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扶正透邪解毒化瘀方对携带KPC-2基因多重耐药肺炎克雷伯杆菌的干预机制研究
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作者 刘通 李雁 +4 位作者 徐红日 张路遥 王宝玉 刘燕 刘凤仪 《中国中医基础医学杂志》 2025年第6期1012-1019,共8页
目的探讨扶正透邪解毒化瘀方对携带KPC-2基因多重耐药肺炎克雷伯杆菌的干预作用和机制,以及对头孢他啶的增效作用和机制。方法试管稀释法、K-B纸片扩散法观察头孢他啶联合不同浓度中药及中药含药血清的体外抑菌效价;酶标仪、透射电镜观... 目的探讨扶正透邪解毒化瘀方对携带KPC-2基因多重耐药肺炎克雷伯杆菌的干预作用和机制,以及对头孢他啶的增效作用和机制。方法试管稀释法、K-B纸片扩散法观察头孢他啶联合不同浓度中药及中药含药血清的体外抑菌效价;酶标仪、透射电镜观察该方及其含药血清对细菌生长曲线和形态结构的影响;RT-qPCR法检测该方对KPC-2基因表达的影响。结果单纯中药的最小抑菌浓度为0.5 g/mL,单纯含药血清(1、2、4、8倍)均无抑菌作用,但联合头孢他啶后均使头孢他啶的最小抑菌浓度由512μg/mL降至256μg/mL;与头孢他啶组比较,2、4、8倍含药血清联合头孢他啶组的抑菌圈直径显著增大,8倍含药血清抑菌效果最佳(P<0.01);中药可直接抑制细菌生长;各中药及含药血清联合头孢他啶组细菌生长受抑情况更加明显,生长迟缓期显著延长;含药血清联合头孢他啶后对细菌结构的破坏程度更为严重,存在量-效关系;与阳性组比较,头孢他啶显著促进了KPC-2表达(P<0.001);与头孢他啶组比较,2、4倍含药血清联合头孢他啶可显著抑制KPC-2表达,4倍含药血清的抑制作用最强(P<0.001)。结论扶正透邪解毒化瘀方与头孢他啶联合后对抑制细菌有协同增效作用,可在一定程度上恢复头孢他啶的敏感性,机制可能与下调KPC-2表达、干扰细菌生长代谢、增强头孢他啶对细菌结构的破坏程度相关。 展开更多
关键词 扶正透邪解毒化瘀方 肺炎克雷伯杆菌 kpc-2 多重耐药 抑菌
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产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床及分子流行病学特征比较
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作者 殷丽军 卢露 +2 位作者 何磊燕 武娜娜 王传清 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期556-562,共7页
目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试... 目的比较产NDM-1和产KPC-2耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的临床及分子流行病学特征。方法回顾性分析2017—2020年某儿童医院非重复儿童住院患者临床分离的CRKP,查阅菌株来源患者的病历资料获得患者的基本临床特征。对CRKP进行药敏试验及多位点序列分型(MLST)分析,比较产NDM-1和产KPC-2的CRKP临床及分子流行病学特征。结果2017—2020年共收集164株CRKP菌株,其中96株携带bla NDM-1,68株携带bla KPC-2,产NDM-1的CRKP主要分布在新生儿科室,产KPC-2的CRKP以非新生儿科室居多,两组在标本来源、患者年龄、科室分布和预后情况方面比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);产NDM-1的CRKP菌株以ST 17型和ST 278型为主,分别为40.63%、18.75%;而产KPC-2的CRKP菌株以ST 11为主,达73.53%。产KPC-2的CRKP分离株对头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和磷霉素的耐药率均高于产NDM-1的CRKP分离株,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论产NDM-1和产KPC-2的CRKP菌株在临床及分子流行病学方面均存在差异,产KPC-2的CRKP菌株表现出更严重的耐药性,感染KPC-2 CRKP的患者预后较差,应引起临床和感控的重视。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 kpc-2 NDM-1 ST 11 ST 17 CRKP 流行病学特征
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新型抗KPC-2型碳青霉烯酶纳米抗体的筛选与鉴定
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作者 张鑫 王辉 许剑锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1259-1264,共6页
目的:产KPC-2型肺炎克雷伯菌可引起β-内酰胺类抗生素、碳青霉烯类抗生素产生耐药性。通过噬菌体展示技术从抗KPC-2纳米抗体文库中筛选与KPC-2特异性结合的纳米抗体,为产KPC-2型肺炎克雷伯菌耐药性的检测和诊断提供技术支持。方法:利用... 目的:产KPC-2型肺炎克雷伯菌可引起β-内酰胺类抗生素、碳青霉烯类抗生素产生耐药性。通过噬菌体展示技术从抗KPC-2纳米抗体文库中筛选与KPC-2特异性结合的纳米抗体,为产KPC-2型肺炎克雷伯菌耐药性的检测和诊断提供技术支持。方法:利用重组KPC-2免疫双峰骆驼,从骆驼的外周血淋巴细胞中提取RNA,逆转录为cDNA,通过两轮嵌套式PCR扩增出纳米抗体片段,构建抗体文库,并通过噬菌体展示技术筛选特异性纳米抗体。通过HPLC和OCTET分别进行表位分析和亲和力测定。结果:构建了一个库容为5.47×10^(8)cfu/ml且插入有效片段不低于81.25%的纳米抗体文库;并建立抗KPC-2纳米抗体的免疫淘选方法;获得了2个不同CDR3区的纳米抗体K2和K5,亲和力分别为6.0 nmol/L和4.8 nmol/L。且在KPC-2上具有2个非竞争性结合表位。结论:成功淘选出2个不同表位的特异性纳米抗体,有望替代传统抗体用于肺炎克雷伯菌耐药性疾病的检测和诊断。 展开更多
关键词 纳米抗体 噬菌体展示技术 kpc-2型碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌
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广东省东莞地区发现1株泛耐药产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌 被引量:6
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作者 张丽 张小兵 +6 位作者 杨维青 黄娟 张丽华 张菊芬 朱学海 朱凯欣 周静 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期465-468,共4页
目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制和治疗对策。方法细菌鉴定采用VITEK2全自动细菌鉴定系统,药敏试验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(改良Hodge试验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查感染患者... 目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制和治疗对策。方法细菌鉴定采用VITEK2全自动细菌鉴定系统,药敏试验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(改良Hodge试验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查感染患者的诊疗情况。结果常规药敏试验显示,该菌株对阿米卡星敏感,对其他抗菌药物均耐药;Hodge试验阳性,PCR检测到KPC-2基因,序列测定与GenBank 11844849序列一致。患者经拔除气管插管,入住隔离病房,加强支持治疗后,1个月内未检测到泛耐药肺炎克雷伯菌。结论加强泛耐药肺炎克雷伯菌监测,提高对泛耐药菌的认识有助于感染疾病的治疗和预防。 展开更多
关键词 泛耐药 kpc-2碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌
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耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌KPC-2与NDM-1基因的研究 被引量:6
5
作者 谢小芳 沈海英 +3 位作者 周惠琴 杨欢 朱雪明 杜鸿 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2601-2603,2606,共4页
目的检测耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况以及KPC-2和NDM-1耐药基因的检出,分析耐碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制。方法采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA纸片协同试验和AmpC酶三维试验检测29株耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科... 目的检测耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况以及KPC-2和NDM-1耐药基因的检出,分析耐碳青霉烯类抗菌药物的耐药机制。方法采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA纸片协同试验和AmpC酶三维试验检测29株耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌产酶情况;PCR法检测KPC-2及NDM-1两种碳青霉烯酶耐药基因。结果 29株分离菌中26株菌改良Hodge试验阳性,7株亚胺培南-EDTA纸片协同试验阳性,7株AmpC酶三维试验阳性,16株携带KPC-2型碳青霉烯酶耐药基因,占55.17%,未扩增出NDM-1碳青霉烯酶耐药基因。结论耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的耐药机制主要是产碳青霉烯酶。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌 碳青霉烯酶 kpc-2基因 NDM-1基因
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产KPC-2肺炎克雷伯菌的基因分型、毒力基因和血清型特征研究 被引量:9
6
作者 程莉 曹小利 +4 位作者 沈瀚 张之烽 宁明哲 周万青 张葵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第8期591-595,共5页
目的分析我院产KPC-2肺炎克雷伯菌基因分型、毒力基因和血清型特点。方法收集碳青霉烯类不敏感肺炎克雷伯菌菌株75株(采用改良Hodge试验和DNA测序以确定其表型和基因型)和同期分离的敏感株97株,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,... 目的分析我院产KPC-2肺炎克雷伯菌基因分型、毒力基因和血清型特点。方法收集碳青霉烯类不敏感肺炎克雷伯菌菌株75株(采用改良Hodge试验和DNA测序以确定其表型和基因型)和同期分离的敏感株97株,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性,PCR检测9种毒力基因all S、rmp A、mrk D、kfu BC、cf29a、fim H、uge、wab G、ure A和K1、K2、K5、K54、K57、K206种血清型。比较产KPC-2和非产KPC-2肺炎克雷伯菌的毒力基因和血清型差异。结果 75株碳青霉烯类不敏感肺炎克雷伯菌菌株中,有61株细菌经改良Hodge试验初筛为产碳青霉烯酶菌株,PCR扩增及DNA测序确定其为产KPC-2酶。PFGE结果显示,依据相似度80%的折点,产KPC-2酶组的61株细菌来源于30个克隆菌株,不产KPC-2酶组的111株肺炎克雷伯菌来源于96个克隆菌株。all S基因在不产KPC-2组中的阳性率(21.9%)高于在产KPC-2组的阳性率(3.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。血清型K1、K2和K54在产KPC-2组与不产KPC-2组间的分布差异无统计学意义(P>0.05),其他3种血清型未检测到。结论产KPC-2肺炎克雷伯菌临床分离株携带的尿素酶基因all S减少,且大多不属于高致病性血清型,但作为高度耐药菌,应加强监控。 展开更多
关键词 kpc-2 毒力基因 血清型 脉冲场凝胶电泳 肺炎克雷伯菌
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常用抗菌药物对产KPC-2酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究 被引量:5
7
作者 简雪峰 程国平 +2 位作者 王媛媛 白娇红 孙灵云 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期969-971,991,共4页
目的探讨常用抗菌药物对产青霉烯-2(KPC-2)酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,为肺炎克雷伯菌临床治疗提供参考。方法收集2012年1月-2015年12月确诊肺炎克雷伯菌感染患者标本中分离20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌,测定菌株对头孢吡肟(FEP)... 目的探讨常用抗菌药物对产青霉烯-2(KPC-2)酶肺炎克雷伯菌的体外抗菌效应研究,为肺炎克雷伯菌临床治疗提供参考。方法收集2012年1月-2015年12月确诊肺炎克雷伯菌感染患者标本中分离20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌,测定菌株对头孢吡肟(FEP)、头孢西丁(FOX)、阿莫西林/克拉维酸(AMC)、头孢他啶(CAZ)、亚胺培南(IPM)、美洛培南(MEM)、环丙沙星(CIP)及米诺环素(MI)的最低抑菌浓度(MIC),分析FEP+CIP、FEP+AMC、IPM+MI、IPM+CIP、CAZ+AMC联合作用(PIC指数)。结果 20株产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对AMC、CAZ完全耐药,耐药率为100.00%,对FOX、CIP耐药率为75.00%,对FEP、IPM、MEM耐药率分别为30.00%、25.00%、30.00%,对MI完全敏感,耐药率为0.00%;FEP+CIP时2株出现协同、12株出现相加、40株出现无关、2株出现拮抗,构成比分别为10.00%、60.00%、20.00%、10.00%,FEP+AMC时17株出现协同、2株出现相加、1株出现拮抗,构成比分别为85.00%、10.00%、5.00%,IPM+MI时10株出现相加、4株出现无关、6株出现拮抗,构成比分别为50.00%、20.00%、30.00%,IPM+CIP时2株出现协同、8株出现相加、7株出现无关、3株出现拮抗,构成比分别为10.00%、40.00%、35.00%、15.00%,CAZ+AMC时12株出现协同、6株出现相加、2株出现拮抗,构成比分别为60.00%、30.00%、10.00%;对FEP+CIP、FEP+AMC、IPM+MI、IPM+CIP、CAZ+AMC的耐药率分别为20.00%、20.00%、90.00%、50.00%、80.00%。结论产KPC-2酶肺炎克雷伯菌对MI敏感,对AMC、CAZ完全耐药,FEP+AMC、CAZ+AMC在体外效应以协同作用为主,其机制值得进一步研究。 展开更多
关键词 kpc-2 肺炎克雷伯菌 抗菌药物 体外 抗菌效应
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海南产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行现状 被引量:5
8
作者 李天娇 王旭明 +7 位作者 符生苗 周晓君 李成学 徐凯 黄涛 符惠群 吕叶 林翀 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2204-2206,共3页
目的探讨海南地区产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行现状。方法通过法国梅里埃API20E生化鉴定条和法国生物梅里埃VITEK2全自动细菌鉴定仪和配套CNS试剂筛选出临床上耐亚胺培南或美罗培南的肠杆菌科细菌并进行药敏统计;并对其进行改... 目的探讨海南地区产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行现状。方法通过法国梅里埃API20E生化鉴定条和法国生物梅里埃VITEK2全自动细菌鉴定仪和配套CNS试剂筛选出临床上耐亚胺培南或美罗培南的肠杆菌科细菌并进行药敏统计;并对其进行改良Hodge试验和亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验检测碳青霉烯酶表型;对目的菌株进行KPC-2耐药基因PCR特异性扩增,扩增后将产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果分离出30株耐亚胺培南和美罗培南的肠杆菌科细菌,体外药敏除阿米卡星23.3%和左氧氟沙星36.7%外,其他广谱青霉素类、头孢类、碳青霉烯类、β-内酰胺酶抑制剂及庆大霉素呈现高水平耐药。30株耐亚胺培南和美罗培南的肠杆菌科细菌有9株改良Hodge试验为阳性,有21株亚胺培南/亚胺培南+EDTA纸片法协同试验为阳性。对其9株改良Hodge试验为阳性菌株进行KPC-2基因PCR扩增,扩增后进行电泳没有发现携带KPC-2耐药基因的耐药菌株。结论海南地区耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌暂时没有发现携带KPC-2型基因耐碳青霉烯酶,但多见产金属酶的碳青霉烯酶。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 kpc-2基因 肠杆菌科 海南
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浙江省丽水地区发现1株泛耐药产KPC-2碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌 被引量:5
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作者 黄金伟 黄建胜 +3 位作者 陈海泉 李国雄 余方友 任建敏 《疾病监测》 CAS 2011年第1期58-60,共3页
目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制及初步探讨治疗对策。方法细菌鉴定采用Vitek-compact细菌鉴定系统,药敏实验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(Hodge实验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查患者... 目的研究泛耐药肺炎克雷伯菌的相关耐药机制及初步探讨治疗对策。方法细菌鉴定采用Vitek-compact细菌鉴定系统,药敏实验采用K-B法,通过产碳青霉烯酶确证试验(Hodge实验)及聚合酶链反应(PCR)检测KPC-2基因,并进行序列测定。同时调查患者感染的诊疗情况。结果常规药敏实验显示除多粘菌素、米诺环素外全部耐药;增加磷霉素K-B法药敏实验显示抑菌环直径为20mm,K-B法协同药敏实验显示多粘菌素、米诺环素、磷霉素、亚胺培南等均无协同抗菌活性;Hodge实验阳性,PCR检测到KPC-2基因,序列与GenBank AF297554序列一致。患者经拔除导尿管,入隔离病房,加强支持治疗后,1个月内未检查到泛耐药肺炎克雷伯菌。结论加强泛耐药肺炎克雷伯菌监测,提高对泛耐药菌的认识有助于感染疾病的治疗和预防。 展开更多
关键词 泛耐药 kpc-2碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌
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弗劳地枸橼酸杆菌中质粒介导的KPC-2和NDM-1型碳青霉烯酶基因结构分析 被引量:5
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作者 林迪 方颍 +1 位作者 张嵘 陈功祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第6期423-427,共5页
目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性... 目的对携带bla_(NDM-1)和bl_(aKPC-2)的弗劳地枸橼酸杆菌的碳青霉烯酶基因结构进行分析。方法收集4株耐碳青霉烯类药物弗劳地枸橼酸杆菌(CF-05、CF-17、CF-35、CF-43),琼脂稀释法测定抗菌药物敏感性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析细菌同源性;特异性PCR扩增和序列测定分析碳青霉烯酶耐药基因和ESBLs耐药基因、接合试验、耐药基因周围序列分析对菌株的耐药机制进行分子水平研究。结果 4株细菌仅CF-05对阿米卡星敏感,所有菌株对其他检测药物全部耐药;PFGE结果显示4株细菌不同源;特异性PCR扩增和序列分析显示2株(CF-35、CF-43)同时携带blaNDM-1和blaKPC-2、另2株(CF-05、CF-17)仅携带blaNDM-1,CF-35同时携带bla_(CTX-M-15);其中3株细菌(CF-05、CF-17、CF-43)接合成功,CF-05、CF-17接合子(CF-05-1和CF-17-1)携带bla_(NDM-1),CF-43获得2种接合子(CF-43-1携带bla_(KPC-2)、CF-43-2同时携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2));分析blaNDM-1和blaKPC-2周围序列发现,4株细菌周围序列分别与国内报道携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2)的肺炎克雷伯菌质粒pNDM-HN380和PK048周围序列高度相似。结论在4株弗劳地枸橼酸杆菌中检测到NDM-1型碳青霉烯酶,其中2株同时携带KPC-2型碳青霉烯酶,bla_(NDM-1)周围序列和bla_(KPC-2)周围序列与国内已知肺炎克雷伯菌相关耐药基因周围序列高度相似。 展开更多
关键词 弗劳地枸橼酸杆菌 碳青霉烯酶 NDM-1 kpc-2
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可视化LAMP法检测耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的初步应用 被引量:5
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作者 邹萍 鲍俊峰 +2 位作者 臧嘉 张婷 许耀辉 《检验医学》 CAS 2019年第1期56-59,共4页
目的建立可视化环介导等温扩增(LAMP)方法检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2),并初步评估其应用价值。方法设计3对特异性的LAMP引物,建立25μL的LAMP检测体系并进行优化,通过与聚合酶链反应(PCR)进行比较,分析其特异性和敏感性。结果... 目的建立可视化环介导等温扩增(LAMP)方法检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2),并初步评估其应用价值。方法设计3对特异性的LAMP引物,建立25μL的LAMP检测体系并进行优化,通过与聚合酶链反应(PCR)进行比较,分析其特异性和敏感性。结果成功建立了检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的可视化LAMP方法。63℃保温40 min可实现对bla_(KPC-2)基因的快速检测。特异性与PCR一致,敏感性比PCR高约10倍。采用新建立的可视化LAMP方法检测出25株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南其中之一耐药的肺炎克雷伯菌中有12株携带bla_(KPC-2)基因,31株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南敏感的肺炎克雷伯菌中有5株携带bla_(KPC-2)基因,二者比较差异有统计学意义(P=0.009 9)。结论建立的可视化LAMP方法可作为检测肺炎克雷伯菌耐药基因bla_(KPC-2)的方法,但尚不能替代体外药物敏感性试验。 展开更多
关键词 环介导等温扩增 肺炎克雷伯菌 耐碳青霉烯酶 blakpc-2基因
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产KPC-2型碳青霉烯酶肠杆菌整合子分布研究 被引量:4
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作者 姚慧琳 范德胜 +1 位作者 陆士海 刘培明 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期281-283,共3页
目的研究亚胺培南耐药肠杆菌耐药机制,分析整合子的分布情况及其在流行传播中的作用。方法收集临床分离的18株对亚胺培南耐药肠杆菌,用琼脂稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);用PCR、DNA测序法检测KPC-2型碳青霉烯酶基因和整合酶基因... 目的研究亚胺培南耐药肠杆菌耐药机制,分析整合子的分布情况及其在流行传播中的作用。方法收集临床分离的18株对亚胺培南耐药肠杆菌,用琼脂稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);用PCR、DNA测序法检测KPC-2型碳青霉烯酶基因和整合酶基因,并分析整合子在耐药基因传播中的作用。结果 18株肠杆菌除对亚胺培南耐药外,对头孢噻肟、环丙沙星、头孢吡肟、阿米卡星、氨苄西林等多药耐药,MIC值分别为128~2 048、8~512、64~2 048、16~2 048、64~4 096μg/mL;PCR、基因测序显示18株肠杆菌均产KPC-2型碳青霉烯酶;18株菌均扩增出Ⅰ类整合酶基因,未检测出Ⅱ类整合酶基因,可变区中不存在kpc-2基因。结论本院分离的18株亚胺培南耐药肠杆菌均存在Ⅰ类整合酶基因,且kpc-2基因是引起这些细菌对亚胺培南耐药的主要原因。 展开更多
关键词 肠杆菌 kpc-2基因 亚胺培南 整合子 聚合酶链反应 DNA测序
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肺炎克雷伯菌携带碳青霉烯酶KPC-2基因环境多态性研究 被引量:4
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作者 沈平华 仉英 蒋晓飞 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期680-684,共5页
目的研究复旦大学附属华山医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌广泛播散初期携帯bla_(KPC-2)的完整基因结构,获得其播散的基因背景。方法收集2006年8月-2009年12月连续不重复的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌42株,进行质粒抽提、bla_(KPC-2)筛选... 目的研究复旦大学附属华山医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌广泛播散初期携帯bla_(KPC-2)的完整基因结构,获得其播散的基因背景。方法收集2006年8月-2009年12月连续不重复的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌42株,进行质粒抽提、bla_(KPC-2)筛选、多位点序列分型(MLST);随后设计一系列PCR引物,基因结构进行完整测序。结果MLST分型显示:34株属于ST11型,5株属于ST423,2株属于ST65,1株属于ST977。主要发现两种携带bla_(KPC-2)基因结构,A型(8/42):Tn1721-bla_(KPC-2)-Tn3;B型(34/42):Tn1721-bla_(KPC-2)-Tn3,且B型结构的两端序列存在差异。结论该组中肺炎克雷伯菌携带bla_(KPC-2)的基因结构存在多态性,Tn1721-bla_(KPC-2)-△Tn3-IS26样结构占优势。研究获得的携带bla_(KPC-2)基因结构及侧翼的完整序列,为进一歩正确认识和理解bla_(KPC-2)的播散模式和机制提供了完整的基因背景。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯类耐药 kpc-2 基因环境
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磷霉素、米诺环素等抗生素对bla_(KPC-2)肺炎克雷伯杆菌的体外药敏研究 被引量:2
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作者 史煜波 胡丽庆 +1 位作者 翁幸鐾 王盛 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期574-576,580,共4页
目的研究筛选治疗产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌的敏感性抗生素。方法用氯霉素、多西环素、磷霉素、米诺环素和替加环素对已知blaKPC-2菌株进行体外药敏试验。结果氯霉素、多西环素米诺环素、磷霉素和替加环素耐药率分别为20%、... 目的研究筛选治疗产KPC-2型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌的敏感性抗生素。方法用氯霉素、多西环素、磷霉素、米诺环素和替加环素对已知blaKPC-2菌株进行体外药敏试验。结果氯霉素、多西环素米诺环素、磷霉素和替加环素耐药率分别为20%、17%、15%、6%和5%。结论本研究所选用抗生素的耐药率明显低于常规抗生素。 展开更多
关键词 blakpc-2肺炎克雷伯杆菌 磷霉素 米诺环素 氯霉素 多西环素 替加环素 药敏试验
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产KPC-2酶肺炎克雷伯菌毒力、血清型及基因分型研究 被引量:2
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作者 简雪峰 程国平 +2 位作者 王媛媛 白娇红 孙娟子 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第23期5285-5287,共3页
目的探讨产KPC-2酶肺炎克雷伯菌毒力、血清型及基因分型,为临床诊治肺炎克雷伯菌感染提供参考依据。方法收集2015年1月-2016年1月在医院住院243例患者各种标本中培养分离出肺炎克雷伯菌菌株147株,采用PCR扩增技术对allS、rmpA、kfuBC、m... 目的探讨产KPC-2酶肺炎克雷伯菌毒力、血清型及基因分型,为临床诊治肺炎克雷伯菌感染提供参考依据。方法收集2015年1月-2016年1月在医院住院243例患者各种标本中培养分离出肺炎克雷伯菌菌株147株,采用PCR扩增技术对allS、rmpA、kfuBC、mrkD、cf29a、uge、fimH、wabG、ureA等9种毒力基因及K1、K2、K5、K20、K54、K57等6种血清型进行检测,分析结果。结果 52株碳青霉烯类敏感,均不产KPC-2酶,95株耐药,均产KPC-2酶,构成比为35.37%、64.63%;不产KPC-2酶的菌株allS基因阳性率高于产KPC-2酶菌株(P<0.05)。结论产KPC-2酶肺炎克雷伯菌毒力allS基因较不产KPC-2酶肺炎克雷伯菌下降,血清型与不产KPC-2酶肺炎克雷伯菌无明显差异。 展开更多
关键词 kpc-2 肺炎克雷伯菌 毒力 血清型 基因
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应用MALDI-TOF MS快速鉴定bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌 被引量:2
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作者 汪华学 张杰 +3 位作者 曹云松 徐阳 应冲涛 郭普 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期217-223,共7页
目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。... 目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。应用聚合酶链反应(PCR)方法筛选携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌。MALDI-TOF MS鉴定菌株并收集携带bla_(KPC-2)基因型和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的质谱图,各自选取其中70株菌株图谱,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra)。采用超级图库鉴定除建库以外的肺炎克雷伯菌,根据耐药表型和PCR结果,判断鉴定结果是否准确。结果共收集295株肺炎克雷伯菌,经耐药表型筛选耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)143株和CSKP 152株。CRKP中鉴定出140株携带碳青霉烯酶基因(134株检出bla_(KPC-2)基因,3株检出blaKPC-18基因,2株检出blaNDM-1基因,1株检出blaIMP基因),3株不携带碳青霉烯酶基因;其中2株同时检出bla_(KPC-2)基因和blaNDM-1基因。根据建库要求,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra);设置error值<0.5,二者重合率达80%;对比图发现,4154.4、8310.7、10880.8、3579、10079.3 m/z五个峰可作为区分携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌和CSKP的特征峰。选取除建库以外的155株肺炎克雷伯菌进行验证,准确率为92.90%(144/155);其中携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌准确率为94.52%(69/73),CSKP准确率为91.46%(75/82)。结论通过MALDI-TOF MS建立Super-Spectra,可快速预测bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌,为临床CRKP感染的诊疗及医院感染防控提供可靠的实验室依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 肺炎克雷伯菌 bla_(kpc-2) 超级图库
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一株弗劳地枸橼酸杆菌中发现KPC-2型碳青霉烯酶 被引量:5
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作者 张嵘 蔡加昌 +1 位作者 周宏伟 陈功祥 《浙江检验医学》 2007年第3期22-25,49,共5页
关键词 枸橼酸杆菌 kpc-2 碳青霉烯 大肠埃希菌 细菌鉴定仪 肉汤培养基 受体菌 肺炎克雷伯菌 青霉素类
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siHybrids分子对耐药肺炎克雷伯菌kpc-2抑制作用研究
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作者 范芳华 吴国友 +2 位作者 周筱琼 肖震 程璐 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第5期490-494,共5页
目的:本研究采用RNA干扰技术和合成小分子抑制剂的方法,研究si Hybrids分子对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯杆菌耐药性的影响。方法:通过对临床分离的48株肺炎克雷伯杆菌进行药敏实验,初步筛选并收集了耐碳青霉烯类抗生素的菌株;进一步利用PC... 目的:本研究采用RNA干扰技术和合成小分子抑制剂的方法,研究si Hybrids分子对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯杆菌耐药性的影响。方法:通过对临床分离的48株肺炎克雷伯杆菌进行药敏实验,初步筛选并收集了耐碳青霉烯类抗生素的菌株;进一步利用PCR检测,筛选出携带碳青霉烯酶基因kpc-2的耐药株。利用si Hybrids技术,针对kpc-2设计合成si Hybrids杂合分子,对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因kpc-2进行特异性沉默后,通过荧光定量PCR实验检测si Hybrids沉默靶基因kpc-2的体外表达水平,并通过联合抑菌实验验证si Hybrids分子提高抗生素抗菌活性乃至逆转细菌耐药性的效果。结果:合成的小分子siHybrids可以使耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达下调,并且与碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南、厄他培南分别联合使用,可使肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美罗培南、厄他培南由耐药转为敏感。结论:si Hybrids可以特异地抑制耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达,通过干扰产碳青霉烯酶基因kpc-2造成肺炎克雷伯杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药性的逆转。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯杆菌 碳青霉烯酶 kpc-2 siHybrids分子
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质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶水平传播机制的探讨 被引量:2
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作者 许俊红 王中全 《医药论坛杂志》 2013年第1期87-88,共2页
目的了解河南省人民医院耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌是否携带KPC型碳青霉烯酶基因,探讨blaKPC基因的水平传播机制。方法采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验,PCR检测KPC编码基因,质粒电转化试验分析blaKPC基因能否水平传播,质... 目的了解河南省人民医院耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌是否携带KPC型碳青霉烯酶基因,探讨blaKPC基因的水平传播机制。方法采用琼脂稀释法进行药物敏感性试验,PCR检测KPC编码基因,质粒电转化试验分析blaKPC基因能否水平传播,质粒酶切电泳图谱判断质粒的相似性。结果两株耐美罗培南肺炎克雷伯菌和日勾维肠杆菌均检测出KPC型碳青霉烯酶基因,测序比对结果显示为KPC-2型碳青霉烯酶,其编码基因blaKPC-2位于质粒上,并且可以在细菌之间进行水平传播。结论质粒介导的KPC-2型碳青霉烯酶是我院肠杆菌科细菌耐药性水平传播的机制之一。 展开更多
关键词 kpc-2型碳青霉烯酶 质粒 水平传播
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重症监护室患者胃肠道产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株的分布调查及遗传相关性分析
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作者 胡金曹 曹小利 +3 位作者 万会林 周辉 周万青 李阳 《临床检验杂志》 CAS 2022年第11期817-820,共4页
目的分析产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株在南京大学附属鼓楼医院重症监护室(Intensive Care Unit,ICU)住院患者胃肠道的定植情况,并分析bla_(KPC-2)阳性肺炎克雷伯菌ST11菌株之间的遗传相关性。方法采集我院ICU患者的肛拭子,使用含有0.5μg... 目的分析产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株在南京大学附属鼓楼医院重症监护室(Intensive Care Unit,ICU)住院患者胃肠道的定植情况,并分析bla_(KPC-2)阳性肺炎克雷伯菌ST11菌株之间的遗传相关性。方法采集我院ICU患者的肛拭子,使用含有0.5μg/mL美罗培南的麦康凯平板筛选碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,K-B法测定其对临床常用抗菌药物的敏感性;采用PCR法和DNA测序技术检测bla_(KPC-2)基因;多位点序列分型技术分析bla_(KPC-2)基因阳性肺炎克雷伯菌的序列分型(sequence type,ST),筛选出ST11菌株。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)技术分析产bla_(KPC-2)肺炎克雷伯菌ST11菌株之间的遗传相关性。结果共收集肛拭子125份,30株(24.2%)为碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌。其中,27株(90.0%)携带bla_(KPC-2)基因,26株(86.7%)细菌为肺炎克雷伯菌ST11,25株(83.3%)细菌为产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11株。PFGE结果显示,19株产KPC-2肺炎克雷伯菌ST11菌株之间有很大的遗传相关性。结论产bla_(KPC-2)肺炎克雷伯菌ST11株在我院ICU患者胃肠道中定植广泛,可能是其感染的主要病原菌,需加强感染控制措施。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 ST11 kpc-2 重症监护室 碳青霉烯耐药
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