人结肠癌细胞HCT116及HCT116/L多药耐药细胞中LEF1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)的表达,以探讨LEF1对人结肠癌细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响及其对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的调控作用。方法应用... 目的通过调节人结肠癌细胞HCT116及HCT116/L多药耐药细胞中LEF1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)的表达,以探讨LEF1对人结肠癌细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响及其对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的调控作用。方法应用LEF1过表达质粒pc DNA-LEF1和LEF1 siRNA上调及沉默人结肠癌细胞HCT116和奥沙利铂耐药细胞HCT116/L中的LEF1的表达,MTT法检测LEF1对HCT116和HCT116/L细胞化疗药物敏感性的影响;应用MDR1过表达质粒pc DNA-MDR1和MDR1 siRNA上调及沉默人结肠癌细胞HCT116-LEF1细胞(过表达LEF1细胞株)和HCT116/L-si LEF1(沉默LEF1奥沙利铂耐药细胞株)的MDR1的表达,MTT法检测MDR1对HCT116-LEF1细胞和HCT116/L-si LEF1细胞化疗药物敏感性的影响;real time-PCR、Western blot等方法检测多药耐药基因MDR1和P-gp蛋白的表达。结果 HCT116/L细胞中奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)和5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的半数抑制浓度(IC_(50))高于HCT116细胞(P<0.05),其LEF1、MDR1 mRNA和P-gp蛋白的表达水平均高于HCT116细胞(P<0.05)。过表达LEF1后,HCT116细胞对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的IC_(50)分别由(15.04±2.68)μmol/L和(5.89±2.77)μmol/L上升至(74.16±9.05)μmol/L和(35.02±6.19)μmol/L(P<0.05),P-pg的蛋白表达水平亦明显升高(P<0.05);沉默LEF1表达后,HCT116/L细胞对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的IC_(50)分别由(511.89±37.79)μmol/L和(220.22±66.33)μmol/L下降至(253.56±71.42)μmol/L和(94.94±25.45)μmol/L(P<0.05),P-gp的蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。沉默MDR1表达后,HCT116-LEF1细胞对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的IC_(50)分别由(85.68±8.46)μmol/L和(36.92±3.02)μmol/L下降至(29.86±5.93)μmol/L和(7.61±1.47)μmol/L(P<0.05)。过表达MDR1后,HCT116/L-si LEF1细胞对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的IC_(50)分别由(216.55±49.63)μmol/L和(101.48±17.93)μmol/L上升至(351.46±23.31)μmol/L和(175.23±28.25)μmol/L(P<0.05)。结论 LEF1通过介导MDR1/P-gp的表达调控人结肠癌细胞HCT116对奥沙利铂和5-氟尿嘧啶的耐药,抑制LEF1过表达对于逆转结肠癌多药耐药具有重要意义。 展开更多

关键词 lef1 MDR1/P-GP 结肠癌 多药耐药

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中晚期食管癌AKR1C3、LEF1表达与放疗敏感性及预后的关系分析 被引量：8

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作者 刘洋 熊伟 米蕊 《临床和实验医学杂志》 2021年第4期368-371,共4页

目的研究中晚期食管癌醛固酮类还原酶家族1成员C3(AKR1C3)、淋巴细胞增强结合因子1(LEF1)表达与放疗敏感性及预后的关系。方法回顾性选择2017年1~12月期间唐山市人民医院收治的中晚期食管癌并接受调强放疗的患者作为研究对象。采用免疫... 目的研究中晚期食管癌醛固酮类还原酶家族1成员C3(AKR1C3)、淋巴细胞增强结合因子1(LEF1)表达与放疗敏感性及预后的关系。方法回顾性选择2017年1~12月期间唐山市人民医院收治的中晚期食管癌并接受调强放疗的患者作为研究对象。采用免疫组织化学检测食管癌中AKR1C3、LEF1的表达。放疗4周后,根据疗效评估结果分为放疗敏感组49例,放疗抵抗组25例。比较放疗敏感组与放疗抵抗组AKR1C3及LEF1表达、临床病理特征的差异。Logistics回归分析放疗敏感性影响因素。随访生存情况,比较不同AKR1C3、LEF1表达的食管癌患者预后差异。结果放疗抵抗组患者食管癌中AKR1C3及LEF1的阳性率、肿瘤最大横径≥4 cm及低未分化的患者比率分别为80.00%、84.00%、48.00%、56.00%,显著高于放疗敏感组(44.90%、48.98%、22.45%、30.61%),差异有统计学意义(P<0.05);经Logistics回归分析,AKR1C3、LEF1、肿瘤最大横径、分化程度是放疗敏感性的影响因素(P<0.05);经Kaplan-Meier曲线分析,AKR1C3及LEF1阳性表达的食管癌患者累积生存率低于AKR1C3、LEF1阴性表达的食管癌(P<0.05)。结论中晚期食管癌中AKR1C3、LEF1阳性表达与放疗抵抗及生存时间缩短有关。 展开更多

关键词 食管癌 放疗 AKR1C3 lef1 敏感性 预后

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LEF1在成人急性淋巴细胞白血病中的突变和表达及其临床意义 被引量：1

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作者 刘娟 郭星 +8 位作者 葛峥 张闰 许景艳 李敏 吴雨洁 乔纯 仇海荣 张建富 李建勇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1212-1216,共5页

淋巴增强因子1(1ymphoid enhancer factor 1,LEF1)是Wingless-type(Wnt)信号通路中的重要转录因子。本研究旨在探讨成人急性淋巴细胞白血病(acute Lymphocytic Leukemia,ALL)中LEF1基因突变、表达特征及其临床意义。采用基因组DNA扩增... 淋巴增强因子1(1ymphoid enhancer factor 1,LEF1)是Wingless-type(Wnt)信号通路中的重要转录因子。本研究旨在探讨成人急性淋巴细胞白血病(acute Lymphocytic Leukemia,ALL)中LEF1基因突变、表达特征及其临床意义。采用基因组DNA扩增、测序和荧光定量PCR等方法研究131例初发成人ALL患者中LEF1基因突变和表达,及其与临床预后参数和生存时间的相关性。结果显示,本组131例成人ALL患者中LEF1突变率3.1%(4/131),均为点突变(位于外显子2和3);初诊时外周血中位白细胞计数和中位原始幼稚淋巴细胞百分比在LEF1高表达组明显高于低表达组(70.6×109/L vs 26.2×109/L,P=0.010;81.0%vs 57.0%,P=0.014);费城染色体阳性ALL和高危患者比例LEF1高表达组显著高于低表达组(66.7%vs 36.5%,P=0.038;79.2%vs 56.2%,P=0.044)。结论:LEF1高表达在成人ALL的发病机制中可能具有重要意义。 展开更多

关键词 lef1 急性淋巴细胞白血病 基因突变

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茶毛虫NPV的P24、Rr1、Lef1基因及其分子进化分析 被引量：3

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作者 聂婷婷 肖强 +2 位作者 殷坤山 邢丽苹 张传溪 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期242-248,共7页

克隆和测定了茶毛虫核型多角体病毒(EupsNPV)全长5942bp的EcoRI-XhoI基因组DNA片段。序列分析表明该片段包含5个完整的开放阅读框(ORF),分别编码P24、Rr1、38.7K、Lef1和Ep-ld124。通过对上述5个基因与其它已知杆状病毒的同源基因的分... 克隆和测定了茶毛虫核型多角体病毒(EupsNPV)全长5942bp的EcoRI-XhoI基因组DNA片段。序列分析表明该片段包含5个完整的开放阅读框(ORF),分别编码P24、Rr1、38.7K、Lef1和Ep-ld124。通过对上述5个基因与其它已知杆状病毒的同源基因的分析比较,以及对P24、Rr1和Lef1的分子进化树分析,表明EupsNPV是一种与已知杆状病毒都有较大差异的病毒种类,属于NPVII组病毒。结果还表明EupsNPV与茶尺蠖(Ectropisobliqua)核多角体病毒(EcobSNPV)的亲缘关系最为接近。本文报道的序列的EMBL登录号为AJ920288。 展开更多

关键词 茶毛虫 核型多角体病毒 P24 lef1 Rr1 序列分析 分子进化

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LEF1基因在巴什拜羊不同毛色皮肤组织中的DNA甲基化及mRNA表达水平分析 被引量：2

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作者 侯晨曦 洪文娟 +1 位作者 何宗龙 决肯·阿尼瓦什 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2742-2748,共7页

【目的】分析LEF1基因在红棕色与青灰色巴什拜羊皮肤组织中DNA甲基化与mRNA的表达水平。【方法】运用BSP(亚硫酸盐修饰后测序PCR)与RT-RCR(实时荧光定量PCR),检测不同毛色巴什拜羊皮肤组织LEF1基因启动子区的甲基化水平与mRNA表达量。... 【目的】分析LEF1基因在红棕色与青灰色巴什拜羊皮肤组织中DNA甲基化与mRNA的表达水平。【方法】运用BSP(亚硫酸盐修饰后测序PCR)与RT-RCR(实时荧光定量PCR),检测不同毛色巴什拜羊皮肤组织LEF1基因启动子区的甲基化水平与mRNA表达量。【结果】在红棕色巴什拜羊皮肤组织中的LEF1基因启动子区的甲基化水平高于青灰色的甲基化水平,且二者甲基化CpG位点不同,二者呈显著的负相关(P<0.05)。【结论】DNA甲基化水平对红棕色与青灰色巴什拜羊的毛色形成具有调节作用,可作为一个候选的巴什拜羊毛色遗传标记。 展开更多

关键词 巴什拜羊 毛色 lef1基因 MRNA表达量 DNA甲基化

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长链非编码RNA LEF1-AS1在老年胃癌病人中的表达及其临床病理意义 被引量：2

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作者 姬玉 姜艺 吴昊 《实用老年医学》 CAS 2019年第12期1156-1159,共4页

目的探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA) LEF1-AS1在胃癌组织中的表达及其临床病理意义。方法应用qRT-PCR技术检测73例胃癌病人(年龄≥65岁)肿瘤组织及癌旁组织中的LncRNA LEF1-AS1表达情况,采用免疫组化法检测胃癌组织样本... 目的探讨长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA) LEF1-AS1在胃癌组织中的表达及其临床病理意义。方法应用qRT-PCR技术检测73例胃癌病人(年龄≥65岁)肿瘤组织及癌旁组织中的LncRNA LEF1-AS1表达情况,采用免疫组化法检测胃癌组织样本中PI3K/Akt蛋白表达情况。分析LncRNA LEF1-AS1表达情况与胃癌病人临床病理特征之间的关系及对预后的影响。结果胃癌组织中LncRNA LEF1-AS1的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01),其表达水平和病人的性别、淋巴结转移情况无关,与组织分化、肿瘤浸润深度(T分期)、TNM分期均有显著相关性(P<0.01)。LncRNA LEF1-AS1表达与胃癌组织中PI3K/Akt的表达呈正相关(P<0.01)。LncRNA LEF1-AS1高表达的胃癌病人无病生存期明显低于低表达组(P<0.05)。结论 LncRNA LEF1-AS1与胃癌的恶性生物学行为关系密切。检测LncRNA LEF1-AS1表达对判断老年胃癌病人预后具有潜在的价值。 展开更多

关键词 胃癌 长链非编码RMA lef1-AS1 PI3K AKT

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基于β-catenin/Lef1相互作用为靶标的新型抗肿瘤药物高通量筛选模型的建立 被引量：8

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作者 陈云雨 牛夏忆 +1 位作者 李妍 刘晓平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期707-717,共11页

旨在以β-catenin/Lef1相互作用为靶标,建立基于ELISA原理的适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。利用DNA重组技术,将构建的β-catenin-pET-30a(+)重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3)... 旨在以β-catenin/Lef1相互作用为靶标,建立基于ELISA原理的适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。利用DNA重组技术,将构建的β-catenin-pET-30a(+)重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta (DE3),经诱导培养后进行β-catenin原核表达。采用亲和层析方法分离纯化β-catenin后,以GSTPulldown实验进行生物学活性鉴定。利用ELISA原理建立β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,通过优选GST-Lef1最佳包被浓度和β-catenin最佳反应浓度,建立适用于靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂筛选的高通量筛选模型。SDS-PAGE和Western blotting实验证实β-catenin的原核表达。GST Pulldown实验证实纯化的β-catenin具有良好的生物学活性。通过对基于ELISA原理建立的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型优化,选用10μg/mL GST-Lef1和6μg/mLβ-catenin建立ELISA高通量筛选模型,其Z?因子为0.76。本研究成功建立了基于ELISA原理的β-catenin/GST-Lef1结合的分子模型,为靶向β-catenin/Lef1相互作用小分子抑制剂的高通量筛选奠定了基础。 展开更多

关键词 Wnt抑制剂 Β-CATENIN β-catenin/lef1相互作用 酶联免疫吸附实验 高通量筛选

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β-catenin、LEF1在宫颈鳞状细胞癌及其癌前病变中的表达及临床意义 被引量：5

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作者 汪钊 王艳峰 关兵兵 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第16期3061-3065,共5页

目的:观察宫颈鳞状细胞癌(SCC)及鳞状上皮内病变组织中β连环蛋白(β-catenin)、淋巴增强子结合蛋白1(LEF1)的表达并探讨其临床意义。方法:选取宫颈SCC组织55例、低级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL... 目的:观察宫颈鳞状细胞癌(SCC)及鳞状上皮内病变组织中β连环蛋白(β-catenin)、淋巴增强子结合蛋白1(LEF1)的表达并探讨其临床意义。方法:选取宫颈SCC组织55例、低级别鳞状上皮内病变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)组织42例、高级别鳞状上皮内病变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)组织34例、正常宫颈组织21例,对上述组织进行β-catenin、LEF1免疫组化检测,分析两者在宫颈鳞状上皮病变中的表达、二者与病变的相关性及其与SCC临床病理参数的关系。结果:SCC、HSIL、LSIL、正常宫颈组织中β-catenin细胞质表达率分别为32.7%、29.4%、23.8%、4.8%,差异有统计学意义(P=0.003);在以上病变中,β-catenin细胞核表达率分别是41.8%、32.4%、28.6%、9.5%,差异有统计学意义(P=0.002);LEF1阳性率分别为69.0%、50.0%、26.2%、9.5%,差异有统计学意义(P<0.001)。β-catenin的异常表达与SCC分化程度(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.033)相关,LEF1的表达与FIGO分期(P=0.020)及淋巴结转移(P=0.024)相关。β-catenin(r s=0.375,P<0.001)及LEF1(r s=0.443,P<0.001)的表达情况与宫颈病变发展呈正相关,β-catenin与LEF1的表达在各组病变中呈正相关(r s=0.403,P<0.001)。结论:宫颈鳞状细胞癌及其癌前病变中β-catenin和LEF1蛋白异常表达,并与宫颈鳞状细胞癌的分化、淋巴结转移及FIGO分期相关。 展开更多

关键词 Β-CATENIN lef1 宫颈鳞状细胞癌 低级别鳞状上皮内病变 高级别鳞状上皮内病变

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急性白血病β-catenin与LEF1基因表达的相关性 被引量：2

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作者 王巍 刘文鑫 +2 位作者 黄永彬 洪运广 杨志刚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期1986-1989,共4页

目的探讨β-catenin、淋巴细胞增强因子1(LEF1)在急性白血病(AL)中的表达及相关性。方法实时定量PCR方法检测62例初诊AML患者、23例初诊ALL患者、20例对照及K562、HL-60、THP-1、Raji细胞株β-catenin和LEF1 m RNA表达。结果 AML组β-ca... 目的探讨β-catenin、淋巴细胞增强因子1(LEF1)在急性白血病(AL)中的表达及相关性。方法实时定量PCR方法检测62例初诊AML患者、23例初诊ALL患者、20例对照及K562、HL-60、THP-1、Raji细胞株β-catenin和LEF1 m RNA表达。结果 AML组β-catenin m RNA表达显著高于对照组,LEF1m RNA表达显著低于对照组(P<0.05)。ALL组β-catenin、LEF1 m RNA表达均高于对照组(P<0.05)。AML、ALL组β-catenin与LEF1 m RNA表达均呈相关性(P<0.05)。在三种AML细胞株中,THP-1细胞β-catenin m RNA表达最高,LEF1 m RNA表达最低,表达方向基本与AML患者一致。结论 AL患者有Wnt/β-catenin路通的异常激活,β-catenin/LEF1转录复合体可能在ALL发病中发挥作用。 展开更多

关键词 急性白血病 Β-CATENIN lef1 相关性

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不同毛色巴什拜羊皮肤组织中LEF1、YWHAZ及WNT2基因差异表达

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作者 洪文娟 侯晨曦 +1 位作者 何宗龙 决肯·阿尼瓦什 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2749-2757,共9页

【目的】研究LEF1、YWHAZ及WNT2基因表达量与毛色之间的关系,为分析LEF1、YWHAZ及WNT2基因在Wnt/β-actenin信号通路中的分子机制奠定基础。【方法】采用随机选取黑色和白色被毛的巴什拜羊各8只,采集皮肤组织,通过定量反转录聚合酶连锁... 【目的】研究LEF1、YWHAZ及WNT2基因表达量与毛色之间的关系,为分析LEF1、YWHAZ及WNT2基因在Wnt/β-actenin信号通路中的分子机制奠定基础。【方法】采用随机选取黑色和白色被毛的巴什拜羊各8只,采集皮肤组织,通过定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)方法测定LEF1、WNT2及YWHAZ基因在不同毛色巴什拜羊皮肤中的表达量,并与LEF1、YWHAZ及WNT2基因转录组测序结果的FPKM值进行双向验证。【结果】LEF1基因在黑色巴什拜羊皮肤组织相对表达量是(4.66±0.59),在白色巴什拜羊皮肤组织是(0.43±0.15);WNT2基因在黑色巴什拜羊组织相对表达量是(7.35±0.77),在白色巴什拜羊皮肤组织是(0.36±0.11);YWHAZ基因在黑色巴什拜羊组织相对表达量是(4.44±0.57),在白色巴什拜羊皮肤组织是(1.02±0.23)。LEF1、YWHAZ及WNT2基因的转录组数据的FPKM值与qRT-PCR结果趋势一致。【结论】LEF1、WNT2及YWHAZ基因在不同毛色的巴什拜羊皮肤组织中均有表达。且LEF1、WNT2及YWHAZ基因在黑色绵羊皮肤中的表达量极显著高于白色绵羊皮肤(P<0.01),LEF1、WNT2及YWHAZ参与毛色的形成过程,可作为绵羊毛色潜在基因研究与毛色之间的相关性。 展开更多

关键词 绵羊 毛色 lef1 WNT2 YWHAZ 定量反转录聚合酶连锁反应

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杜泊羊LEF1生物信息学及表达分析

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作者 王翊帆 王雅艳 李新海 《中国草食动物科学》 CAS 2022年第4期13-17,共5页

旨在对杜泊羊LEF1基因进行生物信息学分析和编码蛋白功能特征预测,探究其对毛囊发育的调控机制,及其在毛囊不同发育时期中的表达量。从试验羊场选择2周岁体重相近的5只杜泊母羊,利用生物信息学方法比对绵羊LEF1氨基酸序列与其他物种的... 旨在对杜泊羊LEF1基因进行生物信息学分析和编码蛋白功能特征预测,探究其对毛囊发育的调控机制,及其在毛囊不同发育时期中的表达量。从试验羊场选择2周岁体重相近的5只杜泊母羊,利用生物信息学方法比对绵羊LEF1氨基酸序列与其他物种的亲缘性,分析LEF1蛋白质的理化性质和结构特征;利用实时荧光定量PCR检测其在杜泊羊体测腹部皮肤的表达量。结果表明,杜泊羊LEF1蛋白的氨基酸序列与牛的亲缘关系最近,与小鼠的亲缘关系最远。LEF1基因编码的氨基酸331个;LEF1基因编码的蛋白质分子式C_(1636)H_(2534)N_(478)O_(481)S_(15),相对分子质量37075.95 ku,理论等电点数值9.52,亲水性平均值-0.906;编码蛋白的二、三级结构主要由无规卷曲(57.7%)和α-螺旋(28.1%)组成,同时包含1个糖基化位点。LEF1基因在杜泊羊毛囊不同发育时期均有表达,在9月和3月高表达,在1月低表达。综上,LEF1基因在杜泊羊毛囊的生长期高表达。 展开更多

关键词 杜泊羊 lef1 生物信息学

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敲低LEF1-AS1对胰腺癌细胞的影响

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作者 杨哲豪 喻超 +3 位作者 潘耀振 邓路 郑迪杰 孙诚谊 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第8期875-881,共7页

目的:探究淋巴增强因子1反义RNA1(LEF1-AS1)对胰腺癌(PC)细胞的影响及机制。方法:使用Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)网站分析来源于癌症基因组图谱(TCGA)数据库中PC组织和正常胰腺组织LEF1-AS1的表达;取对数... 目的:探究淋巴增强因子1反义RNA1(LEF1-AS1)对胰腺癌(PC)细胞的影响及机制。方法:使用Gene Expression Profiling Interactive Analysis(GEPIA)网站分析来源于癌症基因组图谱(TCGA)数据库中PC组织和正常胰腺组织LEF1-AS1的表达;取对数生长期的正常人胰管上皮细胞株HPDE和PC细胞株Panc-1、Bxpc-3、As PC-1、Capan-1、CFPAC-1及MIA Pa Ca-2,采用q PCR检测LEF1-AS1在各细胞中的表达;选取q PCR检测后LEF1-AS1表达较高的PC细胞株Panc-1和MIA Pa Ca-2,用si LEF1-AS1与si Control分别转染后分为下调组和对照组,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验、划痕实验和Transwell实验检测敲低LEF1-AS1对各组PC细胞增殖、细胞侵袭及迁移能力的影响,采用Western blot实验检测敲低LEF1-AS1对各组PC细胞中B细胞白血病淋巴瘤2(Bcl-2)、B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白(Bax)、钙黏附蛋白E(E-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)表达的影响。结果:PC组织中LEF1-AS1的表达高于正常组织(P<0.05),Panc-1、Bxpc-3、As PC-1、Capan-1、CFPAC-1及MIA Pa Ca-2细胞中LEF1-AS1表达水平较HPDE细胞上调(P<0.05);下调组Panc-1和MIA Pa Ca-2细胞24 h、48 h和72 h时OD值均较对照组下降,下调组细胞集落形成数较对照组降低(P<0.05);下调组Panc-1和MIA PaCa-2细胞迁移和侵袭能力较对照组细胞降低(P<0.05);敲低LEF1-AS1表达后,下调组Panc-1和MIA Pa Ca-2细胞Bcl-2和Vimentin蛋白的表达量均较与对照组下降,Bax和E-cadherin蛋白的表达量均较与对照组升高(P<0.05)。结论:敲低LEF1-AS1表达后抑制PC细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与促进PC细胞的凋亡和抑制上皮细胞-间充质转化进程有关。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 细胞增殖 细胞迁移分析 lef1-AS1基因 长链非编码RNA 侵袭

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LEF1介导的microRNA-26b抑制H9C2心肌细胞肥大机制研究

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作者 唐春梅 赵海霞 +3 位作者 随何欢 梁婧 朱丽莎 苏强 《川北医学院学报》 CAS 2020年第6期943-946,共4页

目的:探讨microRNA-26b(miR-26b)调控H9C2心肌细胞肥大的作用靶基因及其分子机制。方法:传代培养H9C2心肌细胞,分别转染miR-26b模拟物(miR-26b mimic)和淋巴样增强因子1(LEF1)siRNA(si-LEF1),以增加H9C2心肌细胞中miR-26b水平或抑制LEF... 目的:探讨microRNA-26b(miR-26b)调控H9C2心肌细胞肥大的作用靶基因及其分子机制。方法:传代培养H9C2心肌细胞,分别转染miR-26b模拟物(miR-26b mimic)和淋巴样增强因子1(LEF1)siRNA(si-LEF1),以增加H9C2心肌细胞中miR-26b水平或抑制LEF1的表达水平。采用FITC-鬼笔环肽染色检测H9C2心肌细胞表面积,双荧光素酶报告基因实验鉴定miR-26b与潜在靶基因LEF13′端非翻译区(3′UTR)的结合作用。RT-qPCR和Western blot法分别检测miR-26b、LEF1及心肌细胞肥大相关基因表达。结果:过表达miR-26b可明显增加H9C2心肌细胞中肥厚相关基因ANP,β-MHC的表达水平,缩小H9C2心肌细胞表面积;双荧光素酶报告基因实验结果提示miR-26b与LEF13′UTR具有相互结合作用,miR-26b在转录水平抑制LEF1的表达;miR-26b mimic和si-LEF1均能抑制H9C2心肌细胞肥大基因的表达。结论:LEF1是miR-26b的作用靶基因,LEF1参与miR-26b抑制H9C2心肌细胞肥大的作用。 展开更多

关键词 心肌细胞肥大 MicroRNA-26b 淋巴样增强因子1 H9C2心肌细胞

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LEF1慢病毒表达载体的构建及稳定肺癌细胞株的鉴定

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作者 滕宇 李丽莉 +5 位作者 马丽 张丽娜 王玥 顾勐 王子宇 岳文涛 《生命科学仪器》 2016年第5期33-37,59,共6页

肺癌作为恶性肿瘤死亡的主要原因,其发生机制涉及诸多肿瘤相关基因的异常表达。淋巴增强子结合因子1(LEF1)是经典Wnt/β-catenin信号通路的关键转录因子,在多种肿瘤的侵袭及转移过程中发挥重要作用。本文通过构建LEF1过表达的慢病毒载体... 肺癌作为恶性肿瘤死亡的主要原因,其发生机制涉及诸多肿瘤相关基因的异常表达。淋巴增强子结合因子1(LEF1)是经典Wnt/β-catenin信号通路的关键转录因子,在多种肿瘤的侵袭及转移过程中发挥重要作用。本文通过构建LEF1过表达的慢病毒载体,在293T细胞中包装慢病毒颗粒,感染目的肺癌细胞并筛选获得稳定表达LEF1的A549及H1299肺癌细胞株,为后续鉴定LEF1直接调控的靶基因奠定细胞学基础。功能研究结果显示,过表达LEF1使上皮细胞标志物E-cadherin表达下调,而间充质细胞标志物N-cadherin表达上调,因而对肺癌细胞的上皮-间充质转化过程(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)具有明显的促进作用。 展开更多

关键词 淋巴增强子结合因子 慢病毒 肺癌 上皮-间充质转化

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