为制备鸡肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的多克隆抗血清,并分析L-FABP的组织表达特性,利用RT-PCR扩增L-FABP基因,构建鸡L-FABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/L-FABP。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导产生GST/L-FABP融合蛋白...为制备鸡肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的多克隆抗血清,并分析L-FABP的组织表达特性,利用RT-PCR扩增L-FABP基因,构建鸡L-FABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/L-FABP。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导产生GST/L-FABP融合蛋白,用亲和层析纯化目的蛋白,将纯化的GST/L-FABP融合蛋白免疫家兔制备抗血清,并利用此抗血清分析鸡L-FABP基因的组织表达特性。诱导得到了1个40 ku(14ku L-FABP+26 ku GST)的融合蛋白,获得效价较高、特异性强的鸡L-FABP的抗血清。鸡L-FABP的组织表达特性研究结果表明,该基因在肝脏和小肠组织中有较高表达,但在心脏、脂肪、肌肉、肌胃、脾、肺和肾中没有检测到表达信号。展开更多
目的探讨尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值。方法选取86例糖尿病患者作为研究对象,依据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)将所有患者分为糖尿病对照组30例、糖尿病微量白蛋白尿组30例与糖尿病大量白蛋白尿...目的探讨尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值。方法选取86例糖尿病患者作为研究对象,依据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)将所有患者分为糖尿病对照组30例、糖尿病微量白蛋白尿组30例与糖尿病大量白蛋白尿组26例,同时选取同期健康体检者30例作为正常对照组。收集各组患者5 m L清晨清洁中段尿,分别检测尿液中NGAL、L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C的浓度。结果尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组中的浓度水平明显高于正常对照组,且随着UACR的增加逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05);尿NGAL在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组浓度水平明显高于糖尿病对照组与正常对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);三项指标联合检测对糖尿病肾病的诊断灵敏度及特异度最高。结论尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测对早期糖尿病肾病具有重要的预测价值,且三项指标联合检测能够提高对糖尿病肾病的诊断灵敏度与特异度。展开更多
文摘为制备鸡肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的多克隆抗血清,并分析L-FABP的组织表达特性,利用RT-PCR扩增L-FABP基因,构建鸡L-FABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/L-FABP。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导产生GST/L-FABP融合蛋白,用亲和层析纯化目的蛋白,将纯化的GST/L-FABP融合蛋白免疫家兔制备抗血清,并利用此抗血清分析鸡L-FABP基因的组织表达特性。诱导得到了1个40 ku(14ku L-FABP+26 ku GST)的融合蛋白,获得效价较高、特异性强的鸡L-FABP的抗血清。鸡L-FABP的组织表达特性研究结果表明,该基因在肝脏和小肠组织中有较高表达,但在心脏、脂肪、肌肉、肌胃、脾、肺和肾中没有检测到表达信号。
文摘目的探讨尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测诊断早期糖尿病肾病的价值。方法选取86例糖尿病患者作为研究对象,依据尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)将所有患者分为糖尿病对照组30例、糖尿病微量白蛋白尿组30例与糖尿病大量白蛋白尿组26例,同时选取同期健康体检者30例作为正常对照组。收集各组患者5 m L清晨清洁中段尿,分别检测尿液中NGAL、L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C的浓度。结果尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组中的浓度水平明显高于正常对照组,且随着UACR的增加逐渐升高,各组间差异均有统计学意义(P均<0.05);尿NGAL在糖尿病微量白蛋白尿组与大量白蛋白尿组浓度水平明显高于糖尿病对照组与正常对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);三项指标联合检测对糖尿病肾病的诊断灵敏度及特异度最高。结论尿NGAL、尿L-FABP、血清胱蛋白酶抑制剂C检测对早期糖尿病肾病具有重要的预测价值,且三项指标联合检测能够提高对糖尿病肾病的诊断灵敏度与特异度。
