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食管癌Eca9706细胞中KRT19基因的甲基化及表达
1
作者 岳冬丽 董文杰 +1 位作者 孙晓娟 樊青霞 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期866-869,共4页
背景与目的:KRT19基因位于17q21.2,编码CK19蛋白。KRT19基因启动子的甲基化在肾癌、神经母细胞瘤中已有报道,而在食管癌中鲜见相关报道。本文研究甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对食管癌Eca9706细胞株生长活性的影响... 背景与目的:KRT19基因位于17q21.2,编码CK19蛋白。KRT19基因启动子的甲基化在肾癌、神经母细胞瘤中已有报道,而在食管癌中鲜见相关报道。本文研究甲基转移酶抑制剂5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对食管癌Eca9706细胞株生长活性的影响,并探讨5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞株KRT19基因甲基化及其表达的影响。方法:用MTT比色法检测不同浓度5-Aza-CdR处理前后Eca9706细胞的生长活性;用结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bi sulfite restriction analysis,C0BRA)检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的的KRT19基因甲基化状态;用Western blot法检测应用5-Aza-CdR后与未用药对照组细胞的KRT19基因蛋白的表达情况。结果:5-Aza-CdR对食管癌Eca9706细胞系的增殖有抑制作用,且呈时间、浓度依赖性;食管癌Eca9706细胞株存在KRT19基因启动子区的甲基化;对照组无KRT19蛋白的表达,应用5-Aza-CdR后可以恢复其蛋白表达。结论:5-Aza-CdR抑制食管癌Eca9706细胞的增殖;5-Aza-CdR可以逆转KRT19基因启动子区的甲基化,恢复其蛋白表达,KRT19基因启动子区的甲基化可能是其失表达的重要机制。这为食管癌诊疗提供了一个新的靶点。 展开更多
关键词 食管癌 Eca9706细胞 krt19基因 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法 甲基化
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参芪扶正注射液对肺腺癌A549/DDP细胞荷瘤裸鼠移植瘤KRT19/β-catenin信号通路的影响 被引量：3
2
作者 刘兵 刘文俊 +2 位作者 孙冶 张琳琳 王淳 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第11期140-144,I0031-I0034,共9页
目的探讨参芪扶正注射液对肺腺癌A549/DDP细胞荷瘤裸鼠移植瘤角蛋白19(keratin 19,KRT19)/β-cate-nin信号通路的影响。方法40只BALB/c-nu裸鼠随机分为对照组,顺铂组,参芪扶正注射液组,顺铂联合参芪扶正注射液低剂量组,顺铂联合参芪扶... 目的探讨参芪扶正注射液对肺腺癌A549/DDP细胞荷瘤裸鼠移植瘤角蛋白19(keratin 19,KRT19)/β-cate-nin信号通路的影响。方法40只BALB/c-nu裸鼠随机分为对照组,顺铂组,参芪扶正注射液组,顺铂联合参芪扶正注射液低剂量组,顺铂联合参芪扶正注射液高剂量组。每只裸鼠分别腋下接种A549/DDP细胞,第7天成瘤,第8~25天开始给予对应药物处理,第26天将全部裸鼠处死。检测各组瘤重和抑瘤率;HE染色观察各组肿瘤组织病理形态学改变;透射电镜观察各组肿瘤细胞超微结构变化;Western blot和免疫组化法检测移植瘤组织KRT19/β-catenin信号通路相关蛋白的表达。结果与顺铂组相比,顺铂联合参芪扶正注射液低、高剂量组瘤重降低(P<0.05),且随着参芪扶正注射液给药剂量增加,瘤重逐渐减小,抑瘤率随之增加;HE染色显示,与顺铂组相比,联合用药组核皱缩加深,核分裂较少,坏死灶增加;透射电镜结果显示,与顺铂组相比,联合用药组出现更多的固缩核、膜泡、内质网肿胀、线粒体变性、脂滴和微绒毛丢失等;与顺铂组相比,顺铂联合不同剂量参芪扶正注射液组可显著下调移植瘤组织KRT19、β-catenin、CD44的表达,上调E-cadherin的表达。结论参芪扶正注射液可通过KRT19/β-catenin信号通路增强A549/DDP荷瘤裸鼠移植瘤对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 参芪扶正注射液 krt19 肺腺癌 化疗耐药
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Krt19在小鼠早期妊娠子宫的表达和调节 被引量：2
3
作者 王静 徐鹏 +4 位作者 王梦媛 孙宇 孟令帅 李世杰 马兴红 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期340-347,共8页
角蛋白19(Keratin19,Krt19)是Ⅰ型角蛋白家族中的一员,为研究Krt19在小鼠早期妊娠过程中的表达及调控,本研究利用原位杂交、免疫组织化学、Western blot、real-time PCR等技术,结合小鼠早期妊娠模型、激素处理模型、延迟着床与激活模型... 角蛋白19(Keratin19,Krt19)是Ⅰ型角蛋白家族中的一员,为研究Krt19在小鼠早期妊娠过程中的表达及调控,本研究利用原位杂交、免疫组织化学、Western blot、real-time PCR等技术,结合小鼠早期妊娠模型、激素处理模型、延迟着床与激活模型和人工诱导蜕膜化模型,研究了Krt19 mRNA以及蛋白在小鼠子宫中的表达情况。结果显示,Krt19 mRNA和蛋白在小鼠早期妊娠1~4 d的腔上皮和腺上皮中强表达,在5~8 d子宫腔上皮、腺上皮及蜕膜中表达;在延迟着床时,Krt19在子宫腔上皮和腺上皮强表达,注射雌激素激活后,Krt19在腔上皮和腺上皮的表达减弱,在激活的胚胎着床位点下基质细胞中有弱表达;雌激素上调Krt19在子宫中的表达;Krt19在人工诱导蜕膜化的子宫基质细胞中表达。结果表明,Krt19参与了胚胎着床过程,并受类固醇激素的调控,与蜕膜化过程密切相关。 展开更多
关键词 胚胎着床 蜕膜化 角蛋白 krt19 小鼠子宫
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miR-642a-5p靶向KRT19调控甲状腺癌细胞TPC-1细胞周期的研究 被引量：4
4
作者 霍占江 田亮 +3 位作者 王志杰 张强 郝敏丽 董陆玲 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第10期762-766,771,共6页
目的:探讨miRNA调控甲状腺癌细胞TPC-1细胞周期的潜在机制。方法:通过过表达甲状腺癌中异常表达的miRNA,检测甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力和细胞周期。通过miRDB在线分析miRNA的潜在靶标。通过siRNA敲低潜在靶标,检测甲状腺癌细胞TPC-1... 目的:探讨miRNA调控甲状腺癌细胞TPC-1细胞周期的潜在机制。方法:通过过表达甲状腺癌中异常表达的miRNA,检测甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力和细胞周期。通过miRDB在线分析miRNA的潜在靶标。通过siRNA敲低潜在靶标,检测甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力和细胞周期。通过荧光素酶报告实验检测miRNA与潜在靶标之间的关系。结果:过表达miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力显著下降(P<0.05)。敲低miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力显著上升(P<0.05)。过表达miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量上升(P<0.05)、G2-M期和S期的细胞数量下降(P<0.05)。敲低miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量下降(P<0.05)、G2-M期和S期的细胞数量上升(P<0.05)。当敲低KRT19后,甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力显著下降(P<0.05)。过表达miR-642a-5p后,KRT19的蛋白水平下降(P<0.05)。敲低miR-642a-5p后,KRT19的蛋白水平上升(P<0.05),miR-642a-5p靶向KRT19的3端非编码区(P<0.05)。敲低KRT19后,甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力下降(P<0.05)。过表达KRT19后,甲状腺癌细胞TPC-1的细胞活力上升(P<0.05)。敲低KRT19后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量上升(P<0.05)、G2-M期和S期的细胞数量下降(P<0.05)。过表达KRT19后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量下降(P<0.05)、G2-M期和S期的细胞数量上升(P<0.05)。同时敲低KRT19和miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量、G2-M期和S期的细胞数量无显著变化(P>0.05)。同时过表达KRT19和miR-642a-5p后,甲状腺癌细胞TPC-1处于G1期的细胞数量、G2-M期和S期的细胞数量无显著变化(P>0.05)。结论:miR-642a-5p通过靶向KRT19 mRNA的3端非编码区,降低了KRT19的表达,调控甲状腺癌细胞TPC-1的细胞周期。 展开更多
关键词 甲状腺癌 miR-642a-5p krt19 TPC-1 细胞周期
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敲减KRT19基因表达对膀胱癌T24细胞恶性生物学行为的影响
5
作者 孔朝辉 王蓬勃 +2 位作者 张灏 韩皓名 张汉青 《中华实用诊断与治疗杂志》 2022年第8期761-764,共4页
目的探讨敲减KRT19基因表达对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、集落形成的影响。方法对数生长期T24细胞分为shKRT19组和对照组,分别转染shKRT19慢病毒质粒和空载慢病毒质粒,转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测2组细胞KRT19 mRNA相对表达量,... 目的探讨敲减KRT19基因表达对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、集落形成的影响。方法对数生长期T24细胞分为shKRT19组和对照组,分别转染shKRT19慢病毒质粒和空载慢病毒质粒,转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测2组细胞KRT19 mRNA相对表达量,采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡率;转染后培养0、24、48、72、96 h时采用CCK-8法检测2组细胞增殖率;转染72 h采用克隆形成实验观察2组培养11 d细胞克隆形成数目。结果转染48 h,shKRT19组细胞KRT19 mRNA相对表达量(0.02±0.00)低于对照组(1.00±0.01)(t=169.741,P<0.001),细胞凋亡率[(18.97±2.12)%]高于对照组[(4.89±0.17)%](t=—10.847,P<0.001),G_(0)/G_(1)期[(57.72±3.59)%]、S期[(9.69±0.49)%]、G_(2)/M期[(32.59±3.65)%]细胞比率与对照组[(52.84±1.76)%、(11.01±0.85)%、(36.15±2.29)%]比较差异均无统计学意义(P>0.05)。shKRT19组转染后培养24、48、72、96 h时细胞增殖率[(181.5±2.1)%、(248.9±4.5)%、(337.9±23.4)%、(421.7±3.2)%]均低于对照组[(206.3±4.9)%、(375.4±6.3)%、(546.3±27.9)%、(778.8±4.4)%](P<0.05)。培养11 d,shKRT19组细胞克隆形成数目[(115±3)个]少于对照组[(147±11)个](t=4.861,P<0.001)。结论敲减KRT19基因表达可抑制膀胱癌T24细胞生长、增殖和集落形成,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 膀胱癌 krt19基因 增殖 凋亡 T24细胞
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脊索瘤类器官模型构建与鉴定
6
作者 毛永鑫 李俊晓 许炜 《中国细胞生物学学报》 2025年第12期3213-3221,共9页
脊索瘤是一种罕见的骨肿瘤,起源于胚胎脊索残留组织。这类肿瘤通常生长在靠近重要血管和神经的解剖复杂区域,使得手术完全切除极具挑战性。此外,脊索瘤对放射治疗和化学药物治疗反应不佳,导致其高复发率和较差预后。目前治疗手段有限,... 脊索瘤是一种罕见的骨肿瘤,起源于胚胎脊索残留组织。这类肿瘤通常生长在靠近重要血管和神经的解剖复杂区域,使得手术完全切除极具挑战性。此外,脊索瘤对放射治疗和化学药物治疗反应不佳,导致其高复发率和较差预后。目前治疗手段有限,亟需新型研究模型以深入理解其发病机制并开发更有效疗法。传统细胞系模型无法准确模拟脊索瘤的体内特征,而类器官技术为疾病建模和药物筛选提供了新途径。该文详述了从患者肿瘤组织建立脊索瘤类器官的方案,包括组织消化、类器官培养、传代及特定基因表达验证等流程。通过该方法成功构建了脊索瘤类器官模型,同时经检测证实了其表达Brachyury和KRT19等脊索瘤特异性标志物,表明了该模型能真实再现体内肿瘤特征。该模型为研究脊索瘤发生发展的分子机制及药物研发提供了重要的体外研究平台。 展开更多
关键词 脊索瘤 类器官模型 BRACHYURY krt19
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细胞角蛋白19对人宫颈癌细胞增殖及β-catenin核转位的影响
7
作者 张园 刘宪 +2 位作者 张巧瑞 王蕾 崔南 《山西医科大学学报》 2025年第5期495-501,共7页
目的研究细胞角蛋白19(KRT19)通过β-catenin调控宫颈癌细胞增殖的分子机制。方法通过GEPIA在线数据库分析KRT19在宫颈癌等多种肿瘤组织中的表达情况。采用嘌呤霉素压力筛选获取KRT19稳定过表达的HeLa-KRT19细胞系和KRT19稳定干扰表达的... 目的研究细胞角蛋白19(KRT19)通过β-catenin调控宫颈癌细胞增殖的分子机制。方法通过GEPIA在线数据库分析KRT19在宫颈癌等多种肿瘤组织中的表达情况。采用嘌呤霉素压力筛选获取KRT19稳定过表达的HeLa-KRT19细胞系和KRT19稳定干扰表达的SiHa-shKRT19细胞系,采用Western blot和细胞免疫化学检测细胞中KRT19、β-catenin和细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达,细胞计数、MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞周期的变化。结果GEPIA在线数据库分析的结果显示,KRT19在人宫颈癌患者肿瘤组织中高表达(P<0.05)。KRT19在HeLa细胞中低表达,在SiHa细胞中高表达;成功构建KRT19稳定表达的HeLa细胞系和干扰表达的SiHa细胞系。与HeLa-GFP相比,HeLa-KRT19细胞中β-catenin核转位增加,细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达上调(P<0.05),G0/G1期的细胞比例减少(P<0.05),细胞增殖增加(P<0.05);与SiHa-GFP相比,SiHa-shKRT19细胞中β-catenin核转位减少,细胞周期相关蛋白Cyclin D1的表达下调(P<0.05),G0/G1期的细胞比例增加(P<0.05),细胞增殖降低(P<0.05)。结论通过促进β-catenin的核转位,KRT19可以激活Cyclin D1蛋白的表达并促进宫颈癌细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 细胞角蛋白19 Β-CATENIN 核转位 细胞增殖 宫颈癌 细胞周期
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外周血癌细胞中多种肿瘤标记物基因检测预测乳腺癌患者转移和预后的意义 被引量：5
8
作者 马春虎 程露阳 +7 位作者 刘镭 许亚娜 赵恩宏 刘承一 王立新 夏爱华 敬鑫垚 刘兴华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期85-90,共6页
目的:筛选一组可检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因,分析乳腺癌患者相对循环癌细胞数(Lc)与临床病理特征的关联。方法:收集乳腺癌患者142例(乳腺癌组)和正常女性60人(正常对照组)外周血标本。利用CGAP提供的SAGE Genie数据库中数字基因... 目的:筛选一组可检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因,分析乳腺癌患者相对循环癌细胞数(Lc)与临床病理特征的关联。方法:收集乳腺癌患者142例(乳腺癌组)和正常女性60人(正常对照组)外周血标本。利用CGAP提供的SAGE Genie数据库中数字基因表达演示工具,筛选一组可用于检测乳腺癌循环癌细胞的标记物基因(FAM83A、NPY1R和KRT19)。应用定量巢式PCR方法检测研究对象外周血中标记物基因的表达水平,并通过公式计算患者Lc值。结果:在乳腺癌组患者外周血中肿瘤标记物基因FAM83A、NPY1R和KRT19的表达水平均明显高于正常对照组(P<0.001)。142例乳腺癌患者中有113例(79.6%)至少表达1个肿瘤标记物基因。乳腺癌患者Lc值与其临床分期和远处转移有关联(P<0.001)。Kaplam-Meier生存曲线,Lc值小于2的患者生存时间明显长于Lc值大于2者(P=0.005)。结论:筛选了一组检测乳腺癌外周血循环癌细胞的标记物基因,联合该组基因计算的Lc值与患者临床分期和远处转移有关联,并可辅助判断乳腺癌预后。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 NPY1R FAM83A krt19 定量巢式PCR 相对循环癌细胞数
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基于GEO数据库、TMT蛋白组学筛选绞股蓝对膀胱癌的蛋白靶点 被引量：2
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作者 常拓 齐彦爽 +1 位作者 蔺曼 朴香兰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期1331-1338,共8页
绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)是传统的中药材,对于多种癌症具有显著的疗效。为筛选绞股蓝对膀胱癌的作用靶点,本研究将30只SPF级SD大鼠随机分为模型组、给药组和空白组,通过膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)建立膀胱癌模型并通过相... 绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)是传统的中药材,对于多种癌症具有显著的疗效。为筛选绞股蓝对膀胱癌的作用靶点,本研究将30只SPF级SD大鼠随机分为模型组、给药组和空白组,通过膀胱灌注N-甲基-N-亚硝基脲(MNU)建立膀胱癌模型并通过相同的方式进行膀胱灌注绞股蓝干预治疗,在第10周进行取材,通过H&E染色病理切片观察各组膀胱内肿瘤情况以明确药效。通过蛋白质组学串联质谱标签(TMT)10重标记法检测各组膀胱组织的蛋白差异表达情况,结合GEO数据库中3组膀胱癌数据集对作用靶点进行筛选。结果显示,绞股蓝反向调节膀胱癌335种蛋白质,其中包括55种上调和280种下调。GEO的3个膀胱癌表达谱中汇集的差异蛋白(DEGs)包含20种上调和50种下调。将GEO中DEGs与TMT蛋白质组学中膀胱癌趋势相同的蛋白进行汇集,结合绞股蓝反向调节数据,总共筛选获得了3个反向调节靶点,其中包括1种下调的靶点CNN1和2种上调的靶点KRT19、PCP4,并通过蛋白免疫印迹法进行验证。本研究结果表明,CNN1、KRT19和PCP4可能是绞股蓝治疗膀胱癌的潜在靶点,绞股蓝可能通过调节CNN1、KRT19和PCP4来抵抗膀胱癌,这为绞股蓝治疗膀胱癌提供分子机制依据。 展开更多
关键词 膀胱癌 绞股蓝 CNN krt19 PCP4
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