目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建K...目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞。用Notch1/Hes1信号通路激动剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞进行干预。用CCK-8实验、蛋白印迹法、免疫荧光、流式细胞术检测细胞活性、细胞凋亡率、KIF2A、cleaved-caspase-3、Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 BEL7402/5-FU细胞具有强5-FU耐药性,其IC_(50)为344.2μmol/L,是BEL7402细胞的92倍(IC_(50)=3.730μmol/L)。与BEL7402细胞比较,BEL7402/5-FU细胞中KIF2A蛋白表达明显增加(P<0.001);与si-NC组比较,si-KIF2A组BEL7402/5-FU细胞活性明显下降(P<0.001)、凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.001),另外Notch1和Hes1蛋白表达明显减少(P<0.001);与si-NC+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU组BEL7402/5-FU细胞活性显著下降(P<0.001)、凋亡率显著增加(P<0.001);与si-KIF2A+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU+VPA组BEL7402/5-FU细胞活性明显提高(P<0.001)、凋亡率显著降低(P<0.001)、Notch1和Hes1蛋白表达量显著增加(P<0.001)。结论 KIF2A的沉默通过抑制Notch1/Hes1信号通路活性减弱BEL7402/5-FU细胞对5-FU的化疗耐药性。展开更多
目的探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin super family protein 2A,KIF2A)过表达与食管鳞癌的增殖和预后的相关性。驱动蛋白家族成员2A是驱动蛋白-13超家族蛋白的一员,且KIF2A在许多肿瘤的发展中发挥着重要作用。然而,KIF2A在食道鳞状细胞...目的探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin super family protein 2A,KIF2A)过表达与食管鳞癌的增殖和预后的相关性。驱动蛋白家族成员2A是驱动蛋白-13超家族蛋白的一员,且KIF2A在许多肿瘤的发展中发挥着重要作用。然而,KIF2A在食道鳞状细胞癌(esophageal cell squamous carcinoma,ESCC)中的作用仍不清楚。方法使用己方收集的样本通过免疫组化来研究对比KIF2A在ESCC和正常组织中的表达水平和预后情况。通过细胞实验和动物实验研究KIF2A在ESCC中的机制。结果免疫组化显示,KIF2A在ESCC组织中相对高表达,并与该病预后相关。集落形成实验、细胞增值实验与细胞毒性实验(CCK-8)和蛋白质印迹(western blotting)结果显示,KIF2A的敲低可以明显降低ESCC细胞的形成能力和增殖能力。动物实验结果表明,敲低KIF2A可以明显减少小鼠的肿瘤体积。结论KIF2A可以作为ESCC的预后因素之一,而敲低KIF2A可以分别抑制ESCC在体外和体内的增殖。KIF2A可以作为未来ESCC的潜在预后生物标志物和治疗靶点。展开更多
文摘目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞。用Notch1/Hes1信号通路激动剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞进行干预。用CCK-8实验、蛋白印迹法、免疫荧光、流式细胞术检测细胞活性、细胞凋亡率、KIF2A、cleaved-caspase-3、Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 BEL7402/5-FU细胞具有强5-FU耐药性,其IC_(50)为344.2μmol/L,是BEL7402细胞的92倍(IC_(50)=3.730μmol/L)。与BEL7402细胞比较,BEL7402/5-FU细胞中KIF2A蛋白表达明显增加(P<0.001);与si-NC组比较,si-KIF2A组BEL7402/5-FU细胞活性明显下降(P<0.001)、凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.001),另外Notch1和Hes1蛋白表达明显减少(P<0.001);与si-NC+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU组BEL7402/5-FU细胞活性显著下降(P<0.001)、凋亡率显著增加(P<0.001);与si-KIF2A+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU+VPA组BEL7402/5-FU细胞活性明显提高(P<0.001)、凋亡率显著降低(P<0.001)、Notch1和Hes1蛋白表达量显著增加(P<0.001)。结论 KIF2A的沉默通过抑制Notch1/Hes1信号通路活性减弱BEL7402/5-FU细胞对5-FU的化疗耐药性。
文摘目的探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin super family protein 2A,KIF2A)过表达与食管鳞癌的增殖和预后的相关性。驱动蛋白家族成员2A是驱动蛋白-13超家族蛋白的一员,且KIF2A在许多肿瘤的发展中发挥着重要作用。然而,KIF2A在食道鳞状细胞癌(esophageal cell squamous carcinoma,ESCC)中的作用仍不清楚。方法使用己方收集的样本通过免疫组化来研究对比KIF2A在ESCC和正常组织中的表达水平和预后情况。通过细胞实验和动物实验研究KIF2A在ESCC中的机制。结果免疫组化显示,KIF2A在ESCC组织中相对高表达,并与该病预后相关。集落形成实验、细胞增值实验与细胞毒性实验(CCK-8)和蛋白质印迹(western blotting)结果显示,KIF2A的敲低可以明显降低ESCC细胞的形成能力和增殖能力。动物实验结果表明,敲低KIF2A可以明显减少小鼠的肿瘤体积。结论KIF2A可以作为ESCC的预后因素之一,而敲低KIF2A可以分别抑制ESCC在体外和体内的增殖。KIF2A可以作为未来ESCC的潜在预后生物标志物和治疗靶点。
