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lncRNA LAMA5-AS1在胰岛素抵抗中的作用及黄芪多糖与小檗碱联合使用对其的调控机制 被引量：1
1
作者 何析珈 毛竹君 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3710-3716,共7页
目的:探讨黄芪多糖(AP)与小檗碱(BBR)联合使用对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的作用是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)LAMA5-AS1的表达。方法:建立IR HepG2细胞模型并给予AP-BBR干预,构建LAMA5-AS1过表达载体和siRNA,检测其过表达效果... 目的:探讨黄芪多糖(AP)与小檗碱(BBR)联合使用对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的作用是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)LAMA5-AS1的表达。方法:建立IR HepG2细胞模型并给予AP-BBR干预,构建LAMA5-AS1过表达载体和siRNA,检测其过表达效果和干扰效果。将LAMA5-AS1和LAMA5-AS1 siRNA分别转染HepG2细胞,采用qRT-PCR检测IR相关基因mRNA表达;RNA pull-down和RNA免疫沉淀法(RIP)分别检测LAMA5-AS1和PCB蛋白之间的相互作用和结合情况。结果:与对照组比较,模型组LAMA5-AS1表达显著升高(P<0.05),AP-BBR组可显著降低LAMA5-AS1的表达(P<0.05)。与IR组比较,IR+AP-BBR组、IR+OE+AP-BBR组和IR+OENC+AP-BBR组chemerin、GLUT2、PPARα和PPARγ mRNA水平显著升高(P<0.01);IR+AP-BBR组、IR+siRNA+AP-BBR组和IR+siNC+AP-BBR组中chemerin、GLUT2、myostatin、p38MAPK和PPARα mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05);IR+siRNA组chemerin、GLUT2、myostatin、p38MAPK、PPARα和PPARγ mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05)。RNA pull-down和RIP实验发现,IP较IgG有显著的富集趋势(P<0.01),推断LAMA5-AS1-202可与PCB蛋白结合。结论:lncRNA LAMA5-AS1作为上游基因可诱导IR的发生,AP-BBR可能通过抑制LAMA5-AS1的表达,增加胰岛素相关基因水平而改善IR。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 黄芪多糖 小檗碱 长链非编码RNA lama5-AS1 机制 HepG2细胞模型
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