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水禽细小病毒LAMP及其可视化通用检测方法的建立
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作者 戴银 周慧琴 +9 位作者 谷思琴 胡晓苗 王洁茹 殷冬冬 尹磊 沈学怀 潘孝成 赵瑞宏 周学利 侯宏艳 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第7期63-68,共6页
为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测... 为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测方法,并对2种方法的特异性和灵敏性进行检测。采用常规PCR、LAMP和LAMP-HNB对10份水禽临床样品进行检测,以评估2种方法的实用性。结果显示,LAMP方法的最佳反应温度为65℃、反应时间为60 min。2种方法仅能扩增GPV和MDPV,而对其他5种常见水禽病毒的检测结果均为阴性,最低检出浓度均为1×10-5ng/μL。2种方法与常规PCR的检测结果一致,符合率达100%。结果表明,建立的LAMP方法和LAMP-HNB可视化方法具有灵敏性好、特异性高、仪器要求低和可视化等优点,可为水禽细小病毒的现场快速检测提供技术支撑。 展开更多
关键词 鹅细小病毒(GPV) 番鸭细小病毒(MDPV) NS基因 环介导等温扩增(lamp) 可视化
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绵羊无浆体LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法的建立 被引量:2
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作者 郭心龙 周勇志 +4 位作者 曹杰 王亚楠 张厚双 段德勇 周金林 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第3期330-337,共8页
绵羊无浆体(Anaplasma ovis)是一种蜱传、寄生于红细胞内的细菌病原体,引起绵羊、山羊和野生反刍动物等发病,对我国养羊业发展造成严重危害。尽管已有多种绵羊无浆体诊断方法报道,但仍然缺少简易快捷、应用于现场的检测技术。本研究旨... 绵羊无浆体(Anaplasma ovis)是一种蜱传、寄生于红细胞内的细菌病原体,引起绵羊、山羊和野生反刍动物等发病,对我国养羊业发展造成严重危害。尽管已有多种绵羊无浆体诊断方法报道,但仍然缺少简易快捷、应用于现场的检测技术。本研究旨在建立一种针对绵羊无浆体msp4基因的LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法。该检测方法是在恒定温度下进行的,不需要特殊设备仪器,能够产生荧光呈现可视化的结果。通过优化LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法的体系以确定各成分最佳浓度比。该检测方法能够检测到绵羊无浆体msp4基因最低质粒DNA拷贝数为3.90 copies/μL,具有较高的敏感性。检测其他无浆体和其他常见羊病原体时呈阴性,表明特异性良好。对临床样本的应用检测,与常规PCR检测结果符合率为100%。结果表明,建立的LAMP-CRISPR/Cas12a体系适用于绵羊无浆体的检测,具有快捷方便的现场诊断和在资源匮乏的情况下应用的优势。 展开更多
关键词 绵羊无浆体 msp4基因 lamp CRISPR
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团头鲂皮特不动杆菌环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测方法建立 被引量:1
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作者 张瑞轩 曹景龙 +2 位作者 王卫民 罗毅 黎洁 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期71-78,共8页
为了精准识别和监测鱼类中皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)的感染,针对团头鲂(Megalobrama amblycephala)源皮特不动杆菌的管家基因rpo B设计特异性扩增引物,通过反应体系和条件(包括反应温度、时间、Mg^(2+)浓度以及内、外、环引... 为了精准识别和监测鱼类中皮特不动杆菌(Acinetobacter pittii)的感染,针对团头鲂(Megalobrama amblycephala)源皮特不动杆菌的管家基因rpo B设计特异性扩增引物,通过反应体系和条件(包括反应温度、时间、Mg^(2+)浓度以及内、外、环引物用量比)优化及灵敏度和特异性检测,建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)的快速检测方法。结果表明:Mg^(2+)最优浓度为6.0 mmol/L,内、外、环引物最优用量比为8∶1∶4,在63℃恒温条件下反应30 min即可检测到皮特不动杆菌,反应60 min可获得最优结果;该LAMP方法的灵敏度是常规PCR方法的100倍,最低检出量为1.4 cfu/m L;在特异性检测方面,该方法仅能检测出皮特不动杆菌,与嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、摩根菌(Morganella morganii)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)以及鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)等7种常见致病菌均无交叉反应;此外,该方法既可以通过检测体系的颜色变化直观读取结果,也可以通过琼脂糖凝胶电泳分析结果。由此可见,本研究中所建立的针对团头鲂源皮特不动杆菌的LAMP快速检测方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点,可用于水产养殖业皮特不动杆菌引起的细菌性败血症的现场快速检测。 展开更多
关键词 团头鲂 皮特不动杆菌 细菌性败血症 环介导等温扩增技术(lamp) RPOB 反应体系
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Novel Design of HID Lamp Electronic Ballast for Automotive Systems 被引量:2
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作者 DU Ye-qiang WANG Jin-hai ZHENG Yu ZHANG Cheng 《Semiconductor Photonics and Technology》 CAS 2007年第4期276-279,共4页
This paper presents a high intensity discharge(HID) lamp for automotive illumination. A novel type of ballast for HID is proposed without an acoustic resonance. The system consists of high frequency DC/DC converter,... This paper presents a high intensity discharge(HID) lamp for automotive illumination. A novel type of ballast for HID is proposed without an acoustic resonance. The system consists of high frequency DC/DC converter,DC/AC inverter(SLA2403M), high voltage igniter and a microcontroller unit(MCU). The proposed ballast controls the complex start-up process and constant power process by programming on the rnicrocontroller. It is verified that experimental results agree well with the calculated ones. The ballast features such functions as failure protection, line under-voltage, line over-voltage, output short circuit and disconnection protections. 展开更多
关键词 HID lamp BALLAST microcontroller unit PWM
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Optimized Design of LED Daylight Lamp Lighting System 被引量:2
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作者 TIAN Da-lei GUAN Rong-feng WANG Xing 《Semiconductor Photonics and Technology》 CAS 2008年第2期121-123,135,共4页
In order to meet the requirements of indoor illumination, a LED daylight lamp model was designed, it can replace traditional fluorescent lamp without insteading additional power supply establishment. The optical prope... In order to meet the requirements of indoor illumination, a LED daylight lamp model was designed, it can replace traditional fluorescent lamp without insteading additional power supply establishment. The optical properties of the model were simulated using optical analysis software. Its luminous efficiency is about 30.4 lm/W, and the illuminance is about 38 lux when the distance is 1.5 m between the center of the model and measured spot. With the theoretically-optimized design of LED model, experiments based on the results of the optimal simulation in the laboratory were conducted to verify the performance of the proposed LED model, it reaches a power factor of about 0.8 at 6 W. The simulation results are very similar with the measured values. It is testified that simulative method is one of the effective tools for LED lighting optical design. 展开更多
关键词 LED daylight lamp optical properties SIMULATION
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哈维氏弧菌LAMP可视化检测方法的建立
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作者 于劼豪 黄郁葱 +4 位作者 孙良娟 钟键 鲁义善 简纪常 蔡双虎 《海洋渔业》 北大核心 2025年第1期29-39,共11页
为提高哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)早期快速诊断水平,建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。利用表达环二聚体磷酸二酯的VieA基因序列在哈维氏弧菌中的保守性,将其作为靶基因设计引物,并初步建立LAMP反应体系,对L... 为提高哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)早期快速诊断水平,建立一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。利用表达环二聚体磷酸二酯的VieA基因序列在哈维氏弧菌中的保守性,将其作为靶基因设计引物,并初步建立LAMP反应体系,对LAMP反应体系中各反应物浓度、内外引物比例、反应时间和反应温度进行优化,并对优化后的LAMP反应的特异性和灵敏度进行检测;分别在优化后的LAMP反应体系中加入SYBR Green I、钙黄绿素-锰离子或羟基萘酚蓝作为指标剂对LAMP反应产物进行可视化判别,从而建立一种针对哈维氏弧菌的LAMP可视化检测方法。研究表明,该LAMP反应体系最佳反应温度60℃、反应时间60 min、Mg2+浓度1.2 mmol·L^(-1)、dNTPs浓度0.64 mmol·L^(-1)、甜菜碱浓度0.25 mmol·L^(-1)及内外引物比例16∶1;该反应体系能特异性检测到哈维氏弧菌,且灵敏度为3.4×10-6 ng·μL^(-1)。可视化指标剂钙黄绿素-锰离子的添加比例为12∶1或羟基萘酚蓝的添加浓度为390μmol·L^(-1)时,LAMP反应产物的可视化效果最好,临床应用表明,该LAMP可视化技术能准确并特异性地检测到珍珠龙胆石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)和凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)组织中感染的哈维氏弧菌。研究提供了一种简单、快速和结果可视化的哈维氏弧菌LAMP检测方法,可以为水生动物哈维氏弧菌的现场检测和弧菌病的早期诊断提供技术支持。 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 lamp技术 可视化检测 临床应用
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海南万宁咖啡炭疽病菌Colletotrichum siamense的分离鉴定及LAMP快速检测体系的建立
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作者 温思为 高圣风 +5 位作者 田甜 刘世超 苟亚峰 张若男 薛超 孙世伟 《热带作物学报》 北大核心 2025年第7期1733-1744,共12页
作为海南省万宁市特色农业支柱产业,兴隆咖啡产业的可持续发展正面临炭疽病侵害的严峻挑战。咖啡炭疽病可导致咖啡叶片焦枯、枝条溃疡及浆果褐腐,是咖啡的主要病害之一。本研究在万宁咖啡主产区采集咖啡炭疽病样品并分离病原菌,通过ITS... 作为海南省万宁市特色农业支柱产业,兴隆咖啡产业的可持续发展正面临炭疽病侵害的严峻挑战。咖啡炭疽病可导致咖啡叶片焦枯、枝条溃疡及浆果褐腐,是咖啡的主要病害之一。本研究在万宁咖啡主产区采集咖啡炭疽病样品并分离病原菌,通过ITS、TUB2、CHS-1、ACT、GAPDH多基因联合分析鉴定病原菌,并基于环介导等温扩增技术(LAMP)建立快速检测体系。结果表明:(1)采集典型病样50份,经组织分离纯化获得炭疽菌株24株;(2)明确万宁5个种植区的病原种群结构包含4个炭疽菌种,即Colletotrichum tropicale、C.karstii、C.fructicola及优势种暹罗炭疽菌(C.siamense,45.8%)。(3)基于TUB2基因特异区域,设计筛选得到特异性LAMP引物组Tub-L1,优化反应体系参数为63℃恒温扩增50 min,内外引物浓度比为8∶1,Mg^(2+)8 mmol/L,d NTPs 0.8 mmol/L,无需甜菜碱。验证试验表明,该体系检测灵敏度达100 pg/μL(为常规PCR的10倍);对炭疽菌属的7个近缘种(C.tropicale、C.fructicola、C.karstii等)及7种非靶标植物病原菌[含咖啡驼孢锈菌(Hemileia vastatrix)、菜豆间座壳菌(Diaporthe phaseolorum)等]均无阳性反应。采用优化后的LAMP检测体系对田间采集的病害叶片样本进行分析,所有样品均成功检测出暹罗炭疽菌,其结果与常规PCR检测方法一致。综上所述,本研究建立并优化的咖啡炭疽病菌LAMP快速检测体系具有操作简便、反应高效、特异性强、灵敏度高以及结果可视化等优势,适用于暹罗炭疽菌(C.siamense)的田间快速检测。该体系为咖啡炭疽菌的精准鉴定及高效检测提供了可靠的技术支撑,对咖啡炭疽病的早期预警、病害监测及综合防控具有重要的实践意义和应用价值。 展开更多
关键词 咖啡炭疽病 病原鉴定 环介导等温扩增(lamp) 检测
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黑木耳菌棒中长枝木霉LAMP可视化检测技术研究 被引量:1
8
作者 朱姝蕊 张传清 《食药用菌》 2025年第4期280-284,共5页
长枝木霉(Trichoderma harzianum)是黑木耳生产中菌棒灭菌不彻底的标志性污染菌之一。为提高长枝木霉在黑木耳菌棒中早期诊断的效率,本研究提出一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。研究首先选取长枝木霉的tubulin... 长枝木霉(Trichoderma harzianum)是黑木耳生产中菌棒灭菌不彻底的标志性污染菌之一。为提高长枝木霉在黑木耳菌棒中早期诊断的效率,本研究提出一种基于环介导等温扩增(LAMP)技术的可视化快速检测方法。研究首先选取长枝木霉的tubulin基因作为靶基因,设计特异性引物,初步构建LAMP反应体系。通过在LAMP反应中加入羟基萘酚蓝作为显色剂,实现了对反应产物的颜色判别,从而实现可视化检测。最后,通过优化反应温度(55~66℃,共12个梯度)和反应时间(15~120 min,共8个梯度),提升检测体系的灵敏度。研究结果表明,该体系采取反应温度60℃,反应时间60 min,灵敏度达到10 pg/μL,比传统的PCR方法高出100倍。该方法简便、快速、准确,无需昂贵仪器即可实施,适用于普通实验室和田间的大规模检测,为黑木耳菌棒中长枝木霉的早期诊断与防控提供了有力的技术支持。 展开更多
关键词 长枝木霉 lamp技术 可视化检测 黑木耳菌棒
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地锦叶斑病菌鉴定及LAMP快速检测体系的建立
9
作者 黄成玉 陈健鑫 +3 位作者 郑星月 吴峰婧琳 马焕成 伍建榕 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第1期89-96,共8页
【目的】明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类,并建立快速检测方法。【方法】采用组织分离法分离病原菌,并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原,通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树,明确病原菌的分类地位;以病原菌的Alt a1基... 【目的】明确引起云南玉龙县地锦叶斑病的病原种类,并建立快速检测方法。【方法】采用组织分离法分离病原菌,并依据科赫氏法则确定地锦叶斑病病原,通过形态学特征及多基因联合构建系统发育树,明确病原菌的分类地位;以病原菌的Alt a1基因序列为靶标设计特异性引物建立环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。【结果】地锦叶斑病病原菌鉴定为链格孢菌Alternaria alternata。建立的LAMP反应体系可特异有效地检测出地锦叶斑病菌,该体系最佳反应温度为65℃、最佳反应时间为50 min、最低检测灵敏度为1 pg/μL。使用该体系对人工接种病原菌不同时间的地锦叶片进行链格孢LAMP检测,检出时间为接种12 h及以上。【结论】本研究可为地锦叶斑病的早期检测和科学防控提供理论依据。 展开更多
关键词 地锦 叶斑病 链格孢菌 病原鉴定 lamp体系
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Research of the Wireless Management System for Solar Street Lamp Based on NanoLOC AVR Module
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作者 张开如 莫伦伟 唐梅玉 《Journal of Measurement Science and Instrumentation》 CAS 2011年第1期55-59,共5页
In order to improve the service life of solar street lamp, it is necessary to manage the lamp's battery in the form of on-line detection via wireless communanication. A wireless managonent systean for solar street la... In order to improve the service life of solar street lamp, it is necessary to manage the lamp's battery in the form of on-line detection via wireless communanication. A wireless managonent systean for solar street lamp based on nanoLOC AVR nttlule is researched in this paper, the system can real-timely detect the solar street lamp's battery voltage, corrent, tonperature, internal resistance, residual capacity and so on. And the collected data is transmitted to computer' s management via wireless connnunication to achieve recording, storage, analysis and processing for various parameters. 展开更多
关键词 solar street lamp nanoLOC AVR module wireless com-munication
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基于LAMP与智能手机端对龋病致病菌快速检测平台的构建
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作者 尚进 张晓东 +5 位作者 王敬夫 王玥晖 杨晨 王贺靓 刘佼佼 张然 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第5期595-599,共5页
目的:建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)对变异链球菌的快速、定量、可视化的快速检测方法。方法:提取变异链球菌DNA,通过LAMP技术对DNA中的特异性片段进行检测,建立基于LAMP技术的检测方案,对检测实验条件进行优化,建立针对变异链... 目的:建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)对变异链球菌的快速、定量、可视化的快速检测方法。方法:提取变异链球菌DNA,通过LAMP技术对DNA中的特异性片段进行检测,建立基于LAMP技术的检测方案,对检测实验条件进行优化,建立针对变异链球菌的LAMP定量检测技术,运用基于移动端检测设备对阳性实验结果进行定量分析。结果:建立的LAMP定量检测方法可在23 min内检测时间内对样本进行检测,具有良好的特异性和灵敏性,检测精度达到1.625×10^(-3)ng/μL。使用移动端应用程序对阳性结果进行采集、识别并进行了量化,绝对G值与DNA浓度呈良好线性关系,方程为y=3.2x+57.133(R^(2)=0.9882)。结论:LAMP定量检测变异链球菌的新方法灵敏度高、特异性强、结果可视化、方便省时、可以对细菌DNA进行定量等特点,具有广泛的临床应用前景。 展开更多
关键词 lamp 变异链球菌 DNA 定量检测
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miR-207靶向自噬相关蛋白LAMP2调控巨噬细胞与结核分枝杆菌相互作用机制的研究 被引量:1
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作者 杜文雅 代禹美 +2 位作者 乐林芝 马涛 吴利先 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期97-104,共8页
目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四... 目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四组(OP-LAMP2组:共转染miR-207 mimics和LAMP2过表达质粒;EP组:共转染mimics NC和空载质粒;siLAMP2组:转染siLAMP2;siLAMP2-NC组:转染siLAMP2-NC)。使用H37Ra感染Ana-1细胞建立结核感染模型。结核菌落形成单位计数评估LAMP2对胞内分枝杆菌负荷的影响以及对胞外残留分枝杆菌的清除作用。流式细胞术检测细胞总凋亡率。实时荧光定量PCR检测LAMP2、细胞凋亡基因、焦亡基因及自噬基因相对表达量。Western blot法检测LAMP2蛋白、细胞凋亡、焦亡、自噬蛋白的相对表达量。结果双荧光素酶报告实验检测显示miR-207与LAMP2存在靶向关系,实时荧光定量PCR、Western blot结果统计分析和显微镜下观察证明成功建立感染模型。菌落形成单位计数发现OP-LAMP2组的菌落数低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。流式细胞术检测发现OP-LAMP2组总凋亡率低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR及Western blot法检测发现对照组凋亡、焦亡相关蛋白和基因相对表达量趋势为OP-LAMP2低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR检测自噬正调节基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和重组人自噬效应蛋白(Beclin1)在OP-LAMP2组相对表达量高于EP组,siLAMP2组低于siLAMP2-NC组,负调节自噬基因相对表达量与自噬正调节基因趋势相反。自噬相关蛋白相对表达量与自噬基因趋势一致。结论miR-207通过靶向自噬相关蛋白LAMP2促进巨噬细胞凋亡、细胞焦亡、抑制自噬,促进结核分枝杆菌(Mtb)的存活,为TB提供新的治疗方向。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌(Mtb) miR-207 lamp2 自噬 凋亡 焦亡
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A dopant-assisted iodide-adduct chemical ionization time-of-flight mass spectrometer based on VUV lamp photoionization for atmospheric low-molecular-weight organic acids analysis 被引量:1
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作者 Yonglei Zhang Ruidong Liu +3 位作者 Mei Li Yingzhe Guo Jichuang Kong Keyong Hou 《Journal of Environmental Sciences》 2025年第3期500-511,共12页
Formic and acetic acids are the most abundant gaseous organic acids and play the key role in the atmospheric chemistry.In iodine-adduct chemical ionizationmass spectrometry(CIMS),the low utilization efficiency of meth... Formic and acetic acids are the most abundant gaseous organic acids and play the key role in the atmospheric chemistry.In iodine-adduct chemical ionizationmass spectrometry(CIMS),the low utilization efficiency of methyl iodide and humidity interference are two major issues of the vacuum ultraviolet(VUV)lamp initiated CIMS for on-line gaseous formic and acetic acids analysis.In this work,we present a new CIMS based on VUV lamp,and the ion-molecular reactor is separated into photoionization and chemical ionization zones by a reducer electrode.Acetone was added to the photoionization zone,and the VUV photoionization acetone provided low-energy electrons for methyl iodide to generate I−,and the addition of acetone reduced the amount of methyl iodide by 2/3.In the chemical ionization zone,a headspace vial containing ultrapure water was added for humidity calibration,and the vial changes the sensitivity as a function of humidity from ambiguity to well linear correlation(R2>0.95).With humidity calibration,the CIMS can quantitatively measure formic and acetic acids in the humidity range of 0%-88%RH.In this mode,limits of detection of 10 and 50 pptv are obtained for formic and acetic acids,respectively.And the relative standard deviation(RSD)of quantitation stability for 6 days were less than 10.5%.This CIMS was successfully used to determine the formic and acetic acids in the underground parking and ambient environment of the Shandong University campus(Qingdao,China).In addition,we developed a simple model based formic acid concentration to assess vehicular emissions. 展开更多
关键词 Formic acid Acetic acid Vacuum ultraviolet(VUV)lamp photoionization(PI) Chemical ionization(CI) Time-of-flight mass spectrometry (TOFMS) Trace gases measurement
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玛瑙红樱桃花变绿植原体LAMP可视化检测方法建立
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作者 洪怡 田文杰 +3 位作者 文晓鹏 文壮 田田 乔光 《分子植物育种》 北大核心 2025年第14期4842-4849,共8页
花变绿植原体病害是近年来在玛瑙红樱桃上发生的一种毁灭性病害。课题组前期研究表明,该花变绿植原体属于16SrV型,为了建立能够用于玛瑙红樱桃花变绿植原体果园病害筛查,苗木流通检疫等方面的快速检测技术,本研究设计并优化了玛瑙红樱... 花变绿植原体病害是近年来在玛瑙红樱桃上发生的一种毁灭性病害。课题组前期研究表明,该花变绿植原体属于16SrV型,为了建立能够用于玛瑙红樱桃花变绿植原体果园病害筛查,苗木流通检疫等方面的快速检测技术,本研究设计并优化了玛瑙红樱桃花变绿植原体LAMP可视化检测方法。同时,灵敏度测试表明,该检测体系灵敏度为3.72×10^(-5)ng/μL,是普通PCR的100倍,同时对未出现花变绿症状的玛瑙红樱桃叶片(74份)进行检测,LAMP阳性检测率为36.84%、普通PCR方法仅仅为5.26%。本研究建立的玛瑙红樱桃花变绿植原体LAMP可视化检测方法灵敏度高,操作简单,具有非常好的基层推广潜力。 展开更多
关键词 樱桃 花变绿植原体 lamp检测技术
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LAMP5基因在食管癌中的预后作用及免疫分析
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作者 朱俊菘 梅格格 +3 位作者 霍振宇 何泉禄 任飞 李芳 《长治医学院学报》 2025年第2期97-102,共6页
目的:探讨LAMP5在食管癌中的预后作用和潜在免疫功能。方法:从TCGA和GTEx数据库获取181例食管癌肿瘤组织转录组数据和668例正常组织转录组数据,使用在线工具分析LAMP5在食管癌肿瘤样本和正常样本及临床各分期中的表达情况。使用limma软... 目的:探讨LAMP5在食管癌中的预后作用和潜在免疫功能。方法:从TCGA和GTEx数据库获取181例食管癌肿瘤组织转录组数据和668例正常组织转录组数据,使用在线工具分析LAMP5在食管癌肿瘤样本和正常样本及临床各分期中的表达情况。使用limma软件包鉴定食管癌组织和正常组织的差异表达基因,并进行KEGG通路富集和GO功能富集分析。绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用logrank检验和单变量Cox回归分析LAMP5表达与患者生存率的相关性。通过QUANTISEQ算法分别计算LAMP5表达与免疫细胞浸润的相关性以及与免疫检查点基因表达的相关性。结果:LAMP5在食管癌样本中高表达,在正常样本中低表达(P<0.001);LAMP5的表达在临床分期前3期中呈逐步增长的趋势(P<0.01);筛选出4896个差异表达基因,包括2861个上调基因以及2035个下调基因,通路富集分析结果显示,上调基因显著富集在细胞因子-细胞因子受体的相互作用、细胞周期等信号通路,下调基因显著富集在钙信号等通路;KM生存曲线结果表明低表达组患者的生存时间显著高于高表达组患者的生存时间;Cox回归模型风险比值结果表明LAMP5是食管癌的危险性因素;LAMP5的表达与Tregs、M2巨噬细胞等免疫细胞的浸润呈显著正相关,与7个免疫检查点基因的表达呈显著正相关。结论:LAMP5的表达与食管癌的预后密切相关,它在肿瘤微环境和抑制抗肿瘤免疫功能中发挥显著作用;LAMP5有望成为一种新型的食管癌诊断标志物,同时LAMP5在靶向免疫治疗药物开发中具有重要价值。 展开更多
关键词 lamp5 食管癌 预后 免疫分析 肿瘤微环境
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Early and Rapid Detection of Tomato Gray Mold Utilizing Loop-Mediated Isothermal Amplification(LAMP)Technology
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作者 Qian ZHAO Wen LI +3 位作者 Xiliu LI Zhenhua JIA Xiaojuan FENG Shuishan SONG 《Plant Diseases and Pests》 2025年第5期1-6,16,共7页
[Objectives]To develop methods for the early and rapid detection of tomato gray mold.[Methods]Utilizing the ACTIN gene of Botrytis cinerea as the target,a set of specific primers for loop-mediated isothermal amplifica... [Objectives]To develop methods for the early and rapid detection of tomato gray mold.[Methods]Utilizing the ACTIN gene of Botrytis cinerea as the target,a set of specific primers for loop-mediated isothermal amplification(LAMP)was designed and screened.Subsequently,the reaction system and conditions were optimized to achieve rapid isothermal amplification of B.cinerea.[Results]Through agarose gel electrophoresis and SYBR GreenⅠvisualization analysis,the optimal dosages of BstⅡDNA polymerase and dNTPs,as well as the optimal ratio of internal to external primers,were determined to be 0.6 U/μL,1.25 mmol/L,and 2:1,respectively.The specific detection of B.cinerea was accomplished at 61℃ for 40 min,achieving a sensitivity of 100 ag/μL,which is 106 times greater than that of conventional PCR detection.When this method was applied to the detection of tomato diseases,the detection limit for B.cinerea spores reached 20 spores/mL.Furthermore,the pathogen was detectable in tomato leaves that had been infected for 4 d,despite the absence of visible phenotypic symptoms of gray mold.[Conclusions]This method is suitable for the early,rapid,sensitive,and visual detection of tomato gray mold,thereby offering technical support for its early diagnosis,prevention,and control. 展开更多
关键词 TOMATO Botrytis cinerea Gray mold Loop-mediated isothermal amplification(lamp) ACTIN gene
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草莓滑刃线虫LAMP检测方法的建立
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作者 俞禄珍 李帅 +3 位作者 林宇 崔金璐 赵亚津 宋绍祎 《植物检疫》 2025年第1期35-38,共4页
草莓滑刃线虫(Aphelenchoides fragariae)是一种叶和芽寄生线虫,可侵染250多种植物,被列入我国检疫性有害生物名录。本研究通过比较GenBank数据库中滑刃属线虫相关序列,以草莓滑刃线虫rDNA-ITS序列为靶标,设计草莓滑刃线虫LAMP特异性引... 草莓滑刃线虫(Aphelenchoides fragariae)是一种叶和芽寄生线虫,可侵染250多种植物,被列入我国检疫性有害生物名录。本研究通过比较GenBank数据库中滑刃属线虫相关序列,以草莓滑刃线虫rDNA-ITS序列为靶标,设计草莓滑刃线虫LAMP特异性引物,建立了可视化LAMP反应检测体系,并采用目标线虫及近似种线虫DNA进行引物特异性验证。结果表明,本研究建立的LAMP检测方法可在1 h内对草莓滑刃线虫进行检测,供试其他22种植物线虫均未发生非特异性扩增,仅草莓滑刃线虫出现扩增,具有良好的物种特异性;检测灵敏度可达1/250条草莓滑刃线虫;检测结果可以直接用肉眼判断。因此,本方法具有反应时间短、灵敏度高、设备要求低的优点,适于基层实验室开展草莓滑刃线虫检测。 展开更多
关键词 草莓滑刃线虫 lamp 快速检测 RDNA-ITS
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微针辅助快速DNA提取联合LAMP技术用于三文鱼的鉴别
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作者 曹书菡 宁雯秋 +3 位作者 张芮宁 刘丽婷 杨雨婷 孟凡达 《生物医学》 2025年第5期967-974,共8页
目的:开发一种基于微针贴片提取DNA并联合LAMP技术识别特定DNA的方法,实现特殊样本的快速采集与鉴别,为市场监管、企业自检提供便携化解决方案。方法:构建一种微针贴片以快速提取组织间液并采用吹打的方式洗脱DNA,利用可视化LAMP比色法... 目的:开发一种基于微针贴片提取DNA并联合LAMP技术识别特定DNA的方法,实现特殊样本的快速采集与鉴别,为市场监管、企业自检提供便携化解决方案。方法:构建一种微针贴片以快速提取组织间液并采用吹打的方式洗脱DNA,利用可视化LAMP比色法实现三文鱼的DNA鉴别。结果:我们构筑的微针具有良好的外观表型、穿刺能力、抗形变能力与汲取能力,能够辅助快速DNA提取联合可视化LAMP比色法,可以在1 h内完成三文鱼的鉴别。结论:本方法构建的微针能够实现DNA快速提取,联合可视化LAMP比色法可快速实现对特定食品的鉴别,为食品的市场监管提供科学依据。 展开更多
关键词 微针提取 DNA鉴别 lamp可视化检测
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北京农学院联合企业研发的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒获得注册
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《北京农学院学报》 2025年第4期F0003-F0003,共1页
农业农村部发布第943号公告,批准由中联瑞(北京)生物科技有限责任公司、北京农学院等7家单位联合申报的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒注册,并发布了该产品的质量标准、工艺规程、说明书及标签。非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒由北京农学院董... 农业农村部发布第943号公告,批准由中联瑞(北京)生物科技有限责任公司、北京农学院等7家单位联合申报的非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒注册,并发布了该产品的质量标准、工艺规程、说明书及标签。非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒由北京农学院董虹教授团队联合7家企业共同研发,是一种用于快速检测生猪重大疫病的新技术,具有检出率高、灵敏度高、操作简便、结果易判读等显著优势。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 注册 lamp检测试剂盒
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基于沙门菌属LAMP检测的食品卫生检验优化方法
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作者 甘方勇 《现代食品》 2025年第1期196-199,共4页
沙门菌是一种常见的食源性病原体,能够引起沙门菌感染,导致食物中毒,严重时甚至可危及生命。优化检测方法对于快速准确地识别污染源、防止疾病的传播至关重要。本文通过对比传统的分离培养法,发现环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isot... 沙门菌是一种常见的食源性病原体,能够引起沙门菌感染,导致食物中毒,严重时甚至可危及生命。优化检测方法对于快速准确地识别污染源、防止疾病的传播至关重要。本文通过对比传统的分离培养法,发现环介导等温扩增技术(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)在检测速度、操作简便性和成本效益方面具有显著优势。实验结果表明,LAMP方法远快于分离培养法,且LAMP法的操作步骤简单,不需要复杂的设备和高技能的操作人员,能够有效降低成本。 展开更多
关键词 沙门菌属 环介导等温扩增技术(lamp) 食品检测
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