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基于LDLR/MEK/ERK信号通路探讨加减薯蓣丸调控VTA-NAc环路髓鞘改善血管性痴呆小鼠抑郁行为的作用机制
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作者 景松 谭子虎 杨琼 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第16期4555-4563,共9页
探讨加减薯蓣丸对血管性痴呆(vascular dementia,VaD)小鼠抑郁行为的作用及可能机制。3月龄雄性C57BL/6小鼠72只,分为假手术组,模型组,加减薯蓣丸低、中、高剂量组,氟西汀组。除假手术组外,其余5组小鼠采用双侧颈总动脉狭窄术结合慢性... 探讨加减薯蓣丸对血管性痴呆(vascular dementia,VaD)小鼠抑郁行为的作用及可能机制。3月龄雄性C57BL/6小鼠72只,分为假手术组,模型组,加减薯蓣丸低、中、高剂量组,氟西汀组。除假手术组外,其余5组小鼠采用双侧颈总动脉狭窄术结合慢性不可预测刺激。糖水偏好实验、悬尾实验检测抑郁行为,激光散斑成像检测脑血流量,蛋白免疫印迹检测小鼠中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area,VTA)和伏隔核(nucleus accumbens,NAc)脑区的低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)、磷酸化(p)-MEK、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、p-ERK蛋白表达,免疫荧光法检测VTA和NAc脑区髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)荧光表达水平,固蓝染色观察小鼠VTA和NAc的髓鞘形态,透射电镜观察小鼠VTA和NAc髓鞘微观结构。抑郁相关的行为学实验表明,与假手术组相比,模型组小鼠悬尾实验不动时间显著增加(P<0.01),糖水偏好率显著降低(P<0.01);加减薯蓣丸干预后,小鼠悬尾实验不动时间显著缩短(P<0.01),糖水偏好率显著增加(P<0.01)。激光散斑成像结果显示,与假手术组同时间比较,模型组小鼠脑血流量显著下降(P<0.01);与模型组相比,加减薯蓣丸中、高剂量组小鼠脑血流量显著增加(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验表明,与假手术组相比,模型组小鼠VTA和NAc脑区中LDLR、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK水平显著下降(P<0.01);加减薯蓣丸中、高剂量能显著逆转这一趋势(P<0.01)。免疫荧光实验表明,与假手术组相比,模型组小鼠VTA和NAc脑区中MBP荧光强度显著降低(P<0.01);进一步分析VTA脑区的MBP荧光强度,与模型组相比,加减薯蓣丸中、高剂量组荧光强度显著升高(P<0.01);在NAc脑区加减薯蓣丸各剂量组MBP荧光强度有不同程度的增加(P<0.01)。固蓝染色实验表明,与假手术组相比,模型组小鼠染色着色程度变浅,髓鞘纤维排列变得较为疏松,这一现象提示模型组小鼠存在显著的脱髓鞘病变;但在中、高剂量加减薯蓣丸干预下,VTA与NAc脑区染色程度及髓鞘结构得到改善。透射电镜结果显示,假手术组VTA和NAc髓鞘完整且致密;模型组存在广泛的髓鞘丢失,髓鞘出现变性、崩解;给予加减薯蓣丸干预后,小鼠VTA和NAc的髓鞘丢失程度减轻,有髓鞘包绕组织的比例变大。综上,加减薯蓣丸改善VaD小鼠抑郁样行为的机制可能为上调LDLR/MEK/ERK信号通路促进VTA-NAc环路髓鞘再生。 展开更多
关键词 血管性痴呆(VaD) 抑郁行为 加减薯蓣丸 ldlr/MEK/ERK VTA-NAc 髓鞘
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LXR-IDOL-LDLR轴在脂质平衡中作用研究进展 被引量:2
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作者 周鑫斌 武丽 毛威 《浙江中医药大学学报》 CAS 2014年第9期1131-1134,共4页
[目的]综述新近发现的IDOL蛋白(Inducibledegrader of the low-density lipoprotein receptor)对低密度脂蛋白受体(low-densitylipoprotein receptor,LDLR)调节作用及肝X受体(LXR)-IDOL-LDLR轴在脂代谢平衡稳态中作用的研究进展。[方法... [目的]综述新近发现的IDOL蛋白(Inducibledegrader of the low-density lipoprotein receptor)对低密度脂蛋白受体(low-densitylipoprotein receptor,LDLR)调节作用及肝X受体(LXR)-IDOL-LDLR轴在脂代谢平衡稳态中作用的研究进展。[方法]查阅近年来国内外研究IDOL及LXRIDOL通路的相关文献,并归纳总结其在脂代谢中的作用。[结果]IDOL能在转录后水平介导LDLR及其家族其他成员(VLDLR、ApoER2)的泛素化降解,该作用独立于固醇调节元件结合蛋白(SREBP)途径且受LXR的调节。[结论]LXR-IDOL通路能通过IDOL依赖途径泛素化降解LDLR,调节LDLR水平及LDL摄取,从而在脂代谢平衡中发挥重要作用。LXR-IDOL-LDLR轴可能为脂质代谢紊乱及心血管疾病提供新的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 ldlr诱导降解蛋白 肝脏X受体 ldlr 脂质代谢
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LDL、oxLDL对THP-1巨噬细胞PCSK9、LDLR表达的影响研究 被引量:10
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作者 刘录山 程艳丽 +6 位作者 谢闵 杨琼 潘利红 姜志胜 唐朝克 危当恒 唐志晗 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第5期540-547,共8页
为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染... 为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测THP-1巨噬细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blot检测THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达.结果发现,不同浓度LDL处理THP-1巨噬细胞后,随着LDL浓度的增大,细胞内脂滴数目略有增多.免疫荧光染色发现,PCSK9在THP-1巨噬细胞上的表达随LDL浓度的增加而增多,胞浆内定位于某一特定细胞器中;RT-PCR、Western blot检测发现,LDL可以呈浓度依赖性下调THP-1巨噬细胞中LDLR的表达和上调PCSK9的表达.不同浓度oxLDL处理THP-1巨噬细胞后,随oxLDL浓度的增大,脂滴颗粒明显增加;oxLDL处理对THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达影响均不明显.研究结果表明:THP-1巨噬细胞上,同时有PCSK9和LDLR的表达,且PCSK9定位于胞浆中某一特定细胞器;oxLDL对THP-1巨噬细胞LDLR和PCSK9表达没有影响;LDL能够降低THP-1巨噬细胞表面LDLR的表达,同时上调PCSK9表达,初步说明在THP-1巨噬细胞中,两者有一定的相关性. 展开更多
关键词 低密度脂蛋白(LDL) 氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL) PCSK9/NARC-1 低密度脂蛋白受体(ldlr) 动脉粥样硬化 THP-1巨噬细胞
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PCSK9/LDLR通路介导姜黄素烟酸酯促进HepG2摄取脂质 被引量:10
4
作者 张彩平 孙少卫 +6 位作者 龚勇珍 欧露 林丽美 郑兴 庹勤慧 雷小勇 廖端芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第9期825-832,共8页
为研究PCSK9/LDLR通路介导姜黄素烟酸酯(CurTn)降低血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),减少动脉内膜下脂质沉积的分子机制,用5、10、15μmo/L姜黄素烟酸酯与25 mg/L LDL共孵育Hep G2细胞24 h,分别采用油红O染色、胆固醇荧光定量试剂盒、Di ... 为研究PCSK9/LDLR通路介导姜黄素烟酸酯(CurTn)降低血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),减少动脉内膜下脂质沉积的分子机制,用5、10、15μmo/L姜黄素烟酸酯与25 mg/L LDL共孵育Hep G2细胞24 h,分别采用油红O染色、胆固醇荧光定量试剂盒、Di I-LDL摄取检测细胞内胆固醇含量及LDL摄取情况,用逆转录定量聚合酶链反应(RT-Q-PCR)检测LDLR及SREBP2的m RNA表达,蛋白质印迹检测LDLR、SREBP2及PCSK9蛋白表达.随姜黄素烟酸酯作用浓度的增高细胞内脂滴显著增多,细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)含量增高,细胞内胆固醇摄取增多;RT-Q-PCR和蛋白质印迹检测发现,与对照组(Control)比较,5、10、15μmo/L姜黄素烟酸酯处理组LDLR蛋白表达增高,SREBP2 mRNA表达水平升高,PCSK9蛋白表达降低,但对LDLR mRNA及SREBP2蛋白表达无影响.结果表明:姜黄素烟酸酯通过降低PCSK9、减少LDLR降解、升高LDLR蛋白表达,促进HepG2细胞胆摄取胆固醇.初步说明CurTn可能通过抑制PCSK9介导LDLR溶酶体降解,促进肝脏清除血浆LDL-C水平. 展开更多
关键词 姜黄素烟酸酯(CurTn) 低密度脂蛋白受体(ldlr) 低密度脂蛋白(LDL) 前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9型(PCSK9) 胆固醇调节元件结合蛋白2型(SREBP2)
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apoE/LDLR双基因缺失幼龄小鼠主动脉中动脉粥样硬化相关基因的表达 被引量:13
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作者 戴学栋 尹苗 +7 位作者 荆文 杜会芹 叶红燕 商允菊 张晾 邹艳艳 曲志萍 潘杰 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期43-50,共8页
利用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测11个动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)相关基因在1、2和3月龄的载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)/低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor, LDLR)双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠主... 利用RT-PCR以及实时定量RT-PCR检测11个动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)相关基因在1、2和3月龄的载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)/低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor, LDLR)双基因缺失(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠主动脉中的表达变化,同时应用血生化指标和病理形态学观察AS 早期病变特点,探讨apoE和LDLR 基因联合缺失引发的血脂代谢紊乱和血管炎症损伤的关系以及AS 的炎症反应机制。结果显示,apoE-/-/LDLR-/-小鼠IL-1β、TLR2、MCP-1、ICAM-1、VCAM-1、GM-CSF、CD36和 ET-1表达在1月龄时较同龄野生型(wild type, WT)小鼠显著上调(P<0.05, P<0.01),PDGF-α和TNF-α表达在2 月龄时较同龄WT 小鼠显著上调,除ET-1表达在2龄时以及TLR2、VCAM-1和ICAM-1表达在3月龄时降至WT小鼠水平以外,其余各基因表达随年龄增长继续升高(P<0.05, P<0.01),其中 MCP-1 表达在 2 月龄时达到峰值。NF-κB在各年龄段apoE-/-/LDLR-/-小鼠中的表达与同龄WT 小鼠相比均无显著差异。各年龄段apoE-/-/LDLR-/- 小鼠血清TC、TG、LDL、HDL、TNF-α、IL-1β和 ox-LDL含量均显著高于同龄WT小鼠(P<0.05, P<0.01),并随年龄增长逐渐升高。apoE-/-/LDLR-/-小鼠1月龄时主动脉内膜出现少量的散在的脂质沉积,随着年龄增长病变区域增多,脂质沉积增厚。上述结果提示:apoE 和LDLR 双基因缺失形成的高脂血症可能通过刺激主动脉中炎症基因时序表达,起始并扩大病变部位的炎症反应,共同促进AS的发生发展。 展开更多
关键词 apoEE^-/-/ldlrE^-/-小鼠 动脉粥样硬化 主动脉 RT-PCR 动脉粥样硬化相关基因
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高脂饮食诱导APOE和LDLR基因敲除鼠AS斑块形成的分子病理学特征 被引量:11
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作者 周军 周丽 曾庆仁 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1460-1464,共5页
目的观察在高脂饮食条件下,载脂蛋白E(ApoE)和低度密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成的病理学特征与基质金属蛋白酶(MMP-2,9)和Mac-3表达水平。方法用C57BL/6J小鼠普通饮食作对照,用ApoE基因敲除和LDLR基因敲... 目的观察在高脂饮食条件下,载脂蛋白E(ApoE)和低度密度脂蛋白受体(LDLR)基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成的病理学特征与基质金属蛋白酶(MMP-2,9)和Mac-3表达水平。方法用C57BL/6J小鼠普通饮食作对照,用ApoE基因敲除和LDLR基因敲除两种小鼠,每种分为普通饮食和高脂饮食两组,8只/组。连续喂养120d后,分离获得各组小鼠主动脉,用Masson染色,油红O染色法观察小鼠动脉粥样斑块病理形态学变化,用免疫组织化学检测AS斑块内炎症以及基质金属蛋白酶(MMP-2,9)表达水平,用免疫双荧光抗体法分析AS斑块巨噬细胞和平滑肌细胞内MMP-9表达的差异。结果与普通饮食的基因敲除鼠比,高脂饮食的ApoE和LDLR基因敲除鼠的动脉粥样硬化斑块显著增大,炎性细胞增多,纤维帽中基质纤维成分减少,纤维帽形状变薄和大量中性脂滴沉积。其中,以ApoE基因敲除鼠的最为严重。AS斑块形成大小与Mac-3表达水平和炎症细胞增加呈正相关。斑块内MMP-9表达在巨噬细胞内占50%~70%,在平滑肌细胞内占30%。结论高脂饮食可加重ApoE和LDLR基因敲除小鼠AS斑块形成和Mac-3表达及炎症细胞增加,MMPs水平亦相应增加,其病变呈现出不稳定性斑块特征。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 Mac-3 基质金属蛋白酶 ApoE和ldlr基因敲除小鼠
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脂多糖通过LDLr诱导巨噬细胞泡沫化:炎症应激下巨噬细胞泡沫化的另一条通路 被引量:4
7
作者 叶强 雷寒 +2 位作者 郑文武 郑舒展 陈压西 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1064-1070,共7页
目的研究炎症介质-脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄... 目的研究炎症介质-脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1巨噬细胞在无血清培养基中培养4 h后,分为对照组(继续无血清培养),高脂组(加入LDL负荷,终浓度为25 mg·L-1),高脂加炎症刺激组(加入LDL负荷,终浓度为25 mg·L-1,同时加入炎症介质LPS,终浓度200μg·L-1),单纯炎症刺激组(加入炎症介质LPS,终浓度200μg·L-1),以上各组细胞培养24 h后收获。ELISA法检测细胞培养基中TNF-α浓度,酶化学法检测细胞内胆固醇浓度,琼脂糖电泳检测LDL氧化程度,Real time PCR法检测LDLr、SREBP2和SCAP mRNA表达水平,Western blot法检测LDLr、SREBP2和SCAP蛋白表达,激光共聚焦检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况。结果细胞内胆固醇测定发现,炎症介质LPS通过增加THP-1巨噬细胞对非修饰LDL摄取,导致巨噬细胞转变为泡沫细胞。在无炎症介质LPS时,25 mg·L-1LDL减少LDLr mRNA和蛋白表达(P<0.05)。然而,LPS增加LDLr mRNA和蛋白表达,逆转25 mg·L-1LDL对LDLr的抑制效应,不恰当的增加了巨噬细胞对LDL摄取(P<0.05),LPS刺激也导致了SCAP和SREBP2的mRNA和蛋白过表达(P<0.05),同时促进了SCAP从内质网转移到高尔基体。这些结果提示LPS干扰了胆固醇介导的LDLr负反馈调控,使非修饰LDL在巨噬细胞内堆积,导致泡沫细胞形成。结论本研究提示,在LPS诱导的炎症应激状态条件下,天然LDL可以通过LDLr被巨噬细胞大量摄取入细胞内,导致泡沫细胞形成,这可能是巨噬细胞泡沫化的另一条通路。 展开更多
关键词 THP-1巨噬细胞 脂多糖 炎症 动脉粥样硬化 ldlr 固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)
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角鲨烯对HepG2细胞LDLR表达的影响及机制初探 被引量:6
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作者 李婷 赵丽萍 +2 位作者 余超超 田男 范春雷 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1020-1024,共5页
目的研究角鲨烯对HepG2细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响,并探讨其降胆固醇的机制。方法MTT法检测不同浓度角鲨烯对HepG2细胞增殖活性的影响;倒置荧光显微镜和流式细胞术检测不同浓度角鲨烯对HepG2细胞内源性LDLR表达活性的影响;F... 目的研究角鲨烯对HepG2细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响,并探讨其降胆固醇的机制。方法MTT法检测不同浓度角鲨烯对HepG2细胞增殖活性的影响;倒置荧光显微镜和流式细胞术检测不同浓度角鲨烯对HepG2细胞内源性LDLR表达活性的影响;FRET技术检测不同浓度角鲨烯对SREBP通路中关键蛋白分子SCAP与Insig2相互作用的影响。结果角鲨烯能明显抑制HepG2细胞增殖活性,且呈浓度依赖性;倒置荧光显微镜和流式细胞术结果均表明,与对照组相比,角鲨烯能增强HepG2细胞LDLR的表达活性;FRET检测结果显示,与模型组相比,角鲨烯组YFP荧光值降低,而在5~25μmol·L^(-1)范围内,随角鲨烯浓度的增高,YFP荧光值降低。结论角鲨烯可能通过抑制SCAP/SREBP信号调控通路中关键蛋白分子SCAP与Insig2的相互作用,上调HepG2细胞LDLR的表达,是具有潜在价值的降胆固醇新药。 展开更多
关键词 角鲨烯 ldlr HEPG2 SREBP固醇通路 胆固醇 FRET技术
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大米蛋白调控成熟期大鼠LDLR基因及蛋白表达 被引量:6
9
作者 彭雪 杨林 +2 位作者 刘巧红 李娅楠 李凯 《生物信息学》 2013年第2期120-123,共4页
为了探讨大米蛋白对成熟期大鼠胆固醇代谢调控因子—低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)的调控作用,以18周龄雄性Wistar成熟期大鼠为研究对象,应用大米蛋白及酪蛋白为食物蛋白源,饲喂无胆固醇及富含胆固醇饲料,... 为了探讨大米蛋白对成熟期大鼠胆固醇代谢调控因子—低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)的调控作用,以18周龄雄性Wistar成熟期大鼠为研究对象,应用大米蛋白及酪蛋白为食物蛋白源,饲喂无胆固醇及富含胆固醇饲料,经18日自由摄食后,测定实验鼠血浆总胆固醇、血浆高密度胆固醇水平及肝脏LDLR基因及蛋白表达水平。对照酪蛋白,大米蛋白均能显著降低大鼠血浆总胆固醇、血浆非高密度胆固醇水平及动脉粥样硬化指数,并且,显著刺激肝脏LDL基因及蛋白表达水平。实验结果表明,大米蛋白降低成熟期大鼠血浆胆固醇水平的作用功效与膳食胆固醇添加与否无关,大米蛋白降胆固醇的作用机制之一是能够有效刺激LDLR的表达,从而抑制LDL-C的转运入血。 展开更多
关键词 大米蛋白 胆固醇 ldlr 成熟期大鼠
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LDLR基因AvaⅡ位点多态性与高甘油三酯血症的相关性 被引量:2
10
作者 李敏 来彦彬 +1 位作者 王玉炯 杜学婷 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第3期252-255,共4页
研究了LDLR基因外显子13中AvaⅡ位点多态性在宁夏回族自治区正常回、汉族人群及高甘油三酯血症患者中的分布频率,分析探讨了该位点多态性是否存在于宁夏回、汉族居民中,以及基因型与甘油三酯含量之间的相关性.应用聚合酶链式反应-限制... 研究了LDLR基因外显子13中AvaⅡ位点多态性在宁夏回族自治区正常回、汉族人群及高甘油三酯血症患者中的分布频率,分析探讨了该位点多态性是否存在于宁夏回、汉族居民中,以及基因型与甘油三酯含量之间的相关性.应用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对214例健康样本(回族102例,汉族112例)和212例高甘油三酯血症患者样本(回族88例,汉族124例)的低密度脂蛋白受体(LDLR)基因的多态性进行了检测.结果发现,在宁夏地区回、汉族人群中存在着AvaⅡ多态性位点,回、汉族居民间存在着明显差异,健康人群与高甘油三酯血症人群之间该位点基因型存在着显著差异.由此说明,AvaⅡ多态性位点可以作为宁夏回、汉族的遗传标记,而且该位点与高甘油三酯血症有相关性. 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体(ldlr)基因 基因多态性 高甘油三酯血症
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LDLR^(-/-)小鼠中脂代谢相关基因的表达 被引量:4
11
作者 欧海龙 严忠海 雷霆雯 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1088-1092,共5页
目的分析LDLR基因敲除小鼠体内脂代谢相关基因ApoB100、PPARα、LXRα以及ABCA1与野生型相比表达水平的差异情况。方法应用多重PCR的方法对LDLR-/-小鼠基因型进行鉴定;接着分别对LDLR-/-小鼠和野生型小鼠脂代谢相关基因的mRNA相对丰度... 目的分析LDLR基因敲除小鼠体内脂代谢相关基因ApoB100、PPARα、LXRα以及ABCA1与野生型相比表达水平的差异情况。方法应用多重PCR的方法对LDLR-/-小鼠基因型进行鉴定;接着分别对LDLR-/-小鼠和野生型小鼠脂代谢相关基因的mRNA相对丰度以及蛋白表达水平进行qRT-PCR、ELISA分析。结果与野生型相比,LDLR-/-小鼠中ApoB100、PPARα的mRNA及蛋白表达均上调(P<0.05);ABCA1的表达水平下降(P<0.01),蛋白水平上的下降幅度更为明显;而LXRα不管在mRNA或蛋白水平上均检测不到差异表达。结论 LDLR基因功能的缺失对不同的脂类代谢相关基因的表达产生不同的影响。本研究有助于人们进一步了解家族性高胆固醇血症的发病机制,同时也为药物设计中靶位点的选择提供参考价值。 展开更多
关键词 ldlr- -小鼠 脂代谢 基因表达
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生活方式对ApoE^(-/-)和LDLR^(-/-)小鼠动脉粥样硬化的影响 被引量:1
12
作者 王建茹 刘萍 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第12期3075-3077,共3页
动脉粥样硬化(AS)是遗传和环境因素相互作用的慢性炎症性动脉血管疾病,是人类死亡的主要原因之一[1,2]。流行病学研究已经发现了许多AS的危险因素,比如年龄、性别、吸烟、肥胖、糖尿病、高血压、血脂异常、家族史、慢性炎症性疾病等,... 动脉粥样硬化(AS)是遗传和环境因素相互作用的慢性炎症性动脉血管疾病,是人类死亡的主要原因之一[1,2]。流行病学研究已经发现了许多AS的危险因素,比如年龄、性别、吸烟、肥胖、糖尿病、高血压、血脂异常、家族史、慢性炎症性疾病等,其中饮食、缺乏运动、睡眠等生活方式也是AS明显的危险因素[3,4]。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 动物模型 APO E ldlr 基因敲除 生活方式
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杞蓉益精颗粒对高脂血症大鼠血清胆固醇浓度及其肝脏LDLR基因表达的影响 被引量:1
13
作者 冯前进 薛征 +1 位作者 关建红 梁爱华 《中国医药学报》 CSCD 2004年第2期86-89,共4页
目的 :研究杞蓉益精颗粒对高脂血症大鼠血清胆固醇浓度及其肝脏LDLR基因表达的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 ,高脂饲料喂养造成高脂血症模型 ,杞蓉益精颗粒 1 5g·kg- 1·d- 1灌胃给药 ,每日 1次 ,连续 2周。取血测血清胆固醇浓... 目的 :研究杞蓉益精颗粒对高脂血症大鼠血清胆固醇浓度及其肝脏LDLR基因表达的影响。方法 :雄性Wistar大鼠 ,高脂饲料喂养造成高脂血症模型 ,杞蓉益精颗粒 1 5g·kg- 1·d- 1灌胃给药 ,每日 1次 ,连续 2周。取血测血清胆固醇浓度 ,取肝组织采用斑点探针杂交法测LDLRmRNA ,以LDLRmRNA与 β actinmRNA比值表示LDLR基因表达水平。结果 :动物血清胆固醇水平为高脂模型组 (7 0 1± 1 1 9)mmol/L ,高脂模型 +给药组 (5 6 4±1 1 2 )mmol/L ,两组比较有明显差异 (P <0 0 5 )。各组动物肝LDLR基因表达水平依次为正常对照组 (1 0 0± 1 9) % ,高脂模型组 (39± 1 4 ) % ,两组比较有明显差异 (P <0 0 5 )。高脂模型 +给药组 (78± 8) % ,与高脂模型组比较有明显差异 (P <0 0 1 )。结论 :高脂饲喂大鼠可显著升高血清胆固醇水平 ,并可显著抑制其肝脏LDLR基因的表达 ,而杞蓉益精颗粒可显著降低其血清胆固醇以及上调高脂血症大鼠肝脏LDLR基因的表达 ,其分子生物学机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 杞蓉益精颗粒 高脂血症 大鼠 血清胆固醇 肝脏ldlr 基因表达 低密度脂蛋白受体
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高胆固醇血症与LDLR基因的相关性分析 被引量:1
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作者 何毅刚 王玲 《中国优生与遗传杂志》 2015年第4期21-22,98,共3页
目的通过对兰州地区100例高胆固醇血症患者的LDLR基因的测序分析,寻找高胆固醇血症的致病位点,以期为该病的预防和治疗提供理论依据。方法收集兰州地区100例高胆固醇血症患者的外周血标本,提取DNA后对目的基因进行PCR扩增并测序,结果在B... 目的通过对兰州地区100例高胆固醇血症患者的LDLR基因的测序分析,寻找高胆固醇血症的致病位点,以期为该病的预防和治疗提供理论依据。方法收集兰州地区100例高胆固醇血症患者的外周血标本,提取DNA后对目的基因进行PCR扩增并测序,结果在BLAST进行比对分析。结果 100例高胆固醇血症患者中,共发现9个突变位点,有5个同义突变,3个错义突变(p.R406Q、p.D622Y、p.P661T),1个终止突变(p.E714X),其中3个突变(p.R406Q、p.P661T、p.E714X)未见文献报道。结论通过对兰州地区高胆固醇血症LDLR基因突变位点的研究,了解该地区基因突变特点,为高胆固醇血症的早期预防、诊断及治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 高胆固醇血症 ldlr基因 突变
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SCAP/SREBP2/LDLr通路在LPS诱导人血管平滑肌细胞泡沫化中的作用 被引量:1
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作者 叶强 雷寒 +2 位作者 范忠才 郑文武 郑舒展 《泸州医学院学报》 2014年第4期361-366,共6页
目的:研究炎症介质——脂多糖(LPS)是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加人血管平滑肌细胞对天然低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡... 目的:研究炎症介质——脂多糖(LPS)是否通过扰乱固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白-固醇调节元件结合蛋白2(SCAP-SREBP2)复合物介导的低密度脂蛋白受体(LDLr)负反馈调控,增加人血管平滑肌细胞对天然低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法:人血管平滑肌细胞在无血清培养基中培养24 h后,分为对照组(继续无血清培养);高脂组(加入LDL负荷,终浓度为25μg/ml);高脂加LPS组(加入LDL负荷,终浓度为25μg/ml,同时加入LPS,终浓度400 ng/ml);高脂加LPS加肝素组(加入LDL负荷,终浓度为25μg/ml,加入LPS,终浓度400 ng/ml,加入肝素,终浓度5 mg/ml),以上各组细胞培养24 h后收获。酶化学法检测细胞内胆固醇浓度,油红O染色法检测细胞内脂质水平,Real time PCR法检测LDLr、SREBP2表达水平,细胞免疫化学法检测SCAP蛋白表达,激光共聚焦检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况。结果:细胞内胆固醇测定及油红O染色发现,LPS通过增加人血管平滑肌细胞对非修饰LDL摄取,导致人血管平滑肌细胞转变为泡沫细胞。在LPS不存在时,25μg/ml LDL减少LDLr mRNA水平(P<0.05)。然而,LPS增加LDLr mRNA水平,逆转25μg/ml LDL对LDLr的抑制效应,不恰当的增加了血管平滑肌细胞对LDL摄取(P<0.05),LPS刺激也导致了SCAP蛋白表达增加和SREBP2的mRNA水平升高(P<0.05),同时促进了SCAP从内质网转移到高尔基体。这些结果提示LPS通过增加SCAP/SREBP2复合物从内质网到高尔基体转位,干扰了胆固醇介导的LDLr负反馈调控,使非修饰LDL在血管平滑肌细胞内堆积,导致泡沫细胞形成。结论:本研究提示,在LPS刺激条件下,SCAP/SREBP2/LDLr通路可能是血管平滑肌细胞泡沫化的另一条通路。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 泡沫细胞 ldlr 固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)
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302例海南黎族LDLR基因PvuⅡ多态性与血脂水平关系的研究
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作者 罗显云 孙民增 +6 位作者 陈林 张云波 褚丽秀 王天松 蔡望伟 姚震 刘月丽 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第5期610-613,共4页
目的探讨海南地区黎族人群低密度脂蛋白受体(LDLR)基因PvuⅡ位点的多态性及其对血脂及载脂蛋白的影响。方法采用分层随机整群抽样方法选取694例样本(观察组:黎族302例,对照组:汉族392例),抽取空腹静脉血检测血脂水平,运用聚合酶链反应-... 目的探讨海南地区黎族人群低密度脂蛋白受体(LDLR)基因PvuⅡ位点的多态性及其对血脂及载脂蛋白的影响。方法采用分层随机整群抽样方法选取694例样本(观察组:黎族302例,对照组:汉族392例),抽取空腹静脉血检测血脂水平,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测LDLR基因PvuⅡ多态性。结果观察组与对照组LDLR基因PvuⅡ3种基因型P1P1、P1P2、P2P2频率(66.89%vs.76.53%、27.81%vs.20.41%、5.30%vs.3.06%)比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组等位基因P2频率19.20%显著高于对照组13.26%(P<0.01)。观察组脂蛋白(a)[Lp(a)]、载脂蛋白B(apoB)水平显著低于对照组(P<0.01),观察组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白AI(apoAI)水平和apoAI/apoB比值显著高于对照组(P<0.01)。两组对象LDLR基因PvuⅡ各基因型与临床血脂水平指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、apoAI、apoB、Lp(a)]差异无统计学意义(P>0.05)。结论海南黎族人群LDLR基因存在PvuⅡ多态性,LDLR基因PvuⅡ多态性与血脂各项指标水平无相关性,P2等位基因不影响血脂代谢。 展开更多
关键词 海南 黎族 ldlr基因 PvuⅡ多态性 血脂 载脂蛋白
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肿瘤组织LDLR活性改变的机制 被引量:1
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作者 眭建 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 1995年第1期59-61,共3页
肿瘤组织LDLR活性改变的机制眭建(镇江医学院病理生理教研室,镇江212001)细胞培养、动物实验和活体研究显示,许多肿瘤组织有低密度脂蛋白受体(LDLR)活性的明显改变,表现为有的增高和有的降低。迄今,有关肿瘤组织... 肿瘤组织LDLR活性改变的机制眭建(镇江医学院病理生理教研室,镇江212001)细胞培养、动物实验和活体研究显示,许多肿瘤组织有低密度脂蛋白受体(LDLR)活性的明显改变,表现为有的增高和有的降低。迄今,有关肿瘤组织LDLR活性改变的机制众说纷纭,且... 展开更多
关键词 肿瘤组织 ldlr 低密度脂蛋白
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不同激素对体外培养犊牛肝细胞LDLR mRNA表达量的影响
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作者 殷溪瀚 曲永利 +5 位作者 刘翔 袁雪 韩云胜 潘琪琪 王冠 王志博 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第17期27-31,共5页
本研究旨在从分子水平上部分阐述不同激素对体外培养犊牛肝细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA表达量的影响。选取一头健康的初生犊牛,放血致死后立即无菌采取肝脏尾状突,采用循环灌注法消化肝组织,分离肝细胞。取接种于6孔培养板中生长良... 本研究旨在从分子水平上部分阐述不同激素对体外培养犊牛肝细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA表达量的影响。选取一头健康的初生犊牛,放血致死后立即无菌采取肝脏尾状突,采用循环灌注法消化肝组织,分离肝细胞。取接种于6孔培养板中生长良好的肝细胞,分别添加1、10、100、1 000 nmol/L的胰岛素,1、10、100、1 000 nmol/L的胰高血糖素,2.5、5.0、10、50 ng/m L的瘦素,设置空白对照,每个浓度3个重复。采用荧光定量PCR分析LDLR mRNA的表达量。结果表明:胰岛素各浓度添加组LDLR mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01),但是1、10 nmol/L添加组间差异不显著(P>0.05);胰高血糖素1 000 nmol/L添加组LDLR mRNA表达量极显著低于对照组(P<0.01),10、100 nmol/L添加组显著低于对照组(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05);瘦素各添加组间差异不显著(P>0.05)。试验结果证明,胰岛素对LDLR mRNA的表达有促进作用,且随着胰岛素浓度的增加,促进作用加强;胰高血糖素对LDLR mRNA的表达有抑制作用,且随着胰高血糖素浓度的增加,抑制作用加强;瘦素未表现出对LDLR mRNA的表达有促进或者抑制作用。 展开更多
关键词 犊牛肝细胞 激素浓度 ldlr MRNA
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ApoE/LDLR双基因突变小鼠肝脏差异表达蛋白组研究
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作者 金晓蕾 宋兴辉 +4 位作者 邢晓明 王娜 傅强 施育平 潘杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1959-1963,共5页
目的:分析脂代谢相关双基因突变(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠肝脏蛋白质表达特点,研究差异表达蛋白与基因突变小鼠血脂代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。方法:应用双向电泳及质谱技术对5周龄双基因突变和野生型小鼠肝组织差异蛋白进行比较研究... 目的:分析脂代谢相关双基因突变(apoE-/-/LDLR-/-)小鼠肝脏蛋白质表达特点,研究差异表达蛋白与基因突变小鼠血脂代谢紊乱和动脉粥样硬化的关系。方法:应用双向电泳及质谱技术对5周龄双基因突变和野生型小鼠肝组织差异蛋白进行比较研究。结果:双基因突变和野生型小鼠肝脏中分别检测到(928±15)和(1 017±50)个蛋白点(n=3),两者之间的平均匹配率分别为78.7%和83.2%。双基因突变小鼠有108个蛋白点未能与野生型小鼠匹配,相差5倍以上的上调点和下调点分别为10个和45个,取其中6个点做质谱分析,鉴定为endoplasmin precursor,acidic leucin-rich nuclear phosphoprotein 32 family member A,serotransferrin precursor,stress-70 protein precursor,fibronectin precursor,complement C3 precursor,fibrinogen gamma polypeptide 7种蛋白质。结论:双基因突变小鼠与野生型小鼠的肝脏蛋白表达谱有明显差异,推测这些蛋白在脂代谢相关双基因突变引发的小鼠血脂代谢紊乱在动脉粥样硬化的发生发展中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 基因 ApoE/ldlr 动脉硬化 电泳 凝胶 双向
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LDLR基因P505S位点突变与不稳定型心绞痛的关系
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作者 帖彦清 张明明 +2 位作者 刘欣 孙海娟 宋光耀 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期3828-3831,共4页
目的探讨LDLR基因P505S突变与不稳定型心绞痛(UAP)的遗传易感性的关系。方法确诊的UAP患者562例(男325例,女237例)作为观察组,同一时期正常体检者563例(男342例,女221例)作为对照组,利用聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP... 目的探讨LDLR基因P505S突变与不稳定型心绞痛(UAP)的遗传易感性的关系。方法确诊的UAP患者562例(男325例,女237例)作为观察组,同一时期正常体检者563例(男342例,女221例)作为对照组,利用聚合酶链-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)并联合DNA直接测序技术,对两组的EDTA抗凝血LDLR基因P505S位点突变进行分型,按该位点等位基因C和T的出现分为CC、CT、TT基因型。采用多变量logistic回归分析统计该多态位点与UAP易感性的关系。检测所有研究对象的血脂水平。结果观察组血脂指标中TC、TG、LDL-C水平明显高于对照组,而HDL-C则明显低于对照组;观察组的吸烟、饮酒及阳性家族史的比例均高于对照组(P〈0.05)。CC、CT、TT基因型在观察组中的分布频率分别为65.7%、23.8%和10.5%,在对照组中分别是77.8%、19.2%和3.0%,两组间基因型频率分布差异有统计学意义(2=18.453,P〈0.01)。多因素分析显示,LDLR基因P505S突变位点T等位基因与UAP的遗传易感性明显相关(OR=7.48,95%CI 4.59-25.17,P〈0.01)。结论 LDLR基因P505S突变位点与UAP患者遗传易感有关。 展开更多
关键词 ldlr基因 单核苷酸多态性 不稳定型心绞痛 遗传易感性
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