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An Inquiry Into the Effect of Peers on L2 Motivation Under the L2 Motivational Self System
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作者 Xiaoyu Zhang 《Chinese Journal of Applied Linguistics》 2025年第2期207-227,320,321,共23页
Second language(L2)motivation has been a topic which receives intensive attention.However,the peer effect on L2 motivation is insufficiently researched,although it is considered a crucial factor which may significantl... Second language(L2)motivation has been a topic which receives intensive attention.However,the peer effect on L2 motivation is insufficiently researched,although it is considered a crucial factor which may significantly mediate learners’L2 motivation.Hence,the current study adopted Dörnyei’s L2 Motivational Self System(L2MSS)as a theoretical framework and investigated in which specific aspects peers might affect the learners’L2 motivation and whether such effect was long-lasting.The research was designed as a small-scale qualitative study which was located in a language-focused experimental class project in China.Ten participants were recruited and individual interviews were conducted.The results demonstrated that,first,peers could remarkably influence the L2 motivation possessed by the students in the experimental class since they tended to create a clearer ideal L2 self and a more powerful ought-to L2 self.Second,although they had both positive and negative views towards the curriculum,a motivated peer climate could alleviate the pressure caused by the curriculum and reinforce positive attitudes.Third,such peer effect was not long-lasting.Based on the research results,pedagogical implications were proposed in terms of establishing a positive peer group and adjusting the emphasis of the curriculum. 展开更多
关键词 peer effect l2 motivation ideal l2 self ought-to l2 self curriculum
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环状RNA EPB41L2通过调控微小RNA-1270/GNAI3轴抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖和迁移及侵袭 被引量:2
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作者 杨凤 缪克红 +2 位作者 兰玉燕 林方梁 孙黎波 《中华老年口腔医学杂志》 2025年第1期4-11,共8页
目的环状RNA(circular RNA,circRNA)与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的进展密切相关,现探讨circRNA EPB41L2调控OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法将细胞分为7组:HOK组(正常培养的口腔上皮细胞)、SCC-9组... 目的环状RNA(circular RNA,circRNA)与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)的进展密切相关,现探讨circRNA EPB41L2调控OSCC细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制。方法将细胞分为7组:HOK组(正常培养的口腔上皮细胞)、SCC-9组(正常培养的SCC-9细胞)、CAL-27组(正常培养的CAL-27细胞)、oe NC组(转染空载pcDNA3.4至CAL-27细胞)、oe EPB41L2组(转染pcDNA3.4-EPB41L2至CAL-27细胞)、oe EPB41L2+mimics NC组(转染pcDNA3.4-EPB41L2及mimics NC至CAL-27细胞)、oe EPB41L2+miR mimics组(转染pcDNA3.4-EPB41L2及miR-1270 mimics至CAL-27细胞)。通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测circRNA EPB41L2、miR-1270及GNAI3 mRNA在各组细胞中的表达,通过CCK-8检测各组细胞活力,通过流式细胞术检测各组细胞凋亡率,通过集落形成实验检测各组细胞增殖能力,通过细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,通过Transwell实验检测各组细胞侵袭数量,通过Western blot检测GNAI3蛋白在各组细胞中的表达,通过RNA pull-down实验、RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)实验、双荧光素酶报告实验验证miR-1270与circRNA EPB41L2的靶向结合关系,通过双荧光素酶报告实验验证miR-1270与GNAI3的靶向结合关系。结果与HOK组比较,SCC-9组、CAL-27组中circRNA EPB41L2表达显著下降(P<0.01),且在CAL-27组中表达水平最低,因此选取CAL-27细胞作为后续研究对象。与oe NC组比较,oe-circRNA EPB41L2组CAL-27细胞活力、增殖能力、划痕愈合率、侵袭数量显著下降,细胞凋亡率显著上升(P<0.001)。与oe EPB41L2+mimics NC组比较,oe EPB41L2+miR mimics组CAL-27细胞增殖能力、划痕愈合率、侵袭数量显著上升,细胞凋亡率显著下降(P<0.001)。与HOK组比较,CAL-27组细胞miR-1270表达显著升高(P<0.001);与oe NC组比较,oe EPB41L2组细胞miR-1270表达显著下降(P<0.001)。与HOK组比较,CAL-27组细胞GNAI3 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.001);与oe NC组比较,oe EPB41L2组细胞GNAI3 mRNA和蛋白表达显著上升(P<0.001);与oe EPB41L2+mimics NC组比较,oe EPB41L2+miR mimics组GNAI3 mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05)。RNA pull-down实验、RIP实验、双荧光素酶报告实验共同证实miR-1270与circRNA EPB41L2靶向结合。双荧光素酶报告实验证实miR-1270与GNAI3靶向结合。结论circ RNA EPB41L2通过调控miR-1270/GNAI3轴抑制OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 环状RNA EPB41l2 微小RNA-1270 GNAI3 增殖 迁移
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红花来源纳米囊泡通过调控SIPA1L2泛素化促进内皮细胞自噬 被引量:1
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作者 罗烨 杨灵 +2 位作者 陈俊羽 翁建新 柯晓 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第2期303-310,共8页
目的:探讨红花来源纳米囊泡(Carthamus tinctorius L.-derived nanovesicles,CDNVs)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)介导的内皮细胞损伤中的保护作用及其调节机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC... 目的:探讨红花来源纳米囊泡(Carthamus tinctorius L.-derived nanovesicles,CDNVs)在氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)介导的内皮细胞损伤中的保护作用及其调节机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),用ox-LDL诱导内皮细胞损伤模型;分为正常对照(normal control,NC)组、oxLDL组(HUVECs加入100 mg/L ox-LDL处理24 h构建内皮细胞损伤模型或内皮细胞炎症模型)和CDNVs+ox-LDL组(先加入40 mg/L CDNVs处理1 h后再加入100 mg/L ox-LDL共培养24 h。采用EdU增殖染色实验观察HUVECs增殖情况;采用细胞凋亡实验检测HUVECs的凋亡水平;RT-qPCR检测信号诱导增殖相关蛋白1样蛋白2(signal-induced proliferation-associated 1-like protein 2,SIPA1L2)mRNA的表达变化;Western blot实验检测自噬蛋白及SIPA1L2蛋白表达水平的变化;免疫共沉淀检测SIPA1L2的泛素化程度。结果:(1)成功分离提纯CDNVs,其鉴定为类圆形、具有双层膜结构的纳米级别囊泡;(2)CDNVs可促进ox-LDL干预下HUVECs的增殖水平(P<0.05),并抑制凋亡(P<0.05);(3)CDNVs可抑制ox-LDL干预下HUVECs的SIPA1L2蛋白表达水平(P<0.05),并促进其自噬(P<0.05);(4)CDNVs促进SIPA1L2蛋白泛素化,并通过泛素-蛋白酶体途径降低SIPA1L2的蛋白水平(P<0.05)。结论:CDNVs通过介导SIPA1L2泛素化促进内皮细胞自噬而发挥保护作用。 展开更多
关键词 红花 纳米囊泡 自噬 SIPA1l2蛋白 泛素化
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人胚肺二倍体细胞系MU-L2与MRC-5的生物学特性比较
4
作者 杨雅雯 程玮 +5 位作者 靳莉武 张震宇 杨迪 王家敏 陈建国 乔自林 《中国生物制品学杂志》 2025年第9期1043-1048,1055,共7页
目的 对人胚肺细胞系MU-L2、转染SV40-LT基因的MU-L2细胞系MU-SVL2与国际上已建立的人胚肺细胞系MRC-5的生物学特性进行比较,以期将MU-L2细胞系应用于生物医学研究及疫苗生产。方法 采用含10%NBS的MEM培养基培养MU-L2、MU-SVL2、MRC-5细... 目的 对人胚肺细胞系MU-L2、转染SV40-LT基因的MU-L2细胞系MU-SVL2与国际上已建立的人胚肺细胞系MRC-5的生物学特性进行比较,以期将MU-L2细胞系应用于生物医学研究及疫苗生产。方法 采用含10%NBS的MEM培养基培养MU-L2、MU-SVL2、MRC-5细胞,并按《中国药典》三部(2020版)的要求进行传代。镜下观察3种细胞的生长特性,CCK-8法检测细胞的增殖能力,qPCR法检测相对端粒长度,软琼脂克隆形成试验分析细胞成瘤性,吉姆萨染色核型分析法检测染色体的稳定情况,并进行比较。结果 培养72 h后,3种细胞均长成致密单层,细胞呈现典型的漩涡状排列形态,生长状态良好;MU-L2、MU-SVL2细胞在培养3~6 d时增殖速度显著高于MRC-5细胞(F=1.893,P<0.05);随着代次的增加,相对端粒长度随之缩短,且MU-L2、MU-SVL2细胞相对端粒长度均长于相近代次的MRC-5细胞;3种细胞均未见细胞集落形成,且均属于正常人二倍体核型。结论 MU-L2及MU-SVL2细胞增殖能力强、端粒稳定性更佳、无成瘤性且染色体稳定,有望应用于生物医学研究和疫苗生产。 展开更多
关键词 人胚肺二倍体细胞 MU-l2细胞 MU-SVl2细胞 MRC-5细胞 生物学特性
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NFE2L2/KEAP1在牙周炎中对细胞成骨分化的调控机制
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作者 黄燕飞 于鸿滨 +5 位作者 殷凌云 梁婧 李昌全 李德宏 王金缘 欧阳骞 《昆明医科大学学报》 2025年第7期26-37,共12页
目的探讨NFE2L2/KEAP1在牙周炎导致的牙槽骨流失后修复中的调控机制。方法建立大鼠牙周炎模型,分为对照组(n=6);牙周炎模型组(n=6);牙周炎+慢病毒空载组(n=6);牙周炎+NFE2L2过表达质粒组(n=6)。HE观察每组小鼠病理变化,通过TRAP染色检... 目的探讨NFE2L2/KEAP1在牙周炎导致的牙槽骨流失后修复中的调控机制。方法建立大鼠牙周炎模型,分为对照组(n=6);牙周炎模型组(n=6);牙周炎+慢病毒空载组(n=6);牙周炎+NFE2L2过表达质粒组(n=6)。HE观察每组小鼠病理变化,通过TRAP染色检测破骨细胞阳性情况,通过ELISA检测组织中的炎症因子水平,通过免疫荧光和qPCR检测NFE2L2的表达,通过western blot检测成骨蛋白ALPL2,RUNX2以及COL1的表达。培养原代牙周韧带细胞(hPDLCs),通过细胞转染过表达NFE2L2及KEAP1。细胞分为六组:正常组;模型组;pcDNA-NC组;pcDNA-NFE2L2组;pc-NFE2L2+pcDNA-NC组;pc-NFE2L2+pcDNA-KEAP1组。建立细胞模型,通过显微镜观察原代细胞牙周韧带细胞(hPDLCs)的形态,通过CKK-8观察细胞的增殖,通过茜素红染色法观察成骨细胞矿化,通过Western Blot检测成骨蛋白以及自噬标志物的表达,通过细胞划痕实验观察细胞迁移。结果(1)经模型诱导后,牙龈发红、肿胀,出现大量炎性浸润,牙槽骨吸收馅窝,证明模型建立成功,在经过慢病毒过表达NFE2L2后,组织部分恢复;(2)经模型诱导后破骨细胞阳性率上升,证明模型建立成功,过表达NFE2L2减少了破骨细胞的阳性率(P<0.001);(3)经模型诱导后,IL-1β,IL-10,及Tnf-α的浓度相较于正常组均上升(P<0.05),证明模型建立成功,转染NFE2L2慢病毒之后,炎症因子的浓度减少(P<0.0001);(4)经模型诱导后,成骨蛋白的表达相较于正常组有所下降过表达NFE2L2之后促进了成骨相关蛋白的表达(P<0.05);(5)LPS处理后细胞活力明显下降,过表达NFE2L2增加了细胞的活力(P<0.0001);(6)LPS处理后钙化结节减少,过表达NFE2L2后,钙化结节增加,加入pcDNA-KEAP1后,矿化结节减少;(7)LPS处理后成骨蛋白的表达下降,转染NFE2L2过表达质粒后,成骨相关蛋白的表达增加,但加入pcDNA-KEAP1后,成骨相关蛋白的表达减少(P<0.05);(8)LPS处理后细胞迁移率下降,过表达NFE2L2增加了细胞迁移率(P<0.0001);(9)LPS处理后,自噬标志物的表达下降,转染NFE2L2质粒后,自噬标志物的表达增加,但加入pcDNA-KEAP1后,自噬标志物的表达减少(P<0.05)。结论发现了NFE2L2/KEAP1在牙周炎中的调控作用,为治疗牙周炎提供科学依据。 展开更多
关键词 牙周炎 KEAP1/NFE2l2 自噬 成骨细胞
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云南地区TCF7L2基因多态性与肾移植后糖尿病的关系
6
作者 牛玲 李博一 +2 位作者 胡伟 张程 马蓉 《云南医药》 2025年第5期1-7,共7页
目的探讨TCF7L2基因多态性与云南地区PTDM的关系。方法选取在昆明市第一人民医院内分泌科住院及泌尿外科门诊就诊的进行同种异体肾移植术的受者59例,根据ADA及WHO糖尿病诊断标准将其分组为肾移植后非糖尿病组(对照组)39例,PTDM组20例,检... 目的探讨TCF7L2基因多态性与云南地区PTDM的关系。方法选取在昆明市第一人民医院内分泌科住院及泌尿外科门诊就诊的进行同种异体肾移植术的受者59例,根据ADA及WHO糖尿病诊断标准将其分组为肾移植后非糖尿病组(对照组)39例,PTDM组20例,检测TCF7L2基因rs7903146、rs290487两个位点基因型及等位基因频率,比较2组患者的性别、移植时年龄和体重、身高、有无高血压病史、体重指数、血脂等指标的差异;采用Logistic回归筛选PTDM的独立危险因素。结果(1)2组患者比较,移植时年龄、高血压病史、TG、HDLC、FPG、Hbalc比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)TCF7L2基因rs7903146位点CC,CT+TT基因型比较差异有统计学意义(P<0.05),PTDM组CT基因型占比最高(35%);等位基因C、T的分布频率比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)TCF7L2基因rs290487位点CC、CT、TT基因型及等位基因C、T的分布频率对比差异无统计学意义(P>0.05)。(4)回归分析提示仅移植时年龄进入回归方程(OR=1.397,95%CI=0.957~2.040,P<0.05)。结论TCF7L2rs7903146位点CT/TT基因型可能与云南地区肾移植后糖尿病发生有关;移植时年龄是PTDM发生的独立危险因素。 展开更多
关键词 TCF7l2基因 基因多态性 移植后糖尿病
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缺血性脑卒中铁死亡特征基因NFE2L2的鉴定与验证 被引量:2
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作者 王咪 马书杰 +1 位作者 刘杨 齐瑞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第7期1466-1474,共9页
背景:铁死亡与缺血性脑卒中的发病密切相关,靶向铁死亡是一种治疗缺血性脑卒中有前景的方案,但具体调控靶点尚不明确。目的:通过生物信息学和机器学习方法筛选缺血性脑卒中铁死亡相关特征基因,并通过细胞实验进行验证,探讨铁死亡在缺血... 背景:铁死亡与缺血性脑卒中的发病密切相关,靶向铁死亡是一种治疗缺血性脑卒中有前景的方案,但具体调控靶点尚不明确。目的:通过生物信息学和机器学习方法筛选缺血性脑卒中铁死亡相关特征基因,并通过细胞实验进行验证,探讨铁死亡在缺血性脑卒中的作用。方法:基于GEO数据库和FerrDb数据库选取符合条件的缺血性脑卒中相关数据集和铁死亡表达数据集,通过t检验筛选铁死亡相关差异基因。对铁死亡相关差异基因进行GO功能富集分析与KEGG信号通路富集分析。通过PPI网络分析和机器学习筛选缺血性脑卒中铁死亡的特征基因,利用ROC分析和GSEA分析探究特征基因的准确性和生物功能。然后进行细胞实验,将HT22细胞分为对照组与缺血性脑卒中组,对照组不作任何干预,缺血性脑卒中组加入0.1 mol/L的H_(2)O_(2)干预24 h诱导细胞氧化应激和铁死亡,通过实时荧光定量RT-PCR和Western Blot验证铁死亡的发生和特征基因表达。结果与结论:(1)共获取45个铁死亡相关差异基因,GO和KEGG富集分析发现差异基因与氧化应激、自噬、铁死亡、脂肪细胞因子信号通路和线粒体代谢密切相关。(2)通过PPI网络中的MCODE插件和cytoHubba插件与机器学习中的LASSO算法和SVM-RFE算法共鉴定出1个铁死亡特征基因核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,NFE2L2)。(3)对NFE2L2进行ROC曲线分析,发现在训练集和验证集中构建的诊断预测模型具有良好的准确性与特异性;对NFE2L2进行GSEA分析,发现特征基因通过免疫、炎症反应、氨基酸代谢及神经因子调控等方面参与缺血性脑卒中发病机制的调控。(4)细胞实验的RT-PCR和Western Blot分析表明,与对照组对比,缺血性脑卒中组中的酰基辅酶A合成酶长链家族成员4 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶4 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与对照组对比,缺血性脑卒中组中特征基因NFE2L2 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。(5)上述结果证实,缺血性脑卒中与铁死亡密切相关,靶向特征基因NFE2L2可以为研究和治疗缺血性脑卒中提供一定的思路与方向。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 铁死亡 生物信息学 HT22细胞 机器学习 特征基因 细胞实验 NFE2l2 ASCL4 GPX4
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PD-L2基因敲除小鼠的脾脏免疫表型分析
8
作者 杨艳红 宋赛哲 刘翠平 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1048-1054,共7页
目的:研究PD-L2基因敲除对C57BL/6小鼠脾脏免疫表型的影响。方法:连续称量雌性和雄性野生型(WT)和PD-L2基因敲除(KO)小鼠3~12周的体质量。HE染色观察4组小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、卵巢、子宫和睾丸组织结构差异;脲酶紫外速率法测... 目的:研究PD-L2基因敲除对C57BL/6小鼠脾脏免疫表型的影响。方法:连续称量雌性和雄性野生型(WT)和PD-L2基因敲除(KO)小鼠3~12周的体质量。HE染色观察4组小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、卵巢、子宫和睾丸组织结构差异;脲酶紫外速率法测量小鼠血清中尿素水平;肌氨酸氧化酶法检测小鼠血清肌酐浓度;流式细胞术检测小鼠脾脏各免疫细胞比例及细胞因子差异。结果:PD-L2基因敲除对小鼠体质量及各器官结构无明显影响。雌性KO小鼠血清尿素和肌酐浓度均高于WT小鼠,但雄性之间差异无统计学意义。雌性KO小鼠脾脏CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、Treg、NK细胞和树突状细胞(DC)较WT小鼠比例降低,而Tfh、B细胞、浆细胞、na?ve B细胞和B2细胞比例升高,IL-17、IL-6和IL-22等促炎细胞因子增加,而IL-10、IL-4等抑炎细胞因子减少,雄性小鼠之间差异不明显或无差异。结论:PD-L2基因敲除主要影响雌性小鼠外周免疫表型,敲除后小鼠炎症反应激活,免疫抑制减弱。 展开更多
关键词 PD-l2 基因敲除 组织结构 免疫表型 炎症反应
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高危人乳头瘤病毒L1、L2蛋白对宫颈癌自噬的影响
9
作者 高勋 王志莲 《医学分子生物学杂志》 2025年第4期399-402,408,共5页
自噬是细胞用来维持体内平衡的一种自我消耗机制,部分研究提示,高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)通过作用于宿主细胞自噬促进宫颈癌的发生。HR-HPV具有将病毒基因组整合到宿主DNA中进而感染宿主细胞的能力,HR... 自噬是细胞用来维持体内平衡的一种自我消耗机制,部分研究提示,高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)通过作用于宿主细胞自噬促进宫颈癌的发生。HR-HPV具有将病毒基因组整合到宿主DNA中进而感染宿主细胞的能力,HR-HPV L1、L2蛋白协助病毒进入细胞,并通过与靶细胞膜上的细胞表面受体相互作用激活PI3K/AKT/mTOR信号通路以抑制自噬过程,使得病毒颗粒不间断地向细胞内运输。HR-HPV L1、L2蛋白可在细胞质中表达并转移到细胞核,通过影响细胞自噬协助病毒逃避免疫监视。虽然目前已有针对HR-HPV L1、L2蛋白的HPV预防性疫苗,但明确HR-HPV L1、L2蛋白对宫颈癌自噬具体的调节方式,或能为宫颈癌的防治拓展新思路。 展开更多
关键词 高危人乳头瘤病毒 L1蛋白 l2蛋白 宫颈癌 自噬
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CRISPR/Cas9介导的Bcl2l1基因敲除细胞系的建立及对塞内卡病毒复制的影响
10
作者 董钰蓓 郭承意 +5 位作者 吴雨晴 马梓承 蒋珽 高雁怩 姜平 白娟 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第10期116-122,共7页
基于CRISPR/Cas9基因编辑平台,对仓鼠肾细胞(BHK-21)及猪睾丸细胞(ST)这2种细胞系实施Bcl2l1基因定向敲除,为探究B细胞淋巴瘤2类似蛋白1(Bcl2l1)基因编码的Bcl-xL蛋白在塞内卡病毒A(SVA)感染鼠源和猪源细胞中的作用及分子机制提供试验... 基于CRISPR/Cas9基因编辑平台,对仓鼠肾细胞(BHK-21)及猪睾丸细胞(ST)这2种细胞系实施Bcl2l1基因定向敲除,为探究B细胞淋巴瘤2类似蛋白1(Bcl2l1)基因编码的Bcl-xL蛋白在塞内卡病毒A(SVA)感染鼠源和猪源细胞中的作用及分子机制提供试验材料。首先设计并合成5条靶向Bcl2l1基因的sgRNA,分别连接到慢病毒载体Lenti CRISPR v2上;将构建好的慢病毒质粒转染至人胚胎肾细胞(HEK293T),获得重组慢病毒并感染BHK-21和ST细胞;再经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得Bcl2l1基因敲除的细胞株;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot验证Bcl2l1基因的敲除情况;通过CCK8法分别检测Bcl2l1基因敲除对BHK-21和ST细胞活性的影响。结果:筛选得到5株Bcl2l1基因缺失的细胞系,即3株Bcl2l1基因敲除鼠源细胞系(Bcl2l1^(-/-)BHK-21)和2株Bcl2l1基因敲除猪源细胞系(Bcl2l1^(-/-)ST);RT-qPCR及Western blot结果显示,与野生型细胞系相比,Bcl2l1基因敲除细胞系的mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001);CCK8试验结果显示,Bcl2l1基因敲除的BHK-21细胞系在增殖能力方面与野生型相比未出现明显变化。在ST细胞系中,Bcl2l1基因的缺失导致了显著的增殖能力下降,与野生型ST细胞形成鲜明对比;Western blot和RT-qPCR试验均显示,Bcl2l1基因敲除后显著抑制了SVA的增殖(P<0.0001)。综上,本研究利用CRISPR/Cas9系统成功构建了敲除Bcl2l1基因的BHK-21细胞系和ST细胞系,并证实Bcl2l1基因在SVA复制中发挥着重要作用,为深入研究Bcl2l1基因的功能提供了理想的细胞模型。 展开更多
关键词 Bcl2l1基因 基因敲除 BHK-21细胞 ST细胞 塞内卡病毒A
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miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用及补肾健脾活血方的影响 被引量:2
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作者 陈桐莹 付赛 +8 位作者 李小韵 刘树华 杨贻富 杨东升 曾韵杰 李扬博 罗丹 黄宏兴 万雷 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第3期583-589,共7页
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病,补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机,以补肾健脾活血为法,对治疗OP有显著效果,微核糖核酸(microRNA,miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1(B-cell lymphoma-2-like protei... 骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种骨重建与骨形成失衡的老年性骨病,补肾健脾活血方针对肾虚脾虚血瘀的病机,以补肾健脾活血为法,对治疗OP有显著效果,微核糖核酸(microRNA,miRNA)、B细胞淋巴瘤-2样蛋白1(B-cell lymphoma-2-like protein 1,BCL2L1)与骨细胞代谢密切相关,故该研究采用双荧光素酶法、聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测miR-140-5p与BCL2L1的结合情况;沉默或过表达miR-140-5p后,流式细胞术检测、蛋白免疫印迹(Western blot)观察人胎成骨细胞(human fetal osteoblast cell line 1.19,HFOB1.19)凋亡与自噬的发生与成骨功能;大鼠灌胃补肾健脾活血方后制备含药血清,采用不同浓度的补肾健脾活血方含药血清分别干预含或不含miR-140-5p micmi的HFOB1.19,观察各组细胞的成骨蛋白表达,研究miR-140-5p/BCL2L1在HFOB1.19凋亡、自噬中的作用,并观察补肾健脾活血方对其的影响。双荧光素酶检测显示miR-140-5p与BCL2L1结合;流式细胞术检测、Western blot检测结果显示miR-140-5p促进HFOB1.19细胞凋亡且miR-140-5p抑制HFOB1.19细胞自噬;高、中、低剂量补肾健脾活血方含药血清干预HFOB1.19后,与miR-140-5p NC组相比,miR-140-5p micmic组的成骨蛋白骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)表达下降,而高剂量干预下的micmic组骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)表达无明显差别。故miR-140-5p/BCL2L1可促进HFOB1.19凋亡与抑制自噬的发生,补肾健脾活血方可通过BMP2影响miR-140-5p的抑成骨作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 补肾健脾活血方 miR-140-5p BCl2L1 凋亡 自噬
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NDUFA4L2通过抑制缺氧条件下活性氧生成促进肺鳞癌进展的研究
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作者 韩鹏 杨艺员 +3 位作者 王源波 周洁君 刘岩 梁一倩 《陕西医学杂志》 2025年第7期867-872,共6页
目的:探究缺氧条件下肺鳞癌细胞NDUFA4L2的表达情况和对细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制,为肺鳞癌靶向治疗提供新的靶点。方法:缺氧或常氧培养人肺鳞癌细胞系NCI-H226,Western blot法检测NDUFA4L2表达以及小干扰RNA(siRNA)敲减缺氧诱... 目的:探究缺氧条件下肺鳞癌细胞NDUFA4L2的表达情况和对细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制,为肺鳞癌靶向治疗提供新的靶点。方法:缺氧或常氧培养人肺鳞癌细胞系NCI-H226,Western blot法检测NDUFA4L2表达以及小干扰RNA(siRNA)敲减缺氧诱导因子-1(HIF-1α)对NDUFA4L2表达的影响;应用超氧化物阴离子荧光探针检测缺氧条件下细胞内活性氧(ROS)水平。构建NDUFA4L2敲减(NCI-H226-shNDUFA4L2)及对照组(NCI-H226-shControl)细胞模型,采用CCK-8法及流式细胞术检测NDUFA4L2敲减及抗氧化剂(NAC)对肺鳞癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的作用。结果:缺氧培养NCI-H226细胞的NDUFA4L2表达水平较常氧培养显著增加(P=0.019)。应用siRNA敲减HIF-1α可显著抑制缺氧条件下NDUFA4L2的表达(P<0.001)。与NCI-H226-shControl细胞相比,缺氧条件下NCI-H226-shNDUFA4L2细胞的ROS水平显著增高(P<0.001);NAC可明显降低NDUFA4L2敲减引起的细胞内ROS水平增高(P<0.001)。与NCI-H226-shControl细胞相比,缺氧条件下NCI-H226-shNDUFA4L2细胞的增殖能力显著降低,凋亡率显著增加,细胞周期G1期细胞比率升高,S期细胞比例下调(均P<0.001)。NAC可逆转NDUFA4L2敲减对NCI-H226增殖、凋亡和细胞周期的影响(均P<0.001)。结论:缺氧通过HIF-1α介导NDUFA4L2表达上调,NDUFA4L2可能通过抑制缺氧时肺鳞癌细胞内ROS的生成发挥促进肿瘤进展的作用。 展开更多
关键词 肺鳞癌 NDUFA4l2 缺氧诱导因子-1 缺氧 活性氧 细胞增殖
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非小细胞肺癌组织中NDUFA4L2的表达及其临床意义
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作者 韩鹏 张伯翔 +3 位作者 杨艺员 李慧婕 许惠 梁一倩 《陕西医学杂志》 2025年第4期435-440,457,共7页
目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤及正常肺组织中NDUFA4L2的表达差异,探讨其与患者预后及临床病理特征的关联,以期为NSCLC的诊断与治疗提供新的参考方向。方法:应用Oncomine和癌症基因图谱(TCGA)数据库,比较分析NDUFA4L2在NSCLC与... 目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤及正常肺组织中NDUFA4L2的表达差异,探讨其与患者预后及临床病理特征的关联,以期为NSCLC的诊断与治疗提供新的参考方向。方法:应用Oncomine和癌症基因图谱(TCGA)数据库,比较分析NDUFA4L2在NSCLC与正常肺组织中的表达水平;应用Kaplan-Meier生存曲线分析和Log-rank检验,评估NDUFA4L2表达水平与预后的关系。收集45例NSCLC肿瘤组织标本和癌旁非肿瘤组织,应用RT-PCR及免疫组化方法检测NDUFA4L2的表达情况。结果:通过Oncomine和TCGA数据库分析表明,与正常肺组织比较,肺鳞癌组织NDUFA4L2 mRNA表达量显著增高(P<0.001),而肺腺癌和大细胞肺癌组织中NDUFA4L2 mRNA表达水平与正常肺组织比较无统计学差异(P值分别为0.924和0.165);Kaplan-Meier生存分析指出NDUFA4L2表达水平与肺鳞癌患者总生存期显著相关(P=0.019),且高表达提示预后不良。此外,RT-PCR和免疫组化检测也指出,肺鳞癌组织NDUFA4L2 mRNA和蛋白表达水平较癌旁非肿瘤组织显著增高(P值分别为<0.001和0.008),并且与肺鳞癌的TNM分期呈正相关(P=0.030);肺腺癌组织NDUFA4L2 mRNA和蛋白表达与癌旁非肿瘤组织比较无统计学差异(P值分别为0.567和0.405)。结论:NDUFA4L2在肺鳞癌组织中呈特异性表达,其高表达水平与患者的不良预后密切相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 肺鳞癌 肺腺癌 NDUFA4l2 预后 免疫组化
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香草扶正合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织能量代谢及PD-L2、RGMb表达的影响
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作者 程权 傅华洲 《中国中医药科技》 2025年第1期20-25,共6页
目的:探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效应及机制。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,顺铂(DDP)组,XCFZ低、中、高剂量组,联合组,每组10只;造模第2天开始... 目的:探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效应及机制。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,顺铂(DDP)组,XCFZ低、中、高剂量组,联合组,每组10只;造模第2天开始XCFZ低、中、高剂量组分别予9.3、18.6、37.2 g/kg XCFZ灌胃;顺铂组以5 mg/kg顺铂溶液隔天腹腔注射,同时以等量双蒸水灌胃,联合组以XCFZ中剂量灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量双蒸水灌胃,每天1次,连续给药14 d;称取小鼠瘤质量及去瘤后体质量并计算抑瘤率,Real-time PCR法检测肺癌组织三磷酸腺苷合酶β亚基(ATP 5B)mRNA表达及细胞色素C氧化酶亚单IV(COX IV)mRNA表达水平;高效液相色谱法(HPLC)检测一磷酸腺苷(AMP)、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)含量。TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡。Western blot检测肿瘤组织细胞程序性死亡配体-2(PD-L2)和反义导向分子(RGMb)表达水平。结果:与模型组比较,联合组抑瘤率最高,其次为顺铂组,XCFZ中剂量组。与模型组比较,XCFZ中剂量组去瘤后体质量升高(P<0.05),顺铂组降低(P<0.05)。与模型组比较,顺铂组及XCFZ高、中剂量组ATP 5B mRNA,COX IV mRNA表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组ATP含量均降低(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,联合组ATP含量显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,联合组及XCFZ各剂量组ADP/ATP及AMP/ATP显著升高(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,XCFZ中剂量组ADP/ATP及AMP/ATP显著升高(P<0.05或P<0.01)。TUNEL染色可见模型组肿瘤细胞凋亡稀少,而各给药组肿瘤细胞凋亡明显增多;各给药组肿瘤细胞稀疏,细胞间空洞较多;DDP组和联合组可见大量坏死细胞,肿瘤细胞抑制萎缩,伴大量碎裂和固缩细胞核及多见胞间空洞。与模型组比较,各用药组PD-L2和RGMb蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与顺铂组比较,联合组及XCFZ中、高剂量组PD-L2/RGMb蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:XCFZ对Lewis肺癌小鼠具有抑瘤作用,且可提高小鼠的体质量,其机制可能与抑制肿瘤组织能量代谢和下调PD-L2和RGMb蛋白表达相关。 展开更多
关键词 香草扶正合剂 肺癌 ATP 5B COX IV PD-l2/RGMb 小鼠
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基于L2-DFNN的桥梁多层次风险识别研究
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作者 张在羽 李舒 +1 位作者 甘露一 刘洪涛 《地震工程学报》 北大核心 2025年第6期1357-1368,共12页
为解决传统风险识别方法在复杂的桥梁风险情景下识别能力不足的问题,以某三跨连续梁桥为研究对象,构建该桥多层次风险情景库。基于改进的深度前馈神经网络(DFNN),对桥梁的不同风险类型、风险位置及风险程度进行特征学习,并用训练完毕的... 为解决传统风险识别方法在复杂的桥梁风险情景下识别能力不足的问题,以某三跨连续梁桥为研究对象,构建该桥多层次风险情景库。基于改进的深度前馈神经网络(DFNN),对桥梁的不同风险类型、风险位置及风险程度进行特征学习,并用训练完毕的网络对典型风险情景进行预测分析,实现桥梁多层次风险识别研究。结果表明,加入L2正则化可以显著提升DFNN的泛化能力,使分类、定位及定量识别的训练准确度分别达到91.6%、74.9%和93.7%;网络在有限元模拟典型风险识别任务中表现出较高的预测准确率,分别为80%、100%和97.41%。总体而言,提出的L2-DFNN可以较好地实现桥梁多层次风险识别工作,可为桥梁健康监测(BHM)提供重要支撑。 展开更多
关键词 多层次风险识别 深度前馈神经网络 l2正则化 有限元模拟 桥梁健康监测
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永磁整流发电系统速度观测超螺旋最优L2增益控制
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作者 尚馨菲 谷志锋 +4 位作者 由学敏 杜巍 张建中 杨雯雯 王彪 《中国测试》 北大核心 2025年第7期172-178,188,共8页
为降低未建模动态及参数不确定性对表贴式永磁整流发电系统稳定性影响,解决传统滑模观测器存在的相位滞后和控制抖振的问题,采用k类函数超螺旋状态观测及凸优化线性矩阵不等式求解方法,提出一种速度观测超螺旋最优L2增益控制(super-twis... 为降低未建模动态及参数不确定性对表贴式永磁整流发电系统稳定性影响,解决传统滑模观测器存在的相位滞后和控制抖振的问题,采用k类函数超螺旋状态观测及凸优化线性矩阵不等式求解方法,提出一种速度观测超螺旋最优L2增益控制(super-twisting optimal L2-gain control,ST-OP-L2C)的新方法。为验证所提方法性能,与传统滑模观测器比例积分控制进行对比,在负载功率变化工作状态下,开展模型仿真验证及样机测试实验。仿真表明,相对于传统滑模观测器,含k类函数超螺旋状态观测器可以减小速度估计误差2 r/min以上,ST-OP-L2C可以明显降低整流电压、电磁转矩响应超调。测试结果表明,样机能够保证整流电压纹波小于0.5%,负载突变时,能够在0.2 s时间内实现整流电压稳定输出,且整流电压超调量较小,能够有效提高系统电源品质。 展开更多
关键词 永磁整流发电 k类函数超螺旋观测 超螺旋控制 最优l2增益控制
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基于小波变换和L2正则化LSTM的股票价格预测
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作者 唐旋 李路 《上海工程技术大学学报》 2025年第1期86-92,共7页
长短时记忆网络(long short-term memory,LSTM)被广泛运用于股票的价格预测,但面对波动幅度较大的股票价格数据时,其预期效果不佳。提出一种基于小波变换和L2正则化LSTM的WT-L2-LSTM模型,利用小波变换对原始宽频数据分解得到多层窄频数... 长短时记忆网络(long short-term memory,LSTM)被广泛运用于股票的价格预测,但面对波动幅度较大的股票价格数据时,其预期效果不佳。提出一种基于小波变换和L2正则化LSTM的WT-L2-LSTM模型,利用小波变换对原始宽频数据分解得到多层窄频数据,再逐层使用L2正则化LSTM(L2-LSTM)模型进行预测,分解后数据较平滑且可以逐层调参。预测结果显示,WT-L2-LSTM模型在拟合优度和均方误差上均优于LSTM模型,表明WT-L2-LSTM模型对股价预测具有更好的精度和泛化性能。 展开更多
关键词 股价预测 小波变换 长短时记忆网络 l2正则化
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基于加权全变差型L1/L2正则化的有限角CT图像重建
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作者 朱瑞雨 周亚美 庞志峰 《中国体视学与图像分析》 2025年第1期56-69,共14页
目的 本文旨在利用L1/L2正则化描述数据稀疏性的能力,建立新型的CT重建模型,改进重建图像质量。方法 在基于全变差泛函空间的L1/L2模型中引入权重矩阵,增强模型描述图像结构特征的能力。由于模型是非凸优化和非光滑的,通过引入辅助变量... 目的 本文旨在利用L1/L2正则化描述数据稀疏性的能力,建立新型的CT重建模型,改进重建图像质量。方法 在基于全变差泛函空间的L1/L2模型中引入权重矩阵,增强模型描述图像结构特征的能力。由于模型是非凸优化和非光滑的,通过引入辅助变量并在增广拉格朗日方法的框架下,将其转化为多个易求解的子问题并利用交替方向法求解。结论 与传统的正则化方法相比,本文所提出的模型能够有效地改善带高斯噪声,尤其是高强度噪声水平的有限角度数据下,图像的重建质量更优。 展开更多
关键词 CT重建 有限角度 加权全变差型L1/l2 交替方向乘子法
原文传递
转录因子TCF7L2促进肝癌的恶性进展
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作者 汪继印 王毅鹏 王玺 《山西医科大学学报》 2025年第8期857-865,共9页
目的探讨TCF7L2基因在肝癌中的功能。方法基于TCGA和GTEx数据库,采用TIMER2.0与GEPIA2分析TCF7L2在肝癌组织中的表达特征,通过LinkedOmics数据库筛选共表达基因并对其进行功能富集分析。体外实验选取稳定过表达TCF7L2蛋白以及稳定敲低TC... 目的探讨TCF7L2基因在肝癌中的功能。方法基于TCGA和GTEx数据库,采用TIMER2.0与GEPIA2分析TCF7L2在肝癌组织中的表达特征,通过LinkedOmics数据库筛选共表达基因并对其进行功能富集分析。体外实验选取稳定过表达TCF7L2蛋白以及稳定敲低TCF7L2蛋白的HepG2和Huh7肝癌细胞系,采用Western blot检测TCF7L2蛋白表达,CCK-8和EdU实验分析细胞增殖能力。采用C57BL/6小鼠皮下接种过表达TCF7L2蛋白或稳定敲低TCF7L2蛋白的Hepa1-6细胞构建移植瘤模型,28 d后取瘤称重。同时联合CellMiner数据库预测靶向TCF7L2的候选药物。结果TCF7L2在肝癌组织显著高表达(P<0.01)。功能富集显示TCF7L2基因参与Wnt信号通路和NF-κB信号通路。体外实验证实,过表达TCF7L2蛋白显著促进肝癌细胞的增殖(P<0.01),而敲低TCF7L2蛋白抑制肝癌细胞的增殖(P<0.01)。体内成瘤实验中,过表达TCF7L2蛋白小鼠肿瘤质量显著增加(P<0.001),而敲低TCF7L2蛋白小鼠的肿瘤质量明显减少(P<0.05)。通过CellMiner数据库筛选出顺铂、雷帕霉素和替西罗利莫这3种治疗肝癌的潜在靶向药物。结论肝癌组织中TCF7L2高表达,敲低TCF7L2可以抑制肝癌细胞恶性表型,提示TCF7L2可能是治疗肝癌的潜在靶点。 展开更多
关键词 TCF7l2 肝癌 增殖 成瘤 生物信息学 药物预测
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