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Lnc-IL7R/Jmjd3/KGF轴对急性呼吸窘迫综合征炎症损伤的早期诊断价值及相关机制
1
作者 周峰 尹其翔 +3 位作者 魏法星 吴敏 林海敏 蔡华忠 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第11期2583-2590,共8页
目的:探究Lnc-IL7R/含Jumonji结构域3(Jmjd3)/角质细胞生长因子(KGF)轴对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)炎症损伤的早期诊断价值及相关机制。方法:①RT-qPCR、Western blot检测ARDS患者血清中Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF mRNA和蛋白水平及组蛋白H3... 目的:探究Lnc-IL7R/含Jumonji结构域3(Jmjd3)/角质细胞生长因子(KGF)轴对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)炎症损伤的早期诊断价值及相关机制。方法:①RT-qPCR、Western blot检测ARDS患者血清中Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF mRNA和蛋白水平及组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27)me3蛋白水平;ELISA检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平。②利用线粒体损伤相关分子模式(MTDs)刺激HBE细胞,建立创伤性ARDS细胞模型。HBE细胞分为对照组(Control组)、模型组(MTDs组)、过表达Lnc-IL7R组(Lnc-IL7R组)、过表达对照组(NC组)和过表达Lnc-IL7R+过表达Jmjd3组(Lnc-IL7R+Jmjd3组)。染色质免疫共沉淀(ChIP)检测细胞中Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化水平;qRT-PCR、Western blot检测细胞中Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA和蛋白水平及H3K27me3蛋白水平。③小鼠尾静脉注射MTDs,建立创伤性ARDS小鼠模型。80只小鼠随机分为Control组、MTDs组、Lnc-IL7R组、NC组和Lnc-IL7R+Jmjd3组,每组16只。HE染色检测小鼠肺组织病理损伤;ChIP、RT-qPCR检测肺组织中Lnc-IL7R、Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化和mRNA水平;ELISA检测BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白水平;Western blot检测肺组织中Jmjd3、KGF、H3K27me3蛋白水平;免疫组化染色检测肺组织中表面活性蛋白C(SPC)和表面活性蛋白D(SPD)蛋白水平。结果:①与健康体检者相比,ARDS患者血清中Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF mRNA和蛋白水平、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白水平明显升高,H3K27me3蛋白水平明显降低(P<0.05)。②与Control组相比,MTDs组HBE细胞中Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化水平、H3K27me3蛋白水平明显降低,Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05);过表达Lnc-IL7R后,细胞中Lnc-IL7R、Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化水平、KGF mRNA和蛋白水平、H3K27me3蛋白水平明显升高,Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA和蛋白水平明显降低(P<0.05);而过表达Jmjd3能够部分逆转过表达Lnc-IL7R对细胞上述指标的影响(P<0.05)。③与Control组相比,MTDs组小鼠肺组织中Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化水平、H3K27me3蛋白水平明显降低,肺组织和BALF中Lnc-IL7R、Jmjd3、KGF、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA和蛋白水平、SPC、SPD蛋白水平明显升高(P<0.05);过表达Lnc-IL7R后,小鼠肺组织中Lnc-IL7R、Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-α启动子区组蛋白甲基化水平、KGF mRNA和蛋白水平、H3K27me3、SPC、SPD蛋白水平明显升高,肺组织和BALF中Jmjd3、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA和蛋白水平明显降低(P<0.05);而过表达Jmjd3能够部分逆转过表达Lnc-IL7R对上述指标的影响(P<0.05)。结论:Lnc-IL7R/Jmjd3/KGF轴通过调控启动子区组蛋白甲基化修饰参与ARDS中的炎症调控和肺泡上皮细胞损伤修复,Lnc-IL7R/Jmjd3/KGF可用于ARDS的早期诊断。 展开更多
关键词 Lnc-IL7R/Jmjd3/kgf轴 急性呼吸窘迫综合征 炎症损伤
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基于计算结构蛋白设计提高KGF-2热稳定的方法
2
作者 易吉辉 吴耀炯 《云南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期775-781,共7页
运用计算结构蛋白设计技术,对人角质细胞生长因子-2(KGF-2)进行改构设计,以提高其热稳定性.首先从PDB数据库中获取KGF-2晶体结构,分析其结构中起支撑作用、与受体及配体相互作用等关键位点,并在计算设计时避开此类位点.对KGF-2晶体结构... 运用计算结构蛋白设计技术,对人角质细胞生长因子-2(KGF-2)进行改构设计,以提高其热稳定性.首先从PDB数据库中获取KGF-2晶体结构,分析其结构中起支撑作用、与受体及配体相互作用等关键位点,并在计算设计时避开此类位点.对KGF-2晶体结构(截短型KGF-2)位点饱和突变扫描,找到自由能变降低的位点;通过对KGF-2晶体结构进行分子动力学模拟,引入动态二硫键.生物学试验验证结果显示,本研究计算设计的KGF-2突变体K81L、K94P、K103D/C106D、V123I、F167L、A185I和H171C/Q190C可大幅提升KGF-2的热稳定性,且生物学功能未受到影响. 展开更多
关键词 人角质细胞生长因子-2 关键位点 计算结构蛋白设计 热稳定
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角质细胞生长因子KGF及其受体KGFR在中耳胆脂瘤中的表达及意义 被引量：1
3
作者 董耀东 马晨 马秀岚 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期3093-3096,共4页
目的探讨KGF与KGFR在中耳胆脂瘤组织中的表达和意义,以及两者在中耳胆脂瘤发病过程中的作用及表达规律性。方法取手术切除并经常规病理确诊的中耳胆脂瘤标本39例作为病例组,取经病理证实为正常皮肤组织的标本计数10例作为对照组;采用SAB... 目的探讨KGF与KGFR在中耳胆脂瘤组织中的表达和意义,以及两者在中耳胆脂瘤发病过程中的作用及表达规律性。方法取手术切除并经常规病理确诊的中耳胆脂瘤标本39例作为病例组,取经病理证实为正常皮肤组织的标本计数10例作为对照组;采用SABC免疫组织化学染色方法,运用计算机数字病理图像分析系统观察并计数阳性细胞表达情况。结果 KGF蛋白在病例组和对照组的阳性表达率分别为84.6%和0,两组间差异有统计学意义;KGFR蛋白在病例组和对照组的阳性表达率分别为82.1%和10.0%,差异有统计学意义;病例组中KGF和KGFR蛋白阳性表达之间存在显著正相关关系。结论 KGF和KGFR可作为特异性标记物,有助于中耳胆脂瘤的诊断并为易患性提供参考;KGF是促进上皮细胞增生的一种重要的细胞因子;KGF和KGFR之间存在旁分泌作用机制。 展开更多
关键词 中耳胆脂瘤 kgf kgfR
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KGF及KGFR共表达促进铁过载肝细胞增殖 被引量：3
4
作者 安树才 张智斌 《中国实验诊断学》 2013年第10期1750-1754,共5页
目的铁过载可以促进肝细胞的增生导致纤维化,但其确切机制尚不清楚。本文通过喂食大鼠3%羰基铁3个月后行70%部分肝切除建立动物模型,通过不同时间点(0,12,24,36h)研究铁过载肝细胞增殖的过程中KGF和KGFR的表达。方法我们通过免疫组织化... 目的铁过载可以促进肝细胞的增生导致纤维化,但其确切机制尚不清楚。本文通过喂食大鼠3%羰基铁3个月后行70%部分肝切除建立动物模型,通过不同时间点(0,12,24,36h)研究铁过载肝细胞增殖的过程中KGF和KGFR的表达。方法我们通过免疫组织化学方法和非放射性原位杂交方法分别检测了KGF和KGFR的蛋白及mRNA水平。结果在正常组,各时间段铁沉积均未检测到。实验组在0小时肝实质细胞和肝间质细胞中铁沉积显著并且随时间而减少(12-36h)。KGF蛋白在正常组12小时肝小叶中央静脉周围的肝实质和肝间质中的细胞质中有表达,36小时这种表达达到最强,但是实验组KGF的表达在24小时最为显著。KGFR的表达在正常组中0小时肝实质细胞中出现,并随时间增加而逐渐增强,到36小时达到高峰。实验组0小时只检测出少量KGFR阳性细胞,到24小时达到高峰随后逐渐减少。KGF和KGFR mRNA的表达在实验组中24小时肝实质细胞同时达到最高。结论 KGF和KGFR的共表达在铁过载肝细胞的增殖过程中促进了肝细胞的增殖。 展开更多
关键词 kgf kgfR 铁过载 增殖 肝脏
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喉粘膜癌前病变和癌变中VEGF、bFGF和KGF的表达分析 被引量：9
5
作者 邓志宏 黄维国 +1 位作者 邱建华 金岩 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期338-340,共3页
目的　探讨血管生成因子在喉癌发生发展中的作用。方法　本文用免疫组织化学和原位杂交方法，观察ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ和ＫＧＦ在喉粘膜不典型增生（ＤＹＳ）及鳞癌（ＳＣＣ）中的表达和分布情况。结果　ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦｍ ＲＮＡ、... 目的　探讨血管生成因子在喉癌发生发展中的作用。方法　本文用免疫组织化学和原位杂交方法，观察ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ和ＫＧＦ在喉粘膜不典型增生（ＤＹＳ）及鳞癌（ＳＣＣ）中的表达和分布情况。结果　ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦｍ ＲＮＡ、ＫＧＦ ｍ ＲＮＡ 在ＳＣＣ 中的表达较ＤＹＳ有所增强，其中ＶＥＧＦ不仅在上皮细胞中表达，间质中部分血管内皮细胞及炎性细胞亦表达ＶＥＧＦ；而ｂＦＧＦ、ＫＧＦ的转录仅在ＤＹＳ和ＳＣＣ的间质中出现，上皮细胞未见阳性表达，ｂＦＧＦ、ＫＧＦ阳性反应主要位于血管内皮细胞和成纤维细胞。结论　在喉癌中ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ、ＫＧＦ可能分别通过自分泌或旁分泌方式促进间质中新生血管和间质的形成，直接或间接地影响肿瘤细胞的生长。 展开更多
关键词 VEGF BFGF kgf 喉肿瘤 病理
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谷氨酰胺对急性肺损伤大鼠HGF及KGF的影响 被引量：4
6
作者 邢伟 贺晓烨 +1 位作者 王建武 杨明施 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期28-31,共4页
目的探讨谷氨酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤时的肝细胞生长因子(HGF)及角细胞生长因子(KGF)的作用。方法采用盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症急性肺损伤模型,40只健康SD大鼠,分为3组,即对照组、手术组[采用盲肠结扎穿刺法]、谷氨酰胺治疗组... 目的探讨谷氨酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤时的肝细胞生长因子(HGF)及角细胞生长因子(KGF)的作用。方法采用盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症急性肺损伤模型,40只健康SD大鼠,分为3组,即对照组、手术组[采用盲肠结扎穿刺法]、谷氨酰胺治疗组[采用盲肠结扎穿刺法后静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg]。实验中手术组死亡6只,治疗组死亡3只,在手术6 h后手术组随机处死6只,24 h后处死剩下5只,治疗组药物处理6 h后处死6只,24 h后处死剩下的8只,4 000 r/min离心10 min,收集血清,置于-20℃冰箱保存待用。Elisa法测定血清中HGF和KGF的量。并进行各组织的病理学光镜检查。研究谷氨酰胺对血清中HGF和KGF的影响。结果与手术组比较,谷氨酰胺治疗组血清HGF和KGF浓度明显升高(P<0.05)。结论静脉给予谷氨酰胺能促进脓毒症大鼠急性肺损伤时HGF和KGF的分泌,促进受损组织的修复。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 ALI HGF kgf
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X射线对仔鼠皮肤组织结构及c-Fos、KGF表达的影响 被引量：3
7
作者 王悦 邓海平 俞诗源 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期123-130,共8页
应用生物显微技术和免疫组织化学方法,研究了不同剂量X射线(0.0、3.5、6.5 Gy)辐射对发育期(1、5、10和20 d)昆明小鼠(Mus musculus)仔鼠皮肤组织结构和c-Fos、KGF表达的影响,探讨了c-Fos、KGF的生物活性作用及调控意义,并利用IPP专业... 应用生物显微技术和免疫组织化学方法,研究了不同剂量X射线(0.0、3.5、6.5 Gy)辐射对发育期(1、5、10和20 d)昆明小鼠(Mus musculus)仔鼠皮肤组织结构和c-Fos、KGF表达的影响,探讨了c-Fos、KGF的生物活性作用及调控意义,并利用IPP专业图像分析软件对其表达强度进行定量分析。结果表明,辐射后1 d,皮肤组织结构无明显变化;辐射后5 d,表皮、真皮及皮下组织厚度减小,毛的数量急剧减少,皮肤组织纤维化严重;辐射后10 d,3.5 Gy组纤维化现象减轻,真皮致密结缔组织和皮下组织也已基本恢复正常状态,6.5 Gy组仔鼠皮肤组织结构恢复缓慢;辐射后20 d,3.5 Gy组仔鼠皮肤结构基本恢复正常,6.5 Gy组仔鼠全部死亡。图像分析显示,c-Fos和KGF蛋白在各组仔鼠皮肤组织中均有不同程度的表达,辐射组c-Fos和KGF的阳性表达较对照组明显增强,随着辐射剂量的增大,c-Fos、KGF蛋白的表达强度呈递增趋势;随着时间的推移,辐射组c-Fos的阳性表达强度逐渐下降,KGF的阳性表达强度呈现波浪形变化。结果提示,大剂量电离辐射导致仔鼠皮肤组织严重损伤,细胞大量凋亡和坏死,辐射后一段时间,由于机体对损伤的自我适应和调节,皮肤组织损伤情况逐渐减弱最终消失。 展开更多
关键词 X射线 仔鼠 皮肤 组织结构 C-FOS kgf
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KGF和EGFP双基因共表达的重组腺病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞的研究 被引量：2
8
作者 王美华 胡锴勋 李晓兵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期427-432,共6页
为了将角质生长因子(KGF)基因通过腺病毒载体转染到间充质干细胞(MSC)中,增强MSC胸腺修复功能,利用DNA重组技术,将目的基因KGF克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质... 为了将角质生长因子(KGF)基因通过腺病毒载体转染到间充质干细胞(MSC)中,增强MSC胸腺修复功能,利用DNA重组技术,将目的基因KGF克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质粒,继而在H293细胞中包装、扩增,并测定病毒滴度。转染至小鼠骨髓MSC中,为胸腺组织修复免疫功能恢复提供前期实验基础。结果表明:重组穿梭质粒pShuttle-GFP-mKGF重组穿梭质粒经酶切鉴定得到0.6 kb和5.1 kb 2个条带;重组腺病毒载体质粒pAdxsi-mKGF病毒质粒经酶切鉴定得到阳性克隆;测定重组腺病毒Ad-EGFP-mKGF半数组织培养感染量的滴度为1.6×1010 pfu/ml。转染后10 hMSC开始表达荧光,6-8 d达高峰,转染率可达92.3%,28 d仍有表达。结论:pAdxsi-mKGF病毒质粒构建成功并能高效、安全地转染MSC。 展开更多
关键词 kgf EGFP 重组腺病毒载体 MSC
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角质形成细胞生长因子(KGF)在喉粘膜良性、癌前及恶性病变中的mRNA水平分析 被引量：4
9
作者 邓志宏 黄维国 +2 位作者 金岩 TipoeGL WhiteFH 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期222-225,250,共5页
利用原位杂交的方法检测KGFmRNA在正常喉粘膜上皮（N）、慢性非特异性炎症（IF）、不典型增生（DYS）及鳞癌（SCC）中的转录水平，探讨KGF在喉粘膜良性及恶性病变中的分布和可能的作用。结果表明，KGFmRNA不仅在间质中的成纤维细胞中表... 利用原位杂交的方法检测KGFmRNA在正常喉粘膜上皮（N）、慢性非特异性炎症（IF）、不典型增生（DYS）及鳞癌（SCC）中的转录水平，探讨KGF在喉粘膜良性及恶性病变中的分布和可能的作用。结果表明，KGFmRNA不仅在间质中的成纤维细胞中表达，少量的炎细胞及血管内皮细胞中亦表达，而且从N、IF、DYS到SCC、KGFmRNA转录水平逐渐增强；上皮细胞及肿瘤性上皮细胞不表达KGFmRNA，KGFmRNA在分化差的SCC周围间质中表达较分化好的SCC周围间质增多。结论：KGF在上皮与间充质细胞的交互作用中发挥着重要的作用，对维持喉粘膜正常结构、代谢及喉癌的发生发展具有重要意义。 展开更多
关键词 kgf 喉粘膜 癌 原位杂交
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角质细胞生长因子(KGF)对人卵泡颗粒细胞内Ca^(2+)浓度和DNA合成的影响 被引量：2
10
作者 李红 杨霖 +2 位作者 陈士岭 邢福祺 朱伟杰 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期50-52,共3页
目的:探讨角质细胞生长因子(KGF)对人卵巢颗粒细胞内Ca^(2+) 浓度及DNA 合成的影响。方法:从体外受精-胚胎移植取卵时的卵泡液中分离出颗粒细胞(n=20),体外培养,采用3H-TdR　及黏附式细胞仪检测在KGF诱导下颗粒细胞内的Ca^(2+)浓度和DN... 目的:探讨角质细胞生长因子(KGF)对人卵巢颗粒细胞内Ca^(2+) 浓度及DNA 合成的影响。方法:从体外受精-胚胎移植取卵时的卵泡液中分离出颗粒细胞(n=20),体外培养,采用3H-TdR　及黏附式细胞仪检测在KGF诱导下颗粒细胞内的Ca^(2+)浓度和DNA合成的变化。结果:加入KGF后,颗粒细胞内的Ca^(2+)浓度和DNA合成显著增加(P<0.01)。结论:KGF可以促进人卵泡颗粒细胞内Ca^(2+)浓度升高和DNA合成增多。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子(kgf) 卵泡颗粒细胞 DNA合成 CA^2+
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壳聚糖复合KGF-2突变体温敏敷料联合简易负压吸引法对压力性损伤的疗效 被引量：4
11
作者 廖威 唐艳 +4 位作者 张珍 王春燕 宋静 龚莹 朱军丽 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2020年第10期1190-1193,1198,共5页
目的探究壳聚糖复合角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)突变体温敏敷料联合简易负压吸引法对长期卧床老年患者大面积压力性损伤的治疗效果。方法选择2016年1月至2018年12月我院普外科收治的90名大面积压力性损伤患者... 目的探究壳聚糖复合角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)突变体温敏敷料联合简易负压吸引法对长期卧床老年患者大面积压力性损伤的治疗效果。方法选择2016年1月至2018年12月我院普外科收治的90名大面积压力性损伤患者,随机分为对照组与观察组,各45例。对照组患者采用简易负压吸引联合传统泡沫敷料治疗,观察组患者在此基础上联合壳聚糖复合KGF-2突变体温敏敷料填充。比较两组患者的伤口愈合效果以及创面细菌检出率。结果观察组患者的伤口愈合总有效率(93.3%)明显高于对照组(75.6%),差异有统计学意义(χ^2=5.41,P=0.003)。观察组患者细菌检出率(8.89%)显著低于对照组(35.56%),差异有统计学意义(χ^2=3.02,P=0.003)。结论壳聚糖复合KGF-2突变体温敏敷料联合简易负压吸引法能显著促进长期卧床老年患者大面积压力性损伤创面愈合,降低交叉感染的风险,具有较好的临床应用效果。 展开更多
关键词 壳聚糖 kgf-2 简易负压吸引法 压力性损伤
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KGF-2单克隆抗体间接ELISA筛选方法的建立 被引量：3
12
作者 朱佳男 姚娜 +2 位作者 官丽莉 车莹 李校堃 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第3期222-224,共3页
目的建立KGF-2单克隆抗体间接ELISA的筛选方法 ,制备KGF-2单克隆抗体.方法以KGF-2为抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.通过棋盘滴定方法确定间接ELISA的抗原包被浓度及一抗、二抗最佳工作浓度;利用建立特异性好的间接ELISA方法筛选杂交瘤... 目的建立KGF-2单克隆抗体间接ELISA的筛选方法 ,制备KGF-2单克隆抗体.方法以KGF-2为抗原免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.通过棋盘滴定方法确定间接ELISA的抗原包被浓度及一抗、二抗最佳工作浓度;利用建立特异性好的间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞株.结果通过棋盘滴定最终确定了500μg/L的抗原包被浓度、1∶1 000的一抗血清稀释倍数及1∶2 000的二抗血清稀释倍数;筛选到两株可稳定分泌抗体、效价较高的杂交瘤细胞株.结论该研究建立了灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于KGF-2单克隆抗体的制备及检测. 展开更多
关键词 kgf-2单克隆抗体 棋盘滴定 杂交瘤细胞
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KGF对离体子宫内膜上皮细胞生长与分泌的影响 被引量：2
13
作者 王欣 贾氢 +4 位作者 程湘 成娅 刘萍 杨合荣 王惠 《西北国防医学杂志》 CAS 2008年第4期286-288,共3页
目的:观察KGF对离体培养的EEC生长和分泌CA125的影响。方法:体外培养增殖期EEC,加入不同浓度KGF作用后,MTT法检测OD值了解细胞生长情况,磁酶免法测定CA125分泌。结果:①不同浓度KGF对EEC的生长、分泌均有刺激作用,以50ng/ml作用最明显;... 目的:观察KGF对离体培养的EEC生长和分泌CA125的影响。方法:体外培养增殖期EEC,加入不同浓度KGF作用后,MTT法检测OD值了解细胞生长情况,磁酶免法测定CA125分泌。结果:①不同浓度KGF对EEC的生长、分泌均有刺激作用,以50ng/ml作用最明显;②MTT法所测OD值与CA125浓度有显著的相关性。结论:KGF可促进体外培养的增殖期EEC生长和分泌,EEC分泌CA125的量与细胞生长有关。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子(kgf) EEC CA125 生长 分泌
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bFGF及KGF mRNA在口腔粘膜中的表达分析 被引量：3
14
作者 金岩 邓志宏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期754-754,776,共2页
成纤维细胞生长因子超家族（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＦＧＦ）是包括９个成员的肽类生长因子，参与了胚胎发育、损伤修复、血管生成等多种重要的生理和病理生理过程。ｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃＦＧＦ）及ＫＧＦ... 成纤维细胞生长因子超家族（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＦＧＦ）是包括９个成员的肽类生长因子，参与了胚胎发育、损伤修复、血管生成等多种重要的生理和病理生理过程。ｂＦＧＦ（ｂａｓｉｃＦＧＦ）及ＫＧＦ（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｇｒｏｗ... 展开更多
关键词 口腔粘膜 BFGF kgf MRNA
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穿膜肽KGF-2的构建及其对HaCaT增殖作用的影响 被引量：1
15
作者 马岩岩 荣靖 +5 位作者 彭鑫磊 刘秋英 舒辉萍 陈海佳 王一飞 任哲 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-33,共5页
目的:构建穿膜肽KGF-2(TAT-KGF-2),研究其对人角质形成细胞HaCaT的增殖作用。方法:采用普通PCR技术和特殊引物从人胚胎肺成纤维细胞cDNA中扩增出目的基因TAT-KGF-2,并将其插入pET-28a(+)载体中构建pET28a-TAT-KGF-2重组质粒;将该质粒转... 目的:构建穿膜肽KGF-2(TAT-KGF-2),研究其对人角质形成细胞HaCaT的增殖作用。方法:采用普通PCR技术和特殊引物从人胚胎肺成纤维细胞cDNA中扩增出目的基因TAT-KGF-2,并将其插入pET-28a(+)载体中构建pET28a-TAT-KGF-2重组质粒;将该质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白TAT-KGF-2;通过Ni-NTA柱纯化获得目标重组蛋白并利用Western blot进行鉴定;MTT法研究TAT-KGF-2对HaCa的增殖作用。结果:成功构建pET28a-TAT-KGF-2重组质粒,经序列比对,与GenBank上公布的人KGF-2基因序列同源性达到100%;获得穿膜肽KGF-2蛋白,分子量约为19 kDa,纯度达到95%以上;TAT-KGF-2对HaCaT在12.5ng/ml时具有增殖作用,并呈浓度依赖性,而且与不具有穿膜功能的KGF-2相比有更强的增殖效果。结论:成功纯化出TAT-KGF-2蛋白,并验证其对HaCaT具有增殖作用,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 kgf-2 穿膜肽 克隆 原核表达 纯化 HaCaT细胞株
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重组角质细胞生长因子(KGF)的原核表达及优化 被引量：4
16
作者 田顺立 郑春阳 《安徽农业科学》 CAS 2018年第33期71-74,共4页
[目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化。[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化。使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMOKGF... [目的]在原核表达系统中进行重组人角质细胞生长因子(KGF)的表达及优化。[方法]选取缺失N端23个氨基酸残基的KGF片段作为目的基因,按照大肠杆菌的密码子偏好性,将其进行密码子优化。使用BL21(DE3)菌株表达KGF(ΔN23)、SUMO融合的SUMOKGF(ΔN23)和Fh8-SUMO融合的Fh8-SUMO-KGF(ΔN23),并测试不同表达温度(37、23℃)对KGF(ΔN23)表达结果的影响。[结果]在BL21(DE3)菌株中,37℃表达时KGF(ΔN23),SUMO-KGF(ΔN23)和Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)的表达量都较高,其中可溶性蛋白表达量KGF(ΔN23)<SUMO-KGF(ΔN23)<Fh8-SUMO-KGF(ΔN23)。降低诱导温度为23℃后,3种KGF的表达量都显著降低,但是可溶性蛋白的占比显著提高,均接近100%。[结论]降低诱导温度能够促进KGF的可溶性表达,但是总蛋白的表达水平显著下降;与可溶性标签蛋白融合表达能够提高KGF在37℃表达时可溶性蛋白占比,其中融合Fh8-SUMO标签的KGF表达量和可溶性蛋白占比较高。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子(kgf) 原核表达系统 密码子优化 融合表达 标签蛋白
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祛异康对子宫内膜异位症模型大鼠COX-2及KGF表达的影响 被引量：1
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作者 杨鉴冰 徐彭丽 +1 位作者 朱丽红 贺丰杰 《陕西中医学院学报》 2009年第6期60-62,共3页
目的观察祛异康对子宫内膜异位症大鼠异位内膜COX-2及KGF表达的影响,探讨祛异康治疗子宫内膜异位症的机制。方法采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为空白对照组、模型组、祛异康高、中、低剂量组、丹那唑组。造模成功各... 目的观察祛异康对子宫内膜异位症大鼠异位内膜COX-2及KGF表达的影响,探讨祛异康治疗子宫内膜异位症的机制。方法采用手术移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,随机分为空白对照组、模型组、祛异康高、中、低剂量组、丹那唑组。造模成功各组给药4W,免疫组化方法检测大鼠在位、异位子宫内膜组织COX-2及KGF的表达。结果各组大鼠异位子宫内膜组织COX-2及KGF与空白对照组比较,表达明显上升(P<0.05);祛异康低、中、高剂量组、丹那唑组与模型组相比COX-2及KGF表达明显下降(P<0.05)。结论祛异康能明显抑制异位症模型大鼠异位内膜的生长,其治疗机理可能是通过降低COX-2及KGF在异位内膜组织中的表达而实现的。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 COX-2 kgf 实验研究
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小熊猫小脑皮层的组织结构及RT-97、KGF和Bax蛋白在小脑皮层的表达
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作者 高先军 王昱 +2 位作者 俞诗源 王悦 郭婷婷 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期32-37,共6页
为了解小熊猫(Ailurus fulgens)小脑皮层的结构特征,观察神经丝蛋白抗体RT-97、角质细胞生长因子(KGF)及Bax蛋白在小脑皮层中的表达,利用组织学方法和免疫组织化学方法观察了小熊猫小脑皮层的显微结构,检测了RT-97、KGF和Bax蛋白的表达... 为了解小熊猫(Ailurus fulgens)小脑皮层的结构特征,观察神经丝蛋白抗体RT-97、角质细胞生长因子(KGF)及Bax蛋白在小脑皮层中的表达,利用组织学方法和免疫组织化学方法观察了小熊猫小脑皮层的显微结构,检测了RT-97、KGF和Bax蛋白的表达。结果表明,小脑皮层从外向内依次可分为分子层、Purkinje细胞层、颗粒层3层。RT-97在小熊猫小脑皮层Purkinje细胞层、颗粒层中神经细胞的轴突、分子层中颗粒细胞的轴突及小脑髓质中有阳性表达;KGF在小脑皮层分子层、Purkinje细胞层和颗粒细胞层及髓质中均有阳性表达;Bax蛋白在小脑皮层分子层、Purkinje细胞层和颗粒细胞层中有阳性表达。RT-97、KGF和Bax蛋白在小脑皮层神经结构的构筑中可能发挥着不同的功能。 展开更多
关键词 小熊猫 小脑皮层 RT-97 kgf BAX蛋白 免疫组化
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Ad—KGF对低氧条件下A549细胞氧化应激的保护作用
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作者 张玉 王宏玲 +2 位作者 杨志华 张萍 李戈 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期167-172,共6页
目的采用携带角质细胞生长因子（KGF）基因的腺病毒（Ad—KGF）防治低氧处理的A549细胞，研究KGF对低氧处理的A549细胞氧化应激损伤的保护作用。方法采用Ad—KGF转染低氧处理的A549细胞，实验分为预防对照组、预防组、治疗对照组及治疗... 目的采用携带角质细胞生长因子（KGF）基因的腺病毒（Ad—KGF）防治低氧处理的A549细胞，研究KGF对低氧处理的A549细胞氧化应激损伤的保护作用。方法采用Ad—KGF转染低氧处理的A549细胞，实验分为预防对照组、预防组、治疗对照组及治疗组，每组分为12h、24h及36h培养A549细胞，之后采用ELISA法检测细胞培养上清液中KGF的表达水平及LDH、ROS及NOS的活力；采用RT—PCR检测低氧处理的细胞中A549的p53及Bax的表达水平。结果预防组和治疗组培养上清液中的KGF均显著升高（P〈0．01），ROS活力显著降低（P〈0．01），NOS活力显著升高（P〈0．01），LDH活力显著降低（P〈0．01），预防组和治疗组p53和Bax的基因表达水平显著低于相应对照组。结论KGF对低氧处理的A549细胞具有良好的抗氧化和抗凋亡作用。 展开更多
关键词 A549细胞 携带kgf基因的腺病毒(Ad—kgf) 缺氧 氧化应激 凋亡
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腺病毒介导的KGF基因修饰促进表皮干细胞增殖
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作者 李新平 白利明 +3 位作者 白文芳 吴志东 吴博 张鸣生 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2011年第5期561-564,共4页
目的构建KGF腺病毒表达载体并转染表皮干细胞,观察其对表皮干细胞增殖的影响。方法 RT-PCR自人成纤维细胞中扩增KGF基因片段,pAD-easy I腺病毒系统构建KGF腺病毒表达载体,以MOI=50感染表皮干细胞;MTT法检测表皮干细胞增殖,流式分析细胞... 目的构建KGF腺病毒表达载体并转染表皮干细胞,观察其对表皮干细胞增殖的影响。方法 RT-PCR自人成纤维细胞中扩增KGF基因片段,pAD-easy I腺病毒系统构建KGF腺病毒表达载体,以MOI=50感染表皮干细胞;MTT法检测表皮干细胞增殖,流式分析细胞周期变化。结果 RT-PCR成功扩增KGF基因片段,成功构建的KGF腺病毒质粒经Pac I内切酶酶切获得4.5 kbp的特异条带,MOI=50的病毒转染效率超过90%;KGF基因修饰后的表皮干细胞增殖效率与对照组比较有显著差异(P<0.05),并且G2/M期细胞数量明显增多。结论成功构建腺病毒KGF表达载体,腺病毒载体介导的KGF基因修饰促进了表皮干细胞的增殖。 展开更多
关键词 kgf 表皮干细胞 增殖 腺病毒
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