川楝素经AKT/mTOR通路下调HIF1A表达抑制食管鳞状细胞癌KYSE150细胞的恶性生物学行为 被引量：1

1

作者 楚月明 朱茂菲 +4 位作者 蒋杭遇 袁强 李兴 刘康 李林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期723-730,共8页

目的:探讨川楝素(TSN)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:通过CCK-8法、克隆形成和EdU实验检测不同浓度TSN(0.062 5、0.125、0.25μmol/L)对KYSE150细胞增殖的影响,流式细胞术、划痕实... 目的:探讨川楝素(TSN)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE150细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:通过CCK-8法、克隆形成和EdU实验检测不同浓度TSN(0.062 5、0.125、0.25μmol/L)对KYSE150细胞增殖的影响,流式细胞术、划痕实验和Transwell实验检测TSN对KYSE150细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。通过GEPIA数据库数据分析食管癌组织中低氧诱导因子1α(HIF1A)的表达,q PCR法检测人食管上皮细胞Het-1A和KYSE150细胞,以及TSN处理的各组KYSE150细胞中HIF1A mRNA的表达水平。WB法检测TSN对HIF1A的上游信号通路AKT/mTOR和下游与细胞迁移、侵袭和凋亡相关蛋白表达的影响。结果:经不同浓度TSN处理后,KYSE150细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞凋亡率均显著升高(P<0.05或P<0.01)。HIF1A mRNA在KYSE150细胞中呈高表达(P<0.05),TSN处理后KYSE150细胞中HIF1A mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。TSN能够显著抑制KYSE150细胞中HIF1A及其上游通路关键蛋白p-AKT、p-mTOR及下游迁移、侵袭和凋亡相关蛋白N-cadherin 、vimentin 、Bcl-2 、caspase-3的表达均显著下调,E-cadherin表达上调(P<0.05或P<0.01)。结论:TSN通过AKT/mTOR信号通路下调HIF1A表达,从而抑制KYSE150细胞增殖、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 川楝素 低氧诱导因子1Α 食管鳞状细胞癌 kyse150细胞 增殖 迁移 侵袭 AKT/mTOR通路

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圣草次苷通过抑制STAT3/GPX4通路诱导食管癌KYSE30细胞铁死亡 被引量：1

2

作者 江蒲 张娜 +1 位作者 高坤 靳晶 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第3期281-287,共7页

目的:探讨圣草次苷对食管癌KYSE30细胞增殖的影响,并基于铁死亡探讨其可能的作用机制。方法:将食管癌KYSE30细胞分为8组:对照组(常规培养)、RSL3组(用3μmol/L铁死亡诱导剂RSL3处理)、圣草次苷组(用75μmol/L圣草次苷处理)、圣草次苷+Fe... 目的:探讨圣草次苷对食管癌KYSE30细胞增殖的影响,并基于铁死亡探讨其可能的作用机制。方法:将食管癌KYSE30细胞分为8组:对照组(常规培养)、RSL3组(用3μmol/L铁死亡诱导剂RSL3处理)、圣草次苷组(用75μmol/L圣草次苷处理)、圣草次苷+Fer-1组(用5μmol/L铁死亡抑制剂Fer-1+75μmol/L圣草次苷处理)、Fer-1组(用5μmol/L Fer-1处理)、oe-NC组(转染空白载体对照)、oe-STAT3组(转染STAT3过表达载体)、oe-STAT3+圣草次苷组(转染STAT3过表达载体后,用75μmol/L圣草次苷处理)。采用CCK-8法、EdU掺入实验和克隆形成实验分别检测各组细胞的增殖能力,ELISA检测细胞内铁死亡相关指标的水平,WB法检测STAT3/GPX4通路相关蛋白的表达。构建KYSE30细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察圣草次苷及Fer-1对移植瘤生长的影响。结果:圣草次苷能够抑制KYSE30细胞增殖和克隆形成,增加活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、Fe^(2+)水平,降低谷胱甘肽(GSH)水平(均P<0.05),并抑制裸鼠移植瘤的生长,这些作用能够被Fer-1所逆转(P<0.05)。STAT3过表达可消除圣草次苷对铁死亡的诱导效应及其对STAT3/GPX4通路的抑制作用(P<0.05)。结论:圣草次苷能够通过抑制STAT3/GPX4信号通路来诱导食管癌KYSE30细胞铁死亡,从而在食管癌中发挥显著的抗肿瘤效应。 展开更多

关键词 食管癌 kyse30细胞 圣草次苷 铁死亡 活性氧 STAT3/GPX4信号通路

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miR-7-5p调控FOXM1对食管鳞状细胞癌KYSE-150细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

3

作者 程璐 陆小群 +3 位作者 孙艳 梅舟 王佳露 孙杰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第10期1044-1052,共9页

目的:探讨miR-7-5p调控叉头框转录因子M1(FOXM1)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE-150细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:通过双萤光素酶报告基因实验验证miR-7-5p与FOXM1的靶向结合位点。收集2022年1月至2024年10月期间苏州大学附属常... 目的:探讨miR-7-5p调控叉头框转录因子M1(FOXM1)对食管鳞状细胞癌(ESCC)KYSE-150细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响。方法:通过双萤光素酶报告基因实验验证miR-7-5p与FOXM1的靶向结合位点。收集2022年1月至2024年10月期间苏州大学附属常州老年病医院收治的56例ESCC患者的癌组织和癌旁组织标本,以及患者的基本临床资料。采用qRT-PCR法检测ESCC组织中miR-7-5p和FOXM1的表达水平,分析其表达与临床病理特征的关系。常规培养的KYSE-150细胞为Ctrl组,用Lipofectamine 3000转染试剂将质粒转染KYSE-150细胞,分为Mimic NC组、miR-7-5p mimic组、miR-7-5p mimic+OE-NC组和miR-7-5p mimic+OE-FOXM1组。EdU染色和CCK-8实验检测KYSE-150细胞增殖能力,流式细胞术检测KYSE-150细胞的凋亡和CD8+T细胞凋亡情况,WB法检测KYSE-150细胞中PD-L1、FOXM1、BAX和PCNA蛋白的表达。构建KYSE-150细胞裸鼠移植瘤模型,观察miR-7-5p过表达对移植瘤生长和组织中Ki-67、FOXM1表达的影响。结果:miR-7-5p可以靶向负调控FOXM1(P<0.05)。ESCC组织中miR-7-5p呈低表达,FOXM1呈高表达(均P<0.05),其表达分别与TNM分期、分化程度显著相关联(均P<0.05)。miR-7-5p过表达组EdU阳性细胞率、细胞增殖能力、CD8+T细胞凋亡率,以及PD-L1、PCNA、FOXM1 mRNA和蛋白均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、miR-7-5p、BAX水平均显著升高(均P<0.05);同时过表达FOXM1则可逆转上述作用(均P<0.05)。miR-7-5p过表达可降低小鼠移植瘤质量和体积,以及移植瘤组织中Ki-67、FOXM1蛋白的表达(均P<0.05)。结论:miR-7-5p过表达能够显著抑制KYSE-150细胞增殖和免疫逃逸并促进细胞凋亡,其机制可能是通过靶向负调控FOXM1基因实现的。 展开更多

关键词 miR-7-5p 叉头框转录因子M1 食管鳞状细胞癌 kyse-150细胞 增殖 凋亡 免疫逃逸

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铁皮石斛毛兰素对人食管癌KYSE-150细胞的抑制作用 被引量：2

4

作者 燕文柏 赵庆俊 +10 位作者 胡艺萍 罗纪红 邓晓东 赵志伟 魏玉颖 蒋璐遥 严阳 周俊含 甘菊丽 杜彦锋 张薇薇 《现代食品科技》 北大核心 2025年第1期57-64,共8页

该研究旨在探明铁皮石斛毛兰素对人食管癌KYSE-150细胞生长的抑制作用。分别采用CCK-8试剂盒、显微镜观察、划痕实验和流式细胞技术检测毛兰素对KYSE-150细胞的活性,细胞形态变化、细胞迁移能力和细胞凋亡、周期阻滞的影响,并通过Wester... 该研究旨在探明铁皮石斛毛兰素对人食管癌KYSE-150细胞生长的抑制作用。分别采用CCK-8试剂盒、显微镜观察、划痕实验和流式细胞技术检测毛兰素对KYSE-150细胞的活性,细胞形态变化、细胞迁移能力和细胞凋亡、周期阻滞的影响,并通过Western Blot法检测Bax、Bcl-2、Vimentin、Akt、P-Akt、PI3K、P-PI3K、N-cadherin、E-cadherin蛋白的表达情况。结果表明,毛兰素对KYSE-150细胞生长具有抑制作用,24、48、72 h的IC50分别为357.30、120.20、57.43 nmol/L,细胞出现皱缩、聚团生长现象,细胞迁移能力降低,同时与对照组相比,40、80、120 nmol/L作用24 h后,细胞凋亡百分比分别是27.57%、35.38%、61.97%,处理组细胞G1期比例明显降低,由56.64%下降至2.80%,G2期细胞比例明显增加,由16.82%增加至86.98%,Western Blot实验中加药组Bax和E-cadherin表达相对增高,Bcl-2、Vimentin、P-Akt、PI3K、P-PI3K、N-cadherin蛋白表达相对降低,表明毛兰素可诱导细胞凋亡,抑制细胞迁移。由此可见,铁皮石斛毛兰素可通过抑制EMT途路抑制细胞迁移,通过调控PI3K/Akt信号通路抑制KYSE-150细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 铁皮石斛 毛兰素 人食管癌kyse-150细胞 PI3K/AKT信号通路

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miR-124通过靶向BECN1基因调控细胞自噬抑制食管癌KYSE170细胞的侵袭和迁移 被引量：9

5

作者 刘飞 刘思桦 +6 位作者 刘世娜 谷丽娜 孟令娇 尹丹静 张建东 吴云艳 桑梅香 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期778-784,共7页

目的:探讨mi R-124通过调控细胞自噬对食管癌KYSE170细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:食管癌KYSE170细胞转染mi R-124 mimic,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化,双荧光素酶报告基因验证mi R-124对BECN1(Beclin1)基因的靶向调... 目的:探讨mi R-124通过调控细胞自噬对食管癌KYSE170细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:食管癌KYSE170细胞转染mi R-124 mimic,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化,双荧光素酶报告基因验证mi R-124对BECN1(Beclin1)基因的靶向调控作用,Western blotting分析对BECN1、P62及LC3蛋白表达水平的影响。向KYSE170细胞中转染BECN1 si RNA沉默BECN1的表达,Transwell法检测细胞侵袭及迁移能力的变化,Western blotting检测BECN1、P62及LC3蛋白的表达。将mi R-124 mimic与BECN1过表达质粒共转染至KYSE170细胞,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力的变化,Western blotting检测自噬相关基因表达的变化。结果:转染mi R-124 mimic后,KYSE170细胞的侵袭和迁移能力下降(P<0.05),BECN1蛋白及荧光素酶报告基因活性均明显下调(均P<0.01),自噬相关蛋白P62表达增高,LC3表达水平明显降低(均P<0.01)。沉默BECN1表达抑制食管癌细胞侵袭及迁移(P<0.01),而过表达BECN1使mi R-124 mimic对KYSE170细胞自噬、侵袭和迁移能力的抑制作用明显减弱(P<0.01),自噬相关蛋白P62表达降低、LC3蛋白表达水平明显升高(均P<0.01)。结论:mi R-124能够抑制食管癌细胞侵袭及迁移能力,其机制可能与靶向调控自噬相关基因BECN1的表达影响细胞自噬有关。 展开更多

关键词 MI R-124 BECN1 食管癌 kyse170细胞 自噬 迁移 侵袭

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下调IL-8表达抑制食管鳞状细胞癌KYSE170细胞的迁移能力及其相关机制 被引量：4

6

作者 杨青 张香梅 +5 位作者 何明 陈新 赵继东 桑梅香 赵连梅 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期785-790,共6页

目的:研究白介素8(IL-8)对食管鳞癌细胞株KYSE170迁移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:体外合成针对IL-8的si RNA,采用脂质体法转染KYSE170细胞,利用Real-time PCR和Wsetern blotting及ELISA法检测沉默效率,镜下观察细胞形态学改... 目的:研究白介素8(IL-8)对食管鳞癌细胞株KYSE170迁移能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:体外合成针对IL-8的si RNA,采用脂质体法转染KYSE170细胞,利用Real-time PCR和Wsetern blotting及ELISA法检测沉默效率,镜下观察细胞形态学改变,划痕实验检测细胞迁移能力,CCK-8实验检测细胞增殖能力的变化。Wsetern blotting检测IL-8受体及JAK2-STAT3信号通路相关蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,靶向沉默IL-8处理后的KYSE170细胞,其IL-8基因和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),IL-8分泌量显著减少(P<0.01);IL-8基因沉默后,KYSE170细胞迁移能力明显减弱(P<0.01),而细胞增殖能力无明显变化。IL-8受体2即CXCR2、转移相关蛋白WASF3的表达水平明显降低(P<0.05),而IL-8受体1即CXCR1的表达水平没有明显变化;JAK2-STAT3信号通路关键蛋白p-JAK2和p-STAT3表达明显降低(均P<0.01)。结论:下调IL-8的表达可以抑制食管癌细胞株KYSE170的迁移能力,其机制可能通过介导CXCR2及其下游JAK2-STAT3信号通路活性的改变相关。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 kyse170细胞 白介素8 迁移

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siRNA沉默KLF4的表达促进食管癌KYSE140细胞的增殖及迁移 被引量：3

7

作者 黄邵洪 胡昆鹏 +1 位作者 严淑红 叶升 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期301-305,共5页

目的:探讨体外沉默Kruppel样因子4(Kruppel like factor 4,KLF4)基因的表达对食管癌KYSE140细胞增殖及迁移的影响。方法:Western blotting法检测人食管癌细胞株KYSE140、KYSE150、EC109及EC9706及食管永生化细胞NE3中KLF4蛋白的表达,化... 目的:探讨体外沉默Kruppel样因子4(Kruppel like factor 4,KLF4)基因的表达对食管癌KYSE140细胞增殖及迁移的影响。方法:Western blotting法检测人食管癌细胞株KYSE140、KYSE150、EC109及EC9706及食管永生化细胞NE3中KLF4蛋白的表达,化学合成2对靶向KLF4的siRNA(KLF4-siRNA1,KLF4-siRNA2),并设对照siRNA(Ctrl-siRNA),分别体外转染至高表达KLF4的食管癌KYSE140细胞中,形成KLF4-siRNA1-KYSE140、KLF4-siRNA2-KYSE140及Ctrl-siRNA-KYSE140细胞,通过MTT实验、Transwell实验分别检测转染后食管癌KYSE140细胞的增殖及迁移。结果:食管癌细胞株KYSE140中KLF4蛋白的表达明显高于KYSE150、EC109及EC9706细胞株[(5.62±0.02)vs(1.71±0.23)、(3.24±0.35)、(3.16±0.41),均P<0.05]。KLF4-siRNA1-KYSE140、KLF4-siRNA2-KYSE140与Ctrl-siRNA-KYSE140细胞相比,KLF4蛋白表达明显降低[(0.49±0.18)、(0.32±0.09)vs(0.98±0.19),均P<0.05],细胞增殖能力明显增高[(1.2±0.8)、(1.4±0.1)vs(0.6±0.1),均P<0.05],迁移细胞数量也明显增加[(780±22)、(475±25)vs(83±17)个,P<0.05]。结论:KLF4在人食管癌细胞的增殖和迁移过程中起着负调控作用。 展开更多

关键词 Kruppel样因子4基因 食管癌 kyse140细胞 增殖 迁移

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熊果酸对食管癌KYSE105细胞增殖、凋亡的影响 被引量：8

8

作者 卢丹 冯常炜 马彦娟 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第2期130-133,共4页

目的探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人食管癌KYSE105细胞增殖、细胞凋亡的影响及其分子机制。方法应用0～50μmol/L熊果酸处理KYSE105细胞24～72h后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测KYSE105细胞周期... 目的探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人食管癌KYSE105细胞增殖、细胞凋亡的影响及其分子机制。方法应用0～50μmol/L熊果酸处理KYSE105细胞24～72h后,采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测KYSE105细胞周期及凋亡率;RT-PCR检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcelllymphoma/lewkmia-2,bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2as-sociated X protein,bax)及细胞周期素D1(cyclinD1)mRNA的表达。结果熊果酸作用后KYSE105细胞生长明显减慢,抑制率8.55%～89.48%(P<0.05),呈时间-剂量效应关系,使细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率16.62%～21.54%(P<0.05)。baxmR-NA表达升高,bcl-2、cyclinD1mRNA表达下调(P<0.05)。结论熊果酸能明显抑制KYSE105细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制bcl-2、cyclinD1表达,同时促进bax表达有关。 展开更多

关键词 熊果酸 kyse105细胞 细胞凋亡 BCL-2 CYCLIND1 BAX

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miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2

9

作者 魏思思 李晓亚 +4 位作者 董佩 戴素丽 张璁 赵连梅 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期623-631,共9页

目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制。方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实... 目的:探讨miR-1269a在食管癌组织中的表达及其对KYSE30细胞恶性生物学行为的影响,并研究其可能的作用机制。方法:选取90例在河北医科大学第四医院通过手术切除的食管癌组织标本,并收集正常食管永生化上皮细胞和食管癌细胞系,应用qPCR实验检测癌组织和细胞系miR-1269a的表达水平。将miR-1269a的mimics和inhibitor分别转染食管癌细胞KYSE30后,用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测miR-1269a对KYSE30细胞增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响。通过生物信息学软件预测miR-1269a的靶基因,并通过WB实验和双荧光素酶报告基因实验验证miR-1269a对靶基因的调控作用。转染SOX6质粒后,采用MTS、Transwell和克隆形成实验分别检测SOX6对KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力的影响,并利用回复实验进一步验证结果。结果:食管癌组织中miR-1269a的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);与正常食管上皮细胞相比,食管癌细胞系中miR-1269a的表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a mimics转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著高于mimics NC组(P<0.05或P<0.01);inhibitor转染组KYSE30细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆形成能力显著低于inhibitor NC组(P<0.05或P<0.01)。miR-1269a可与SOX6的3’UTR区相结合,且过表达miR-1269a后,KYSE30细胞的SOX6表达水平和荧光素酶报告基因的活性均显著降低(P<0.05)。回复实验表明,高表达miR-1269a可以促进食管癌细胞增殖、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01),同时高表达SOX6后,miR-1269a的促进作用出现部分逆转。结论:miR-1269a在食管癌组织和细胞系中表达上调,能够促进KYSE30细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成等恶性生物学行为,其机制可能是通过抑制靶基因SOX6实现的。 展开更多

关键词 食管癌 miR-1269a kyse30细胞 SOX6基因 增殖 迁移 侵袭

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核桃青皮粗提物诱导KYSE150食管癌细胞周期阻滞及凋亡 被引量：5

10

作者 李彩霞 张淑坤 +1 位作者 李志刚 司传领 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2017年第2期151-155,共5页

目的:研究核桃青皮粗提物诱导KYSE150人食管癌细胞周期阻滞和凋亡的作用机制。方法:MTT方法检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞增殖的抑制效果,流式细胞仪检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot检测核桃青皮... 目的:研究核桃青皮粗提物诱导KYSE150人食管癌细胞周期阻滞和凋亡的作用机制。方法:MTT方法检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞增殖的抑制效果,流式细胞仪检测核桃青皮粗提物对KYSE150细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blot检测核桃青皮粗提物引起的细胞周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的变化。结果:MTT结果显示,核桃青皮粗提物对KYSE150细胞的增殖抑制呈时间和浓度依赖性,当核桃青皮粗提物浓度为100μg/mL时,在24 h,48 h和72 h对KYSE150细胞的增殖抑制率分别为(43.69±1.02)%,(88.73±1.32)%和(93.06±2.34)%;流式细胞术结果表明,核桃青皮粗提物诱导KYSE150细胞周期阻滞和凋亡;Western blot结果表明,核桃青皮粗提物通过上调p53,phospho-p53(p-p53)蛋白的表达,下调cyclinD1蛋白的表达,诱导KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期。另一方面,核桃青皮粗提物通过上调Bax蛋白,下调Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,从而诱导细胞凋亡。当核桃青皮粗提物浓度为40μg/mL时,可上调p53,p-p53,Bax的表达量分别为对照组的(1.8±0.07),(23.6±0.12)和(1.5±0.02)倍,下调cyclinD1,Bcl-2和Caspase-3的表达量分别为对照组的(0.3±0.02),(0.03±0.005)和(0.1±0.01)倍。结论:核桃青皮粗提物可以引发KYSE150细胞周期阻滞在G0/G1期,并且可以通过线粒体途径诱导KYSE150细胞凋亡。 展开更多

关键词 核桃青皮粗提物 kyse150细胞 增殖 周期 凋亡

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整合素连接激酶在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其对KYSE-150细胞增殖、凋亡及裸鼠移植瘤生长的影响 被引量：1

11

作者 马晓丽 高艳 +3 位作者 魏瑜 曹雷雨 张周华 张莉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期549-556,共8页

目的:分析整合素连接激酶(ILK)基因在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达水平及其与患者临床病理特征之间的关系,探讨其对KYSE-150细胞增殖、凋亡和裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月手术切除并经病理证实的75例... 目的:分析整合素连接激酶(ILK)基因在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达水平及其与患者临床病理特征之间的关系,探讨其对KYSE-150细胞增殖、凋亡和裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月手术切除并经病理证实的75例ESCC患者的癌组织和其配对的癌旁组织标本,用组织芯片技术及免疫组织化学染色法检测ESCC组织和癌旁组织中ILK的表达情况;qPCR法检测ESCC细胞ECA109、TE-1、EC9706、KYSE-150中ILK mRNA的表达,选用ILK表达最高的KYSE-150细胞进行后续细胞功能学研究。使用ILK干扰慢病毒感染KYSE-150细胞下调ILK的表达,qPCR和WB法检测ILK基因敲降效率;MTT实验、克隆形成实验和FACS检测干扰ILK表达对KYSE-150细胞增殖能力和凋亡水平的影响;裸鼠皮下成瘤实验检测干扰ILK对KYSE-150细胞移植瘤生长的影响。结果:ESCC组织中ILK蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),且ILK高表达与淋巴结转移有关联(P<0.05)。ILK干扰慢病毒感染的KYSE-150细胞中ILK mRNA表达明显受到抑制(P<0.05),ILK蛋白水平表达下调,以上结果提示ILK敲降成功。与感染阴性对照病毒的KYSE-150细胞相比,ILK干扰慢病毒感染的KYSE-150细胞的增殖能力、克隆形成数均显著降低(均P<0.05),但细胞凋亡率升高(P<0.05)。与对照组相比,干预组裸鼠移植瘤生长缓慢,移植瘤的质量及体积均较小(均P<0.05)。结论:ESCC组织中ILK的表达高于癌旁组织,且ILK高表达与患者发生淋巴结转移有关联;抑制ILK基因可导致KYSE-150细胞增殖能力降低,促进细胞凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 kyse-150细胞 整合素连接激酶 SIRNA 增殖 凋亡 裸鼠

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梁氏异蝎毒素促进KYSE-510细胞凋亡的作用机制研究 被引量：1

12

作者 王娟 李秦晋 +2 位作者 符文卉 魏宝阳 王智 《四川动物》 北大核心 2016年第5期660-665,共6页

为了研究蝎毒抑制肿瘤细胞生长的机理,提取梁氏异蝎Heterometrus liangi蝎毒干预人食管癌细胞(KYSE-510细胞),运用流式细胞术、电镜技术、逆转录PCR和Western blot方法分别检测蝎毒对KYSE-510细胞凋亡的影响以及对caspase-3基因表达。... 为了研究蝎毒抑制肿瘤细胞生长的机理,提取梁氏异蝎Heterometrus liangi蝎毒干预人食管癌细胞(KYSE-510细胞),运用流式细胞术、电镜技术、逆转录PCR和Western blot方法分别检测蝎毒对KYSE-510细胞凋亡的影响以及对caspase-3基因表达。结果表明:经蝎毒处理的实验组KYSE-510活细胞数量显著减少,其原因是蝎毒引起细胞大量凋亡和坏死。经不同浓度(50μg·m L^(-1),100μg·m L^(-1),200μg·m L^(-1))蝎毒处理的KYSE-510细胞与对照组的caspase-3基因在mRNA水平表达相近,而在蛋白表达水平上,实验组细胞与对照组细胞相比,蝎毒促进了caspase-3的剪切活化,且以200μg·m L^(-1)蝎毒处理的KYSE-510细胞caspase-3的剪切活化最强,由此证明蝎毒导致KYSE-510细胞凋亡的机理之一可能是其促进了caspase-3的剪切活化。 展开更多

关键词 梁氏异蝎毒素 kyse-510细胞 CASPASE-3 基因表达

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放射抗拒性食管癌细胞株KYSE-150R上皮—间质转化特性鉴定 被引量：1

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作者 谢聪颖 苏华芳 +5 位作者 景钊 张力 薛圣留 邓霞 吴式琇 伍钢 《肿瘤学杂志》 CAS 2012年第7期504-507,共4页

[目的]鉴定放射抗拒性食管癌细胞株KYSE-150R获得上皮—间质转化(EMT)表型。[方法]食管鳞状细胞癌细胞株KYSE-150经分次反复照射、单克隆培养,筛选出具有放射抗拒性细胞株KYSE-150R。克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线并计算放... [目的]鉴定放射抗拒性食管癌细胞株KYSE-150R获得上皮—间质转化(EMT)表型。[方法]食管鳞状细胞癌细胞株KYSE-150经分次反复照射、单克隆培养,筛选出具有放射抗拒性细胞株KYSE-150R。克隆形成实验计算细胞存活率,拟合生存曲线并计算放射生物学参数。高倍显微镜下观察细胞形态学变化。采用RT-PCR、Western Blot和免疫荧光检测上皮表型标志物E钙黏蛋白(E-cad)、间质表型标志物波形蛋白(VIM)和转录因子Slug、Snail与Twist的表达。[结果]构建的食管癌细胞株KYSE-150R比其亲本对射线更加抗拒,经传代50代后仍保留放射抗拒性。放射抗拒的食管癌细胞株KYSE-150R发生EMT相符的形态学改变:细胞呈纺锤体状,极性消失。与母株相比,KYSE-150R中E-cad表达下降,VIM、Slug及Snail表达上调,Twist表达未见明显变化。免疫荧光染色证实细胞膜E-cad蛋白的丢失,上调的β-catenin移位至细胞核。[结论]放射抗拒的食管癌细胞株KYSE-150R获得了EMT表型,其与食管癌放射抗拒的形成有关。 展开更多

关键词 放射抗拒 食管肿瘤 上皮间质转化 kyse-150R细胞株

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miR-132在食管癌细胞系KYSE150中对靶基因FOXA1的调控作用

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作者 李书军 陈彦亮 +3 位作者 江中太 牛颂歌 吕宝雷 吴文新 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1363-1366,共4页

目的构建miR-132真核表达载体和融合靶基因FOXA1表达载体,在食管癌细胞KYSE150中验证miR-132对靶基因FOXA1的调控作用。方法根据miR-132序列在基因组中的位置及其上下游序列,以EC9706细胞基因组DNA为模板,扩增包含miR-132前体序列,克隆... 目的构建miR-132真核表达载体和融合靶基因FOXA1表达载体,在食管癌细胞KYSE150中验证miR-132对靶基因FOXA1的调控作用。方法根据miR-132序列在基因组中的位置及其上下游序列,以EC9706细胞基因组DNA为模板,扩增包含miR-132前体序列,克隆到pMD18-T Simple中,经BamHⅠ和EcoRⅠ酶切后亚克隆到质粒pcDNA3.1(+)上;通过Real-time PCR检测转染重组表达载体pcDNA3.1-miR-132的KYSE150成熟miR-132的表达水平。用生物信息学软件对miR-132的靶基因进行预测,将候选靶基因FOXA1的3′UTR区融合到pMIR荧光素酶基因下游,通过双荧光素酶报告基因检测分析miR-132对靶基因FOXA1的调控作用。将pCDNA3.1-miR-132表达质粒转染人食管癌细胞KYSE150,通过Western blot检测miR-132对FOXA1蛋白表达的影响。结果成功构建了miR-132真核表达载体,Real-time PCR验证表明pCDNA3.1-miR-132在KYSE150细胞中能够显著地过表达成熟miR-132。生物信息学预测FOXA1可能是miR-132的靶基因。双荧光素酶报告基因分析表明miR-132能够作用于FOXA1的3′UTR。Western blot进一步证实miR-132能够抑制内源性FOXA1蛋白的表达。结论FOXA1是miR-132直接调控的靶基因。 展开更多

关键词 kyse150 miR-132 FOXA1

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川陈皮素对食管癌KYSE150细胞存活、侵袭和凋亡的影响及机制实验研究 被引量：6

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作者 万传科 王晓霞 +3 位作者 张彦青 李守霞 闫建军 王志刚 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第3期407-411,共5页

目的:探究川陈皮素对食管癌KYSE150细胞存活、侵袭及凋亡的影响及可能的机制。方法:将培养至对数生长期的KYSE150细胞分为对照组(常规培养)、顺铂组(0.5μg/ml顺铂)、川陈皮素低(10μg/ml)、中(20μg/ml)、高(40μg/ml)浓度组。采用MTT... 目的:探究川陈皮素对食管癌KYSE150细胞存活、侵袭及凋亡的影响及可能的机制。方法:将培养至对数生长期的KYSE150细胞分为对照组(常规培养)、顺铂组(0.5μg/ml顺铂)、川陈皮素低(10μg/ml)、中(20μg/ml)、高(40μg/ml)浓度组。采用MTT法检测KYSE150细胞存活率。采用Transwell实验检测KYSE150细胞侵袭能力。采用流式细胞术检测KYSE150细胞凋亡率。采用荧光定量PCR法检测KYSE150细胞Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、ROCK2 mRNA表达。采用Western bolt法检测KYSE150细胞RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果:与对照组比较,顺铂组及川陈皮素低、中、高浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平降低,凋亡率升高(均P<0.05)。与顺铂组比较,川陈皮素低、中浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平升高,凋亡率降低(均P<0.05)。川陈皮素高浓度组和顺铂组上述指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。川陈皮素低、中、高浓度组KYSE150细胞存活率、侵袭数目以及RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA和蛋白表达水平依次降低,凋亡率依次升高(均P<0.05)。结论:川陈皮素能够抑制KYSE150细胞的存活和侵袭,促进凋亡,其机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。 展开更多

关键词 食管癌 川陈皮素 kyse150细胞 Ras同源基因家族成员A Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶 机制

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miR-452-5p靶向SOX7促进食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭及EMT 被引量：5

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作者 尹情 韩俊淑 +5 位作者 董稚明 郭炜 沈素朋 梁佳 路军涛 郭艳丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期294-300,共7页

目的:检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法:收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对... 目的:检测miR-452-5p在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达,并探讨其异常表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响及其分子机制。方法:收集2012年3月至2015年12月在河北医科大学第四医院就诊的86名ESCC患者的癌组织样本和对应的癌旁组织,用qPCR法检测miR-452-5p及其他相关基因在ESCC组织和细胞中的表达;向KYSE-150细胞中分别转染miR-452-5p mimic或pcDNA3.1-SOX7构建过表达的细胞株。分析miR-452-5p表达与ESCC病理特征和患者5年OS的关系。用MTS、Tanswell法检测miR-452-5p过表达对食管癌KYSE-150细胞增殖、侵袭能力和EMT进程的影响;用双荧光素酶报告基因实验及TOP/FOP报告基因系统检测miR-452-5p与SRY盒转录因子(SOX7)3’UTR区的结合作用及对Wnt/β-catenin通路活化水平的影响。结果:miR-452-5p在ESCC组织中呈明显高表达(P<0.01),并与ESCC患者的淋巴结转移、TNM分期及5年OS密切相关(均P<0.01)。miR-452-5p过表达明显促进食管癌KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程(P<0.05或P<0.01)。SOX7是miR-452-5p的直接靶基因,miR-452-5p通过对SOX7的负向调控影响了Wnt通路活化水平(P<0.05或P<0.01),同时,miR-452-5p表达也受Wnt通路活化水平的影响(P<0.05或P<0.01),其可能为Wnt通路下游靶基因。结论:miR-452-5p通过miR-452-5p/SOX7/Wnt/miR-452-5p正反馈环路提高Wnt/β-catenin通路活化水平,进而促进ESCC KYSE-150细胞的增殖、侵袭能力及EMT进程,miR-452-5p有望成为ESCC患者靶向治疗的潜在靶点及预后评估的新型分子标志物。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 kyse-150细胞 miR-452-5p SRY盒转录因子7 WNT/Β-CATENIN信号通路

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具核梭杆菌感染对食管癌KYSE150细胞紫杉醇化疗抵抗的影响 被引量：1

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作者 张哲源 刘怡文 +7 位作者 付臻 杨海军 代宁涛 李军扩 孙蔚 郭艺博 孔金玉 周福有 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2023年第5期603-610,共8页

目的:探讨具核梭杆菌(Fn)感染对食管癌细胞紫杉醇(PTX)化疗的影响及其机制。方法:将食管癌细胞KYSE150分为Fn未感染组及Fn感染组(12、24、48和72 h),通过CCK-8及Western blot检测各组细胞的PTX 24 h药物半数抑制浓度(IC_(50))及炎症小体... 目的:探讨具核梭杆菌(Fn)感染对食管癌细胞紫杉醇(PTX)化疗的影响及其机制。方法:将食管癌细胞KYSE150分为Fn未感染组及Fn感染组(12、24、48和72 h),通过CCK-8及Western blot检测各组细胞的PTX 24 h药物半数抑制浓度(IC_(50))及炎症小体NLRP3蛋白表达量。构建NLRP3敲降的食管癌细胞KYSE150-N,然后分为KYSE150组、KYSE150-N组、KYSE150+Fn组和KYSE150-N+Fn组4组。通过Western blot及流式细胞术检测各组细胞系中NLRP3、乙醛脱氢酶1(ALDH1)蛋白表达量及肿瘤干细胞(CSCs)百分比;通过平板克隆、成球实验及CCK-8检测各组细胞的体外增殖能力、克隆成球能力及PTX 24 h IC_(50)。将裸鼠分为上述4组,按分组接种细胞。成瘤后每3 d尾静脉注射一次PTX(10 mg/kg),共6次。对比各组裸鼠的成瘤能力和瘤体组织中NLRP3、ALDH1蛋白表达量及CSCs百分比。结果:与Fn未感染组相比,Fn感染组(12、24、48和72 h)KYSE150细胞的PTX 24 h IC_(50)及NLRP3蛋白表达量均增高(P均<0.05)。与KYSE150组相比,KYSE150+Fn组细胞的NLRP3及ALDH1蛋白表达量、CSCs百分比、体外增殖能力、克隆成球能力、PTX 24 h IC_(50)、裸鼠瘤体对PTX的抗性、瘤体内NLRP3与ALDH1蛋白表达量及CSCs百分比均增高(P均<0.05);而KYSE150-N组细胞上述指标均降低(P均<0.05)。与KYSE150+Fn组细胞相比,KYSE150-N+Fn组细胞上述指标均降低(P均<0.05)。结论:Fn可通过激活NLRP3诱导ALDH1高表达、富集CSCs,降低食管癌细胞对PTX的敏感性,促进其恶性增殖。 展开更多

关键词 具核梭杆菌 食管癌 炎症小体NLRP3 肿瘤干细胞 紫杉醇 化疗抵抗 kyse150细胞

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华蟾酥毒基通过FAK/PI3K/Akt通路抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭 被引量：13

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作者 盛杰霞 邓旭 +3 位作者 包军 王志美 代二庆 邓全军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期139-145,共7页

目的探讨华蟾酥毒基抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭的相关机制。方法 CCK-8法检测Kyse-520细胞经不同浓度华蟾酥毒基作用12、24、48 h后的增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭过程;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分... 目的探讨华蟾酥毒基抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭的相关机制。方法 CCK-8法检测Kyse-520细胞经不同浓度华蟾酥毒基作用12、24、48 h后的增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭过程;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析Kyse-520细胞中FAK、Akt、PTEN、VEGF-A、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测FAK、p-FAK(Tyr397)、Akt、p-Akt(Ser473)、PTEN、VEGF-A、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平。结果 CCK-8结果显示,华蟾酥毒基可以抑制Kyse-520细胞增殖,呈现时间和浓度依赖性,划痕实验和Transwell小室实验结果表明,华蟾酥毒基可以抑制食管癌细胞迁移和侵袭;RT-qPCR和Western blot结果显示,华蟾酥毒基对FAK、Akt mRNA及总蛋白无明显影响,但可以下调p-FAK、p-Akt、VEGF-A、MMP-2、MMP-9表达,上调PTEN的表达。结论华蟾酥毒基通过诱导PTEN表达,下调FAK/PI3K/Akt信号通路,抑制食管癌Kyse-520细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 华蟾酥毒基 食管癌 kyse-520细胞 细胞迁移 细胞侵袭 FAK PI3K/AKT MMPS

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姜黄素对食管癌KYSE410细胞的生长抑制与氧化调节 被引量：7

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作者 周新媛 洪佳馨 +1 位作者 何少兵 张连茹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1405-1410,共6页

通过四氮唑蓝盐化合物(MTS)和重要氧化还原酶及其代谢物的试剂盒检测等方法,考察了姜黄素对食管癌KYSE410细胞生长以及对细胞氧化还原状态和代谢的影响.结果表明,姜黄素对KYSE410细胞具有较强的抑制作用,其IC50=17.9μmol/L.进一步研究... 通过四氮唑蓝盐化合物(MTS)和重要氧化还原酶及其代谢物的试剂盒检测等方法,考察了姜黄素对食管癌KYSE410细胞生长以及对细胞氧化还原状态和代谢的影响.结果表明,姜黄素对KYSE410细胞具有较强的抑制作用,其IC50=17.9μmol/L.进一步研究发现,姜黄素可引起细胞培养上层清液中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平发生变化.当姜黄素浓度为40μmol/L时,MDA水平比对照组提高了125.1%,而SOD水平则降低了43.2%;同时,乳酸水平降低了44.4%,乳酸脱氢酶的活性下降了58.2%,丙酮酸激酶的活性升高了216.7%.姜黄素可能通过干扰氧化还原途径,致使发生脂质过氧化反应,并抑制肿瘤细胞糖酵解作用,进而抑制食管癌KYSE410细胞增殖. 展开更多

关键词 姜黄素 食管癌 kyse410细胞

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miR-199a-3p对Eca109和KYSE450细胞周期和迁移的影响 被引量：1

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作者 刘襄艳 侯桂琴 +4 位作者 高盼 凡丞 张幸丽 师莹莹 鲁照明 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第6期668-672,共5页

目的:观察miR-199a-3p对食管鳞癌细胞周期及迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:常规培养Eca109和KYSE450细胞,分别转染miR-199a-3p mimics及miR-199a-3p mimics negative control(阴性对照)。采用qRT-PCR法检测3组细胞中miR-199a-3... 目的:观察miR-199a-3p对食管鳞癌细胞周期及迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:常规培养Eca109和KYSE450细胞,分别转染miR-199a-3p mimics及miR-199a-3p mimics negative control(阴性对照)。采用qRT-PCR法检测3组细胞中miR-199a-3p的表达水平,并用流式细胞术及划痕实验分别检测细胞周期及细胞迁移能力,用Western blot检测细胞中m TORC2信号通路相关蛋白[m TOR、Rictor、PI3K、p-Akt(T308)、p-Akt(S473)]的表达。结果:与阴性对照相比,转染miR-199a-3p mimics后,Eca109和KYSE450细胞中miR-199a-3p表达量增加;G1期细胞增多,细胞相对迁移率降低,m TOR和Rictor蛋白的表达水平降低,而PI3K、p-Akt(T308)和p-Akt(S473)蛋白的表达水平升高(P均<0.05)。结论:miR-199a-3p可能通过调控m TORC2信号通路来影响食管鳞癌细胞周期进程及细胞迁移。 展开更多

关键词 miR-199a-3p 食管鳞癌 细胞周期 细胞迁移 ECA109 kyse450

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