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利用CRISPRa技术提高乳酸克鲁维酵母凝乳酶分泌表达
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作者 邓宇慧 王世清 郑艳丽 《湖北大学学报（自然科学版）》 CAS 2025年第1期84-90,共7页
乳酸克鲁维酵母因其可靠的食品安全性被广泛应用于工业酶制剂生产,利用高通量的基因调控技术,如基于CRISPR-dCas9的基因表达激活平台(CRISPR activation,CRISPRa)是进一步促进酶制剂产量提高的最有效方法。本研究将激活因子VPR和LAC9分... 乳酸克鲁维酵母因其可靠的食品安全性被广泛应用于工业酶制剂生产,利用高通量的基因调控技术,如基于CRISPR-dCas9的基因表达激活平台(CRISPR activation,CRISPRa)是进一步促进酶制剂产量提高的最有效方法。本研究将激活因子VPR和LAC9分别与dCas9融合,针对P_(LAC4)启动子上游区域序列设计gRNA,引导dCas9-激活因子融合蛋白对其进行特异性结合,促进RNA聚合酶在该区域的聚集,驱动受P_(LAC4)启动子调控的凝乳酶表达。结果显示,dCas9-VPR与dCas9-LAC9的融合形式可分别将凝乳酶表达量提高1.67倍和1.65倍。本研究为利用乳酸克鲁维酵母进行工业酶制剂生产提供了有效的工具。 展开更多
关键词 乳酸克鲁维酵母 CRISPR-dCas9 lac9激活因子 VPR激活因子 凝乳酶
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随机质心映射优化法提升生防乳酸菌Lac 9-3的粘附性及其对冷藏凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)菌群结构的影响
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作者 唐智鑫 钱怡霖 +2 位作者 王荣荣 李苑 刘尊英 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第12期130-137,共8页
生防乳酸菌粘附是其在食品表面定植并发挥作用的第一步。为进一步提升乳酸菌Lac 9-3在凡纳滨对虾表面的粘附性,探究其对冷藏凡纳滨对虾腐败菌生长的影响,本研究采用随机质心映射优化法(Random-Centroid Optimization,RCO)优化了乳酸菌La... 生防乳酸菌粘附是其在食品表面定植并发挥作用的第一步。为进一步提升乳酸菌Lac 9-3在凡纳滨对虾表面的粘附性,探究其对冷藏凡纳滨对虾腐败菌生长的影响,本研究采用随机质心映射优化法(Random-Centroid Optimization,RCO)优化了乳酸菌Lac 9-3的接种条件(包括接种液浓度、接种菌株生长阶段、浸泡时间与接种液pH)。同时,运用高通量测序技术,分析经乳酸菌Lac 9-3处理后的凡纳滨对虾在冷藏第0、8和14 d菌群多样性与组成的差异,探究乳酸菌Lac 9-3对冷藏凡纳滨对虾菌群结构的影响。结果表明,乳酸菌Lac 9-3的最佳接种条件为:接种液浓度为10^(8)CFU/mL、菌株生长阶段为14.1 h(对应稳定期初期),浸泡时间为17.41 min,接种液pH为6.51。在最佳接种条件下,乳酸菌Lac 9-3在凡纳滨对虾表面的粘附数量达到2.08×10^(9)CFU/g,较同浓度对照组增加72.65%。此外,菌相结果显示,乳酸菌Lac 9-3可通过抑制凡纳滨对虾表面优势腐败菌希瓦氏菌属(Shewanella)、肉食杆菌属(Carnobacterium)、别弧菌属(Aliivibrio)与弧菌属(Vibrio)的生长繁殖,调节冷藏期间凡纳滨对虾的菌群结构。乳酸菌Lac 9-3粘附性的提升增加了其在凡纳滨对虾表面的粘附数量,从而调控冷藏过程中凡纳滨对虾的菌群结构并影响其腐败进程,揭示了乳酸菌Lac 9-3在水产品保鲜中的应用潜力。 展开更多
关键词 随机质心映射优化 乳酸菌Lac 9-3 粘附性 菌相 凡纳滨对虾 冷藏
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