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DExH盒解旋酶9通过结合胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1促进高糖诱导的足细胞损伤与炎症反应
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作者 张栋栋 王珺琳 +5 位作者 司书轩 马葆泽 江美旭 景钰莹 吕智美 王荣 《临床内科杂志》 2026年第1期63-67,共5页
目的探讨DExH盒解旋酶9(DHX9)在糖尿病肾脏疾病(DKD)足细胞损伤中的表达变化及其潜在机制。方法将12只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组与DKD组,每组各6只;以链脲佐菌素(STZ)诱导建立DKD模型。同时收集对照组与DKD患者肾组织标本,... 目的探讨DExH盒解旋酶9(DHX9)在糖尿病肾脏疾病(DKD)足细胞损伤中的表达变化及其潜在机制。方法将12只8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组与DKD组,每组各6只;以链脲佐菌素(STZ)诱导建立DKD模型。同时收集对照组与DKD患者肾组织标本,采用免疫组化(IHC)检测肾小球中DHX9的表达水平。体外培养人永生化足细胞,建立高糖模型并分别设立正常糖(NG)、高糖(HG)、高渗透压(HO)和空白对照(Con)、转染对照(si-NC)、DHX9敲低(si-DHX9)、DHX9过表达(OE-DHX9)、高糖+转染对照(HG+si-NC)、高糖+DHX9敲低(HG+si-DHX9)、过表达DHX9+胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)敲低(OE-DHX9+si-IGF2BP1)10个组别。采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测DHX9 mRNA相对表达水平;采用蛋白质印迹法(Western Blot)和免疫荧光检测DHX9及足细胞损伤相关蛋白(synaptopodin、ZO-1、Desmin)与炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)表达水平;采用CCK-8评估细胞活性;采用免疫共沉淀(CO-IP)验证DHX9与IGF2BP1的结合。结果DKD小鼠与患者肾小球DHX9表达水平均较高于各自对照组(P<0.05);高糖刺激可显著上调足细胞DHX9 mRNA和蛋白表达(P<0.001)。si-DHX9显著降低DHX9表达,并在高糖条件下上调synaptopodin、ZO-1、下调Desmin,同时降低IL-1β、IL-6、TNF-α(P<0.001);免疫荧光结果与Western blot一致。CCK-8结果显示,HG组细胞存活率均显著低于NG组和HG+si-DHX9组(P<0.001)。CO-IP提示DHX9与IGF2BP1互作;在DHX9过表达背景下敲低IGF2BP1可提高synaptopodin、ZO-1并降低IL-1β、TNF-α,同时改善OE-DHX9导致的细胞活性下降(P<0.001)。结论DHX9在DKD足细胞损伤中表达上调,可能通过调控IGF2BP1促进炎症与损伤,提示其为潜在干预靶点。 展开更多
关键词 DExH盒解旋酶9 足细胞 糖尿病肾脏疾病 胰岛素样生长因子2 mrna结合蛋白1 炎症
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流体剪切力对人牙周膜细胞LEF-1 mRNA表达影响研究 被引量:2
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作者 张桂荣 陈罗萍 王雪 《中国实用口腔科杂志》 CAS 2015年第1期32-35,共4页
目的探讨人牙周膜细胞在流体剪切力作用下淋巴样增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)m RNA的表达。方法对人牙周膜细胞进行原代培养;通过流体剪切力加力系统对人牙周膜细胞施加1.2 Pa的流体剪切力,作用0、0.5、2、4、8 h后,用... 目的探讨人牙周膜细胞在流体剪切力作用下淋巴样增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF-1)m RNA的表达。方法对人牙周膜细胞进行原代培养;通过流体剪切力加力系统对人牙周膜细胞施加1.2 Pa的流体剪切力,作用0、0.5、2、4、8 h后,用RT-PCR方法检测细胞受力前后LEF-1 m RNA的表达变化。结果人牙周膜细胞在1.2 Pa的流体剪切力作用8 h后,LEF-1 m RNA的表达升高。结论流体剪切力刺激活化了人牙周膜细胞中LEF-1的转录,LEF-1 m RNA的表达升高,可能是在剪切应力作用下Wnt信号通路的应答反应。 展开更多
关键词 牙周膜细胞 lef-1 mrna 流体剪切力
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沉默LOXL1基因对人晶状体上皮细胞氧化胁迫的影响及机制
3
作者 玛依努 易湘龙 《临床眼科杂志》 2026年第1期46-54,共9页
目的研究miRNA-LOXL1在晶状体上皮细胞氧化胁迫中的调控机制。方法利用H_(2)O_(2)诱导氧化胁迫对人晶状体上皮细胞(SRA01/04细胞株)进行处理,通过沉默LOXL1基因的模型,进行了mRNA和miRNA关联性分析,并对显著差异miRNA靶基因进行富集分... 目的研究miRNA-LOXL1在晶状体上皮细胞氧化胁迫中的调控机制。方法利用H_(2)O_(2)诱导氧化胁迫对人晶状体上皮细胞(SRA01/04细胞株)进行处理,通过沉默LOXL1基因的模型,进行了mRNA和miRNA关联性分析,并对显著差异miRNA靶基因进行富集分析。结果mRNA分析:ssiLOXL1组vs.ssiNC组,有445个上调差异基因,568个下调差异基因;ssiLOXL1+H_(2)O_(2)组vs.ssiNC+H_(2)O_(2)组,有2791个上调差异基因,1375个下调差异基因;ssiNC+H_(2)O_(2)组vs.ssiNC组,214个上调差异基因,84个下调差异基因;ssiLOXL1+H_(2)O_(2)组vs.ssiLOXL1,2703个上调差异基因,986个下调差异基因。miRNA分析:ssiLOXL1组vs.ssiNC组,有81个上调差异基因,104个下调差异基因;ssiLOXL1+H_(2)O_(2)组vs.ssiNC+H_(2)O_(2)组,有170个上调差异基因,191个下调差异基因;ssiNC+H_(2)O_(2)组vs.ssiNC组,61个上调差异基因,51个下调差异基因;ssiLOXL1+H_(2)O_(2)组vs.ssiLOXL1,120个上调差异基因,132个下调差异基因。说明LOXL1基因可影响氧化胁迫晶状体细胞株的基因表达。结论LOXL1基因通过PI3K-Akt信号、TNF信号通路、JAK-STAT信号通路、细胞黏附分子、MAPK信号通路等,在晶状体上皮细胞氧化胁迫中发挥重要作用。 展开更多
关键词 剥脱综合征 LOXL1基因沉默 氧化胁迫 miRNA和mrna表达
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甲型H1N1流感mRNA疫苗在小鼠体内免疫原性和免疫保护效果研究 被引量:1
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作者 周玉方 杨众贺 +2 位作者 高婧 袁蕾 雷涵 《中国药学杂志》 北大核心 2025年第10期1013-1018,共6页
目的基于mRNA疫苗技术平台考察甲型流感mRNA疫苗的免疫原性和免疫保护效率,为开发多价季节性流感mRNA疫苗提供新的研究策略。方法利用即用型脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)对mRNA-H1N1进行包封,将LNP/mRNA-H1N1转染至HEK 293T细... 目的基于mRNA疫苗技术平台考察甲型流感mRNA疫苗的免疫原性和免疫保护效率,为开发多价季节性流感mRNA疫苗提供新的研究策略。方法利用即用型脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles,LNP)对mRNA-H1N1进行包封,将LNP/mRNA-H1N1转染至HEK 293T细胞,通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫荧光显微镜对LNP/mRNA-H1N1的体外表达进行分析。进一步地,LNP/mRNA-H1N1以肌内注射途径免疫SPF级BALB/c小鼠,通过酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测LNP/mRNA-H1N1诱导的血凝素(hemagglutinin,HA)特异性血清免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)效价。通过血凝抑制(hemagglutination inhibition,HI)实验检测LNP/mRNA-H1N1诱导的HI效价。通过酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunosorbent spot assay,ELISpot)检测LNP/mRNA-H1N1诱导的细胞因子γ干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)分泌水平,最后,通过同型H1N1病毒攻击实验检测LNP/mRNA-H1N1的免疫保护效率。结果通过Western blot和免疫荧光显微镜均能检测到抗原蛋白HA的特异性表达,其相对分子质量约为75000。LNP/mRNA-H1N1经初次与加强免疫BALB/c小鼠后诱导产生了有意义的体液免疫应答、细胞免疫应答和HI效价。更为重要的是,LNP/mRNA-H1N1能提供100%的免疫保护效率。结论LNP/mRNA-H1N1是一种有效的甲型流感mRNA候选疫苗,为将来开展临床前大型动物的安评试验奠定了基础,也为开发其他亚型的流感mRNA疫苗或其他传染病疫苗提供了研究思路。 展开更多
关键词 即用型脂质纳米颗粒 mrna-H1N1 mrna候选疫苗 免疫原性 免疫保护效率
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“邵氏五针法”对哮喘大鼠血清中IL-4、IL-6及肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的影响 被引量:1
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作者 张淑宁 王培育 +8 位作者 张雪琳 李胜男 朱芷欣 邓云鹏 魏腾腾 何广帅 靳诺佳 刘高飞 杨旭光 《辽宁中医药大学学报》 2025年第11期127-131,共5页
目的观察针刺“肺俞”“大椎”“风门”对哮喘大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad家族成员Smad2基因表达的影响。方法选取40只大鼠分为空白组、模型组、针刺组和地塞米松组4组... 目的观察针刺“肺俞”“大椎”“风门”对哮喘大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)及肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad家族成员Smad2基因表达的影响。方法选取40只大鼠分为空白组、模型组、针刺组和地塞米松组4组,每组10只。通过腹腔注射卵蛋白加氢氧化铝混合物并用卵蛋白滴鼻激发的方法来制备慢性哮喘大鼠模型,空白组用0.9%氯化钠溶液代替。针刺组每周针刺“肺俞”“大椎”“风门”3次,每次20 min,地塞米松组每周腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液3次,空白组和模型组仅陪同抓取固定,不进行治疗。干预结束24 h后取材,苏木精-伊红(HE)染色对肺组织进行病理学检查;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-4、IL-6的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)测定TGF-β1和Smad2 mRNA在大鼠肺组织中的表达情况。结果与空白组相比,模型组大鼠支气管管壁和平滑肌可见明显增厚、管腔变窄,并有较多的炎性细胞浸润,大鼠血清中IL-4、IL-6和肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达量显著升高(P<0.01);与模型组相比,针刺组和地塞米松组大鼠气道炎症程度均降低,血清中IL-4、IL-6和肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达量均显著降低(P<0.01)。结论“邵氏五针法”可以通过下调大鼠血清中IL-4、IL-6及肺组织中TGF-β1、Smad2 mRNA的表达,减轻炎症细胞浸润,抑制平滑肌增厚和气道重塑,可作为针刺抗哮喘效应的机制之一。 展开更多
关键词 邵氏五针法 哮喘 气道重塑 白细胞介素-4 白细胞介素-6 转化生长因子-β1 mrna Smad家族成员2 mrna
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人淋巴细胞来源的外泌体mRNAs作为辐射生物标志物的筛选与验证
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作者 周瑞霞 刘俊 +4 位作者 陆雪 蔡恬静 闫娟 刘青杰 李爽 《癌变·畸变·突变》 2026年第1期41-47,70,共8页
目的:探讨电离辐射对人外周血B淋巴细胞系(AHH-1细胞)来源外泌体中mRNAs表达谱的影响,及其差异表达基因作为辐射生物标志物的可能性。方法:本研究以AHH-1细胞为模型,分别收集对照组和2、5 Gy^(60)Co γ射线照射后24 h的细胞培养上清,通... 目的:探讨电离辐射对人外周血B淋巴细胞系(AHH-1细胞)来源外泌体中mRNAs表达谱的影响,及其差异表达基因作为辐射生物标志物的可能性。方法:本研究以AHH-1细胞为模型,分别收集对照组和2、5 Gy^(60)Co γ射线照射后24 h的细胞培养上清,通过超高速差速离心法分离外泌体,并利用纳米颗粒追踪技术、透射电镜和Western blot方法对外泌体粒径、形态及表面标志蛋白(CD63与TSG101)进行检测。利用表达谱芯片筛选差异表达mRNAs,并进行GO与KEGG富集分析。为进一步探究候选基因的剂量效应关系和时间响应范围,采用0、1、2、4、6 Gy γ射线照射AHH-1细胞,并分别于照射后24和48 h收集外泌体样本,提取外泌体RNA,通过实时荧光定量PCR技术检测候选基因的mRNA相对表达水平。结果:与对照组相比,AHH-1细胞经2 Gy γ射线照射24 h后,外泌体中共鉴定出197个差异表达的mRNAs,其中184个表达上调、13个表达下调;经5 Gy γ射线照射后共鉴定出192个差异表达的mRNAs,其中170个表达上调、22个表达下调。生物信息学分析显示,这些表达变化的mRNAs可能通过参与TGF-β信号通路、ErbB信号通路等影响细胞增殖、凋亡。实时荧光定量PCR分析结果显示,0~6 Gy γ射线照射后24 h,ZNFX1、DDB2、SPDYE2B和CHD3 mRNA均呈现出显著上调的趋势;LENG8、FBXW7、AKAP1及ZGRF1 mRNA在0~4Gy γ射线照射后48 h显著上调,其中4 Gy γ射线照射后48 h的LENG8与FBXW7 m RNA表达水平约为对照组的3倍。结论:电离辐射可诱导AHH-1细胞来源外泌体的mRNAs表达谱发生显著改变,筛选出的差异表达基因(ZNFX1、DDB2、SPDYE2B、CHD3、LENG8、FBXW7、AKAP1和ZGRF1)具有成为电离辐射生物标志物的潜力。 展开更多
关键词 AHH-1细胞系 人外周血B淋巴细胞 外泌体 mrnaS 电离辐射 基因表达 生物标志物
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胃癌组织配对相关同源框1和基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平与胃癌临床病理特征和预后的相关性分析
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作者 黄海斌 沈家生 +1 位作者 朱沛枫 沈剑彬 《浙江中西医结合杂志》 2025年第7期602-607,614,共7页
目的 探讨配对相关同源框1(PRRX1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA在胃癌(GC)组织的表达及其与GC临床病理特征和预后的关系。方法 利用Ualcan数据库检索GC和正常胃组织PRRX1、MMP13 mRNA的表达水平。采用实时荧光定量PCR检测GC组织和癌... 目的 探讨配对相关同源框1(PRRX1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA在胃癌(GC)组织的表达及其与GC临床病理特征和预后的关系。方法 利用Ualcan数据库检索GC和正常胃组织PRRX1、MMP13 mRNA的表达水平。采用实时荧光定量PCR检测GC组织和癌旁组织PRRX1、MMP13 mRNA表达水平,探讨其与GC临床病理特征和预后的关系。采用免疫组织化学法检测PRRX1、MMP13蛋白表达。结果 Ualcan数据库显示,GC组织PRRX1[(35.78±9.01)比(7.39±2.44),P<0.01]、MMP13[(2.03±0.21)比(0.10±0.01),P<0.01]mRNA表达水平高于正常胃组织;实时荧光定量PCR结果显示,GC组织PRRX1[(2.64±0.24)比(1.01±0.12),P<0.01]、MMP13[(2.12±0.22)比(0.99±0.11),P<0.01]mRNA表达水平均高于癌旁组织;GC组织PRRX1、MMP13 mRNA表达水平与GC分化程度、脉管癌栓、淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关(P<0.05或P<0.01);GC组织PRRX1 mRNA表达水平与MMP13 mRNA呈正相关(P<0.01);PRRX1、MMP13 mRNA高表达组累积生存率均低于PRRX1、MMP13 mRNA低表达组(P<0.01)。免疫组织化学分析显示,与癌旁组织比较,GC组织PRRX1、MMP13蛋白高表达率明显升高(P<0.01)。结论 GC组织PRRX1、MMP13mRNA表达水平升高,二者均与GC临床病理特征和预后有关,可为临床诊治GC提供一定参考。 展开更多
关键词 胃癌 配对相关同源框1 mrna 基质金属蛋白酶13 mrna 预后 临床病理特征
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大黄鱼AUF1基因克隆及其促TNF-αmRNA降解活性分析
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作者 何志巧 汪慧娟 +3 位作者 郭盛泉 张晓林 严小军 申望 《水产学报》 北大核心 2025年第1期75-88,共14页
【目的】研究鱼类RNA结合蛋白AUF1对炎症因子mRNA表达的调节作用。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术克隆大黄鱼AUF1 mRNA的全长cDNA序列,命名为LcAUF1,并采用实时荧光定量PCR技术(RTqPCR)检测Lcauf1基因的组织表达特异性、大黄鱼主要... 【目的】研究鱼类RNA结合蛋白AUF1对炎症因子mRNA表达的调节作用。【方法】采用cDNA末端快速扩增技术克隆大黄鱼AUF1 mRNA的全长cDNA序列,命名为LcAUF1,并采用实时荧光定量PCR技术(RTqPCR)检测Lcauf1基因的组织表达特异性、大黄鱼主要免疫器官脾脏和肾脏Lcauf1基因表达对副溶血弧菌攻毒的时序响应,以及通过构建四环素调控表达载体过表达LcAUF1,研究LcAUF1对TNF-α mRNA表达水平的调节作用。【结果】LcAUF1 mRNA全长cDNA由266 bp的5′-非翻译区、954 bp的开放阅读框和193 bp的3′-非翻译区组成,开放阅读框编码317个氨基酸残基;蛋白质序列分析显示,哺乳动物AUF1氨基酸序列和功能结构域在LcAUF1中高度保守;组织表达检测发现Lcauf1在大黄鱼机体中广泛表达,采集的9个组织中均检测到Lcauf1转录本,其中肌肉组织表达水平最高;副溶血弧菌攻毒2 h和12 h肾脏以及攻毒24 h脾脏中Lcauf1表达水平显著下调;RAW264.7细胞过表达Lcauf1显著下调LPS处理0.5、3.0和6.0 h时Tnf-α表达水平;进一步研究显示过表达LcAUF1促进RAW264.7细胞Tnf-α mRNA降解。【结论】AUF1在脊椎动物进化中结构和功能高度保守,LcAUF1也通过促进mRNA降解下调TNF-α mRNA表达水平,提示LcAUF1可能是大黄鱼炎症因子表达的重要调节蛋白,参与调节大黄鱼抗感染炎症因子表达平衡。本研究为深入探讨LcAUF1在大黄鱼抗感染炎症因子表达平衡调控中的作用及其在大黄鱼感染性养殖病害防治中的应用价值提供了参考数据。 展开更多
关键词 大黄鱼 RNA结合蛋白 AU富集元件RNA结合蛋白1 mrna降解 炎症因子
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盐酸戊乙奎醚对嵌顿疝伴肠组织损伤患者自噬基因Beclin1 mRNA表达情况与血清乳酸脱氢酶水平的影响分析
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作者 武建斌 武国强 +1 位作者 赵志英 杨冬花 《中国社区医师》 2025年第6期42-44,共3页
目的:分析盐酸戊乙奎醚对嵌顿疝伴肠组织损伤患者自噬基因Beclin1 mRNA表达情况与血清乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响。方法:选取2021年1月—2022年12月乌兰察布市中心医院收治的自嗜嵌顿疝伴肠组织损伤患者60例作为研究对象,随机分为对照... 目的:分析盐酸戊乙奎醚对嵌顿疝伴肠组织损伤患者自噬基因Beclin1 mRNA表达情况与血清乳酸脱氢酶(LDH)水平的影响。方法:选取2021年1月—2022年12月乌兰察布市中心医院收治的自嗜嵌顿疝伴肠组织损伤患者60例作为研究对象,随机分为对照组与观察组,各30例。两组均接受手术治疗,术后,观察组静脉推注盐酸戊乙奎醚,对照组静脉推注生理盐水。比较两组自噬基因Beclin1 mRNA表达情况及血清LDH水平。结果:治疗前,两组自噬基因Beclin1 mRNA、LDH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组自噬基因Beclin1 mRNA、LDH水平低于治疗前及同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:盐酸戊乙奎醚能够抑制嵌顿疝伴肠组织损伤患者自噬基因Beclin1 mRNA表达,降低血清LDH水平。 展开更多
关键词 盐酸戊乙奎醚 嵌顿疝 肠组织损伤 自噬基因Beclin1 mrna 血清乳酸脱氢酶
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IGF2BP3和UXS1在肝细胞癌中的表达、靶向调控及协同作用机制
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作者 邓玉龙 韦莲青 +2 位作者 吴星辰 谢晓婷 熊丹丹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2026年第1期66-76,共11页
目的:探讨胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)、尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸脱羧酶1(UXS1)在肝细胞癌(HCC)中的表达特征、预后价值及两者协同作用的分子机制。方法:整合UALCAN、cBioPortal、ENCORI、TISCH2、GDSC等公共数据库的转录... 目的:探讨胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)、尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸脱羧酶1(UXS1)在肝细胞癌(HCC)中的表达特征、预后价值及两者协同作用的分子机制。方法:整合UALCAN、cBioPortal、ENCORI、TISCH2、GDSC等公共数据库的转录组数据,对IGF2BP3和UXS1进行表达、预后评估、功能富集及药物敏感性等分析。收集GEO数据库的单细胞RNA测序(sc RNAseq)数据,分析细胞通信、单细胞代谢评分,系统解析IGF2BP3-UXS1轴在HCC中的具体作用。结果:IGF2BP3、UXS1在HCC组织中均显著高表达,且高表达患者总生存期显著缩短(均P<0.05)。采用CRISPP技术敲除IGF2BP3或UXS1后,多种HCC细胞的增殖能力受到明显抑制。sc RNA-seq分析揭示了IGF2BP3、UXS1在肝细胞等细胞类型中的广泛表达分布,前者在细胞分化晚期上调,后者则在细胞分化早、中期高表达。IGF2BP3、UXS1高表达组均显著激活了MIF通路,同时IGF2BP3的高表达削弱了成纤维细胞的相互作用,而UXS1的高表达则增强了T细胞的信号转导功能。IGF2BP3与UXS1在表达相关性中存在显著的正相关(r=0.432,P<0.05)。沉默IGF2BP3结合位点会导致UXS1表达水平变化(F=0.333)。功能富集分析提示,IGF2BP3与UXS1协同调控能量代谢、蛋白质翻译等生物学过程。在IGF2BP3或UXS1高表达的细胞亚群中,发现两者与多个糖代谢相关通路存在显著关联。IGF2BP3、UXS1高表达的患者对优普色替等药物表现出显著的敏感性,还对药物那维托克等表现出显著的耐药性。结论:IGF2BP3、UXS1在HCC中高表达,两者通过调控糖代谢重编程的协同作用促进HCC恶性生物学行为。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子2 mrna结合蛋白3 尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸脱羧酶1 糖代谢重编程 单细胞测序 巨噬细胞迁移抑制因子通路
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N6-甲基腺嘌呤-胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1通过促进甾醇邻酰基转移酶1表达调节心力衰竭的机制研究
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作者 钟妮尔 王菲 +1 位作者 邓纪钊 杨光 《临床内科杂志》 2025年第3期237-242,共6页
目的 探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)和甾醇邻酰基转移酶1(SOAT1)在心力衰竭(HF)中的分子机制。方法 分离获取大鼠心肌细胞,将其分为对照组、缺氧模型组、sh-NC组、sh-SOAT1组、sh-METTL3组、sh-METTL3+Vector组、sh-ME... 目的 探讨胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)和甾醇邻酰基转移酶1(SOAT1)在心力衰竭(HF)中的分子机制。方法 分离获取大鼠心肌细胞,将其分为对照组、缺氧模型组、sh-NC组、sh-SOAT1组、sh-METTL3组、sh-METTL3+Vector组、sh-METTL3+pcDNA-SOAT1组、sh-IGF2BP1组、sh-IGF2BP1+Vector组、sh-IGF2BP1+pcDNA-SOAT1组。对照组细胞在正常氧环境培养,其余各组均在缺氧环境培养。采用Me-RIP分析SOAT1 mRNA的N6-甲基腺嘌呤(m6A)富集水平;RIP分析验证SOAT1 mRNA与METTL3和IGF2BP1蛋白的结合情况;检测细胞活力、细胞凋亡率、活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖摄取、IL-1β及肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。通过横向主动脉收缩(TAC)手术构建HF模型,将64只雄性SD大鼠随机分为假手术组、HF组、HF+LV-NC组、HF+sh-SOAT1组、HF+sh-SOAT1+METTL3组和HF+sh-SOAT1+IGF2BP1组,术后均饲养4周。采用超声心动图分析左心室的功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色分析梗死面积,Western blot检测SOAT1、METTL3和IGF2BP1蛋白表达水平。结果 与对照组比较,缺氧模型组SOAT1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高,细胞活力和葡萄糖摄取水平减少,细胞凋亡率、ROS、LDH、IL-1β、TNF-α水平均升高;与sh-NC组比较,sh-METTL3组、sh-IGF2BP1组和shSOAT1组SOAT1的mRNA和蛋白表达水平均降低,细胞活力和葡萄糖摄取水平增多,细胞凋亡率、ROS、LDH、IL-1β、TNF-α水平均降低(P <0.05)。与sh-NC组比较,sh-METTL3组Anti-METTL3抗体下拉的复合物中m6A修饰的SOAT1 mRNA减少,sh-IGF2BP1组SOAT1 mRNA的半衰期更短;分别与sh-METTL3+vector组和sh-IGF2BP1+vector组比较,sh-METTL3+pcD NA-SOAT1组和shIGF2BP1+pcD NA-SOAT1组细胞活力均更低、细胞凋亡均更高(P <0.05)。动物实验结果显示,与假手术组比较,HF组大鼠心脏组织中SOAT1、METTL3和IGF2BP1蛋白表达水平均升高,心脏梗死面积增大,心脏功能发生障碍[左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴收缩率(LVFS)、左心室最大压力和dP/dt均降低,左心室舒张内径和收缩内径(LVID,d和LVID,s)]均增大;HF+sh-SOAT1组大鼠心脏梗死面积比HF+LV-NC组减小,心脏功能得到改善;而HF+sh-SOAT1+METTL3组和HF+sh-SOAT1+IGF2BP1组大鼠心脏功能障碍进一步加剧(P <0.05)。结论 IGF2BP1通过识别METTL3-m6A介导的SOAT1 mRNA促进其稳定性,上调SOAT1蛋白表达水平,从而促进HF发生与发展。 展开更多
关键词 心力衰竭 RNA N6腺苷甲基化 甾醇邻酰基转移酶1 甲基转移酶样蛋白3 胰岛素样生长因子-2 mrna结合蛋白1
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EV71vp1线性mRNA转录载体的构建
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作者 马明鑫 赵霞 +5 位作者 曹小花 郑亮 Matthew Kay 吴志军 许晓娟 张华 《中国病原生物学杂志》 北大核心 2025年第11期1389-1392,共4页
目的 针对肠道病毒71型(EV71)的VP1蛋白构建线性mRNA转录载体,并进行细胞转染验证VP1蛋白表达,为开发手足口病mRNA疫苗提供技术支撑。方法 应用PCR技术获得vp1基因,在其上游和下游分别引入5'UTR、3'UTR和poly(A)尾,通过基因克... 目的 针对肠道病毒71型(EV71)的VP1蛋白构建线性mRNA转录载体,并进行细胞转染验证VP1蛋白表达,为开发手足口病mRNA疫苗提供技术支撑。方法 应用PCR技术获得vp1基因,在其上游和下游分别引入5'UTR、3'UTR和poly(A)尾,通过基因克隆技术构建出EV71 vp1线性mRNA转录载体pcDNA3.1-EV71-VP1。在PCR、酶切和测序鉴定转录载体后,体外转录出修饰的vp1 mRNA。将转录载体和vp1 mRNA转染HeLa细胞,采用Western blot和免疫荧光验证VP1蛋白的表达。结果 转录载体通过PCR扩增和双酶切都可得到891 bp的vp1基因和1 448 bp的基因片段,与预期相符。体外转录出的vp1 mRNA大小约1 448 bp,与理论值相符。转录载体和vp1 mRNA转染HeLa细胞后,Western blot可检测到38 ku大小的特异性条带,免疫荧光试验也检测到VP1蛋白的正确表达。结论 成功构建了EV71 vp1线性mRNA转录载体,为其免疫学评价奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒71 VP1蛋白 转录载体 蛋白表达 mrna疫苗
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敲低Cav1基因可抑制小鼠肝细胞线粒体功能及关键基因mRNA的m^(6)A修饰和表达
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作者 丁珊珊 廖颖 +2 位作者 白雪 黄娇阳 浅川哲也 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第12期2607-2615,共9页
目的 探讨Cav1对小鼠肝细胞线粒体功能和mRNA的m6A甲基化修饰及表达水平的影响。方法 采用慢病毒转染敲低小鼠肝细胞AML12中Cav1基因的表达(shCav1组),转染阴性对照病毒作为对照组。采用TMRE荧光探针检测线粒体膜电位变化,结合Seahorse... 目的 探讨Cav1对小鼠肝细胞线粒体功能和mRNA的m6A甲基化修饰及表达水平的影响。方法 采用慢病毒转染敲低小鼠肝细胞AML12中Cav1基因的表达(shCav1组),转染阴性对照病毒作为对照组。采用TMRE荧光探针检测线粒体膜电位变化,结合Seahorse能量代谢分析系统检测线粒体呼吸功能。采用甲基化RNA免疫共沉淀技术(MeRIP)联合m^(6)A表观转录组芯片检测mRNA的m^(6)A甲基化修饰和表达水平变化,通过富集分析筛选线粒体功能相关基因,并用qPCR验证目标基因mRNA的m^(6)A修饰和表达水平。结果 与对照组相比,shCav1组线粒体膜电位(P<0.05)和线粒体呼吸能力降低(P<0.01)。m^(6)A表观转录组芯片检测结果显示,shCav1组有7814个mRNA的m^(6)A甲基化修饰水平发生变化(变化倍数>1.5,P<0.05),其中152个上调、7662个下调。联合表达差异分析显示,有2497个mRNA的m^(6)A甲基化修饰和表达水平存在协同变化。协同变化的mRNA富集到氧化磷酸化通路,其中Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m^(6)A甲基化修饰变化百分比最高。芯片和qPCR结果均显示shCav1组中Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m^(6)A修饰和表达水平均较对照组降低(P<0.05)。结论 Cav1敲低的小鼠肝细胞mRNA的m^(6)A甲基化修饰变化显著,该变化与mRNA的表达有关,Cav1对线粒体功能的调节作用可能依赖于其对Usp15、Suclg2、Ppa2 mRNA的m^(6)A修饰调控。 展开更多
关键词 Cav1基因 m^(6)A RNA甲基化 mrna表达 线粒体膜电位 线粒体呼吸
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The regulatory role of ZFAS1/miRNAs/mRNAs axis in cancer:a systematic review
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作者 RAHUL KUMAR SINGH SUROJIT MANDAL +9 位作者 ADRIJA MOHANTA RITU YADAV RAJIV RANJAN KUMAR RINKU KHATKAR VIVEK UTTAM UTTAM SHARMA MANJIT KAUR RANA MANJU JAIN HARDEEP SINGH TULI AKLANK JAIN 《Oncology Research》 2025年第3期591-604,共14页
Objectives:Recently,we and others have demonstrated the involvement of Zinc Finger Antisense 1(ZFAS1)in cancer development.However,the intricate interplay of ZFAS1 with miRNAs and mRNAs remains to be fully understood.... Objectives:Recently,we and others have demonstrated the involvement of Zinc Finger Antisense 1(ZFAS1)in cancer development.However,the intricate interplay of ZFAS1 with miRNAs and mRNAs remains to be fully understood.Materials and methods:We followed PRISMA guidelines to retrieve and assess the available literature on the topic“ZFAS1/miRNA/mRNA axis”and“Cancer”from databases such as PubMed,Google Scholar,and ScienceDirect.We also used bioinformatic webtools for analyzing the potential miRNA targets of ZFAS1 and its role in survival of cancer patients along with their role in various biological functions and pathways.Results:Our literature search and bioinformatic analysis reveals that ZFAS1 serves as a sponge for numerous miRNAs.Among the various targeted miRNAs,miR-150-5p stands out as significantly correlated with ZFAS1 across multiple databases(p-value=3.27e-16,R-value=-0.346).Additionally,our Kaplan-Meier survival analysis indicates a noteworthy association between ZFAS1 expression levels and overall poor prognosis and survival rates in ovarian,sarcoma,and pancreatic cancers.We also underscore the involvement of various signaling pathways,including Signal Transducer and Activator of Transcription 3(STAT3),Spindle and Kinetochore-associated Protein 1(SKA1),Lysophosphatidic acid receptor 1(LPAR1),and Wntβ-catenin,in cancer development through the ZFAS1/miRNAs/mRNAs axis.Furthermore,we identify ZFAS1’s pivotal roles in diverse molecular processes,such as RNA binding and ribonucleoprotein formation.Conclusion:In conclusion,this review comprehensively summarizes the latest advancements in understanding the regulatory relationships among ZFAS1,miRNAs,and mRNAs,emphasizing their collective role in cancer development to propose innovative avenues for cancer treatment.We believe that the intricate relationship among the ZFAS1-miRNA-mRNA axis may yield potential therapeutic targets for effective cancer management. 展开更多
关键词 LncRNA MIRNA mrnaS Zinc finger antisense 1(ZFAS1) Cancer biomarker
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mRNA-miRNA Transcriptomics Analysis of Mechanism of Quercetin Inhibiting Sune-1 Cell Activities
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作者 Qihuang LIN Wenwen LU Shuning YANG 《Medicinal Plant》 2025年第2期49-54,共6页
[Objectives]To further explore the mechanism of quercetin regulating the activity of Sune-1 cells.[Methods]High-throughput mRNA-miRNA transcriptome sequencing technology was used to screen miRNA in Sune-1 cells treate... [Objectives]To further explore the mechanism of quercetin regulating the activity of Sune-1 cells.[Methods]High-throughput mRNA-miRNA transcriptome sequencing technology was used to screen miRNA in Sune-1 cells treated with quercetin.[Results]Statistical analysis showed that 1264 miRNAs were differentially expressed in Sune-1 cells treated with quercetin,of which 716 were significantly up-regulated and 548 were significantly down-regulated;191 miRNAs were differentially expressed in Sune-1 cells treated with quercetin,of which 129 were significantly up-regulated and 62 were significantly down-regulated.By comparing the expression differences of these mRNAs and miRNAs in different samples,six different expression patterns were clustered.The expression of the above miRNAs was verified by real-time quantitative PCR(qPCR),and the results were highly consistent with the transcriptome sequencing data.In addition,Gene Ontology annotation and functional enrichment analysis of miRNA target genes showed that CTGF,VHL and H19,which are related to the regulation of cell proliferation signal transduction,were predicted to be new targets of differential miRNAs such as miR494-3p and miR675-3p and may play an important regulatory role in the process of Quercetin inhibiting the proliferation of Sune-1 cells.[Conclusions]This study provides a basis for the rational use of anti-tumor functional components of traditional Chinese medicine,and also provides a theoretical basis for the targeted therapy of nasopharyngeal carcinoma. 展开更多
关键词 QUERCETIN Sune-1 cells miRNA transcriptome mrna transcriptome Cell proliferation
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长链非编码RNA NEAT1/ILF3通过增强CDK6 mRNA的稳定性促进喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移
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作者 梁冀望 朱相宇 +1 位作者 杨骁 赵月皎 《解剖科学进展》 2025年第1期13-16,20,共5页
目的探究lncRNA NEAT1对喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响,并进一步探究其机制。方法将敲减lncRNA NEAT1慢病毒转染喉鳞状细胞癌AMC-HN-8细胞建立稳定敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞系,RT-qPCR检测细胞lncRNANEAT1表达,CCK-8方法... 目的探究lncRNA NEAT1对喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响,并进一步探究其机制。方法将敲减lncRNA NEAT1慢病毒转染喉鳞状细胞癌AMC-HN-8细胞建立稳定敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞系,RT-qPCR检测细胞lncRNANEAT1表达,CCK-8方法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移能力。将稳定转染的细胞皮下注射裸鼠,测量肿瘤体积和质量。将CDK6过表达质粒转染敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞,Western blot检测细胞CDK6蛋白表达,CCK8和Transwell实验检测过表达CDK6对敲减lncRNA NEAT1的喉鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响。RIP实验验证lncRNA NEAT1与ILF3蛋白结合。用放线菌素D处理喉鳞状细胞癌细胞,RT-qPCR检测过表达ILF3对敲减lncRNA NEAT1的细胞或沉默ILF3对过表达lncRNA NEAT1的细胞CDK6 mRNA降解的影响。结果敲减lncRNA NEAT1降低AMC-HN-8细胞增殖活性,抑制细胞迁移能力,降低细胞移植瘤体积和质量,下调AMC-HN-8细胞中CDK6蛋白表达。过表达CDK6逆转了敲减lncRNA NEAT1对AMC-HN-8细胞增殖和迁移的抑制作用。lncRNA NEAT1与ILF3蛋白结合。过表达ILF3不影响敲减lncRNA NEAT1对LSCC细胞CDK6 mRNA降解的促进作用,而沉默ILF3逆转了过表达lncRNA NEAT1对LSCC细胞CDK6 mRNA降解的抑制作用。结论lncRNA NEAT1通过上调CDK6促进LSCC细胞体外增殖和迁移能力和体内肿瘤生长,其机制与其结合ILF3并增强CDK6 mRNA的稳定性有关。 展开更多
关键词 LncRNA NEAT1 喉鳞状细胞癌 ILF3 CDK6 mrna稳定性 增殖 迁移
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CYMP-AS1 Promotes Ovarian Cancer Progression by Enhancing the Intracellular Translocation of hnRNPM and Reducing the Stability of AXIN2 mRNA
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作者 Yuhan Wang Yimei Meng +4 位作者 Wanqiu Xia Yusen Liang Yaru Wang Peiling Li Lei Fang 《Oncology Research》 2025年第8期2141-2159,共19页
Background:Ovarian cancer(OC)is a representative malignancy of the female reproductive system,with a poor prognosis.Long non-coding RNAs(lncRNAs)crucially affect tumor development.This study aimed to identify lncRNAs ... Background:Ovarian cancer(OC)is a representative malignancy of the female reproductive system,with a poor prognosis.Long non-coding RNAs(lncRNAs)crucially affect tumor development.This study aimed to identify lncRNAs that potentially participated in OC.Methods:LncRNA expression in cells and tissues was quantified using reverse transcription-quantitative PCR,while fluorescence in situ hybridization determined their cellular localization.Various in vitro assays,together with a mouse xenograft model,were employed to elucidate the function of CYMP antisense RNA 1(CYMP-AS1)in OC.The molecular mechanisms underlying CYMP-AS1 regulation were investigated through RNA pull-down and immunoprecipitation assays,immunofluorescence staining,western blotting,and mRNA stability assays.Results:This study identified a previously unreported lncRNA,CYMP-AS1,which exhibits increased expression in the cytoplasm of OC tissues and cells.Knockout of CYMP-AS1 reduced the OC cell proliferation,migration,invasion,and epithelial-mesenchymal transition(EMT).CYMP-AS1 directly interacts with heterogeneous nuclear ribonucleoprotein M(hnRNPM),inducing its intracellular translocation and reducing the stability of Axis inhibition protein 2(AXIN2)mRNA.This process ultimately elevated the expression of Wnt/β-catenin signaling pathway-related proteins.Conclusion:This study confirms CYMP-AS1 as a novel biomarker in OC progression and suggests that the CYMP-AS1/hnRNPM/AXIN2 axis may offer an innovative strategy for OC treatment. 展开更多
关键词 CYMP antisense RNA 1(CYMP-AS1) heterogeneous nuclear ribonucleoproteinM(hnRNPM) mrna stability ovarian cancer(OC) long non-coding RNAs(lncRNAs)
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基于mRNA技术的抗风疹病毒中和血清制备及鉴定
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作者 赵美依 诸珏珉 +5 位作者 徐晓竹 高飞霞 邹星 熊斐斐 罗剑 马雷钧 《中国生物制品学杂志》 2026年第2期217-221,228,共6页
目的采用mRNA技术制备抗风疹病毒(rubella virus,RuV)中和血清,并进行鉴定,以期用于麻疹-腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗(measles,mumps and rubella vaccine,MMR)鉴别和病毒滴度检测。方法构建表达RuV BRDⅡ疫苗株及2B基因型野毒株E1蛋白的... 目的采用mRNA技术制备抗风疹病毒(rubella virus,RuV)中和血清,并进行鉴定,以期用于麻疹-腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗(measles,mumps and rubella vaccine,MMR)鉴别和病毒滴度检测。方法构建表达RuV BRDⅡ疫苗株及2B基因型野毒株E1蛋白的mRNA脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)疫苗,并通过Western blot和间接免疫荧光法验证其在293T细胞中的表达。用2种mRNA-LNP疫苗及风疹减毒活疫苗分别免疫豚鼠,制备抗血清,采用间接ELISA法检测血清中RuV E1蛋白特异性IgG抗体效价,微量中和法测定中和抗体效价,并评估血清对腮腺炎病毒和麻疹病毒的交叉干扰作用。结果2种mRNA-LNP疫苗粒径分别为71.69和70.77 nm,包封率均>85%,可在293T细胞中有效表达E1蛋白。2种mRNA-LNP疫苗免疫豚鼠后产生的E1蛋白特异性IgG抗体效价及中和抗体效价均显著高于风疹减毒活疫苗(F分别为20.38~37.94和10.63~21.59,P分别为<0.001和<0.05),且该血清仅特异性中和RuV,对麻疹病毒和腮腺炎病毒无交叉干扰。结论基于mRNA技术成功制备了高效价、高特异性的抗RuV中和血清,适用于MMR疫苗的质量检定,并为风疹疫苗的研发提供了新策略。 展开更多
关键词 风疹病毒 E1蛋白 中和血清 mrna疫苗 特异性
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非小细胞肺癌中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达及意义 被引量:22
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作者 姜昕 周建华 +3 位作者 邓征浩 屈晓辉 蒋海鹰 刘英 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期276-279,共4页
目的探讨Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化SP法和原位杂交法分别检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1、HIF-1、V... 目的探讨Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织的表达及其临床病理学意义。方法采用免疫组化SP法和原位杂交法分别检测65例NSCLC组织、15例正常支气管上皮组织中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达。结果Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为81.5%(53/65)、96.9%(63/65)、93.8%(61/65)、73.8%(48/65),均明显高于正常支气管上皮组织阳性表达率(P<0.05);NSCLC中Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA的表达均与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Notch1、HIF-1与VEGF蛋白间均正相关;Notch1蛋白与Notch1 mRNA的表达呈正相关。结论Notch1、HIF-1、VEGF蛋白及Notch1 mRNA在NSCLC中均表达上调,提示在肺癌的发生、发展中可能起重要作用;检测NSCLC组织Notch1蛋白及mRNA可作为判断肿瘤侵袭与转移的重要指标。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 NOTCH1 HIF-1 VEGF NOTCH1 mrna
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鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠关节滑膜组织MMP_3和TIMP-1mRNA表达的影响 被引量:27
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作者 鞠大宏 张春英 +6 位作者 吴皓 贾红伟 刘铭福 赵宏艳 肖诚 刘梅洁 李艳 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期27-28,31,共3页
目的 :探讨鹿瓜多肽注射液治疗类风湿性关节炎 (RA)的机理。方法 :以Ⅱ型胶原 (CⅡ )诱导的免疫性关节炎 (CIA)大鼠为RA动物模型 ,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分 ,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果 ,并取膝关节... 目的 :探讨鹿瓜多肽注射液治疗类风湿性关节炎 (RA)的机理。方法 :以Ⅱ型胶原 (CⅡ )诱导的免疫性关节炎 (CIA)大鼠为RA动物模型 ,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分 ,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果 ,并取膝关节滑膜切片进行原位杂交 ,用图像分析系统检测MMP3 和TIMP 1mRNA表达水平。结果 :与模型组比较 ,鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻。模型组大鼠滑膜组织MMP3 mRNA表达阳性密度明显高于正常对照组 ,而TIMP 1mRNA表达阳性密度明显低于正常对照组。鹿瓜多肽组大鼠滑膜组织MMP3 表达降低 ,TIMP 1表达增高。结论 :鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用 ,其机理可能与抑制滑膜组织MMP3 mRNA表达并促进TIMP 1mRNA表达有关。 展开更多
关键词 鹿瓜多肽注射液 类风湿性关节炎 免疫性关节炎 MMP3 mrna TIMP-1 mrna
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