为加速分子标记在芝麻研究中的应用,利用网上现有的芝麻EST(expressed sequencetags)数据信息,开展了芝麻EST-SSR功能性标记的开发和利用研究。在所有的3328条芝麻EST序列中共确认得到1785条非冗余EST序列。其中,在含有微卫星重复的148...为加速分子标记在芝麻研究中的应用,利用网上现有的芝麻EST(expressed sequencetags)数据信息,开展了芝麻EST-SSR功能性标记的开发和利用研究。在所有的3328条芝麻EST序列中共确认得到1785条非冗余EST序列。其中,在含有微卫星重复的148条序列中共检测有155个EST-SSR。非冗余EST序列总长为774.27kb,平均每4.99kb含有一个EST-SSR。EST-SSR的分布频率和特征分析表明,以AG/TC为重复基元(motif)的SSR出现最多,占总SSR的37.42%。利用这些序列,设计开发了50对EST-SSR引物,并分别选用36个芝麻、2个棉花、2个大豆和2个油葵进行多态性和通用性研究。其中44对引物在供试芝麻材料中扩增出条带,共产生108个位点,平均每对引物产生2.45个位点,多态信息含量(polymorphism information content,PIC)平均值为0.390。根据遗传相似性系数进行聚类,有26个芝麻材料聚类在两个大的亚类(III和IV)中,聚类结果表明芝麻的基因型与地理来源之间没有必然的联系。此外,分别有2对、3对和4对引物可以在棉花、大豆和油葵中进行通用性扩增。本研究证实这种全新开发的芝麻EST-SSR标记在芝麻遗传多样性分析、遗传图谱构建以及比较基因组等研究方面有广阔的利用前景。展开更多
[目的]以6份不同地理来源的糜子资源为试验材料,基于前期转录组测序获得的1000对SSR引物,选出200对进行多态性检测,以期构建一批可以准确评估糜子种质遗传差异的分子标记.[方法]用Primer Premier 5.0软件设计引物,改良CTAB法提取DNA,PC...[目的]以6份不同地理来源的糜子资源为试验材料,基于前期转录组测序获得的1000对SSR引物,选出200对进行多态性检测,以期构建一批可以准确评估糜子种质遗传差异的分子标记.[方法]用Primer Premier 5.0软件设计引物,改良CTAB法提取DNA,PCR扩增DNA和聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选引物多态性;用PowerMarker 3.25和PopGen 1.32计算遗传多样性参数.[结果]200对引物中97对呈单态性,80对呈多态性.单碱基序列重复引物有20对,10对具多态性,其重复基元是A(50%)和T(50%).二碱基序列重复引物有36对,15对具多态性,其碱基重复类型有7种(AG最多,TC、GC和GA次之,CA、TA和AC最少).三碱基序列重复引物有144对,55对具多态性,其碱基重复类型有24种(GGC、GCG和GCC最多,GAA、GCT和CGC等次之,ACC、AGG、CAG、CGT、AAG、AAC、TCG、CGA、ATT、CAA和CCA最少).就引物分辨率(Rp)值而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.67-4.67(平均2.07)、1.33-4.33(平均2.73)和0.67-4.00(平均1.83).基于Rp值分析SSR分布频次,发现80个标记分布在5个区间:0-1、1-2、2-3、3-4和4-5,分别包含17(21.25%)、36(45.00%)、11(13.75%)、14(17.50%)和2个(2.50%).就Rp值而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.33-0.67(平均0.51)、0.40-0.78(平均0.59)和0.33-0.83(平均0.59).单碱基序列重复标记共检测到22个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.2000),其中8个和2个位点分别具2和3个变异;二碱基序列重复标记共检测到38个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.5333),其中7个和8个位点分别具2和3个变异;三碱基重复标记共检测到136个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.4727),其中29个和26个位点分别具2和3个变异.就多态性信息含量而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.3750-0.5355(平均0.4293)、0.2392-0.7438(平均0.4293)和0.2392-0.7438(平均0.3989).就多样性指数而言,1-3碱基序列重复分别为0.6365-1.0776(平均0.7497)、0.5623-1.0986(平均0.8339)和0.5623-1.0889(平均0.8312).[结论]基于转录组测序结果,检测200对SSR引物的多态性,发现177对(88.5%)可以扩增出完整条带,其中80对具多态性,多态率为40%.展开更多
采用EST-SSR标记对59份甜瓜（Cucumis melo L.）种质资源的遗传多样性进行研究.结果表明,46对EST-SSR标记中有23对扩增出多态性,EST-SSR标记的多态性信息含量（Polymorphic information content,PIC）值的分布范围为0.239～0.588,平均值...采用EST-SSR标记对59份甜瓜（Cucumis melo L.）种质资源的遗传多样性进行研究.结果表明,46对EST-SSR标记中有23对扩增出多态性,EST-SSR标记的多态性信息含量（Polymorphic information content,PIC）值的分布范围为0.239～0.588,平均值为0.386;46个标记共检测到54个多态性位点,种质两两之间的简单匹配（Simple matching,SM）系数范围为0～0.981;聚类结果表明,在相似系数为0.19处,59份甜瓜种质可以分为2类.展开更多
文摘为加速分子标记在芝麻研究中的应用,利用网上现有的芝麻EST(expressed sequencetags)数据信息,开展了芝麻EST-SSR功能性标记的开发和利用研究。在所有的3328条芝麻EST序列中共确认得到1785条非冗余EST序列。其中,在含有微卫星重复的148条序列中共检测有155个EST-SSR。非冗余EST序列总长为774.27kb,平均每4.99kb含有一个EST-SSR。EST-SSR的分布频率和特征分析表明,以AG/TC为重复基元(motif)的SSR出现最多,占总SSR的37.42%。利用这些序列,设计开发了50对EST-SSR引物,并分别选用36个芝麻、2个棉花、2个大豆和2个油葵进行多态性和通用性研究。其中44对引物在供试芝麻材料中扩增出条带,共产生108个位点,平均每对引物产生2.45个位点,多态信息含量(polymorphism information content,PIC)平均值为0.390。根据遗传相似性系数进行聚类,有26个芝麻材料聚类在两个大的亚类(III和IV)中,聚类结果表明芝麻的基因型与地理来源之间没有必然的联系。此外,分别有2对、3对和4对引物可以在棉花、大豆和油葵中进行通用性扩增。本研究证实这种全新开发的芝麻EST-SSR标记在芝麻遗传多样性分析、遗传图谱构建以及比较基因组等研究方面有广阔的利用前景。
文摘[目的]以6份不同地理来源的糜子资源为试验材料,基于前期转录组测序获得的1000对SSR引物,选出200对进行多态性检测,以期构建一批可以准确评估糜子种质遗传差异的分子标记.[方法]用Primer Premier 5.0软件设计引物,改良CTAB法提取DNA,PCR扩增DNA和聚丙烯酰胺凝胶电泳筛选引物多态性;用PowerMarker 3.25和PopGen 1.32计算遗传多样性参数.[结果]200对引物中97对呈单态性,80对呈多态性.单碱基序列重复引物有20对,10对具多态性,其重复基元是A(50%)和T(50%).二碱基序列重复引物有36对,15对具多态性,其碱基重复类型有7种(AG最多,TC、GC和GA次之,CA、TA和AC最少).三碱基序列重复引物有144对,55对具多态性,其碱基重复类型有24种(GGC、GCG和GCC最多,GAA、GCT和CGC等次之,ACC、AGG、CAG、CGT、AAG、AAC、TCG、CGA、ATT、CAA和CCA最少).就引物分辨率(Rp)值而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.67-4.67(平均2.07)、1.33-4.33(平均2.73)和0.67-4.00(平均1.83).基于Rp值分析SSR分布频次,发现80个标记分布在5个区间:0-1、1-2、2-3、3-4和4-5,分别包含17(21.25%)、36(45.00%)、11(13.75%)、14(17.50%)和2个(2.50%).就Rp值而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.33-0.67(平均0.51)、0.40-0.78(平均0.59)和0.33-0.83(平均0.59).单碱基序列重复标记共检测到22个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.2000),其中8个和2个位点分别具2和3个变异;二碱基序列重复标记共检测到38个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.5333),其中7个和8个位点分别具2和3个变异;三碱基重复标记共检测到136个等位变异,每个位点为2-3个(平均2.4727),其中29个和26个位点分别具2和3个变异.就多态性信息含量而言,1-3碱基序列重复引物分别为0.3750-0.5355(平均0.4293)、0.2392-0.7438(平均0.4293)和0.2392-0.7438(平均0.3989).就多样性指数而言,1-3碱基序列重复分别为0.6365-1.0776(平均0.7497)、0.5623-1.0986(平均0.8339)和0.5623-1.0889(平均0.8312).[结论]基于转录组测序结果,检测200对SSR引物的多态性,发现177对(88.5%)可以扩增出完整条带,其中80对具多态性,多态率为40%.
