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血清Cathepsin B活性联合心肌LC3-Ⅱ/Ⅰ比值在预测七氟烷后处理心肌保护效能中的诊断价值
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作者 刘刚 王伟 宋峰 《中国实验诊断学》 2025年第8期916-921,共6页
目的探讨七氟烷通过自噬-溶酶体途径对围术期老年心肌缺血再灌注损伤(MIRI)患者心肌保护效应的机制,并评估血清Cathepsin B活性与LC3-Ⅱ/Ⅰ比值联合检测在心功能恢复预测中的临床应用价值。方法用前瞻性随机对照设计,纳入2023年1月至202... 目的探讨七氟烷通过自噬-溶酶体途径对围术期老年心肌缺血再灌注损伤(MIRI)患者心肌保护效应的机制,并评估血清Cathepsin B活性与LC3-Ⅱ/Ⅰ比值联合检测在心功能恢复预测中的临床应用价值。方法用前瞻性随机对照设计,纳入2023年1月至2024年12月新疆医科大学第六附属医院收治的128例接受髋或膝关节置换术的老年MIRI高风险患者,随机分为实验组(七氟烷后处理,n=64)与对照组(常规麻醉,n=64)。术后6月随访左室射血分数(LVEF)变化及主要不良心血管事件(MACE)分为预后良好组与不良组,形成4个分层亚组。检测手术前后心功能指标、炎症/氧化应激指标,并测定血清组织蛋白酶B(Cathepsin B)活性与轻链3比值(LC3-Ⅱ/Ⅰ)。采用工作特征曲线(ROC)及多因素Logistic回归分析预测效能及独立风险因素。结果4组间术后Cathepsin B活性与LC3-Ⅱ/Ⅰ比值存在显著差异,实验组预后良好组2项指标最低,对照组预后不良组最高。LVEF变化(ΔLVEF)在实验组预后良好组显著高于其他组(P<0.001)。ROC分析结果显示,Cathepsin B活性AUC为0.87(95%CⅠ:0.83~0.91),LC3-Ⅱ/Ⅰ比值AUC为0.81(95%CⅠ:0.76~0.86),联合检测AUC提升至0.92(95%CⅠ:0.88~0.96)。Logistic回归分析证实两者为心功能恢复的独立预测因素。结论七氟烷通过激活自噬-溶酶体通路,发挥心肌保护作用。血清Cathepsin B活性与LC3-Ⅱ/Ⅰ比值联合检测可有效预测围术期心肌功能,具有重要临床应用价值。 展开更多
关键词 七氟烷 心肌保护 Cathepsin B lc3-ⅱ/ⅰ比值 自噬途径 溶酶体功能 心肌缺血再灌注损伤(MIRI)
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大负荷运动诱导大鼠骨骼肌损伤对其自噬超微结构及Beclin1和LC3-Ⅱ/Ⅰ的影响 被引量:12
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作者 张欣 王瑞元 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期296-300,I0001,共6页
目的:观察大负荷离心运动对大鼠骨骼肌自噬超微结构及自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的影响。方法:48只SD雄性大鼠适应性训练后随机分成对照组(C,n=8)和大负荷离心运动组(E,n=40)。E组于跑台进行90 min下坡跑,运动后0 h、12 h、24 h、4... 目的:观察大负荷离心运动对大鼠骨骼肌自噬超微结构及自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ的影响。方法:48只SD雄性大鼠适应性训练后随机分成对照组(C,n=8)和大负荷离心运动组(E,n=40)。E组于跑台进行90 min下坡跑,运动后0 h、12 h、24 h、48 h和72 h取比目鱼肌,透射电镜观察其自噬体超微结构变化;Western blot检测Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达;免疫荧光观测LC3的定位及含量变化。结果:E组比目鱼肌自噬体数量在运动后0 h、12 h和24 h均有增加,并伴LC3自噬荧光明显增强(P<0.01),同时运动后48 h自噬荧光仍有显著性升高(P<0.05);Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ在大负荷离心干预后表达升高(P<0.05),运动后12 h^24 h达到峰值(P<0.01),直至运动后72 h完全恢复。结论:大负荷离心运动可诱导骨骼肌自噬超微结构变化,自噬蛋白表达增强,以上可能是运动损伤的骨骼肌功能下降的原因之一。 展开更多
关键词 骨骼肌损伤 自噬 超微结构 BECLIN1 lc3-ⅱ/ⅰ
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Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-Ⅱ mRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA的影响 被引量:5
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作者 刘利娟 陈瑶 +4 位作者 周德生 王洪海 周颖璨 李中 胡华 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第4期509-513,共5页
目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 ... 目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 h 4个亚组。各组于再灌相应时间点行神经功能缺损评分,并断头取脑行HE染色及Real time-PCR检测。结果神经功能缺损:与假手术组比较,模型组、Sal组各时间点均有神经功能缺损(P<0.01);与模型组比较,再灌24、72 h Sal组神经功能缺损评分降低(P<0.05)。HE染色:模型组神经元减少、缺失,细胞肿胀,部分破裂,细胞核固缩、偏移、深染,胶质细胞增生,经Salubrinal干预后,再灌各时间点神经元增多,胞膜较完整,核固缩现象较轻,水肿轻微。Real time-PCR检测:与假手术组比较,模型组、Sal组各指标于再灌各时间点均增高(P<0.01)。与模型组比,Sal组LC3-ⅡmRNA表达于再灌12、24、72 h下降明显(P<0.05);Sal组LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA于再灌后各时间点下降均明显(P<0.01)。结论 Salubrinal通过下调LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值,对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用。 展开更多
关键词 Salubrinal 缺血再灌注大鼠模型 lc3- MRNA lc3-ⅱ/lc3-mRNA 神经保护
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重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Caspase-3表达的影响 被引量:12
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作者 张秉丽 霍成英 李有连 《中医药导报》 2021年第9期31-35,共5页
目的:探究重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法:将对数生长期的胃癌SGC-7901细胞分为对照组和重楼... 目的:探究重楼皂苷Ⅰ对胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬的作用及对微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅰ(LC3-Ⅰ)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。方法:将对数生长期的胃癌SGC-7901细胞分为对照组和重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组。重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组分别以1.5、3.0、6.0 mg/mL重楼皂苷Ⅰ培养胃癌细胞,对照组用含10%胎牛血清的1640-RPMI培养基培养胃癌细胞。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率;透射电镜观察SGC-7901细胞超微结构的改变;Lyso-Tracker Red染色观察SGC-7901细胞自噬情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting法检测胃癌细胞Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白相对表达量。结果:与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组24、48、72 h增殖抑制率升高,重楼皂苷Ⅰ低剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ高剂量组(P<0.05);与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞椭圆形的双层膜包绕囊泡状结构增多,自噬小体增多。重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞溶酶体红色荧光小体增加,酸性自噬溶酶体囊泡过度累积。与对照组比较,重楼皂苷Ⅰ低、中、高剂量组细胞凋亡率及Beclin-1、Caspase-3蛋白相对表达量升高,重楼皂苷Ⅰ低剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ高剂量组;Bcl-2/Bax、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低,重楼皂苷Ⅰ高剂量组<重楼皂苷Ⅰ中剂量组<重楼皂苷Ⅰ低剂量组(P<0.05)。结论:重楼皂苷Ⅰ可通过诱导胃癌SGC-7901细胞线粒体自噬,抑制细胞增殖,促进凋亡。 展开更多
关键词 线粒体自噬 重楼皂苷 微管相关蛋白1轻链3- 微管相关蛋白1轻链3- 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 胃癌SGC-7901细胞
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补肾活血方对人胚肺成纤维细胞IL-17A、LC3-Ⅱ影响的实验研究
5
作者 刘晓明 李芮 高善语 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第5期2043-2052,共10页
目的 探讨补肾活血方对人胚肺成纤维细胞的作用机制。方法 首先,观察不同浓度的含药血清对人胚肺成纤维细胞的抑制情况及细胞内的胶原蛋白的含量,确定出实验用含药血清的最佳血药浓度;其次,应用TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞,将实验细胞... 目的 探讨补肾活血方对人胚肺成纤维细胞的作用机制。方法 首先,观察不同浓度的含药血清对人胚肺成纤维细胞的抑制情况及细胞内的胶原蛋白的含量,确定出实验用含药血清的最佳血药浓度;其次,应用TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞,将实验细胞分为空白对照组,TGF-β1处理组,TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h组(含药血清组),TGF-β1处理+基因敲除阴性对照组(sh-NC组),TGF-β1处理+IL-7A基因敲减组(sh-IL-17A组),TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+过表达质粒阴性对照组(Vector组),TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+IL-17A过表达质粒组(IL-17AOE组),进行相应药物培养后,检测各组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A表达量的变化。结果 TGF-β1处理组中人胚肺成纤维细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较空白对照组明显增多(P<0.05);含药血清组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较TGF-β1处理组明显较少,而自噬小体的数量较TGF-β1处理组明显增多;sh-IL-17A组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较sh-NC组明显较少,而自噬小体的数量较sh-NC组明显增多;IL-17AOE组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A mRNA等各项指标较Vector组明显增多,而自噬小体的数量较Vector组明显减少。结论 补肾活血方可以对MRC-5细胞中的胶原显著降解。这一作用与抑制IL-17A介导的通路,激活细胞自噬,进一步降解胶原蛋白有关。 展开更多
关键词 补肾活血方 人胚肺成纤维细胞 COL- IL-17A 自噬小体lc3-
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远志皂苷调节细胞自噬抗Aβ25-35诱导的SH-5Y5Y细胞凋亡的研究 被引量:6
6
作者 李巧 金桂芳 +2 位作者 尤付玲 王琳 杨红 《广东药科大学学报》 CAS 2017年第4期536-540,共5页
目的从细胞自噬角度探讨远志皂苷(tenuifolin,Ten)抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的作用及分子机制。方法建立Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬小泡的变... 目的从细胞自噬角度探讨远志皂苷(tenuifolin,Ten)抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的作用及分子机制。方法建立Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型,通过MTT法和流式细胞术测定细胞活力和凋亡率,单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬小泡的变化,Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平的变化。结果 Ten抑制Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞活力降低及凋亡率增加,减少Aβ25-35诱导的自噬体增加,显著降低自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达水平。结论 Ten通过调节Aβ25-35诱导的细胞自噬,从而抑制Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 远志皂苷 AΒ25-35 细胞自噬 凋亡 lc3-ⅱ/ⅰ
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熊果酸通过促进自噬保护H_(2)O_(2)诱导的H9C2大鼠心肌细胞氧化应激损伤 被引量:12
7
作者 王绮雯 陈志健 +2 位作者 张旺发 王浩 李爱群 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1615-1621,共7页
目的研究熊果酸(Ursoic acid,UA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的H9C2大鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及对细胞自噬的调节作用。方法以200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)诱导24 h建立H9C2心肌细胞氧化应激损伤模型。将H9C2细胞随机分为6... 目的研究熊果酸(Ursoic acid,UA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的H9C2大鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及对细胞自噬的调节作用。方法以200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)诱导24 h建立H9C2心肌细胞氧化应激损伤模型。将H9C2细胞随机分为6组:正常组、溶剂组、模型组及熊果酸高、中、低剂量(10、5、2.5μmol·L^(-1))组。采用CCK-8法检测细胞存活率;EdU法检测细胞增殖能力;TBA法检测丙二醛(MDA)脂质氧化水平;WST-8法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western Blot法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及p62的表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞的存活率及EdU阳性细胞(红色荧光)百分比均明显降低(P<0.05);细胞内MDA脂质氧化水平明显升高(P<0.05),SOD活性明显降低(P<0.05);LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值明显上调(P<0.05),p62蛋白表达明显下调(P<0.05)。与模型组比较,熊果酸高、中、低剂量均能明显提高H9C2的细胞存活率及EdU阳性细胞百分比(P<0.05);降低MDA水平(P<0.05),提高SOD活性(P<0.05);上调LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达比值(P<0.05),下调p62蛋白表达水平(P<0.05)。结论熊果酸对H_(2)O_(2)诱导的H9C2大鼠心肌细胞氧化应激损伤具有明显保护作用,可能与其促进细胞自噬有关。 展开更多
关键词 熊果酸 H9C2细胞 H_(2)O_(2) 氧化应激 细胞自噬 lc3-ⅱ/ⅰ P62
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二苯乙烯苷减轻小鼠急性脑缺血再灌注后的氧化应激损伤及其对自噬的影响 被引量:3
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作者 张奇龙 薛威 +3 位作者 徐博涵 唐虹 江勤 董六一 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1232-1236,共5页
目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再... 目的 研究小鼠急性脑缺血再灌注损伤(CIRI)后二苯乙烯苷(TSG)对自噬作用的影响及其神经保护作用。方法 雄性昆明种小鼠100只,随机分为假手术组、模型组和TSG低、中、高剂量组(3、6、12 mg/kg)。采用双侧颈总动脉结扎法建立急性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注24 h,于缺血和再灌注前尾静脉注射给药各1次。断头取脑检测脑组织含水量,采用试剂盒检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,HE染色检测小鼠脑组织病理变化,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白的表达。结果 与模型组比较,TSG组脑皮层神经元的病理性损伤较轻,神经元数量增加,形态改善,核固缩减轻;TSG中、高剂量组显著降低脑组织含水量及MDA的含量,并可显著升高血清中SOD活性(P <0. 01),TSG高剂量组亦可显著抑制自噬相关基因Atg6 (Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ/Ⅰ)蛋白的表达(P <0. 05)。结论 TSG对小鼠急性CIRI具有很好的神经保护作用,作用机制可能与抑制CIRI中自噬激活有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 二苯乙烯苷 自噬 BECLIN1 lc3-ⅱ/ⅰ
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夹脊电针通过PTEN通路对脊髓损伤自噬的影响 被引量:3
9
作者 李竹馨 尹洪娜 +3 位作者 李海燕 李晨阳 王雪 孙忠人 《中医药信息》 2021年第3期30-34,共5页
目的:观察抑制PTEN后,夹脊电针对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能和脊髓组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、mTOR和STAT3含量的影响,探究夹脊电针干预SCI的疗效机制。方法:雄性SD大鼠随机分为电针(EA)组、bpV组、EA+bpV组、模型(Model)组和假手术(Sham)组... 目的:观察抑制PTEN后,夹脊电针对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能和脊髓组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、mTOR和STAT3含量的影响,探究夹脊电针干预SCI的疗效机制。方法:雄性SD大鼠随机分为电针(EA)组、bpV组、EA+bpV组、模型(Model)组和假手术(Sham)组,每组分为1、3、7、14 d时间点,每个时间点每组6只。采用Allen's方法造模,造模成功后第1天起,EA组针刺损伤部位上、下各一节段旁开约0.3 mm,左右各2针,上正下负连接电麻仪100 Hz连续脉冲波30 min/d。bpV组每日腹腔注射bpV(HOpic)0.2 mL。EA+bpV组在每日注射bpV后10 min进行电针治疗;Model组、Sham组和EA组每日腹腔注射等量生理盐水。各组在治疗1、3、7、14 d后第2天取材。在每日治疗前和取材前采用BBB评分评估大鼠后肢运动功能。Elisa法检测脊髓组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ、mTOR和STAT3的表达情况。结果:BBB评分结果显示EA组、bpV组和EA+bpV组评分在各时间点均显著高于模型组(P<0.05),EA组与bpV组之间无显著性差异(P>0.05),EA+bpV组评分显著高于EA组和bpV组(P<0.05)。Elisa结果显示EA组、bpV组和EA+bpV组均可显著性增高LC3-Ⅱ/Ⅰ和STAT3水平(P<0.05),降低mTOR水平(P>0.05)。结论:夹脊电针可能通过抑制PTEN通路促进大鼠SCI后自噬水平,有助于运动功能的恢复,这可能成为夹脊电针治疗SCI促进神经修复的科学依据。 展开更多
关键词 夹脊电针 脊髓损伤 PTEN/mTOR/STAT3 BPV lc3-ⅱ/ⅰ
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活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响
10
作者 陈佳敏 陈心豪 +1 位作者 李花 刘旺华 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期35-38,共4页
目的 探讨活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组12只、手术组66只。手术组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注(MCAO)模型,假手术组仅分离血管不插栓。大鼠清醒后,进行神经功能缺... 目的 探讨活血化瘀解毒方对脑缺血再灌注大鼠脑细胞自噬的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组12只、手术组66只。手术组采用线栓法制备大脑中动脉闭塞脑缺血/再灌注(MCAO)模型,假手术组仅分离血管不插栓。大鼠清醒后,进行神经功能缺损(mNss)评分,手术组根据评分情况进行分层随机分组,分为模型组、依达拉奉组、活血化瘀解毒方(HXHYJDF)组、3-MA组、3-MA+HXHYJDF组,每组各12只。各组予以相应干预,7d后再次进行mNss评分,而后处死取材。通过血液流变学观察大鼠腹主动脉血(低、中、高切边下全血黏度及血浆黏度)血瘀情况;HE染色观察大鼠缺血侧脑皮质层组织病理形态变化;透射电镜观察大鼠脑缺血侧皮质层神经细胞自噬小体超微结构;Western blot法检测大鼠脑缺血侧皮质组织ATG-13(自噬相关蛋白13)、VPS34(哺乳动物中的第III类PI3 Kinase)、LC3(微管相关蛋白1轻链3)蛋白表达情况。结果 (1)与假手术组相比,模型组第1天神经功能缺损评分明显升高(P<0.05),且第7天评分未有明显降低,低、中、高切边下全血黏度及血浆黏度均升高(P<0.05),病理改变明显,电镜下神经细胞结构损伤,线粒体肿胀,自噬泡清晰可见,ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达明显增加(P<0.05)。(2)与模型组相比,各药物干预组神经功能缺损评分第1天差异无统计学意义(P>0.05),第7天评分均明显降低(P<0.05),低、中、高切边下全血黏度及血浆黏度水平均有所下降(P<0.05),脑组织病理改变有所改善,电镜下神经细胞结构损伤减轻,可见轻微肿胀线粒体结构,未见明显自噬体结构,依达拉奉组及HXHYJDF组ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达明显减少(P<0.05),3-MA组可能由于3-MA对ⅠPI3K和ⅢPI3K时相性抑制,ATG-13、VPS34表达无明显降低(P>0.05),LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平较HXHYJDF组也有明显升高(P<0.05),而3-MA+HXHYJDF组较3-MA组ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达均有不同程度的下调。结论 活血化瘀解毒方可减轻脑缺血再灌注大鼠脑损伤,可能与抑制细胞自噬,下调自噬相关蛋白ATG-13、VPS34、LC3-Ⅱ/Ⅰ表达水平有关。 展开更多
关键词 活血化瘀解毒方 自噬 脑缺血再灌注 ATG-13 VPS34 lc3-ⅱ/ⅰ
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A型流感病毒对肺巨噬细胞自噬的影响及麻杏石甘汤含药血清的干预作用 被引量:13
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作者 李玲 张波 +5 位作者 卢芳国 蔡亮 高强 胡珏 何谷良 吴涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期878-883,共6页
目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素... 目的探讨麻杏石甘汤含药血清对A型流感病毒诱导的肺巨噬细胞自噬的干预作用。方法以A型流感病毒感染的RAW264. 7细胞为研究对象,分为麻杏石甘汤含药血清低、中、高剂量组、奥司他韦组、3-MA+流感病毒组、流感病毒组、3-MA组、雷帕霉素组、空白组,干预12 h后,分别用激光共聚焦显微镜和透射电镜技术检测细胞自噬情况;Western blot法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ表达。结果麻杏石甘汤含药血清能不同程度抑制流感病毒诱导的细胞自噬标志蛋白LC3的膜聚集,抑制细胞内自噬小体和自噬溶酶体的增加,以及LC3-Ⅱ的表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,且呈现一定的量效关系。结论麻杏石甘汤可能通过抑制A型流感病毒诱导的细胞自噬,最终调控A型流感病毒的致病作用。 展开更多
关键词 流感病毒 肺巨噬细胞 自噬 麻杏石甘汤含药血清 雷帕霉素 lc3-ⅱ/lc3-比值
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沉默表皮生长因子受体的表达对肺腺癌A549细胞自噬的影响 被引量:3
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作者 马阳 吴娟 +5 位作者 纪晓坤 王蕊 杜芸 王珩 郭晓 张艳 《癌变·畸变·突变》 CAS 2019年第5期347-351,358,共6页
目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细... 目的:研究降低表皮生长因子受体(EGFR)的表达对肺腺癌A549细胞自噬活性的影响.方法:A549细胞中加入EGF处理,分为4组,即未处理组和10、25、50 ng/mL EGF处理组,用Western blot方法检测EGFR的蛋白表达;采用转染siRNA降低肺腺癌细胞A549细胞EGFR的表达,将A549细胞分为4组,即未处理组、EGFR siRNA-1组、EGFR siRNA-2组和EGFR siRNA-3组,分别采用Real-time RT-PCR和Western blot方法检测EGFR mRNA和蛋白表达水平来评价3个siRNA的沉默效果;将A549细胞分为转染EGFR siRNA组、转染空载体组、转染试剂组(只加入等量转染试剂)及未处理组,且4组均加入等量的50 ng/mL EGF,用Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达,观察沉默EGFR表达对自噬活性变化;A549细胞分为转染EGFR siRNA组和转染空载体组,用透射电子显微镜观察自噬小体.结果:转染siRNA后A549细胞EGF蛋白的表达降低,LC3Ⅰ向LC3Ⅱ的转化水平升高(P<0.05),细胞内出现较多自噬小体,自噬活性明显增加.结论:降低EGFR的表达可以提高肺腺癌A549细胞自噬活性. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 肺腺癌 自噬 SIRNA lc3-ⅱ/lc3-
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蜡螟抗白假丝酵母菌自噬机制的初步研究 被引量:2
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作者 戴京京 王兵 +1 位作者 周武碧 李红林 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第10期1154-1156,共3页
目的探究白假丝酵母菌感染蜡螟时蜡螟的自噬相关通路蛋白的表达情况。方法用一定量的白假丝酵母菌的活化孢子感染蜡螟,经过12h,解剖蜡螟收集蜡螟细胞并裂解细胞,用真菌活性检测试剂盒检测孢子活性;解剖蜡螟取肠道组织并用PI染死细胞。... 目的探究白假丝酵母菌感染蜡螟时蜡螟的自噬相关通路蛋白的表达情况。方法用一定量的白假丝酵母菌的活化孢子感染蜡螟,经过12h,解剖蜡螟收集蜡螟细胞并裂解细胞,用真菌活性检测试剂盒检测孢子活性;解剖蜡螟取肠道组织并用PI染死细胞。取不同感染时间段的淋巴细胞,用裂解液裂解,离心取上清,用Western blot法检测上清液中的Dectin-1、ROS、LC3Ⅰ/Ⅱ的表达水平。结果活化的孢子注射至蜡螟体内后,其活性受到抑制;蜡螟的肠道细胞被定位在上面的菌丝损伤并且孢子活性受到抑制。随着蜡螟感染白假丝酵母菌时间的递增,其自身的Dectin-1、ROS、LC3Ⅰ/Ⅱ的表达水平在不断增高且在感染24h最高。结论白假丝酵母菌感染蜡螟后,蜡螟的淋巴细胞和肠道细胞通过升高Dectin-1、ROS、LC3Ⅰ/Ⅱ的表达水平发挥杀伤孢子的作用。 展开更多
关键词 蜡螟 白假丝酵母菌 自噬 DECTIN-1 ROS lc3/
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